阅读说明：本技术 一种改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂及其制备方法与应用 (Regulator for improving intestinal health of micropterus salmoides at feed conversion stage and preparation method and application thereof ) 是由 吉中力 陈春明 朱宏友 马伟 于 2019-12-09 设计创作，主要内容包括：本发明申请提供了一种改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂及其制备方法与应用,属于饲料添加剂技术领域。所述调节剂的组成包括茶多酚5-30％,氧化魔芋葡甘聚糖5-20％,亚麻籽油20-50％,菊粉10-30％,载体25-40％。其具体制备方法为:将亚麻籽油放置于不锈钢反应釜中,缓慢加入载体并搅拌均匀,得到亚麻籽油混合物,并将其过80-100目筛网,再将茶多酚、氧化魔芋葡甘聚糖、菊粉分别加入,并混合搅拌均匀,检验所得混合物各成分含量,装罐包装。所得调节剂应用于加州鲈幼鱼转料阶段的饲料配制中,能够大大提高加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康,减少胃肠道病害发生,减少养殖过程中抗生素的使用。(The invention provides a regulator for improving intestinal health of micropterus salmoides at a feed conversion stage and a preparation method and application thereof, belonging to the technical field of feed additives. The regulator comprises 5-30% of tea polyphenol, 5-20% of oxidized konjac glucomannan, 20-50% of linseed oil, 10-30% of inulin and 25-40% of a carrier. The preparation method comprises placing oleum Lini in a stainless steel reaction kettle, slowly adding carrier and stirring well to obtain oleum Lini mixture, sieving with 80-100 mesh sieve, adding tea polyphenols, oxidized konjac glucomannan and inulin respectively, mixing and stirring well, checking the content of each component of the obtained mixture, canning and packaging. The obtained regulator is applied to the preparation of the feed in the feed conversion stage of the micropterus salmoides, so that the intestinal health of the micropterus salmoides in the feed conversion stage can be greatly improved, gastrointestinal tract diseases are reduced, and the use of antibiotics in the culture process is reduced.)

一种改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂及其制备方 法与应用

技术领域

本发明属于饲料添加剂技术领域，尤其是涉及一种改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂。

背景技术

加州鲈学名大口黑鲈，原产北美密西西比河水系，抗病强、生长快、易起捕、适温广，外形美现、无肌间刺、肉质细嫩。凭借其独特的品质和生长优势，加州鲈一直受到广大消费者的青睐。加州鲈作为一个外来鱼种，经过几十年的发展，已经在中国落地生根，从国内的市场供求情况来看，它现在已经从可养品种，上升为宜养品种。近年来，随着全程颗粒饲料和投喂技术的突破，加州鲈成为“炙手可热的养殖明星”。“反季节育苗”技术得到突破，推动了加州鲈产业进一步发展。加州鲈苗的需求量达到数百级，养殖区域不断扩大，且呈逐年递增的趋势。加州鲈未来的市场前景是非常好的。

加州鲈养成过程中，都需要经历苗种标粗过程。标粗加州鲈苗，主要是根据加州鲈生长的不同阶段，转换不同口径的饵料饲料，进行喂养。然而，加州鲈幼鱼转料阶段时常出现一些不良反应，主要表现为：初期鱼苗不吃食，在水体草丛或者有遮蔽物地方漫游；有的***处有拖便，大部分可见肠道有出血(病鱼经实验室检测，鉴定属于气单胞菌属感染引起的肠炎出血)；后期可见背部肌肉发白，呈“熟身”状，养殖实践中俗称“熟身病”。发病高峰期会在2-3天内大量死亡，死亡率80％以上。目前综合判断下来，加州鲈转料期间的不良反应，大都为加州鲈体质弱、免疫力低下，细菌或病毒诱发引起的肠道综合性感染，导致全身性血液循环障碍，进而肌肉坏死。

目前公开的技术方案中，主要涉及益菌抑菌(201510162168.7；201810565029.2)、中药制剂(201710596078.8；201810945052.4)、抗菌肽(201910306889.9)等。其中益菌抑菌途径需要较长的时间定植有益菌；植物中药作用效果弱且所需剂量大；抗菌肽制备成本高等。这些现有的技术方案对于调节加州鲈幼鱼转料阶段肠道的健康，作用时间长，不确定因素多，成本高等。所以为了解决上述技术难题，研究一种作用时间快，经济效益高的调节加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的制剂是十分有必要的。

发明内容

本申请针对现有技术的不足，本发明提供了一种改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂及其制备方法与应用。本发明配比合理，各种成分之间，具有协同增效的作用，能够大大提高加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康，减少胃肠道病害发生，减少养殖过程中抗生素的使用。

本发明的技术方案如下：

一种改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂，所述调节剂的由以下质量百分比的原料组成：

其中所述茶多酚、氧化魔芋葡甘聚糖、亚麻籽油和菊粉为食品级。

所述载体为可溶性淀粉或扶态粉中的至少一种。

所述调节剂的制备方法的具体步骤如下：

(1)将亚麻籽油放置于不锈钢反应釜中，缓慢加入载体并搅拌均匀，得到亚麻籽油混合物，并将所得亚麻籽油混合物过80-100目筛网；

(2)再将茶多酚、氧化魔芋葡甘聚糖、菊粉分别加入步骤(2)中所得过筛的亚麻籽油混合物中，混合搅拌均匀；

(3)检验步骤(2)中所得混合物各成分含量，装罐包装。

所述的调节剂应用于加州鲈幼鱼转料阶段的饲料配制中。

所述调节剂在加州鲈幼鱼转料阶段的饲料的添加重量占比为0.1％-0.5％。

本发明有益的技术效果在于：

亚麻籽油中含有大量的α-亚麻酸，其含量约为53％。目前，已有技术成果指出，陆生动物补充膳食亚麻籽油可以通过改变肠道菌群多样性、菌群丰度、菌群数量等影响菌群代谢活性。亚麻籽油中的α-亚麻酸作为一种ω-3多不饱和脂肪酸，对水产动物健康的多重益处已被广泛报道，尤其是其降血脂、调节脂代谢功效对水产动物的健康的促进作用已获公认。然而，补充亚麻籽油对鱼类肠道菌群活性的影响还缺乏相应的技术成果。

茶多酚又名茶单宁、茶鞣质，它是茶叶内一类多羟基类化合物的总称，具有抗氧化、清除自由基、抗菌、解毒等的功能。饲料“禁抗”已是大势所趋，茶多酚以其独特的生物学功能和“绿色”本质倍受关注。陆生动物研究发现，茶多酚可以通过影响细菌的细胞***过程，对多种细菌类群的近百种细菌的生长均有不同程度的抑制作用。茶多酚对微生物的作用还具有较好的选择性，主要表现为它既可以抑制大多数有害菌群的生长，又能促进双歧杆菌及乳酸菌等有益菌群的增殖，可改善动物体内微生态，增强肠道的免疫功能。水产动物由于生活在水环境中，其肠道微生物菌群多样性、丰度变化较之陆生动物更大。目前已有茶多酚相关技术成果在鱼类上使用，但此类成果只是浅显的提出鱼类肠道健康，并未具体用数据说明是否影响鱼类肠道微生物群落的变化情况。且加州鲈作为一种有胃鱼类，从胃至前肠、中肠、后肠微生物菌群的多样性和丰度呈逐渐增加的趋势，尤其幼鱼转料期微生物群落丰度变化更为频繁。当下，加州鲈配合饲料高糖高脂水平是行业常规现象，亦容易诱导加州鲈肠道相应微生物群落的改变，继而引发肠炎等病害。出于加州鲈肠道健康损伤的相关诱因，本发明专利是基于茶多酚作用机理上进行的相关创作思考。

氧化魔芋葡甘聚糖是一种可溶性的膳食纤维，在肠道可以被有益菌发酵利用产生气体、乳酸盐和短链脂肪酸等物质。本发明同时发现在加州鲈幼鱼转料阶段的喂养过程中氧化魔芋葡甘聚糖还可以有效抑制肠道嗜水气单胞菌的数量，并发现氧化魔芋葡甘聚糖可以明显提高加州鲈肠道菌群的多样性，显著提高肠道绒毛高度和粘膜上皮高度，进而改善肠道上皮细胞的基因表达，促使受损的肠粘膜细胞修复，从而改善肠道粘膜形态。目前，氧化魔芋葡甘聚糖作为肠道健康调节剂在加州鲈幼鱼上的使用情况，还未见相关技术成果发表。

菊粉作为一种益生元，由于其特殊的β-(2,1)-糖苷键结构，使得菊粉在动物口腔、胃、肠中均不会发生消化分解，只能在肠道中被肠道微生物作为底物分解产生少量的热量，这一特殊的性质使得菊粉具有了许多突出的生理功能。菊粉的摄入能够选择性的促进益生菌的增长，抑制有害菌的增殖。然而菊粉对肠道菌群的影响非常复杂，现有的一些技术成果往往只关注了特定的种属，而对肠道菌群缺乏全面的理解和应用。虽然，菊粉在不少现有技术中有提及(201510729553.5、201710617738.6)，但是畜禽与水中动物肠道微生物相差较大，因而菊粉的使用比例影响也不同。虽然已有技术提及菊粉可用于水产肠道微生物调节，但该类现有技术更多是关注菊粉对鱼类的生长影响，并未详细提及对肠道菌群的影响情况，而且菊粉经过本发明专利改进后的技术成果，对于加州鲈增重率的影响明显高于现有技术的呈现效果。

茶多酚、氧化魔芋葡甘聚糖、菊粉在亚麻籽油的协同调和下，具有用于改善加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的巨大潜力，经亚麻籽油调和后，显著提高了茶多酚的抗氧化作用，辅助提高了氧化魔芋葡甘聚糖的活性成分保留以及增强了氧化魔芋葡甘聚糖的改善肠道作用，同时茶多酚作为抗氧化剂可以降低亚麻籽油中α-亚麻酸不饱和键的氧化；尤其是本发明人出乎意料地发现：该加州鲈幼鱼转料阶段肠道健康的调节剂还具有针对革兰氏阴性微生物的抗微生物活性(如显著降低肠道嗜水气单胞菌数量)，从而导致加州鲈幼鱼转料阶段死亡率降低。

附图说明

图1为本发明测试例1中加州鲈幼鱼肠道中嗜水气单胞菌的变化示意图。

图2为本发明测试例2中加州鲈幼鱼肠道中嗜水气单胞菌的变化示意图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明进行具体描述。

实施例1

(1)以下物质按质量百分数100％计，将50％亚麻籽油放置于不锈钢反应釜中，缓慢加入30％可溶性淀粉或扶态粉中的至少一种，并搅拌均匀，得到亚麻籽油混合物，并将所得亚麻籽油混合物过80目筛网；

(2)再将5％茶多酚、5％氧化魔芋葡甘聚糖、10％菊粉分别加入步骤(2)中所得过筛的亚麻籽油混合物中，混合搅拌均匀，得到肠道健康调节剂。

测试例1

将本发明实施例1所制备的肠道健康调节剂，按重量占比为0.1％的量均匀添加至加州鲈幼鱼转料阶段的配合饲料中，制成粒径1mm的配合颗粒饲料，作为试验组。未添加本发明的饲料作为空白对照组。

在浙江湖州市选取3个大小接近的长方形养殖池塘，每个养殖池塘中间用网隔离成2个小塘(一个投喂对照组饲料，一个投喂试验组饲料)。在6个小塘中分别放入体质健康的处于转料阶段的加州鲈幼鱼2万尾，筛分规格10克左右。养殖30天后，加州鲈幼鱼成活率、饲料系数、增重率分析如表1所示。

表1饲料中肠道健康调节剂对加州鲈幼鱼生长健康的影响

分组	成活率(％)	饲料系数	增重率(％)
				对照组	60.04±5.96	1.08±0.06	295.25±27.40
试验组	95.15±2.86	0.76±0.06	551.50±21.09
				P-value	0.004	0.012	<0.001

备注：数据表示为，均值±标准误差。

肠道嗜水气单胞菌菌落数分析如图1所示。

投喂对照组饲料的池塘，发现有不少鱼体，***处出现拖便、肠道的出血，将对照组和试验组健康的加州鲈鱼肠道，进行微生物分析，嗜水气单胞菌数量变化如图1所示，综合测试例1，我们明显发现加州鲈幼鱼饲料补充本发明的肠道健康调节剂，成活率和增重率明显提高，加州鲈幼鱼饲料系数显著降低，同时肠道嗜水气单胞菌有害菌数目显著降低。

实施例2

(1)以下物质按质量百分数100％计，将20％亚麻籽油放置于不锈钢反应釜中，缓慢加入20％扶态粉并搅拌均匀，得到亚麻籽油混合物，并将所得亚麻籽油混合物过100目筛网；

(2)再将25％茶多酚、20％氧化魔芋葡甘聚糖、15％菊粉分别加入步骤(2)中所得过筛的亚麻籽油混合物中，混合搅拌均匀，得到肠道健康调节剂。

对比例1

以下物质按质量百分数100％计，将40％扶态粉与25％茶多酚、20％氧化魔芋葡甘聚糖、15％菊粉混合搅拌均匀，得到不含亚麻籽油混合调节剂。

测试例2

将本发明实施例2制备得到的肠道健康调节剂以及对比例1中所制备的不含亚麻籽油混合调节剂，分别按重量占比为0.5％的量均匀添加至加州鲈幼鱼配合饲料中，均制成粒径1mm的配合颗粒饲料，分别作为试验组2、试验组3。其中，未添加本发明的饲料作为空白对照组。

选取体质健康的加州鲈幼鱼540尾，规格30克左右，随机分成3个处理组，每个处理组3个重复，每个重复60尾鱼。养殖环境为江苏吴江某鱼塘网箱养殖，网箱规格2×2×2m。养殖56天后，加州鲈幼鱼成活率、饲料系数、增重率分析如表2所示，肠道嗜水气单胞菌菌落数分析如图2所示。

表2饲料中肠道健康调节剂对加州鲈幼鱼生长健康的影响

分组	成活率(％)	饲料系数	增重率(％)
				对照组	73.04±3.10<sup>c</sup>	1.08±0.11<sup>c</sup>	375.25±27.28<sup>c</sup>
试验组2	95.28±2.86<sup>a</sup>	0.66±0.03<sup>a</sup>	636.50±31.59<sup>a</sup>
				试验组3	80.25±2.62<sup>b</sup>	0.86±0.16<sup>b</sup>	537.50±30.79<sup>b</sup>
P-value	0.003	0.032	0.004

备注：数据表示为，均值±标准误差；表格中a、b、c字母表示单因素方差分析差异显著。

如上实施例和测试例所述，发现用亚麻籽油调和的茶多酚、氧化魔芋葡甘聚糖、菊粉经载体混合后补充于加州鲈幼鱼转料阶段的配合饲料中(添加量0.1-0.5％)，产生了显著的表现益处，尤其加州鲈幼鱼在转料阶段成活率、增重率明显提高，同时饲料系数明显降低。加州鲈幼鱼转料期，***处经常出现的拖便、肠道的出血，没有再发生，主要在于本发明的肠道健康调节剂大大降低加州鲈幼鱼转料期间肠道嗜水气单胞菌数量，降低嗜水气单胞菌感染引发的肠道感染病症，因为使用亚麻籽油配合茶多酚、氧化魔芋葡甘聚糖、菊粉改善加州鲈幼鱼肠道健康的表现以前从未被证实。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。