阅读说明：本技术 一种高含量大黄素的提取纯化方法 (Extraction and purification method of high-content emodin ) 是由 杨海鹰 王晓龙 杨方超 于 2019-11-15 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种高含量大黄素的提取纯化方法,以解决现有的大黄素提取纯化的方法存在生产成本高、技术难度大的问题。该高含量大黄素的提取纯化方法,包括以下步骤；称取虎杖原料,清洗、晾干、粉碎后得虎杖碎料,并用丙酮浸泡虎杖碎料；使用丙酮提取虎杖碎料并过滤,将滤液合并后浓缩至浸膏,在真空条件下将浸膏干燥,干燥后粉碎；将干燥后的碎料使用乙酸乙酯溶解,加入活性炭除杂并过滤,通过静置的方式滤除沉淀；将沉淀用N-N二甲基甲酰胺溶液回流搅拌热洗涤并趁热抽滤,分别收集不溶物和滤液,将不溶物再次回流搅拌热洗涤,收集沉淀并干燥；将干燥后的沉淀用乙酸乙酯、活性炭结晶,并滤出晶体；用甲醇搅拌洗涤晶体,干燥后即得大黄素。(The invention relates to a method for extracting and purifying high-content emodin, which aims to solve the problems of high production cost and great technical difficulty of the existing method for extracting and purifying emodin. The method for extracting and purifying the high-content emodin comprises the following steps; weighing rhizoma Polygoni Cuspidati raw materials, cleaning, air drying, pulverizing to obtain rhizoma Polygoni Cuspidati crushed material, and soaking the rhizoma Polygoni Cuspidati crushed material with acetone; extracting crushed giant knotweed with acetone, filtering, merging the filtrates, concentrating to obtain an extract, drying the extract under a vacuum condition, drying and crushing; dissolving the dried crushed materials by using ethyl acetate, adding activated carbon to remove impurities, filtering, and filtering out precipitates in a standing mode; refluxing, stirring and hot washing the precipitate with an N-N dimethylformamide solution, carrying out suction filtration while the precipitate is hot, respectively collecting insoluble substances and filtrate, refluxing, stirring and hot washing the insoluble substances again, collecting the precipitate and drying; crystallizing the dried precipitate with ethyl acetate and active carbon, and filtering out crystals; stirring and washing the crystal by using methanol, and drying to obtain the emodin.)

一种高含量大黄素的提取纯化方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种高含量大黄素的提取纯化方法。

背景技术

大黄素别名朱砂莲甲素，大黄素的生理活性决定它不仅可用于医疗，亦可以用于保健和日用化工品中，如有人把它用于护发和护肤品中，亦有人把它编入天然色素中去。国外，人们把它作为轻泻剂。大黄素对金黄色葡萄球菌209P、链球菌、白喉杆菌、枯草杆菌、副伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、肺炎球菌、卡他球菌等均有抑制作用；对临床常见厌氧性细菌有较强的抑制作用；其MIC略高于甲硝唑，在8μg/ml浓度能使76%~91%的厌氧菌生长受抑。大黄素抗菌作用机制与抑制线粒体呼吸链电子传递、抑制呼吸与氨基酸、糖和蛋白质代谢中间产物的氧化和脱氢等有关。抑制核酸和蛋白质合成的最终结果，使细菌生长受抑。同时还具有解痉、止咳、降压作用。

高品质大黄素提取纯化的方法有很多，常用的方法包括层析柱法，以及以萃取、膜过滤为原理的方法等，但该类方法都存在生产成本高、技术难度大、难以实现工业化的问题。由于国内外厂家对大黄素精制工艺路线的严格保密性，所以已经申请的专利并不多。

公布号为CN 107337594 A的专利公开了“一种高纯度大黄素提取方法”，提取工艺步骤包括：步骤一、粉碎；步骤二、调节PH；步骤三、超声波处理；步骤四、膜处理；步骤五、萃取；步骤六、中和处理；步骤七、干燥；步骤八、研磨。

公布号为CN 105906493 A的专利公开了“一种大黄素的提取工艺”， 该方法包括以下步骤：先取大黄，洗净后在110～130℃条件下烘干，粉碎得到细粉，将所得细粉经水蒸气蒸馏法蒸馏，去除蒸馏出的杂质，再将精制粉末加至乙醇水溶液中，加热回流提取，放冷后，调节提取液pH至3 .0～4 .0，静置分层，将上清送入微滤膜进行过滤，然后将微滤透过液加热浓缩，最后将浓缩液送入层析柱进行除杂，所得透过液经喷雾干燥得到大黄素。

上述方法虽然可以获得高含量的大黄素产品，但存在柱层析纯化时间过长、不容易实现工业化，耗费溶剂量大，萃取溶剂不易回收，膜过滤技术要求高等特点。

柱层析纯化时间问题：经过试验，通过柱层析纯化方法获得该目标产品在25天左右，而且不同季节生产周期存在明显差异，导致部分季节供货时间较长。

膜过滤萃取问题：由于大黄酚、大黄素甲醚和大黄素在相同溶剂中的溶解性非常相似，增加了操作难度，使得产品收率大大折扣。

发明内容

本发明的目的是提供一种高含量大黄素的提取纯化方法，以解决现有的大黄素提取纯化的方法存在生产成本高、技术难度大的问题。

为实现上述目的，本发明的技术解决方案是：

一种高含量大黄素的提取纯化方法，包括以下步骤；

S1，称取虎杖原料，清洗、晾干、粉碎后得虎杖碎料，并用丙酮浸泡虎杖碎料；

S2，使用丙酮提取虎杖碎料并过滤，将滤液合并后浓缩至浸膏，在真空条件下将浸膏干燥，干燥后粉碎；

S3，将干燥后的碎料使用乙酸乙酯溶解，加入活性炭除杂并过滤，通过静置的方式滤除沉淀；

S4，将沉淀用N-N二甲基甲酰胺溶液回流搅拌热洗涤并趁热抽滤，分别收集不溶物和滤液，将不溶物再次回流搅拌热洗涤，收集沉淀并干燥；

S5，将干燥后的沉淀用乙酸乙酯、活性炭结晶，并滤出晶体；

S6，用甲醇搅拌洗涤晶体，干燥后即得大黄素。

优选的，步骤 S1中使用丙酮浸泡虎杖碎料8-12小时。

优选的，步骤S2中使用丙酮的浓度为80%且重量为碎料重量的12倍，在温度65℃、PH=5-6的条件下提取碎料三次。

优选的，步骤S3中使用乙酸乙酯的重量为干燥后碎料重量的15倍，并在温度80℃条件下将干燥后的碎料溶解，加入活性炭的重量为所述虎杖碎料重量的10%。

优选的，步骤S4中使用N-N二甲基甲酰胺溶液的重量为沉淀重量的15倍，回流搅拌热洗涤时的温度为88℃、时长为6小时。

优选的，步骤S5中使用乙酸乙酯的重量为干燥后沉淀重量的40倍，乙酸乙酯的温度为80℃，加入活性炭的重量为所述虎杖碎料重量的20%。

7、根据权利要求5所述的一种高含量大黄素的提取纯化方法，其特征在于：步骤S6中使用甲醇的重量为晶体重量的3倍，并在常温条件下搅拌洗涤。

本发明的有益效果为：

本发明提供的一种高含量大黄素的提取纯化方法，采用N-N二甲基甲酰胺溶剂在加热条件下对产品进行溶解分离，该方式操作简单、效果好，而且环保；本发明的方法溶剂使用量少，节约了提取纯化的成本，并且工艺简单，易实现工业化；该方法产品收率在95%以上，溶剂回收率在90%以上，综合利用率高，能够避免对原材料的浪费；该方法使得产品生产周期短，因此能够及时满足市场需求，避免了使用柱层析纯化方法耗时过长的问题。

附图说明

图1为本发明高含量大黄素的提取纯化方法流程图。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明的内容作进一步详细描述：

下面是本发明的高含量大黄素的提取纯化方法具体实例一的实施方式，如图1所示；

S1，称取虎杖原料100g（大黄素含量为2%），清洗、晾干、粉碎后得虎杖碎料，并用丙酮浸泡虎杖碎料10小时；

S2，使用1200g浓度为80%的丙酮，在温度65℃、PH=5.5的条件下提取虎杖碎料三次并过滤，将滤液合并后浓缩至浸膏，在真空条件下将浸膏干燥，干燥后粉碎；

S3，使用乙酸乙酯将干燥后的碎料在温度80℃的条件下进行溶解，加入10g活性炭除杂并过滤，通过静置的方式滤除沉淀，测定大黄素粗品含量42%，4.5克粗品；

其中，乙酸乙酯的重量为干燥后碎料重量的15倍；

S4，使用N-N二甲基甲酰胺溶液将沉淀在温度为88℃的条件下回流搅拌热洗涤6小时，并趁热抽滤，分别收集不溶物和滤液；

将不溶物在相同的条件下再次回流搅拌热洗涤，收集沉淀并干燥；检测大黄素含量为94%，1.67克粗品；

其中，N-N二甲基甲酰胺溶液的重量为沉淀重量的15倍；

S5，使用活性炭含量为20g的乙酸乙酯将干燥后的沉淀结晶，并滤出晶体；

其中，乙酸乙酯的温度为80℃、重量为干燥后沉淀重量的40倍；

S6，用甲醇在常温条件下搅拌洗涤晶体，干燥后即得大黄素纯品HPLC98.3%，1.56克纯品；

其中，使用甲醇的重量为晶体重量的3倍。

下面是本发明的高含量大黄素的提取纯化方法具体实例二的实施方式，如图1所示；

S1，称取虎杖原料1kg（大黄素含量为2%），清洗、晾干、粉碎后得虎杖碎料，并用丙酮浸泡虎杖碎料10小时；

S2，使用12kg浓度为80%的丙酮，在温度65℃、PH=5.5的条件下提取虎杖碎料三次并过滤，将滤液合并后浓缩至浸膏，在真空条件下将浸膏干燥，干燥后粉碎；

S3，使用乙酸乙酯将干燥后的碎料在温度80℃的条件下进行溶解，加入100g活性炭除杂并过滤，通过静置的方式滤除沉淀，测定大黄素粗品含量41.8%，46克粗品；

其中，乙酸乙酯的重量为干燥后碎料重量的15倍；

S4，使用N-N二甲基甲酰胺溶液将沉淀在温度为88℃的条件下回流搅拌热洗涤6小时，并趁热抽滤，分别收集不溶物和滤液；

将不溶物在相同的条件下再次回流搅拌热洗涤，收集沉淀并干燥；检测大黄素含量为94.1%，17克粗品；

其中，N-N二甲基甲酰胺溶液的重量为沉淀重量的15倍；

S5，使用活性炭含量为200g的乙酸乙酯将干燥后的沉淀结晶，并滤出晶体；

其中，乙酸乙酯的温度为80℃、重量为干燥后沉淀重量的40倍；

S6，用甲醇在常温条件下搅拌洗涤晶体，干燥后即得大黄素纯品HPLC98.3%，15.5克纯品；

其中，使用甲醇的重量为晶体重量的3倍。

下面是本发明的高含量大黄素的提取纯化方法具体实例三的实施方式，如图1所示；

S1，称取虎杖原料10kg（大黄素含量为2%），清洗、晾干、粉碎后得虎杖碎料，并用丙酮浸泡虎杖碎料10小时；

S2，使用120kg浓度为80%的丙酮，在温度65℃、PH=5.5的条件下提取虎杖碎料三次并过滤，将滤液合并后浓缩至浸膏，在真空条件下将浸膏干燥，干燥后粉碎；

S3，使用乙酸乙酯将干燥后的碎料在温度80℃的条件下进行溶解，加入1kg活性炭除杂并过滤，通过静置的方式滤除沉淀，测定大黄素粗品含量42.3%，454克粗品；

其中，乙酸乙酯的重量为干燥后碎料重量的15倍；

S4，使用N-N二甲基甲酰胺溶液将沉淀在温度为88℃的条件下回流搅拌热洗涤6小时，并趁热抽滤，分别收集不溶物和滤液；

将不溶物在相同的条件下再次回流搅拌热洗涤，收集沉淀并干燥；检测大黄素含量为94%，174克粗品；

其中，N-N二甲基甲酰胺溶液的重量为沉淀重量的15倍；

S5，使用活性炭含量为2kg的乙酸乙酯将干燥后的沉淀结晶，并滤出晶体；

其中，乙酸乙酯的温度为80℃、重量为干燥后沉淀重量的40倍；

S6，用甲醇在常温条件下搅拌洗涤晶体，干燥后即得大黄素纯品HPLC98.18%，155克纯品；

其中，使用甲醇的重量为晶体重量的3倍。

本发明的方法操作简单、效果好，工艺简单，易实现工业化；该方法获得的产品收率高，溶剂综合利用率高，能够避免对原材料的浪费；该方法使得产品生产周期短，因此能够及时满足市场需求。

以上所述仅为本发明的实施例，并非对本发明保护范围的限制，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均包括在本发明的专利保护范围内。