阅读说明：本技术 皮肤老化或皮肤皱纹改善用化妆品组合物 (Cosmetic composition for improving skin aging or skin wrinkles ) 是由 庆瑞娟 李敬银 吕炫周 姜承贤 朴明三 于 2019-04-17 设计创作，主要内容包括：本发明涉及包含菊花、芦荟、洋常春藤混合提取物作为有效成分的皮肤老化或皮肤皱纹改善用化妆品组合物,更具体地,涉及包含通过抑制紫外线引起的皮肤老化来有效改善皮肤皱纹的提取物的皮肤外用剂组合物。根据本发明,包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物作为有效成分的化妆品组合物使作为胶原蛋白生物合成基因的COL1A1的表达增加,并抑制作为胶原蛋白分解酶的MMP-1的表达,由此可呈现皮肤老化防止或皱纹改善效果。(The present invention relates to a cosmetic composition for skin aging or skin wrinkle improvement comprising a mixed extract of chrysanthemum, aloe, and ivy as an effective ingredient, and more particularly, to a composition for skin external use comprising an extract effective for improving skin wrinkles by inhibiting skin aging caused by ultraviolet rays. According to the present invention, a cosmetic composition comprising a mixed extract of chrysanthemum, aloe and ivy as an active ingredient can exhibit skin aging prevention or wrinkle improvement effects by increasing the expression of COL1a1, which is a collagen biosynthesis gene, and inhibiting the expression of MMP-1, which is a collagen catabolic enzyme.)

皮肤老化或皮肤皱纹改善用化妆品组合物

技术领域

本发明涉及包含菊花、芦荟、洋常春藤混合提取物作为有效成分的皮肤老化或皮肤皱纹改善用化妆品组合物，更具体地，涉及包含通过抑制紫外线引起的皮肤老化来有效改善皱纹的提取物的皮肤外用剂组合物。

背景技术

皮肤作为存在于身体的最外侧的器官，从外部环境及刺激中保护我们的身体。皮肤与身体内多个器官相比，始终露在外部刺激环境中，因而可容易受到攻击，尤其，就面部皮肤而言，直接露在紫外线及污染物质中，因而具有与其他身体皮肤相比容易发生老化的特征。

皮肤老化区分为因遗传因素而发生的内因性老化和因环境暴露而发生的外因性老化。内因性老化因生物学代谢过程而自然发生，相反，外因性老化因持续性曝光、压力、吸烟等而发生。并且，在临床学观点上，具有因内因性老化而皮肤干燥且苍白，失去弹性，显示细纹的特征，但观察到因外因性老化而生成深皱纹，且有不规则的色素沉着引起的斑点生成及着色、粗糙的皮肤等，严重时，还引起黑痣、黑斑、皮肤癌等疾病，因而更影响皮肤。因此，为了防止皮肤老化，预先阻断这种外因性老化，并抑制外因性老化的进行状态，这是更有效的。

在组织学观点上，皮肤老化是由皮肤的细胞外组织(Extracellular matrixproteins)构成的变化引起的。在真皮细胞外组织中，多种胶原蛋白占皮肤真皮层的90％，对于外部刺激或力赋予强度和张力来保护皮肤。因此，胶原蛋白的减少与皮肤老化及皱纹形成有着密切的关联。健康真皮的主要交联构成成分中之一为Ⅰ类型(type)胶原蛋白，在因光老化而受损的皮肤中，这种胶原蛋白的前体明显减少。当进行老化时，胶原蛋白也进行分解，但因紫外线之类的刺激而多种胶原蛋白分解酶(基质金属蛋白酶(MMPs：MatrixMetalloproteinases))的生物合成增加，以减少胶原蛋白合成，从而形成皱纹。多种胶原蛋白分解酶(MMPs)作为细胞内蛋白酶，是使真皮的细胞外结构的成分进行分解及重组化的酶，其中，基质金属蛋白酶-1(MMP-1)作用于真皮的胶原蛋白来使胶原蛋白进行分节。因此，这种酶的体内表达量及活性程度起到产生或改善皱纹的重要的因素的作用。

在此期间，作为用于改善皱纹的原材料，维生素C、α-生育酚、视黄醇及其衍生物等主要以配合于化妆品及医药品的方式被利用，但这些存在当配合于剂型时产生变臭现象或化学稳定性差的缺点。

为了克服这种缺点，最近，被受瞩目的是开发利用这些天然物衍生物质的皱纹改善用化妆品组合物的方式，需要发掘这种皱纹改善用化妆品组合物。

菊花(Chrysanthemum morifolium)为通常广泛用于观赏的花，但众所周知，在中国用作对眼睛好的药，并包含多种维生素前体和矿物质、作为抗氧化力好的色素的β-胡萝卜素等的有效成分。芦荟(Aloe Vera)作为在热带地区生长的多肉植物，是数年作为药用或以营养学目的使用的植物。不仅是治愈目的，芦荟叶子中多含的凝胶作为霜和乳液等多用于化妆品业界中。尤其，据报告，多包含维生素、矿物质、多酚抗氧化剂等的有效成分。洋常春藤(Hedera Helix)作为属于五加科的植物，当没有白糖时，熬成浓的状态来用作甜味料，茎和果实在民间疗法中用作药。尤其，众所周知，具有降低糖尿病的血糖的效果，且对关节炎、肌肉痛、咳嗽等具有功效。但是，当使用菊花、芦荟、洋常春藤时，尚未揭示具有皮肤老化预防或皱纹改善效果。

对此，本发明人为了克服上述现有技术的多个问题而进行锐意研究，最终，确认到菊花、芦荟、洋常春藤的混合提取物比包含单独提取物作为有效成分的情况对皮肤老化及皱纹改善具有更卓越的功效，并完成了本发明。

现有技术文献

专利文献

(专利文献1)韩国公开专利第10-2017-0027685号

(专利文献2)韩国授权专利第10-2008-63267号

(专利文献3)韩国公开专利第10-2012-0081309号

发明内容

本发明的主要目的在于，提供包含可有效改善皮肤老化及皱纹生成的菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的皱纹改善用化妆品组合物。

根据本发明的一实施方式，本发明提供包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物作为有效成分的皮肤老化或皮肤皱纹改善用化妆品组合物。

本发明的特征在于，上述皮肤老化由外因引起，更具体地，上述皮肤老化为由紫外线引起的皮肤光老化。

本发明的特征在于，上述提取物可利用以往使用的任何溶剂来进行提取，优选地，利用水、有机溶剂或它们的混合溶剂来进行提取，更优选地，利用选自由水、无水或含水甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、甘油、丙二醇、丁二醇或它们的混合溶剂组成的组中的一种以上的溶剂来进行提取。

本发明的特征在于，上述混合提取物能够以1-5：1-5：1-5的混合重量比例提取菊花：芦荟：洋常春藤提取物，优选地，能够以1-3：1-3：1-3的混合重量比例进行提取，更优选地，能够以1：1：1的混合重量比例混合菊花：芦荟：洋常春藤提取物。本发明的混合提取物可在混合各个天然物之后一同进行提取，或在分别提取之后进行混合。本发明的特征在于，上述混合提取物可提取菊花、芦荟及洋常春藤的某一部位，但优选地，提取它们的花、叶子或茎。

本发明的特征在于，在组合物总重量中，包含0.001至30重量百分比的上述提取物。当含量低于上述范围时，有效性可能降低，当含量高于上述范围时，难以进行剂型化，故而不优选。

本发明的特征在于，上述组合物具有促进Ⅰ类型胶原蛋白(COL1A1)基因表达，抑制因紫外线而增加的MMP-1的基因表达来抑制老化，并改善皱纹的效果。

根据本发明的实验例，可确认到用菊花、芦荟、洋常春藤混合提取物处理人成纤维细胞时，与单独处理菊花、芦荟或洋常春藤提取物的情况相比，具有使COL1A1的基因表达增加的协同功效。并且，确认到在照射紫外线的成纤维细胞中，当处理菊花、芦荟、洋常春藤的混合提取物时，也与单独处理菊花、芦荟或洋常春藤提取物的情况相比，当抑制MMP-1的表达时呈现协同功效。根据这种结果可知本发明的菊花、芦荟、洋常春藤混合提取物促进Ⅰ类型前胶原蛋白基因的表达，可通过抑制紫外线引起的MMP-1基因表达增加来呈现皮肤老化抑制及皱纹改善效果。

本发明的特征在于，上述组合物还可利用该领域中通常制备的任何剂型来进行制备，优选地，上述组合物为选自由润肤乳、皮肤柔顺剂、爽肤水、收敛剂、润肤液、乳液、保湿润肤液、营养润肤液、按摩霜、营养霜、保湿霜、护手霜、粉底、精华素、营养精华素、面膜、香皂、洗面奶、洁肤露、洁面霜、润肤露及身体乳组成的组中的一种以上的剂型。

作为有效成分，本发明的化妆品组合物除了上述混合提取物之外，还可按不同剂型包含通常使用于化妆品组合物的含水的水相成分、包含油或油脂的油相成分、有机或无机粉体、表面活性剂、保湿剂、增稠剂等，作为其他辅助成分，还可包含防腐剂、抗氧化剂、pH调节剂、颜料及香料等。

根据本发明，包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物作为有效成分的化妆品组合物可增加作为胶原蛋白生物合成基因的COL1A1的表达，通过抑制作为胶原蛋白分解酶的MMP-1的表达，可呈现皮肤老化防止或皱纹改善效果。

附图说明

图1为确认在人成纤维细胞中菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物对COL1A1的信使核糖核酸表达产生的影响的实验例1的结果。

菊花、芦荟、洋常春藤混合物1：菊花3.3+芦荟3.3+洋常春藤3.3(ul/ml)；菊花、芦荟、洋常春藤混合物2：菊花5+芦荟2.5+洋常春藤2.5(ul/ml)；菊花、芦荟、洋常春藤混合物3：菊花2.5+芦荟5+洋常春藤2.5(ul/ml).^*p<0.05,^**p<0.01(与空白组进行比较)

图2为确认在人成纤维细胞中菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物对MMP-1的信使核糖核酸表达产生的影响的实验例2的结果。

菊花、芦荟、洋常春藤混合物1：菊花0.33+芦荟0.33+洋常春藤0.33(ul/ml)；菊花、芦荟、洋常春藤混合物2：菊花0.5+芦荟0.25+洋常春藤0.25(ul/ml)；菊花、芦荟、洋常春藤混合物3：菊花0.25+芦荟0.5+洋常春藤0.25(ul/ml).^**p<0.01(与空白组进行比较),,⁺⁺p<0.01(与紫外线对照组进行比较)

具体实施方式

以下，为了具体说明本发明，例举实施例及实验例来进行详细说明。但是，本发明的实施例及实验例能够以多种其他方式进行变形，本发明的范围不应被解释为限定于以下详细说明的实施例及实验例。本发明的实施例及实验例用于使该领域中本发明所属技术领域的普通技术人员更加完整地理解本发明。

本发明的一实例提供包含菊花、芦荟及洋常春藤提取混合物作为有效成分的皮肤老化防止或皱纹改善用化妆品组合物。从皮肤实验室(Derma Lab)提供本发明中使用的菊花、芦荟及洋常春藤提取物来使用于实验。上述菊花、芦荟及洋常春藤提取物的获取方法不受特别限制，可使用利用有机溶剂或水进行提取来制备或销售的提取物。

上述化妆品组合物对外因或内因引起的皮肤老化改善有效。上述外因是指多种外因，例如，紫外线，内因还被称为年代性因素，主要指随着时间的经过产生的因素。

具体地，包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的本发明的化妆品组合物具有诱导胶原蛋白生物合成基因的表达来使受损的真皮恢复的功效，其效果与单独处理菊花、芦荟或洋常春藤的情况相比呈现协同功效。

并且，本发明的化妆品组合物可使胶原蛋白分解酶基因减少来呈现皱纹改善效果及老化防止效果，其效果与单独处理菊花、芦荟或洋常春藤的情况相比呈现协同功效。

以下，通过实施例更加详细地说明本发明。但是，这些实施例用于例示性地说明本发明，本发明的范围不局限于这些实施例。

比较例1：菊花、芦荟及洋常春藤的单独提取物

在将菊花(花)、芦荟(叶子)及洋常春藤(叶子)进行粉末化之后，分别提取每100g，并分别放入个别的容器，作为提取溶剂，浸渍于70重量百分比的1L乙醇水溶液，在室温条件下搁置24小时，从而获得提取液。利用滤纸来对获得的提取液进行过滤之后，利用旋转式蒸发干燥机来对滤液进行减压浓缩，从而获得了菊花提取物50g、芦荟提取物50g、洋常春藤提取物50g的提取物。

实施例1：菊花、芦荟及洋常春藤的混合提取物的制备

如下列表1所示，对在上述比较例1中获得的菊花、芦荟及洋常春藤单独提取物进行混合来获得混合提取物。

表1

实验例1：菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的Ⅰ类型胶原蛋白基因表达诱导效果 的测定

为了测定菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的Ⅰ类型胶原蛋白基因表达诱导效果，从皮肤实验室中提供相应的提取物，使用于以下实验。

具体地，在人的成纤维细胞细胞株(Human dermal fibroblast，Hs68)中，以如下条件进行实验。首先，以3.5x10⁵将Hs68成纤维细胞分注于6孔板之后，在37℃、5％CO₂条件的培养基中培养24小时。之后，去除培养基，放入磷酸盐缓冲液(DPBS)进行水洗，替换为无胎牛血清(FBS)的培养基之后，分为单独处理菊花、芦荟、洋常春藤提取物1％(10ul/ml)的组和以使菊花、芦荟及洋常春藤的混合提取物的最终混合浓度成为10ul/ml的方式进行处理的组，进一步培养24小时。之后，在各个试样的细胞中，利用TRIZOL(RNA iso，DA KARA，日本)来分离核糖核酸之后，利用nanodrop在260nm下对核糖核酸进行定量之后，分别使用2μg的核糖核酸在扩增器中合成互补脱氧核糖核酸(cDNA)(C1000热循环仪(Thermal Cycler)，伯乐(Bio-Rad)，美国)。利用在合成的互补脱氧核糖核酸中添加作为靶基因的COL1A1引物和作为花青染料的SYBR Green(supermis，应用生物系统公司(Applied Biosystems)，美国)的混合物在实时(real-time)聚合酶链式反应(PCR)机器中实施实时聚合酶链式反应，从而最终确认了COL1A1基因的表达程度。基因的表达量通过对β肌动蛋白(β-actin)基因进行校正来最终分析，将分析结果示于图1中。

如图1所示，当单独处理菊花、芦荟、洋常春藤提取物时，在菊花、芦荟中COL1A1表达显著增加，但在洋常春藤提取物中未呈现表达增加样态。与其相比，可确认到当处理菊花、芦荟、洋常春藤混合提取物时COL1A1表达以非常突出的水平增加的状态。

实验例2：菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的MMP-1表达抑制能力的评价

为了评价对于因紫外线而致使菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物超表达的MMP-1表达抑制的协同功效，确认了人成纤维细胞细胞株(Human dermal fibroblast，Hs68)中的MMP-1表达抑制能力。

首先，以3.5x10⁵将Hs68细胞分注于6孔板之后，在37℃、5％CO₂条件的培养基中培养24小时。之后，去除培养基，并放入磷酸盐缓冲液之后，在除了户外紫外线(UVB)非照射组之外的剩余细胞组中照射12mJ/cm²的户外紫外线之后，替换为无胎牛血清的培养基。并且，分为单独处理0.1％(1ul/ml)的菊花、芦荟、洋常春藤提取物的组和以使菊花、芦荟及洋常春藤的混合提取物的最终混合浓度成为1ul/ml的方式进行处理的组进行试样处理之后，进一步培养24小时。之后，在各个试样的细胞中，利用TRIZOL(RNA iso，DAKARA，日本)来分离核糖核酸之后，利用nanodrop在260nm下对核糖核酸进行定量之后，分别使用2μg的核糖核酸在扩增器中合成互补脱氧核糖核酸(C1000热循环仪，Bio-Rad，美国)。利用在合成的互补脱氧核糖核酸中添加作为靶基因的MMP-1引物和作为花青染料的SYBR Green(supermis，应用生物系统公司，美国)的混合物在实时聚合酶链式反应机器中实施实时聚合酶链式反应，从而最终确认了COL1A1基因的表达程度。基因的表达量通过对β肌动蛋白基因进行校正来最终分析，将分析结果示于图2中。

如图2所示，在户外紫外线照射组中，MMP-1的表达量显著增加。对此，当单独处理菊花、芦荟、洋常春藤提取物时，对于MMP-1呈现抑制功效，当混合处理菊花、芦荟及洋常春藤提取物时，呈现更突出的表达量抑制功效，从而可确认到对于MMP-1表达抑制具有协同功效。

剂型例1：爽肤剂的制备

根据下列表2中所示的组成成分及组成比以通常的方法制备了包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的爽肤剂。

表2

剂型例2：乳液剂的制备

根据下列表3中所示的组成成分及组成比以通常的方法制备了包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的乳液剂。

表3

成分	含量(重量百分比)
		菊花	0.33
芦荟	0.33
		洋常春藤	0.33
甘油	7.0
		丁二醇	3.0
甘油硬脂酸酯/PEG-100硬脂酸酯	1.0
		聚山梨酯60	0.5
倍半油酸山梨坦	0.5
		角鲨烷	3.0
辛酸/癸酸甘油三酯	5.0
		乳木果油	2.0
硬脂醇	0.5
		硬脂酸	0.5
羧基乙烯聚合物	0.2
		精氨酸	0.2
防腐剂	微量
		香料	微量
纯化水	余量

剂型例3：霜剂的制备

根据下列表4中所示的组成成分及组成比以通常的方法制备了包含菊花、芦荟及洋常春藤混合提取物的霜剂。

表4

成分	含量(重量百分比)
		菊花	0.33
芦荟	0.33
		洋常春藤	0.33
甘油	7.0
		丁二醇	5.0
甘油硬脂酸酯/PEG-100硬脂酸酯	2.0
		聚山梨酯60	0.5
山梨醇硬脂酸酯	0.5
		植物角鲨烷	5.0
荷荷巴油	3.0
		辛酸/癸酸甘油三酯	10.0
芦荟脂	3.0
		蜂蜡	1.0
硬脂醇	0.5
		山嵛醇	0.5
硬脂酸	0.5
		羧基乙烯聚合物	0.2
精氨酸	0.3
		聚二甲基硅氧烷	0.5
防腐剂	微量
		香料	微量
纯化水	余量

以上说明仅用于例示性地说明本发明的技术思想，只要是本发明所属技术领域的普通技术人员就可以在不脱离本发明的本质特性的范围内进行多种修改及变形。