阅读说明：本技术 一种烟草青枯病的抑制剂 (Inhibitor for tobacco bacterial wilt ) 是由 赖荣泉 吴晓婷 王巧妮 于 2019-11-29 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种烟草青枯病的抑制剂,属于植物保护领域。所述抑制剂其组分包含0.5~400mmol/L的2,6-二异丙基苯酚。该抑制剂能有效抑制烟草青枯菌的生长,在浓度为400 mmol/L时,其抑菌圈直径高达49.33 mm；当浓度达为0.5 mmol/L时,抑菌率为64.24%,当浓度达为1 mmol/L时,能够完全抑制青枯病菌的生长。该抑制剂的有效活性成分为因植物源活性物质大蒜根系分泌物2,6-二异丙基苯酚,防效相对稳定；能显著抑制该病菌增殖而控制菌落的生长。能减少化学农药的使用、减少环境污染,并提高烟叶质量。(The invention provides an inhibitor for tobacco bacterial wilt, belonging to the field of plant protection. The inhibitor comprises 0.5-400 mmol/L of 2, 6-diisopropyl phenol. The inhibitor can effectively inhibit the growth of ralstonia solanacearum, and the diameter of an inhibition zone is 49.33 mm when the concentration is 400 mmol/L; when the concentration reaches 0.5 mmol/L, the bacteriostasis rate is 64.24%, and when the concentration reaches 1mmol/L, the growth of ralstonia solanacearum can be completely inhibited. The effective active ingredient of the inhibitor is 2, 6-diisopropyl phenol which is the root secretion of garlic and is a plant source active substance, and the control effect is relatively stable; can obviously inhibit the proliferation of the pathogenic bacteria and control the growth of bacterial colonies. Can reduce the use of chemical pesticide, reduce environmental pollution and improve the quality of tobacco leaves.)

一种烟草青枯病的抑制剂

技术领域

本发明属于植物保护领域，具体涉及一种烟草青枯病的抑制剂。

背景技术

烟草是重要的经济作物，在我国，其种植面积和总产量均占世界的1/3以上（陈长卿等，2019）。我国烟草侵染性病害多达68种，且烟草病害种类逐渐增加，病害的发生使烟叶产量大幅度降低和烟叶质量受到严重影响（陈瑞泰等，1997；赵杰等，2013）。烟草青枯病是由茄科青枯劳尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的维管束细菌性土传病害，主要危害植物的根和茎（周训军等，2012）。在我国南方普遍发生，其中以广东、福建、台湾、湖南、江西等烟区为害较严重（陈瑞泰等，1997）。近几年，由于气候等原因，该病已由南向北开始蔓延（孔凡玉，2003）。目前，该病的防治主要通过化学防治来进行，但其效果不明显且长期施用化学农药会造成药物残留、植株产生抗药性和污染环境等问题（Imazaki I, et al.,2010）。

大蒜（Allium sativum L.）为百合科葱属植物，对植物病原菌具有广谱的杀菌作用（张万萍和赵丽，2012）。大蒜直接作用于下茬作物的物质可能主要是大蒜根系中的物质及大蒜根系分泌物（周艳丽等，2007a，2007b）。研究表明，植物的连作障碍与根系分泌物有着密切的关系，而根系分泌物及其化感作用的研究成为当前研究连作障碍的热点（Song etal.，2004；解文科等，2005；罗永清等，2012；Li et al.，2014）。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟草青枯病的抑制剂。所述抑制剂大蒜根系分泌物2,6-二异丙基苯酚，对烟草青枯病菌的生长具有显著的抑制作用，能够直接用于防治烟草青枯病菌。

一种烟草青枯病的抑制剂，其组分包含：0.5~400mmol/L的2,6-二异丙基苯酚。

进一步的，一种烟草青枯病的抑制剂，其组分包含：0.5~1mmol/L的2,6-二异丙基苯酚。

更进一步的，一种烟草青枯病的抑制剂，其组分包含：1mmol/L的2,6-二异丙基苯酚。

包含上述一种烟草青枯病的抑制剂的农药。

上述一种烟草青枯病的抑制剂在烟草青枯病防治中的应用。

上述包含一种烟草青枯病的抑制剂的农药在烟草青枯病防治中的应用。

本发明的优点在于：

本发明提供一种烟草青枯病的抑制剂，其组分包含0.5~400mmol/L的2,6-二异丙基苯酚。该抑制剂能有效抑制烟草青枯菌的生长，随着2,6-二异丙基苯酚浓度的增加，其抑菌圈和抑菌率也逐渐增大；在浓度为400 mmol/L时，其抑菌圈直径高达49.33 mm；当浓度达为0.5 mmol/L时，抑菌率为64.24%，当浓度达为1 mmol/L时，能够完全抑制青枯病菌的生长。该抑制剂的有效活性成分为因植物源活性物质大蒜根系分泌物2,6-二异丙基苯酚，防效相对稳定；能显著抑制该病菌增殖而控制菌落的生长。能减少化学农药的使用、减少环境污染，并提高烟叶质量。

具体实施方式

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是下述的实例仅仅是本发明其中的例子而已，并不代表本发明所限定的权利保护范围，本发明的权利保护范围以权利要求书为准。

供试菌株：烟草青枯病菌（Ralstonia solanacearum）

试剂：邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二异丙基苯酚、二烯丙基二硫、2,6-二叔丁基对甲酚。

实施例1 4种化感物质对烟草青枯病菌的抑制活性试验

选取大蒜根系分泌物中的化感物质：邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二异丙基苯酚、二烯丙基二硫、2,6-二叔丁基对甲酚。参考许大凤和倪海军（2016）及刘勇等（2007）方法，用甲醇将四种大蒜根系分泌物化感物质均配成浓度为400mmol/L、200mmol/L和50mmol/L的试剂待用，用甲醇为对照 (CK)。

从已活化好的青枯菌菌株中挑取单菌落到装有3mLNB培养基的三角瓶中置于温度为28℃，转速为180rpm的摇床上，培养12h，进行摇菌，待用。取两瓶装有150mL的TTC培养基，一瓶培养基中不加菌悬液，另一瓶培养基中加入菌悬液，吸取1500μL原菌液到装有冷却至45-50℃150mL培养基的三角瓶中。先将不加菌液的培养基，倒入培养皿中；待培养基冷却后，再倒入加有菌液的培养基，并在每个培养基中放入3个牛津杯，将牛津杯***上层培养基（未凝固）中，并将牛津杯中的培养基用接种针挑出，每个牛津杯中加入200μL的大蒜根系分泌物化感物质试剂，以甲醇为对照。平板于超净工作台内放置4h确保试剂充分扩散到琼脂中；之后将平板置于28 ℃，湿度为75%的人工气候箱中暗培养，待培养72 h 后用十字交叉法测量抑菌圈直径。

抑制率（%）= ( 处理组抑菌圈直径－对照组抑菌圈直径) /处理组抑菌圈直径×100

4种化感物质对烟草青枯病菌的抑抑菌效果，如表1所示。

表1 4种化感物质对烟草青枯病菌的抑菌效果

注：同列数据后小写字母不同表示差异显著（p <0.05），下同

表1中看出：2,6-二异丙基苯酚抑菌效果最明显，且随着浓度的增加，抑菌圈越来越大，在浓度为400 mmol/L时，培养72 h后，抑菌圈为49.33 mm；二烯丙基二硫抑菌效果较好，随着浓度的增加，抑菌圈越来越大，在浓度为400 mmol/L时，培养72 h后，抑菌圈为30.67 mm；二者均与对照有显著性差异。2,6-二叔丁基对甲酚抑菌效果不明显，邻苯二甲酸二丁酯无抑菌效果，2,6-二叔丁基对甲酚和邻苯二甲酸二丁酯对烟草青枯病菌均无显著性差异。因此选取2,6-二异丙基苯酚进行下一步试验。

实施例2 2,6-二异丙基苯酚对青枯病菌的抑制效果

菌落法：选取抑菌圈最大的试剂2,6-二异丙基苯酚，将该试剂配成浓度为20mmol/L的母液（用20%的甲醇稀释），将母液按不同比例加入TTC培养基中，使2,6-二异丙基苯酚试剂终浓度为：0.05，0.1，0.5，1和5mmol/L，以20%的甲醇为对照（CK）。将过夜的青枯菌菌悬液稀释到浓度为1×10³cfu/mL，吸取100μL菌悬液涂布于含不同浓度2,6-二异丙基苯酚的TTC平板培养基上，之后将平板置于28 ℃，湿度为75%的人工气候箱中暗培养，72h后开始测抑菌率。

青枯病抑菌率（%）=（对照皿菌落数量–处理皿菌落数量）/对照皿菌落数量×100。

2,6-二异丙基苯酚对青枯病菌的抑制效果，如表2。

表2 2,6-二异丙基苯酚的抑菌作用

表1中可以看出：不同浓度2,6-二异丙基苯酚处理 72 后，对烟草青枯菌均具有抑制效果，且随着浓度增大抑制效果逐渐增强。当2,6-二异丙基苯酚浓度为 1 mmol/L，抑制率为99.66%，而当其浓度为 5 mmol/L 时可完全抑制青枯病菌的生长。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。