阅读说明：本技术 一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂 (Inhibitor for tobacco fusarium root rot ) 是由 吴晓婷 赖荣泉 王巧妮 于 2019-11-29 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂,属于植物保护领域。所述抑制剂其组分包含0.05~5mmol/L的2,6-二异丙基苯酚。该抑制剂能有效抑制烟草镰刀菌的生长,在浓度为5 mmol/L时,其对烟草镰刀菌根腐病菌丝生长抑制率为83.46%；孢子萌发抑制率为100%。该抑制剂的有效活性成分为因植物源活性物质大蒜根系分泌物2,6-二异丙基苯酚,防效相对稳定；具有很好的抑制该病菌孢子萌发及菌丝生长作用能减少化学农药的使用、减少环境污染,并提高烟叶质量。(The invention provides an inhibitor for tobacco fusarium root rot, belonging to the field of plant protection. The inhibitor comprises 0.05-5 mmol/L of 2, 6-diisopropyl phenol. The inhibitor can effectively inhibit the growth of fusarium graminearum, and when the concentration is 5mmol/L, the inhibition rate of the inhibitor on the growth of fusarium root rot hyphae of tobacco is 83.46%; the spore germination inhibition rate is 100%. The effective active ingredient of the inhibitor is 2, 6-diisopropyl phenol which is the root secretion of garlic and is a plant source active substance, and the control effect is relatively stable; has good effects of inhibiting spore germination and hypha growth of the pathogenic bacteria, reducing the use of chemical pesticide, reducing environmental pollution and improving the quality of tobacco leaves.)

一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂

技术领域

本发明属于植物保护领域，具体涉及一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂。

背景技术

烟草镰刀菌根腐病是主要的根茎类病害之一，烟草根腐病在福建省普遍发生。其病原菌有尖镰刀菌（F. oxysporum）、茄病镰刀菌（F. solani）和半裸镰刀菌（F. semitectum）（吴安忠等，2018；张绍升等，2012）。由于全球气候变暖、土地连作造成病原菌积累、烟田常年施用化肥、施用农药，以及有机肥施用量的减少，造成土壤微生物群落不平衡，烟草根腐病逐年增加（朱贤朝等，2001；Cole J D，et al., 1982）。目前烟草镰刀菌根腐病的防治方法主要采用化学防治，由于特效药剂和抗性品种的缺乏，烟草根腐病的治理难度较大，危害较严重，成为生产上防治最困难的重要病害之一（赵杰等，2013）。

大蒜（Allium sativum L.）为百合科葱属植物，对植物病原菌具有广谱的杀菌作用（张万萍和赵丽，2012）。大蒜直接作用于下茬作物的物质可能主要是大蒜根系中的物质及大蒜根系分泌物（周艳丽等，2007a，2007b）。有研究发现，琼脂乙酸乙酯组分中主要成分为2,6-二异丙基苯酚、2,6-二叔丁基对甲酚、二烯丙基二硫化物和邻苯二甲酸二丁酯，而且对其中2,6-二异丙基苯酚、2,6-二叔丁基对甲酚和二烯丙基二硫化物化感作用做了验证，试验结果均表现出不同的化感作用（周艳丽和程智慧，2012）。化感物质具有一定的化感潜力，对作物生长会产生有益或有害的作用（阎飞，2000）。黄业昌等（2017）研究发现，邻苯二甲酸二丁酯能有效降低西瓜枯萎病的发病率和病情指数。邻苯二甲酸二丁酯和苯甲酸-4-甲基苯酯对黄瓜枯萎病菌菌丝有抑制作用。本课题组前期在烟田利用大蒜与其套种等来防控烟草根茎病害，取得了明显的控害效果（赖荣泉，2011；Lai et al,2011a; Lai et al,2011b）。因此，本试验探讨了大蒜根系分泌物化感物质对烟草青枯病菌生长的影响，为烟草青枯病菌的防治提供理论依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂，其组分包含：0.05~5mmol/L 2,6-二异丙基苯酚。

进一步的，上述一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂，其组分包含：1~5mmol/L 2,6-二异丙基苯酚。

更进一步的，上述一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂，其组分包含：5mmol/L 2,6-二异丙基苯酚。

一种包含上述一种烟草镰刀菌根腐的抑制剂的农药。

上述一种烟草镰刀菌根腐的抑制剂在烟草镰刀菌根腐病防治中的应用。

上述包含一种烟草镰刀菌根腐的抑制剂的农药在烟草镰刀菌根腐病防治中的应用。

本发明的优点在于：

本发明公开了一种烟草镰刀菌根腐病的抑制剂，其组分包含：0.05~5mmol/L 2,6-二异丙基苯酚。随着2,6-二异丙基苯酚浓度的增加，在浓度为5 mmol/L时，其对烟草镰刀菌根腐病菌丝生长抑制率为83.46%；孢子萌发抑制率为100%。该抑制剂的有效活性成分为因植物源活性物质大蒜根系分泌物2,6-二异丙基苯酚，防效相对稳定；能有效抑制烟草镰刀菌根腐病菌孢子萌发及菌丝生长，进而能减少化学农药的使用、减少环境污染，并提高烟叶质量。

附图说明：

图1为2,6-二异丙基苯酚对烟草镰刀菌根腐病菌丝生长的抑制作用。从左往右是2,6-二异丙基苯酚的浓度依次为0 mmol/L（CK）、0.05 mmol/L、0.1 mmol/L、0.5 mmol/L、1mmol/L、5 mmol/L，从上到下三行为3次重复。

具体实施方式

为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是下述的实例仅仅是本发明其中的例子而已，并不代表本发明所限定的权利保护范围，本发明的权利保护范围以权利要求书为准。

供试菌株：烟草尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)

试剂：邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二异丙基苯酚、二烯丙基二硫、2,6-二叔丁基对甲酚。

实施例1 化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病菌丝生长的抑制作用

参考周宝利等（2011）的方法：将选取四种大蒜根系分泌物化感物质邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二异丙基苯酚、二烯丙基二硫、2,6-二叔丁基对甲酚以甲醇为溶剂制成大蒜根系分泌物化感物质试剂，在PDA培养基中分别添加四种大蒜根系分泌物化感物质试剂，使各自在培养基中的浓度分别为0.05，0.1，0.5，1和5mmol/L，以添加等量甲醇为对照（CK）。轻轻转动锥形瓶，使大蒜根系分泌物化感物质试剂与培养基混合均匀，将混合液倒入直径为9cm的培养皿中，每皿20mL，冷却凝固后，分别在培养皿中接入一个直径为5 mm的烟草尖孢镰刀菌根腐病菌饼，置于28℃暗培养。每处理设置3次重复。培养5 d后，用十字交叉法测定菌落直径（图1），并计算抑制率。

抑制率（%）=[(对照菌落直径－处理菌落直径)／对照菌落直径]×100

大蒜根系分泌物化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病菌菌丝生长的抑制作用，如图1和表1所示。

表1 大蒜根系分泌物化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病菌丝生长的抑制作用

注：同列数据后小写字母不同表示差异显著（p <0.05）,下同。

表1中看出：四种大蒜根系分泌物化感物质的不同浓度试剂，除二烯丙基二硫在浓度为0.05mmol/L时，促进菌丝生长；其余试剂对烟草尖孢镰刀菌根腐病菌丝生长均有不同的抑制作用。在2,6-二异丙基苯酚和2,6-二叔丁基对甲酚处理下，烟草尖孢镰刀菌根腐病菌丝生长与对照相比差异均显著，且2,6-二异丙基苯酚与其他试剂相比，其抑菌效果最好，在浓度为5mmol/L时，其抑菌率达到83.45%。在二烯丙基二硫处理下，当浓度达到1mmol/L时，菌丝生长与对照相比达到差异显著。因此，四种大蒜根系分泌物化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病菌丝生长的抑菌效果为：二烯丙基二硫<邻苯二甲酸二丁酯<2,6-二叔丁基对甲酚<2,6-二异丙基苯酚。

实施例2 大蒜根系分泌物化感物质对根腐病（烟草尖孢镰刀菌）孢子萌发的影响测定

参考周艳丽（2011）的方法：用打孔器沿生长 4 d 的菌落边缘打取直径为 0.5 cm 菌饼，产孢时将烟草根腐病菌接种于PDA燕麦培养基上 28 ℃黑暗培养 7 d 至菌丝繁茂后刮取菌丝，将菌丝在无菌水中，用无菌水将孢子洗脱，摇匀后镜检，调整孢子浓度至1×10⁷cfu/mL。将大蒜根系分泌物化感物质邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二异丙基苯酚、二烯丙基二硫、2,6-二叔丁基对甲酚用20%的甲醇分别稀释至0.05，0.1，0.5，1和5mmol/L，以20%的甲醇为对照。吸取100 μL 菌悬液，与 100 μL不同浓度的大蒜根系分泌物化感物质试剂混匀，形成混合液，在铺有滤纸的培养皿中放入载玻片，用直径15 mm 的打孔器打取水琼胶培养基置于载玻片上，每皿 2 片水琼胶培养基．吸取混合液 20 μL 于水琼胶培养基上，保湿培养，28 ℃ 黑暗培养8 h后，40 倍物镜下镜检病原菌孢子萌发情况，以孢子芽管的长度超过孢子直径的一半为已萌发孢子。计算孢子萌发率和孢子萌发抑制率。

孢子萌发率（%）＝萌发孢子数/孢子总数×100

孢子萌发抑制率（%）=（对照孢子萌发数－处理孢子萌发数）/对照孢子萌发数×100

大蒜根系分泌物化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病孢子萌发的影响测定，如表2所示；大蒜根系分泌物化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病孢子萌发抑制率，见表3。

表2 化感物质对尖孢镰刀菌根腐病孢子萌发率的影响

表3 化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病孢子萌发抑制率

由表2、表3可知：四种大蒜根系分泌物化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病孢子萌发均有不同的抑制作用，各浓度处理与对照均存在显著性差异。除2,6-二异丙基苯酚处理外，当其他化感物质浓度达到1mmol/L时，孢子萌发率为0，孢子萌发抑制率为100%。当各试剂浓度达到0.5mmol/L时，邻苯二甲酸二丁酯、2,6-二异丙基苯酚、二烯丙基二硫和2,6-二叔丁基对甲酚对尖孢镰刀菌根腐病孢子的萌发率分别为35.36%、87.52%、48.63%和63.76%，对尖孢镰刀菌根腐病孢子的萌发抑制率分别为88.12%、10.39%、50.21%和34.68%。因此，四种化感物质对烟草尖孢镰刀菌根腐病孢子的抑制效果为：2,6-二异丙基苯酚<2,6-二叔丁基对甲酚<二烯丙基二硫<邻苯二甲酸二丁酯。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。