阅读说明：本技术 一种动物血浆蛋白联产提取工艺 (Process for co-production and extraction of animal plasma proteins ) 是由 许帅辉 赵悦华 赵水 常明利 于 2019-11-04 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种动物血浆蛋白联产提取工艺,涉及生物工程技术领域。包括以下步骤：S1.采集动物血浆,将动物血浆置于-4℃的环境下；S2.取适量动物血浆置于分离器中,调节分离器的温度,往血浆中加入乙醇溶液A并将其两者充分搅拌混合,调节混合液的PH值,静置15-30min后,得到沉淀A与上清液A；S3.分离沉淀A与上清液A,将沉淀A中加入乙醇溶液B将其两者充分搅拌混合,除去上清液,即得层粘连蛋白。通过优化提取工艺以及严格控制提取参数,可以从动物血浆中连续化提取出层粘连蛋白、纤连蛋白、球蛋白、珠蛋白与白蛋白,不仅提高了蛋白质的提取效率,节约大量的提取时间,同时也大大提高了蛋白质的纯度。(The invention provides a animal plasma protein co-production extraction process, which relates to the technical field of bioengineering and comprises the following steps of S1, collecting animal plasma, placing the animal plasma in an environment of-4 ℃, S2, placing a proper amount of the animal plasma in a separator, adjusting the temperature of the separator, adding an ethanol solution A into the plasma, fully stirring and mixing the plasma and the ethanol solution A, adjusting the pH value of a mixed solution, standing for 15-30min to obtain a precipitate A and a supernatant A, S3, separating the precipitate A from the supernatant A, adding an ethanol solution B into the precipitate A, fully stirring and mixing the precipitate A and the ethanol solution B, and removing the supernatant to obtain laminin.)

一种动物血浆蛋白联产提取工艺

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体为一种动物血浆蛋白联产提取工艺。

背景技术

血浆的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等，血浆相当于***的细胞间质，血浆是血液的重要组成部分，呈淡黄色液体(因含有胆红素)，血浆的化学成分中，水分占90~92%，其他10%以溶质血浆蛋白为主，并含有电解质、营养素、酶类、激素类、胆固醇和其他重要组成部分，血浆蛋白是多种蛋白质的总称。

血浆蛋白中的各种蛋白质都有着十分重要的作用，例如白蛋白在形成血浆胶体渗透压及转运某些小分子物质和脂溶性物质方面发挥主要作用，球蛋白与特异性免疫有密切关系，纤维蛋白是参与血液凝固过程的重要物质，目前，关于各种蛋白质的提取方式有很多，但是大多数提取方法的过程都较为复杂，提取过程中耗费的时间较多，无法做到规模化的生产，且提取的蛋白质纯度有待进一步提高。

发明内容

（一）解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种动物血浆蛋白联产提取工艺，解决了现有技术中提取方法的过程都较为复杂，提取过程中耗费的时间较多，无法做到规模化的生产，且提取的蛋白质纯度有待进一步提高的问题。

（二）技术方案

为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种动物血浆蛋白联产提取工艺，包括以下步骤：

S1.采集动物血浆，将动物血浆置于-4℃的环境下；

S2.取适量动物血浆置于分离器中，调节分离器的温度，往血浆中加入乙醇溶液A并将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置15-30min后，得到沉淀A与上清液A；

S3.分离沉淀A与上清液A，将沉淀A中加入乙醇溶液B将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得层粘连蛋白；

S4.将上清液A置于另一分离器中，往上清液A中加入乙醇溶液C将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置20-25min后,得到沉淀B与上清液B，将沉淀B与上清液B分离，往沉淀B中加入乙醇溶液D，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得纤连蛋白；

S5.将上清液B置于另一分离器中，往上清液B中加入乙醇溶液E将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置23-29min后,得到沉淀C与上清液C，将沉淀C与上清液C分离，往沉淀C中加入乙醇溶液F，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得球蛋白;

S6.将上清液C置于另一分离器中，往上清液C中加入乙醇溶液G将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置30-36min后,得到沉淀D与上清液D，将沉淀D与上清液D分离，往沉淀D中加入乙醇溶液H，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得珠蛋白;

S7.将上清液D置于另一分离器中，往上清液D中加入乙醇溶液J将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置18-24min后,得到沉淀E与上清液E，将沉淀E与上清液E分离，往沉淀E中加入乙醇溶液L，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得白蛋白。

优选的，所述步骤2-7中的分离器温度均为零下10℃到零下2℃，且搅拌速度为3000-5000r/min，搅拌时间为1-2min。

优选的，所述步骤2中乙醇溶液A的浓度为6-10%，PH值的范围为7-7.5。

优选的，所述步骤3中乙醇溶液B的浓度为13-18%，PH值的范围为5-7。

优选的，所述步骤4中乙醇溶液C的浓度为19-26%，PH值的范围为4-6,所述乙醇溶液D的浓度为35-45%。

优选的，所述步骤5中乙醇溶液E的浓度为17-25%，PH值的范围为6.5-7.5,所述乙醇溶液F的浓度为35-45%。

优选的，所述步骤6中乙醇溶液G的浓度为22-29%，PH值的范围为6.5-7.5,所述乙醇溶液H的浓度为35-45%。

优选的，所述步骤7中乙醇溶液J的浓度为25-30%，PH值的范围为7.1-7.3,所述乙醇溶液L的浓度为35-45%。

（三）有益效果

本发明提供了一种动物血浆蛋白联产提取工艺。具备以下有益效果：

1、该动物血浆蛋白联产提取工艺，通过优化提取工艺以及严格控制提取参数，可以从动物血浆中连续化提取出层粘连蛋白、纤连蛋白、球蛋白、珠蛋白与白蛋白，不仅提高了蛋白质的提取效率，节约大量的提取时间，同时也大大提高了蛋白质的纯度。

2、该动物血浆蛋白联产提取工艺，采用动物血浆作为原材料，原材料的获取方式简单，提取的成本得到了降低，可以对各种蛋白质进行规模化生产。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例：

本发明实施例提供一种动物血浆蛋白联产提取工艺，包括以下步骤：

S1.采集动物血浆，将动物血浆置于-4℃的环境下，采用动物血浆作为原材料，原材料的获取方式简单，提取的成本得到了降低，可以对各种蛋白质进行规模化生产；

S2.取适量动物血浆置于分离器中，调节分离器的温度，往血浆中加入乙醇溶液A并将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置15-30min后，得到沉淀A与上清液A，其中乙醇溶液A的浓度为6-10%，PH值的范围为7-7.5；

S3.分离沉淀A与上清液A，将沉淀A中加入乙醇溶液B将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得层粘连蛋白，其中乙醇溶液B的浓度为13-18%，PH值的范围为5-7；

S4.将上清液A置于另一分离器中，往上清液A中加入乙醇溶液C将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置20-25min后,得到沉淀B与上清液B，将沉淀B与上清液B分离，往沉淀B中加入乙醇溶液D，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得纤连蛋白，其中乙醇溶液C的浓度为19-26%，PH值的范围为4-6,所述乙醇溶液D的浓度为35-45%；

S5.将上清液B置于另一分离器中，往上清液B中加入乙醇溶液E将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置23-29min后,得到沉淀C与上清液C，将沉淀C与上清液C分离，往沉淀C中加入乙醇溶液F，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得球蛋白，其中乙醇溶液E的浓度为17-25%，PH值的范围为6.5-7.5,所述乙醇溶液F的浓度为35-45%;

S6.将上清液C置于另一分离器中，往上清液C中加入乙醇溶液G将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置30-36min后,得到沉淀D与上清液D，将沉淀D与上清液D分离，往沉淀D中加入乙醇溶液H，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得珠蛋白，其中乙醇溶液G的浓度为22-29%，PH值的范围为6.5-7.5,所述乙醇溶液H的浓度为35-45%;

S7.将上清液D置于另一分离器中，往上清液D中加入乙醇溶液J将其两者充分搅拌混合，调节混合液的PH值，静置18-24min后,得到沉淀E与上清液E，将沉淀E与上清液E分离，往沉淀E中加入乙醇溶液L，调节混合液的PH值，静置10-20min后，除去上清液，即得白蛋白，其中乙醇溶液J的浓度为25-30%，PH值的范围为7.1-7.3,所述乙醇溶液L的浓度为35-45%。

其中步骤2-7中的分离器温度均为零下10℃到零下2℃，且搅拌速度为3000-5000r/min，搅拌时间为1-2min。

通过优化提取工艺以及严格控制提取参数，可以从动物血浆中连续化提取出层粘连蛋白、纤连蛋白、球蛋白、珠蛋白与白蛋白，不仅提高了蛋白质的提取效率，节约大量的提取时间，同时也大大提高了蛋白质的纯度。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。