阅读说明：本技术 一种现场快速检测蔗糖的比色试剂及其制备方法 (Colorimetric reagent for rapidly detecting sucrose on site and preparation method thereof ) 是由 窦新存 张天实 于 2019-10-26 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种现场快速检测蔗糖的比色试剂及其制备方法,该试剂是由A,B两部分组成,A是由化学试剂N-甲基吡咯烷酮磺酸盐和甲基氯化咪唑鎓配制而成；B是由化学试剂巴比妥酸、对甲苯胺、冰醋酸和异丙醇配制而成；其主要利用在二元离子液体下,蔗糖可以被快速催化脱水生成羟甲基糠醛,而羟甲基糠醛可以和巴比妥酸与对甲苯胺形成樱桃红色复合物,实现比色检测。本试剂对于含有杂质的样品可以以较快的速度(1min内)实现微量(＞50μg)检测。另外,本试剂原料易得,制备简便,无危险,选择性强,操作简单,可以有效避免传统的糖类检测方法中,无法区分醛类,醇类等类似物的问题。(The invention provides a colorimetric reagent for rapidly detecting sucrose on site and a preparation method thereof, wherein the reagent consists of a reagent A and a reagent B, wherein the reagent A is prepared from a chemical reagent N-methylpyrrolidone sulfonate and methylimidazolium chloride; b is prepared by chemical reagents of barbituric acid, p-toluidine, glacial acetic acid and isopropanol; the method is mainly characterized in that under the binary ionic liquid, sucrose can be quickly catalyzed and dehydrated to generate hydroxymethyl furfural, and the hydroxymethyl furfural, barbituric acid and p-toluidine can form a cherry red compound to realize colorimetric detection. The reagent can realize trace (> 50 mu g) detection for a sample containing impurities at a higher speed (within 1 min). In addition, the reagent has the advantages of easily obtained raw materials, simple and convenient preparation, no danger, strong selectivity and simple operation, and can effectively avoid the problem that aldehydes, alcohols and other analogues cannot be distinguished in the traditional saccharide detection method.)

一种现场快速检测蔗糖的比色试剂及其制备方法

技术领域

本发明提供了一种性质稳定，特异性强的蔗糖现场比色检测试剂及其制备方法，可以实现现场快速检测蔗糖。

背景技术

蔗糖是生活中最常见的一种甜味剂，经常作为食品添加剂。但是一些糖尿病患者以及婴幼儿服用的低糖或无糖产品中是严格限制蔗糖含量的。由于蔗糖比其他非糖类甜味剂更廉价，一些非法商家会在低糖或无糖食品中掺入蔗糖。因此，在食品安全领域有一些关于蔗糖的定性或定量的检测手段。除此之外，世界范围内恐怖活动猖獗，严重威胁着人民的生命财产安全。我国对制式***的管控比较严格，而非制式***具有来源广泛，易获得，易制造，易实施等特点，故成为***最常用的***物。由于蔗糖具备易燃烧，易获得，燃烧后提供能量并产生大量气体的特点，其在非制式***物中是一种常见的燃料。由于蔗糖在生活中普遍存在，难以实现管控，而其本身不具有单独制作***物的性质，因此未受到过多重视，在***案及搜爆现场还未实现蔗糖的检测。

综上，实现蔗糖的快速现场分析无论在食品安全还是社会安全都有着极大的意义。比色检测作为一种简捷，直观的检测手段十分适合用于以上场景中蔗糖的检测。目前，比色检测蔗糖最主要的检测方法是Fehling试剂法，Benedict试剂法以及铁法。这些方法利用的都是蔗糖水解得到的葡萄糖的还原性，例如铁法中，在碱性溶液环境下，有如下反应：C₆H₁₂O₆+6K₃[Fe(CN)₆]+6KOH＝(CHOH)₄·(COOH)₂+6K₄[Fe(CN)₆]+4H₂O，溶液由红色变为黄色，但由于还原糖还原性并不强，该类反应须在热水浴中进行，且反应较慢，不利于应用于现场分析。不利用还原糖性质的检测方法主要有Molish试剂法，蒽酮硫酸法。这些方法利用蔗糖在浓硫酸存在下快速脱水生成羟甲基糠醛，利用脱水产生的热量可以促进羟甲基糠醛与酚或醌类物质形成复合物，从而进行比色检测。但该类反应需要浓硫酸处理样品，非常危险，而且在有杂质存在的情况下可能产生无法预计的现场状况。

发明内容

本发明目的在于，提供一种现场快速检测蔗糖的比色试剂及其制备方法，该试剂是由A， B两部分组成，A是由化学试剂N-甲基吡咯烷酮磺酸盐(NMP[HSO₄])和甲基氯化咪唑鎓配制而成；B是由化学试剂巴比妥酸，对甲苯胺，冰醋酸，异丙醇和超纯水配制而成。其主要利用在二元离子液体下，蔗糖可以被快速催化脱水生成羟甲基糠醛，而羟甲基糠醛可以和巴比妥酸与对甲苯胺形成樱桃红色复合物，实现比色检测。本发明操作简单，成本较低，对于含有大量杂质的样品也可以较快的速度(1min内)实现微量(＞50μg)检测。此外，利用蔗糖在二元离子液体中转化成羟甲基糠醛的性质，可以有效避免传统的糖类检测方法中Fehling 试剂，Benedict试剂，银氨试剂无法区分醛类和醇类的问题。

本发明所述的一种现场快速检测蔗糖的比色试剂，该试剂由A，B两部分组成，其中A是由化学试剂N-甲基吡咯烷酮磺酸盐和甲基氯化咪唑鎓按摩尔比为0.5-2.5:10配制而成；B是由化学试剂巴比妥酸质量分数为1％-5％、对甲苯胺体积分数为4％-8％、冰醋酸体积分数为4％-8％和异丙醇体积分数为34％-42％配制而成。

所述现场快速检测蔗糖的比色试剂的制备方法，按下列步骤进行：

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入4个烧瓶中，分别加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，氯代正丁烷，氯代正己烷和氯代正辛烷，温度60℃水浴下反应24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1位分别为乙基、丁基、己基或辛基的甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐与步骤b得到的甲基氯化咪唑鎓按摩尔比 0.5-2.5:10，于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2-10g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、将对甲苯胺、醋酸和异丙醇按体积比1:1:6-10混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的混合液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存，其中试剂B中巴比妥酸质量分数为1％-5％、对甲苯胺体积分数为4％-8％、冰醋酸体积分数为4％-8％和异丙醇体积分数为34％-42％；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蔗糖后，先滴加检测试剂A，再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，观察其是否生成樱桃红色的复合物，以此确定蔗糖的存在。

本发明所述的一种现场快速检测蔗糖的比色试剂及其制备方法，其主要利用蔗糖在二元离子液体中被催化脱水生成5-羟甲基糠醛，之后与巴比妥酸-对甲苯胺形成一种樱桃红色的复合物的现象实现检测。本试剂原料易得，制备简便，无危险，选择性强，操作简单，具有广泛应用的潜力。

具体实施方式

实施例1

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与12mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蔗糖(化学试剂)后，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，15s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖。

实施例2

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代丁烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-丁基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-丁基-3-甲基氯化咪唑鎓9.976g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蔗糖(化学试剂)后，先滴加检测试剂A，再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，15s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖。

实施例3

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代己烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-己基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-己基-3-甲基氯化咪唑鎓11.578g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蔗糖(化学试剂)后，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，15s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖存在。

实施例4

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代辛烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-辛基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-辛基-3-甲基氯化咪唑鎓13.18g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蔗糖(化学试剂)后，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，15s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖存在。

实施例5

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蔗糖后，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，26s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖存在。

实施例6

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取4g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与12mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的蜂蜜后，先滴加检测试剂B，无变色情况，说明蜂蜜中不含羟甲基糠醛，再次取样，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有样品的采样纸上，40s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖。

实施例7

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取4g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、将蔗糖放入坩埚中灼烧1min，用采样纸擦取微量的蔗糖后，先滴加检测试剂A，5s 再滴加试剂B到含有蔗糖样品的滤纸上，50s左右即在烧焦的样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖。

实施例8

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取6g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦拭用黑火药和蔗糖制作的简易***装置表面，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有样品的滤纸上，26s即在样品表面产生樱桃红色，可以确定采样纸中样品含有蔗糖。

实施例9

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取6g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与12mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、用采样纸擦取微量的果糖(化学试剂)，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有样品的滤纸上，2s内即在样品表面产生樱桃红色，其反应速率远快于蔗糖反应速率，可以确定采样纸中样品以果糖为主。

实施例10

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应 24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取6g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与16mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、在表面皿中滴加10μL 5g/L的蔗糖溶液，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有样品的滤纸上，约1min液体中即有部分区域产生樱桃红色，可以确定溶液中含有蔗糖。

实施例11

制备检测试剂A：

a、将10mL N-甲基吡咯烷酮放入烧瓶中，在冰浴环境下缓慢加入6mL的浓硫酸，在室温下缓慢搅拌24h，再用***和乙酸乙酯分别洗涤3次，得到N-甲基吡咯烷酮磺酸盐；

b、将5g 1-甲基咪唑放入烧瓶中，加入1.1倍摩尔比的氯代乙烷，温度60℃水浴下反应24h，用乙酸乙酯洗涤3次，得到1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓；

c、将步骤a得到的N-甲基吡咯烷酮磺酸盐1.127g与步骤b得到的1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓8.375g于温度50℃水浴下充分混匀，冷却后封装在试剂盒的试剂瓶A中；

制备检测试剂B：

d、称取2g巴比妥酸在烧杯中，加入40mL水，在温度50℃的水浴下充分溶解，冷却后定容至100mL容量瓶；

e、称取2mL对甲苯胺、2mL冰醋酸与20mL异丙醇混合均匀，置于黑色试剂瓶中保存；

f、将步骤d得到的巴比妥酸与步骤e得到的溶液液按体积比1:1混合，充分搅拌均匀之后置于黑色试剂瓶B中保存；

将配置的检测试剂用于蔗糖的比色检测：

g、在表面皿中滴加10μL混合溶液(10g/L的蔗糖溶液和1000g/L的硝酸铵溶液1:1混合)，先滴加检测试剂A，5s再滴加试剂B到含有样品的滤纸上，约1min液体中即有部分区域产生樱桃红色，可以确定溶液中含有蔗糖。

通过本发明提供的现场快速检测蔗糖的比色试剂，可快速、准确的检测出***物中的蔗糖，节约成本，提高检测的即时性和准确度。