阅读说明：本技术 一种植物提取物组合物及其在防晒、晒后修复、防光老化和美白化妆品中的应用 (Plant extract composition and application thereof in sunscreen, after-sun repair, photoaging prevention and whitening cosmetics ) 是由 叶希韵 周艳卿 尹尉翰 刘明耀 于 2018-07-02 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种天然植物迷迭香、金银花及川芎提取物组合物在防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白化妆品中的应用,属于中药及化妆品领域。本发明将迷迭香、金银花及川芎提取物应用于化妆品,验证了其中两种或三种组分的组合能有效抵抗紫外线对皮肤造成的损伤,并对紫外线损伤后的皮肤细胞修复具有明显效果,本发明首次发现所述组合物中的组成成分的组合使用能明显提高防晒功效,晒后修复功效,具有抗炎、防光老化和美白的作用,能保持皮肤湿润,增加皮肤晒后水分含量和皮肤弹性的作用,使用安全、稳定。本发明具有防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白功效的植物提取物组合可作为有效活性成分制成膏霜、喷雾剂、粉剂等多种剂型,用于化妆品。(The invention discloses an application of a natural plant rosemary, honeysuckle and ligusticum wallichii extract composition in cosmetics for sun protection, after-sun repair, inflammation resistance, photoaging resistance and whitening, and belongs to the field of traditional Chinese medicines and cosmetics. The invention applies rosemary, honeysuckle and ligusticum wallichii extract to cosmetics, verifies that the combination of two or three components can effectively resist the damage of ultraviolet rays to the skin, and has obvious effect on repairing skin cells after the ultraviolet rays are damaged. The plant extract composition with the sun-screening, after-sun repairing, anti-inflammatory, anti-photoaging and whitening effects can be used as an effective active ingredient to be prepared into various formulations such as cream, spray, powder and the like, and is used for cosmetics.)

一种植物提取物组合物及其在防晒、晒后修复、防光老化和美 白化妆品中的应用

技术领域

本发明属于中药及化妆品领域，涉及一种含有迷迭香提取物、金银花提取物和/或川芎组合物的天然植物提取物组合物及其在防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白化妆品中的应用。

背景技术

近年来，大自然环境污染和大气层破坏程度的增大使得照射到地面的紫外线不断增加，皮肤衰老、日光性皮炎甚至皮肤癌患者数量显著增加，因此寻找安全、有效、稳定的化妆品防晒剂和晒后修复剂一直是众多研发人员关注的重点。

在三种不同波长范围的紫外线类型中，两部分紫外线可以照射到地面，即波长在320-400nm的长波长紫外线UVA以及290-320nm的中波长紫外线UVB。UVA的穿透力极强，透过皮肤表层可到达真皮层深部，引起皮肤过早衰老；而UVB主要作用于细胞表面，引起皮肤晒黑，长期还会导致红斑生成、脱皮，甚至损伤细胞DNA，引发皮肤癌症。当然，UVA 与UVB对皮肤的损害具有协同作用，UVA可以显著加重UVB所产生的急性损伤，提高致癌可能性，因此，日常防护紫外线十分重要。

目前市面上的防晒化妆品数目繁多，防晒能力主要由防晒剂决定。钛白粉、氧化锌等物理防晒剂可有效屏蔽掉紫外线对皮肤的伤害，但用量过大时或长期使用透气性较差，毛孔易堵塞；二苯甲酮衍生物等化学防晒剂也应用广泛，但由于其容易引起皮肤过敏、发生光解反应等，长期使用，产生的中间产物易对皮肤造成损伤。

现今生活水平的提高使得人们对化妆品的要求不断提高，大众对护肤的态度也日趋理性，越来越重视添加成分的安全性及有效性，天然、稳定且防晒效果显著的化妆品备受青睐。多年的探索研究发现，一些中药对于皮肤光损伤和光老化能起到有效的防治作用，多项研究表明皮肤衰老与防晒不当具有十分紧密的联系，因此做好日常防晒显得十分重要，而这些中药可以清除氧自由基、修复胶原纤维、改善微循环等，现已发现如山奈根提取物、姜黄根茎提取物、芦荟提取物等具有良好的防晒效果。从植物中提取防晒成分药性稳定、药力持久，对皮肤无刺激、安全有效，因此具有广阔的发展前景，是化妆品用品市场发展方向之一。

发明内容

本发明的目的在于提供一种安全有效的对皮肤细胞具有防晒功效、晒后修复、抗炎、和防光老化作用又具有美白保湿效果的天然植物提取物组合物。

本发明提供了迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物及其组合物在化妆品防晒、晒后修复、抗炎、防光老化、美白、保湿或抗衰老中的应用。

本发明提供一种具有防晒、晒后修复美白、抗炎、防光老化、保湿或抗衰老功效的植物提取物组合物，所述植物提取物组合物以迷迭香提取物、金银花提取物或川芎提取物中的任意两种作为活性成分，并且两种活性成分的质量份数比为(1～9)：(1～9)；或，所述植物提取物组合物含有以迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物作为活性成分，且所述迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物的质量份数比为(1～9)：(1～9)：(1～9)。

本发明中，所述植物提取物组合物以迷迭香提取物、金银花提取物或川芎提取物中的任意两种作为活性成分，在前述质量配比范围内迷迭香提取物、金银花提取物或川芎提取物中的任意两种之间都有显著的协同增强的效果。由图2和图5可知迷迭香提取物与金银花提取物组合后效果优于单独作用时的效果，且不同浓度配比下均有良好的抗紫外损伤作用；类似地，由图3和图6可知迷迭香提取物与川芎提取物组合后效果优于单独作用时的效果，且不同浓度配比下均有良好的抗紫外损伤作用；图4和图7可知金银花提取物与川芎提取物组合后效果优于单独作用时的效果，且不同浓度配比下均有良好的抗紫外损伤作用。优选地，所述任意两种活性成分的质量份数比为(4～6)：(4～6)；更优选地，所述任意两种活性成分的质量份数比为1：1。

本发明中，所述植物提取物组合物以迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物共同作为活性成分，优选地，所述迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物的质量份数比为(4～6)： (4～6)：(4～6)；更优选地，所述迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物的质量份数比为 1：1：1。在这个质量配比范围内，所述迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物三者之间有显著的协同增强的效果，即如图8和图9所示，迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物的组合物较之单独的提取物，对紫外线照射有更好的保护和修复作用。

本发明还提出一种化妆品组合物，其含有所述提取物组合物。其中，所述每种提取物(迷迭香提取物、金银花提取物或川芎提取物)的活性成分占化妆品基质的质量百分比为0.05％～3％，余量为化妆品基质。

优选地，所述组合物(迷迭香提取物、金银花提取物或川芎提取物)的活性成分占化妆品基质的质量百分比为3％，余量为化妆品基质。

本发明中，所述化妆品基质可以但不限于是由以下组分构成的基质混合物(重量百分比)：

6％甘油，5％矿油，4％棕榈酸异丙酯，3.5％辛酸/癸酸甘油三酯，2％硬脂醇聚醚-2，2％硬脂醇聚醚-21，1.5％鲸蜡硬脂醇，1％聚丙烯酸酯-13/聚异丁烯/聚山梨醇酯-20，0.8％甘油硬脂酸酯，0.2％尿囊素，0.2％羟苯甲酯，0.15％双(羟甲基)咪唑烷基脲，0.1％羟苯丙酯，0.05％ EDTA二钠，其余为水。或，

6％鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯，5％甘油，4％油酸乙酯\硬脂酸乙酯\牛油果树果脂不皂化物\ 亚油酸乙酯，3％辛酸癸酸甘油三酯，3％甲基丙二醇，3％花生醇\山嵛醇\花生醇葡糖苷\水\葡萄糖，2.5％鲸蜡硬脂醇，2％聚二甲基硅氧烷，1％C14-22醇\C12-20烷基葡糖苷\水\葡萄糖， 0.6％苯氧乙醇，0.5％聚丙烯酸酯交联聚合物-6\水\叔丁醇，0.2％乙基己基甘油，0.2％己二醇/ 辛甘醇，0.2％***胶树胶\黄原胶，余量为水。

由此制得的膏霜涂布均匀、手感细腻、易吸收，具有淡淡的天然草本植物的香味，舒缓清新。

本发明还提出了将上述植物提取物组合物或化妆品组合物在用于制备抵抗紫外线对皮肤造成损伤及损伤后修复的产品中的应用。

本发明还提出了将上述植物提取物组合物或化妆品组合物在用于制备具有防晒、晒后修复、抗炎、防光老化、美白、保湿或抗衰老功效的化妆品中的应用。

本发明还提出了将上述植物提取物组合物或化妆品组合物在用于制备防晒类化妆品或者祛斑类化妆品中的应用。

本发明中，所述化妆品可以是霜剂、乳剂、面膜、爽肤水、护肤水、软膏、油剂、凝胶、气雾剂、溶液剂、或涂膜剂等各种化妆品。

本发明验证了迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物在皮肤抗紫外线、防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白保湿方面的作用，并通过体外和体内实验首次验证了迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物在防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白方面的协同作用。实验结果表明迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物能有效增强皮肤抵抗紫外线的能力，以及对紫外线损伤后的细胞具有明显的修复作用，还能明显减少皮肤的炎症反应以及黑色素的形成。所述原料迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物天然绿色、无毒无刺激性，工艺简单，生产成本低，产品对皮肤作用温和且安全有效。

本发明中，所述美白是指防止皮肤黑色素的沉积，或减少皮肤细胞中黑色素的生成，或降解已经沉积的黑色素。

本发明中，所述抗炎是指防止、减少、消除皮肤炎症反应的产品中的应用。其中，所述炎症是指紫外线照射引起的皮肤炎症反应，能减少细胞内各类炎症因子的产生。

本发明中，所述保湿是指维持皮肤湿润、保持皮肤水分和弹性，或使干燥的皮肤变得湿润和有弹性。

本发明的有益效果在于，本发明提出了含有迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物的组合物在制备防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白化妆品中的应用。本发明将迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物应用于化妆品，首次提出了任意两种活性成分的组合物具有防晒、晒后修复、抗炎、防光老化和美白等功效，进一步地，首次提出了迷迭香提取物、金银花提取物及川芎提取物三者组合后的组合物能大大提高防晒功效，晒后细胞修复作用，且安全稳定，保持皮肤湿润，美白皮肤，防光老化和抗皮肤衰老。本发明可作为有效活性成分制成膏霜、喷雾剂、粉剂等多种剂型，广泛用于化妆品及护肤用品等。

附图说明

图1为迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对细胞活性的影响图，图1-1不同浓度迷迭香提取物对细胞活性的影响；图1-2不同浓度金银花提取物对细胞活性的影响；图1-3 不同浓度川芎提取物对细胞活性的影响；与对照组比较，*p<0.05。

图2为组合物与迷迭香提取物、金银花提取物对UV照射HaCaT细胞保护作用的比较图，与紫外对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001；与组合物组比较，^##p<0.01，^###p<0.001。

图3为组合物与迷迭香提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞保护作用的比较图，与紫外对照组比较，**p<0.01，***p<0.001；与组合物组比较，^#p<0.05，^##p<0.01，^###p<0.001。

图4为组合物与金银花提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞保护作用的比较图，与紫外对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001；与组合物组比较，^#p<0.05，^###p<0.001。

图5为迷迭香提取物、金银花提取物两种不同浓度比例对紫外的保护实验的结果图，与紫外对照组比较，**p<0.01，***p<0.001。

图6为迷迭香提取物、川芎提取物两种不同浓度比例对紫外的保护实验的结果图，与紫外对照组比较，**p<0.01，***p<0.001。

图7为金银花提取物、川芎提取物两种不同浓度比例对紫外的保护实验的结果图，与紫外对照组比较，**p<0.01，***p<0.001。

图8为组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对紫外线UV照射HaCaT细胞保护作用的比较图，与紫外对照组比较，**p<0.01，***p<0.001，与组合物组比较，^#p<0.05，^##p<0.01，^###P<0.001。

图9组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对紫外线UV照射HaCaT细胞损伤修复作用的比较图，与紫外对照组比较，^*P<0.05，**p<0.01，***p<0.001，与组合物组比较，^##p<0.01，^###p<0.001。

图10为组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞的抗炎作用效果比较图，图10-1组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞IL-1β的影响比较图，与紫外对照组比较，**p<0.01，***p<0.001，与组合物组比较，^###p<0.001；图10-2组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞IL-6的影响比较图，与紫外对照组比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，与组合物组比较，^#p<0.05，^##p<0.01。

图11为组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对B16F10细胞黑色素含量的抑制效果比较图，与对照组比较，**p<0.01，***p<0.001，与组合物组比较，^#p<0.05，^##p<0.01。

具体实施方式

结合以下具体实施例和附图，对本发明作进一步的详细说明。实施本发明的过程、条件、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明无特别限制内容。

本发明所述的迷迭香提取物为化妆品原料，可以从市场上购得。具体的所述迷迭香提取物可以包括，但不限于，迷迭香花/叶/茎提取物、迷迭香花提取物、迷迭香提取物、迷迭香叶粉、迷迭香叶水、迷迭香叶提取物和迷迭香叶油；优选地，为迷迭香叶粉、迷迭香花/叶/茎提取物、迷迭香花提取物、迷迭香提取物或迷迭香叶提取物。

本发明所述的金银花提取物(又称忍冬提取物)为化妆品原料，可以从市场上购得。具体的所述金银花提取物可以包括，但不限于，忍冬花提取物、忍冬提取物、忍冬叶提取物和忍冬藤提取物。

本发明所述的川芎提取物为化妆品原料，可以从市场上购得。具体的所述川芎提取物可以包括，但不限于，川芎根粉、川芎根提取物、川芎提取物和川芎油。

本发明的组合物可以制成膏霜、喷雾剂、粉剂等多种剂型，并作为活性成分用于化妆品。由此获得的化妆品可以为霜剂、乳剂、面膜、爽肤水、护肤水、软膏、油剂、凝胶、气雾剂、溶液剂、或涂膜剂等各种形式。

实施例1.迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对细胞活性的影响。

将人永生化表皮细胞HaCaT细胞以1×10⁵个每孔的密度接种到96孔板中，细胞贴壁后，将原有细胞培养基换成含有药物的1640培养基100μL，实验组迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物的浓度分别为(0mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、0.75mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL)。24h后加入CCK-8检测细胞的增殖活性,其中每孔加入10μl的CCK-8 溶液，37℃培养箱中孵育1h后培养基的颜色变为橙色；具体孵育时间视不同细胞而定，检测波长为450nm处的吸光值，吸光值越高说明细胞的增殖活性越大，反之则越低。结果如图1-1、 1-2、1-3所示，与不加药物的对照组相比，当迷迭香提取物浓度低于或等于1.5mg/mL，金银花提取物浓度低于或等于1.5mg/mL，川芎提取物浓度低于或等于1.5mg/mL时均不会对 HaCaT细胞的活性产生毒性影响，后续实验均选用0.5mg/mL或0.75mg/mL的药物浓度开展实验研究。

实施例2.组合物与迷迭香提取物、金银花提取物对UV照射HaCaT细胞保护作用的比较。

将人永生化表皮细胞HaCaT细胞以1×10⁵个每孔的密度接种到96孔板中，细胞贴壁后，将原有细胞培养基换成含有药物的1640培养基100μL，实验分组：对照组、紫外组、组合物组(含0.25mg/mL迷迭香提取物与0.25mg/mL金银花提取物)、迷迭香提取物组(0.25mg/mL， 0.5mg/mL)、金银花提取物组(0.25mg/mL，0.5mg/mL)。药物孵育24h后，用PBS替换药物培养基并进行细胞阳光紫外模拟仪(购自法国)照射，照射剂量为50mJ/cm²UVB+550 mJ/cm²UVA，其中实验对照组细胞既不加药也不照紫外。紫外照射结束后，再将PBS用含有各组提取物的1640培养基替换，CO₂培养箱中继续培养24h。最后加CCK8检测细胞活力，酶标仪检测细胞上清液的吸光值。实验重复三次，结果统计见如图2所示。紫外线照射后的 HaCaT细胞活性显著降低，分别加入组合物、迷迭香、金银花提取物后，细胞活性增强，与 UV对照组相比，差异显著，具有统计学意义，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，组合物组与迷迭香提取物组、金银花提取物组分别比较，细胞活性增加明显，差异具有统计学意义，^##p<0.01，^###p<0.001。说明迷迭香提取物和金银花提取物的组合可以显著降低紫外线对细胞的损伤，并且组合后的效果显著优于单独的提取物的保护效果，具有显著的协同效果。

实施例3.组合物与迷迭香提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞保护作用的比较。

实施过程参考实施例2，实验分组：对照组、紫外组、组合物组(含0.25mg/mL迷迭香提取物与0.25mg/mL川芎提取物)、迷迭香提取物组(0.25mg/mL，0.5mg/mL)、川芎提取物组(0.25mg/mL，0.5mg/mL)。结果统计见如图3所示。紫外线照射后的HaCaT细胞活性显著降低，并出现半致死现象，分别加入组合物、迷迭香、川芎提取物后，细胞活性增强，与UV对照组相比，差异显著，具有统计学意义，**p<0.01，***p<0.001，组合物组与迷迭香提取物组、川芎提取物组分别比较，细胞活性增加明显，差异具有统计学意义，#p<0.05， ##p<0.01，###p<0.001。说明迷迭香提取物和川芎提取物的组合可以显著降低紫外线对细胞的损伤，并且组合后的效果显著优于单独的提取物的保护效果，具有显著的协同效果。

实施例4.组合物与金银花提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞保护作用的比较。

实施过程参考实施例2，实验分组：对照组、紫外组、组合物组(含0.25mg/mL金银花提取物与0.25mg/mL川芎提取物)、金银花提取物组(0.25mg/mL，0.5mg/mL)、川芎提取物组(0.25mg/mL，0.5mg/mL)。结果统计见如图4所示。紫外线照射后的HaCaT细胞活性显著降低，并出现半致死现象，分别加入组合物、金银花、川芎提取物后，细胞活性增强，与UV对照组相比，差异显著，具有统计学意义，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，组合物组与金银花提取物组、川芎提取物组分别比较，细胞活性增加明显，差异具有统计学意义，^#p<0.05，^###p<0.001。说明金银花提取物和川芎提取物的组合可以显著降低紫外线对细胞的损伤，并且组合后的效果显著优于单独的提取物的保护效果，具有显著的协同效果。

实施例5.迷迭香提取物、金银花提取物两种不同浓度比例对紫外的保护实验。

实施过程参考实施例2，实验分组分为对照组、紫外组、提取物组合物组(迷迭香与金银花提取物不同比例构成)，组合物组分为9种，将迷迭香提取物0.5mg/mL和金银花提取物0.5mg/mL浓度分别为看做百分百，组合物质量配比分别为1:9(即0.05mg/mL迷迭香提取物和0.45mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-1)，2:8(即0.1mg/mL迷迭香提取物和0.4mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-2)，3:7(即0.15mg/mL迷迭香提取物和0.35mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-3)，4:6(即0.2mg/mL迷迭香提取物和0.3mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-4)，5:5(即0.25mg/mL迷迭香提取物和0.25mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-5)，6:4(即0.3mg/mL迷迭香提取物和0.2mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-6)，7:3(即0.35mg/mL迷迭香提取物和0.15mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-7)，8:2(即0.4mg/mL迷迭香提取物和0.1mg/mL金银花提取物，标记为组合物 1-8)，9:1(即0.45mg/mL迷迭香提取物和0.05mg/mL金银花提取物，标记为组合物1-9)。结果如图5所示，紫外线照射后的HaCaT细胞活性显著降低，出现半致死现象，加入各组组合物后细胞活性增强，与UV对照组相比差异显著，具有统计学意义，**p<0.01，***p<0.001。说明迷迭香提取物和金银花提取物在1～9:1～9的质量份数比范围内均具有较好细胞保护效果；其中在2～7:3～8的质量份数比范围内协同效应更加明显；更有选地，质量份数比为4～6: 4～6；其中最适的质量份数比为1:1(5:5)。

实施例6.迷迭香提取物、川芎提取物两种不同浓度比例对紫外的保护实验。

实施过程参考实施例5，实验分组分为对照组、紫外组、提取物组合物组(迷迭香与川芎提取物不同比例构成)，组合物组分为9种，将迷迭香提取物0.5mg/mL和川芎提取物0.5mg/mL浓度分别为看做百分百，组合物质量配比分别为1:9(即0.05mg/mL迷迭香提取物和0.45mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-1)，2:8(即0.1mg/mL迷迭香提取物和0.4mg/mL 川芎提取物，标记为组合物2-2)，3:7(即0.15mg/mL迷迭香提取物和0.35mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-3)，4:6(即0.2mg/mL迷迭香提取物和0.3mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-4)，5:5(即0.25mg/mL迷迭香提取物和0.25mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-5)，6:4(即0.3mg/mL迷迭香提取物和0.2mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-6)， 7:3(即0.35mg/mL迷迭香提取物和0.15mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-7)，8:2(即 0.4mg/mL迷迭香提取物和0.1mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-8)，9:1(即0.45mg/mL 迷迭香提取物和0.05mg/mL川芎提取物，标记为组合物2-9)。结果如图6所示，紫外线照射后的HaCaT细胞活性显著降低，出现半致死现象，加入各组组合物后细胞活性增强，与 UV对照组相比差异显著，具有统计学意义，**p<0.01，***p<0.001。

说明迷迭香提取物和川芎提取物在1～9:1～9的质量份数比范围内均具有较好细胞保护效果；其中在1～6:4～9的质量份数比范围内协同效应更加明显；更有选地，质量份数比为4～6: 4～6；其中最适的质量份数比为1:1(5:5)。

实施例7.金银花提取物、川芎提取物两种不同浓度比例对紫外的保护实验。

实施过程参考实施例5，实验分组分为对照组、紫外组、提取物组合物组(金银花与川芎提取物不同比例构成)，组合物组分为9种，将金银花提取物0.5mg/mL和川芎提取物0.5mg/mL浓度分别为看做百分百，组合物质量配比分别为1:9(即0.05mg/mL金银花提取物和0.45mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-1)，2:8(即0.1mg/mL金银花提取物和0.4mg/mL 川芎提取物，标记为组合物3-2)，3:7(即0.15mg/mL金银花提取物和0.35mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-3)，4:6(即0.2mg/mL金银花提取物和0.3mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-4)，5:5(即0.25mg/mL金银花提取物和0.25mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-5)，6:4(即0.3mg/mL金银花提取物和0.2mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-6)， 7:3(即0.35mg/mL金银花提取物和0.15mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-7)，8:2(即0.4mg/mL金银花提取物和0.1mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-8)，9:1(即0.45mg/mL 金银花提取物和0.05mg/mL川芎提取物，标记为组合物3-9)。结果如图7所示，紫外线照射后的HaCaT细胞活性显著降低，出现半致死现象，加入各组组合物后细胞活性增强，与 UV对照组相比差异显著，具有统计学意义，**p<0.01，***p<0.001。

说明金银花提取物和川芎提取物在1～9:1～9的质量份数比范围内均具有较好细胞保护效果；其中在1～6:4～9的质量份数比范围内协同效应更加明显；更有选地，质量份数比为4～6: 4～6；其中最适的质量份数比为1:1(5:5)。

实施例8.组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对紫外线UV照射HaCaT 细胞保护作用的比较。

实施过程参考实施例2，实验分组：对照组、紫外组、组合物组(含0.25mg/mL迷迭香提取物与0.25mg/mL金银花提取物与0.25mg/mL川芎提取物)、迷迭香提取物组(0.75 mg/mL)、金银花提取物组(0.75mg/mL)、川芎提取物组(0.75mg/mL)。实验重复三次，结果统计见如图8所示。紫外线照射后的HaCaT细胞活性显著降低，并出现半致死现象，加入组合物、迷迭香、金银花、川芎提取物后，细胞活性增强，与UV对照组相比，差异显著，具有统计学意义，**p<0.01，***p<0.001，组合物组与迷迭香提取物组、金银花提取物组、川芎提取物组分别比较，细胞活性增加明显，差异具有统计学意义，^#p<0.05，^##p<0.01，^###p< 0.001。说明迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物三者的组合可以显著降低紫外线对细胞的损伤，并且组合后的效果显著优于单独的提取物的保护效果，具有显著的协同效果。

实施例9.组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对紫外线UV照射HaCaT 细胞损伤修复作用的比较。

将人永生化表皮细胞HaCaT细胞以1×10⁵个每孔的密度接种到96孔板中，细胞培养24 小时后，用PBS替换培养基并进行细胞阳光紫外模拟仪(购自法国)照射，照射剂量为50 mJ/cm²UVB+550mJ/cm²UVA，其中实验对照组细胞不照紫外。紫外照射后细胞继续培养12小时后，将照过紫外的细胞分组如下：紫外对照组、组合物组(含0.25mg/mL迷迭香提取物与0.25mg/mL金银花提取物与0.25mg/mL川芎提取物组成)、迷迭香提取物组(0.75mg/mL)、金银花提取物组(0.75mg/mL)、川芎提取物组(0.75mg/mL)。然后将不照紫外的正常细胞对照组和照紫外的细胞对照组更换正常培养基，其他各组更换含药物的培养基继续在CO₂培养箱中培养24h。最后加CCK8检测细胞活力，酶标仪检测细胞上清液的吸光值。实验重复三次，结果统计见如图9所示。紫外对照组的HaCaT细胞活性显著降低，而加入组合物、迷迭香、金银花、川芎提取物后，细胞活性均有明显恢复，与紫外对照组相比，差异显著，具有统计学意义，*p<0.01，**p<0.01，组合物组与迷迭香提取物组、金银花提取物组、川芎提取物组分别比较，细胞活性增加更为明显，具有统计学意义，^#p<0.05，^##p<0.01。说明迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物三者的组合可以显著提高细胞被紫外线照射损伤后修复细胞活性的能力，并且组合后的促进修复的效果显著优于单独的提取物的效果，具有显著的协同效应。

实施例10.组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对UV照射HaCaT细胞的抗炎作用效果比较。

人永生化表皮细胞HaCaT细胞以2×10⁵个细胞接入24孔板内，培养24小时后照紫外，具体处理方法见实施例9，实验分组为：对照组(不照UV)，紫外组、组合物组、迷迭香提取物组、金银花提取物组、川芎提取物组，每组设置4个复孔。实验结束后将每组细胞分别收集起来，提取RNA。用荧光实时定量PCR仪中检测HaCaT细胞中炎症因子IL-1β和IL-6 的表达情况，实验结果见图10-1，10-2。紫外对照组HaCaT细胞的炎症因子的表达量显著升高，加入组合物、迷迭香、金银花、川芎提取物后，细胞炎症因子明显减低，与紫外对照组相比，差异显著，具有统计学意义，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，组合物组与迷迭香提取物组、金银花提取物组、川芎提取物组分别比较，细胞炎症因子降低明显，具有明显的统计学意义，^#p<0.05，^##p<0.01，^###p<0.001。说明迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物三者的组合可以显著抑制细胞受紫外线照射后所产生的炎症反应，并且组合后的抗炎效果显著优于单独的提取物的效果，具有显著的协同效应。

实施例11.组合物与迷迭香提取物、金银花提取物、川芎提取物对B16F10细胞黑色素含量的抑制效果比较。

将黑色素瘤细胞B16F10以每孔1×10⁴个的细胞密度接种于96孔板，实验分组如下：对照组、组合物组(含0.25mg/mL迷迭香提取物与0.25mg/mL金银花提取物与0.25mg/mL川芎提取物)、迷迭香提取物组(0.75mg/mL)、金银花提取物组(0.75mg/mL)、川芎提取物组(0.75mg/mL)，24h后弃原有的培养基，换上各组含药物的无酚红培养基，72h后取所有孔板的上清液，酶标仪检测它们在490nm下的吸光值。实验重复3次。结果如图11所示，与对照组相比，组合物组、迷迭香提取物组、金银花提取物组、川芎提取物组的细胞分泌的黑色素含量均有一定量的减少，但组合物组的黑色素下降最为明显，与对照组有显著差异，具有明显的统计学意义，**p<0.01，***p<0.001。组合物组与迷迭香提取物组、金银花提取物组、川芎提取物组分别比较，细胞黑色素生成率也有明显的降低，差异具有统计学意义，^#p<0.05，^##p<0.01。说明迷迭香提取物、金银花提取物和川芎提取物三者的组合可以显著抑制黑色素瘤细胞产生和分泌黑色素，并且组合物组抑制细胞黑色素生成的效果显著优于单独的提取物的效果，具有显著的协同作用效果。

实施例12.空白膏霜和药物膏霜的配制。

本实施例的具有防晒功效的植物单体组合物，按质量百分数计算，按以下组份配制。药物添加浓度为细胞使用浓度的40倍。

本实施例将迷迭香、金银花、川芎提取物组合物制成化妆品膏剂，其中，迷迭香提取物 1％、金银花提取物1％，川芎提取物1％，基础配方成分比例为(质量百分比)：0.05％EDTA 二钠，0.2％尿囊素，6％甘油，5％矿油，0.8％甘油硬脂酸酯，4％棕榈酸异丙酯，3.5％辛酸/ 癸酸甘油三酯，2％硬脂醇聚醚-2，2％硬脂醇聚醚-21，0.2％羟苯甲酯，0.1％羟苯丙酯，1.5％鲸蜡硬脂醇，1％聚丙烯酸酯-13/聚异丁烯/聚山梨醇酯-20，0.15％双(羟甲基)咪唑烷基脲，其余为水(以上质量百分比均为占所化妆品膏剂总质量的百分比)。空白基础膏霜和药物膏霜均请化妆品公司按照化妆品制备流程进行样品打样，装在化妆品的瓶子内。

本实施方式配制的膏霜涂布均匀、手感细腻、易吸收，具有淡淡的天然草本植物的香味，舒缓清新，可进行人体试验。

实施例13.本发明制备的植物提取物组合物对人手臂皮肤在阳光照射前后的试验结果比较。

试验前用皮肤弹性水分及黑色素测试仪(Cutometer MPA 580，德国)检测每个人左右手臂正面的水分及黑色素含量的基础值，选取左右手臂没有显著差异的人员参与本试验，共30 个志愿者。

试验时间在夏天进行，志愿者都穿短袖衣服，正式开始试验，发给每位志愿者两瓶化妆品，在志愿者左手手臂正面只涂化妆品基础配方空白膏霜作为对照(以下称对照组)，右手手臂正面涂抹含有植物提取物组合物的化妆品膏霜作为试验组(以下称试验组)。受试部位保持干燥，且避免接触其他外用制剂，每天均匀涂抹两次，每次大约0.5克，连续使用7天后观察皮肤反应，未见红斑、水肿、丘疹等过敏症状。志愿者每天将涂抹过含或不含药物的化妆品基础膏霜的双手手臂在太阳光下至少照射半小时，试验后，每周检测左右手臂皮肤含水量、皮肤弹性及黑色素含量情况。

各组数值＝(实验后的检测数据-实验前的检测数据)/实验前的检测数据×100％。

实验结果表明，所有涂抹含有试验组化妆品的志愿者手臂均未见红斑、水肿、丘疹等过敏症状。实验结果还表明，试验组涂抹过的手臂实验前后比较黑色素含量的百分比随着时间明显降低，与对照组实验前后比较有显著性差异，见表1。说明含试验组的防晒作用效果明显，能明显降低黑色素生成，抵抗紫外线照射导致的皮肤晒黑，能增加并保持皮肤水分，促进皮肤弹性的增加，具有抗光老化的作用，对皮肤细胞也具有很好的保护作用效果，是一种非常理想的防晒美白化妆品添加剂。

表1植物提取物组合物对人体皮肤含水量、弹性和黑色素含量的影响

注：与对照组比较，*p<0.05，**p<0.01；

本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求书为保护范围。