阅读说明：本技术 一种含二十二碳六烯酸的精华液组合物及其制备方法 (Essence composition containing docosahexaenoic acid and preparation method thereof ) 是由 胡嘉奂 顾红健 黄瑜 贾霆涵 贺来健 于 2019-10-17 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种包含二十二碳六烯酸的精华液组合物,其中所述组合物包含：二十二碳六烯酸 0.001-1重量％；乳化剂 0.1-5重量％和保湿剂 1-45重量％。本发明还公开了制备所述含二十二碳六烯酸的精华液组合物的方法。(The present invention provides a serum composition comprising docosahexaenoic acid, wherein the composition comprises: docosahexaenoic acid 0.001-1 wt%; 0.1-5 wt% of emulsifier and 1-45 wt% of humectant. The invention also discloses a method for preparing the essence composition containing docosahexaenoic acid.)

一种含二十二碳六烯酸的精华液组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种含二十二碳六烯酸的精华液组合物及其制备方法，该组合物具有保湿、滋润、抗炎、修护、改善皮肤屏障等作用。

背景技术

正常健康的皮肤角质层中，含有10％-20％的水分，以维护皮肤的湿润和弹性。当由于年龄、寒冷和干燥等气候环境的变化，使得角质层中水分的含量降低到10％以下时，皮肤就会显得干燥，起皱以至于渐渐老化。现代化妆品的开发重点已转到保护皮肤、延缓皮肤衰老。因此研究皮肤角质层的水分能够保持的原因具有重要意义。

脂肪酸作为PPAR激动剂的一种，能够刺激细胞脂质的代谢，丝聚蛋白作为一种能被PPAR激动剂所激活并表达上调蛋白的同时对肌肤屏障的完整性、皮肤pH调节、UV抵抗能力和特应性皮炎发病起着举足轻重的作用。据文献报道，丝聚蛋白(FLG)蛋白表达异常引起皮肤屏障功能的破坏可能是引起婴儿皮肤病发病机制之一，脂肪酸可以从基因水平上促进屏障蛋白的表达，从而可能在改善异常的皮肤屏障功能中发挥着重要的作用。Martina S的研究显示在没有炎症的情况下FLG的损失足以改变与特应性皮炎发病机理相关的蛋白的表达水平。这些包括调节炎症，蛋白水解和细胞骨架功能的蛋白质。

二十二碳六烯酸即DHA，是一种对人体非常重要的不饱和脂肪酸，常作为营养添加剂在食品中使用。二十二碳六烯酸作为一种高度不饱和脂肪酸，对于皮肤护理方面具有非常重要的作用，可以达到保湿、滋润、抗炎、修护等作用，增强皮肤屏障，但目前市场上缺少含有此成分的皮肤护理产品。

现有技术公开了具有保湿功能的包含二十二碳六烯酸的化妆品组合物。然而，由于所述化妆品组合物的组分和含量选择以及剂型并不完美，迄今为止的包含二十二碳六烯酸的化妆品组合物并不能全面实现保湿、滋润、抗炎、修护、改善皮肤屏障等作用。

发明内容

本发明提供一种含二十二碳六烯酸的精华液组合物，其对皮肤具有更好的耐受性。同时，所述含二十二碳六烯酸的精华液组合物能长期稳定保存，并具有保湿、滋润、抗炎、修护、改善皮肤屏障等作用。

因此，本发明的第一方面提供一种含二十二碳六烯酸的精华液组合物，其中所述组合物包含：

二十二碳六烯酸 0.001-1重量％；

乳化剂 0.1-5重量％；和

保湿剂 1-45重量％。

根据本发明的一种优选的实施方案，所述组合物包含：

二十二碳六烯酸 0.005-0.5重量％；

乳化剂 0.2-4重量％；和

保湿剂 1-40重量％。

根据本发明的另一种优选的实施方案，所述组合物包含：

二十二碳六烯酸 0.01-0.1重量％；

乳化剂 0.3-3重量％；和

保湿剂 1-30重量％。

根据本发明的一种优选的实施方案，所述乳化剂选自蔗糖月桂酸酯、卵磷脂、PEG-40氢化蓖麻油、聚山梨醇酯-80、山梨坦倍半油酸酯中的至少一种；本发明组合物中的乳化剂能够改善组合物中各种构成相之间的表面张力，使之形成均匀稳定的分散体系。

根据本发明的一种优选的实施方案，所述保湿剂选自甘油、二醇、透明质酸钠和水解透明质酸钠中的至少一种。本发明的精华液组合物中的保湿剂能够在皮肤表面形成一层薄膜，将水份密封在皮肤内以防止水份蒸发，同时不妨碍皮肤对于空气中水份的吸收，从而保持皮肤适当的湿度。

根据本发明另一种优选的实施方案，所述二醇优选为丙二醇和丁二醇，更优选为1,3-丙二醇。

根据本发明的另一种优选的实施方案，所述组合物还包含0-30重量％的植物油脂、0-1重量％的抗氧化剂、0-1重量％的pH调节剂和0-1重量％的抗炎舒缓剂。

本发明的精华液组合物中的植物油脂可保留在皮肤表面，在角质层内起润滑作用，填充皮肤表面的空间，代替在角质层内损失的脂质，保持皮肤柔软、柔韧、平滑，减少鳞片状皮肤，改善皮肤外观。

本发明的精华液组合物中的抗氧化剂能够阻止氧气不良影响，从而能够帮助捕获并中和自由基，从而祛除自由基对人体皮肤的损害。

本发明的精华液组合物中的pH调节剂能与组合物中的酸性物质相互作用，从而调节组合物的pH值。

本发明的精华液组合物中的抗炎舒缓剂具有有抗炎、杀菌、舒缓神经的作用。

根据本发明的一种优选的实施方案，所述植物油脂选自角鲨烷、向日葵籽油、霍霍巴籽油；所述抗氧化剂选自生育酚或生育酚乙酸酯；所述pH调节剂选自柠檬酸、柠檬酸钠、乳酸或乳酸钠；以及所述抗炎舒缓剂选自甘草酸二钾或贻贝提取物。

根据本发明的一种特别优选的实施方案，所述卵磷脂是氢化磷脂酰胆碱。

根据本发明的一种优选的实施方式，所述精华液组合物包含：

根据本发明的一种更加优选的实施方案，所述精华液组合物包含：

根据本发明的一种最优选的实施方案，所述精华液组合物由以下成分组成：

根据本发明的一种优选的实施方案，所述二十二碳六烯酸的纯度大于等于80％。

本发明的精华液组合物可根据不同需要制备成不同剂型，优选皮肤外用制剂，包括液体剂、凝胶剂、乳剂、霜剂、泡沫剂、贴剂等。然而，本领域技术人员理解，本发明所述组合物可以根据组合物的各种剂型添加各种所需添加剂，包括但不限于包括保湿剂、植物油脂、抗炎舒缓剂、抗氧化剂和pH调节剂等。本发明组合物还可以根据组合物的各种剂型添加各种所需的赋形剂。例如，当本发明组合物制备成液体剂时，所述赋形剂可以选自水、生理盐水等；当本发明组合物制备成凝胶剂时，所述赋形剂可以选自纤维素衍生物、淀粉、明胶、琼脂、多糖等；当本发明组合物制备成霜剂时，所述赋形剂可以选自甘油、凡士林、石蜡等；当本发明组合物制备成泡沫剂时，所述赋形剂可以选自羟丙基甲基纤维素、聚乙二醇十二烷基硫酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚磺酸钠等；当本发明组合物制备成贴剂时，所述赋形剂可以选自纤维素衍生物、淀粉、明胶、琼脂、多糖等。

本发明的第二方面提供制备所述精华液组合物的方法，包括以下步骤：

1)将乳化剂、保湿剂加入水中，搅拌至溶解，获得水溶液；

2)加热二十二碳六烯酸、任选的植物油脂和抗氧化剂的混合物并搅拌均匀，获得油相；

3)将上述油相加入上述水溶液中，用乳化均质机乳化，获得乳剂；

4)将任选的pH调节剂和抗炎舒缓剂加入上述乳剂，混合均匀，获得所述精华液组合物。

根据本发明的一种优选的实施方案，其中步骤2)中，将二十二碳六烯酸、任选的植物油脂、抗氧化剂的混合物加热至75-80℃。

本发明的第三方面还提供根据本发明所述的方法获得的精华液组合物，所述组合物包含二十二碳六烯酸作为活性成分，且二十二碳六烯酸的纯度不低于80％。

本发明的各种剂型可根据本领域技术人员已知的常规方法进行制备。

本发明包含二十二碳六烯酸的精华液组合物的优点在于：所述精华液组合物相对于使用其他乳化剂的精华液组合物对皮肤具有更好的耐受性。同时，所述组合物能够显著上调丝聚蛋白、兜甲蛋白、内披蛋白的免疫荧光相对强度和长链脂肪酸的含量，因此具有保湿、滋润、抗炎、修护、改善皮肤屏障等作用。

附图说明

图1显示将本发明实施例1-4所制备的精华液组合物通过3D表皮模型实验测定并分析本发明精华液组合物对丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白的表达量的影响。

图2显示将本发明实施例1-4所制备的精华液组合物通过3D表皮模型实验测定并分析本发明精华液组合物对长链脂肪酸的影响。

具体实施方式

实施例1：

制备方法：将PEG-40氢化蓖麻油、甘油、透明质酸钠、水解透明质酸钠加入水中，用搅拌器搅拌至溶解，获得水溶液，加热至75-80℃；将二十二碳六烯酸、生育酚(维生素E)加热至75-80℃并用搅拌器搅拌均匀，获得油相；将上述油相加入上述水溶液中，用乳化均质机乳化，获得乳剂；降温至40℃以下，将甘草酸二钾、柠檬酸加入上述乳剂，混合均匀，获得所述精华液组合物A1-A4。

实施例2

制备方法：将蔗糖月桂酸酯、氢化磷脂酰胆碱、甘油、1,3-丙二醇、水解透明质酸钠加入水中，用搅拌器搅拌至溶解，获得水溶液，加热至75-80℃；将角鲨烷、二十二碳六烯酸、生育酚(维生素E)加热至75-80℃并用搅拌器搅拌均匀，获得油相；将上述油相加入上述水溶液中，用乳化均质机乳化，获得乳剂；降温至40℃以下，将甘草酸二钾、柠檬酸加入上述乳剂，混合均匀，获得所述精华液组合物B1-B4。

实施例3

制备方法：将蔗糖月桂酸酯、丁二醇、透明质酸钠加入水中，用搅拌器搅拌至溶解，获得水溶液，加热至75-80℃；将二十二碳六烯酸、生育酚乙酸酯加热至75-80℃并用搅拌器搅拌均匀，获得油相；将上述油相加入上述水溶液中，用乳化均质机乳化，获得乳剂；降温至40℃以下，将甘草酸二钾、乳酸加入上述乳剂，混合均匀，获得所述精华液组合物C1-C4。

实施例4

制备方法：将聚山梨醇酯-80、山梨坦倍半油酸酯、氢化磷脂酰胆碱、甘油、丙二醇、水解透明质酸钠加入水中，用搅拌器搅拌至溶解，获得水溶液，加热至75-80℃；将向日葵籽油、霍霍巴籽油、二十二碳六烯酸、生育酚乙酸酯加热至75-80℃并用搅拌器搅拌均匀，获得油相；将上述油相加入上述水溶液中，用乳化均质机乳化，获得乳剂；降温至40℃以下，将贻贝提取物、乳酸、乳酸钠加入上述乳剂，混合均匀，获得所述精华液组合物D1-D4。

实施例5：3D表皮模型实验测定

将实施案例1-4所制备的样品通过3D表皮模型实验测定并分析本发明精华液对丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白的表达量的影响。本实验以表皮模型(广东博溪生物科技有限公司)为研究对象，采用表面给药的方式，将样品模拟人体使用过程，均匀涂布于表皮模型表面，通过免疫荧光法分析丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白的含量，应用Prism(Graphpad)作图，采用单因素方差统计分析待测样品促进丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白提升的功效。

在表皮模型表面均匀涂抹实施案例1-4的各类样品，在37℃，95％RH环境中，培养24小时。孵育结束后，将模型用4％的多聚甲醛进行固定处理，固定24h后，模型环切取下，包埋切片进行免疫荧光检测。经过烤片脱蜡、脱蜡水化、抗原修复、阻断过氧化物酶、血清封闭、一抗孵育、孵育二抗、核染、封片等步骤后，用荧光显微镜拍照分析。

通过3D表皮模型实验表明，从免疫荧光强度结果分析，对于本发明精华液例如A2、A3、A4、B2、B3、B4、C2、C3、C4、D2、D3和D4，丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白的免疫荧光相对强度均显著上调，说明本发明精华液具有促丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白提升的功效(参见表1和图1)。

表1：本发明精华液组合物对丝聚蛋白、兜甲蛋白和内披蛋白的表达量的影响

实施例6：3D表皮模型实验测定

将实施案例1-4所制备的样品通过3D表皮模型实验测定并分析本发明精华液对长链脂肪酸的影响。本实验以表皮模型(广东博溪生物科技有限公司)为研究对象，采用表面给药的方式，将样品模拟人体使用过程，均匀涂布于表皮模型表面，通过LC-MS法分析细胞间脂质的含量，应用Prism(Graphpad)作图，采用单因素方差统计分析待测样品促进长链脂肪酸提升的功效。

在表皮模型表面均匀涂抹实施案例1-4的各类样品，在37℃，95％RH环境中，培养24小时。孵育结束后，用0.25％胰酶将模型角质层分离，37℃消化30min。将分离的角质层样品采用一定体积的氯仿/甲醇进行提取，提取比例为1:1，冰浴超声1h。取上清至上样管中，氮气吹干，进行LC-MS分析。通过3D表皮模型实验表明，从脂肪酸平均碳链长度结果分析，对于本发明精华液例如A2、A3、A4、B2、B3、B4、C2、C3、C4、D2、D3和D4，脂肪酸平均碳链长度均显著上调，说明本发明精华液具有促长链脂肪酸提升的功效(参见表2和图2)。

表2：本发明精华液组合物对长链脂肪酸的影响

No.	DHA	脂肪酸平均碳链长度
				(％)	——
1	BC	19.02
			2	PC	23.02
3	0％DHA	20.88
			4	0.005％DHA	22.41
5	0.05％DHA	22.82
			6	1％DHA	21.85