阅读说明：本技术 金龟子绿僵菌和氰氟虫腙杀斜纹夜蛾的组合物 (Composition for killing prodenia litura by metarhizium anisopliae and metaflumizone ) 是由 夏玉先 彭国雄 周林 于 2019-09-24 设计创作，主要内容包括：本发明属于含有微生物真菌的杀生剂技术领域,具体涉及一种杀斜纹夜蛾的组合物。所述组合物包括金龟子绿僵菌和氰氟虫腙。本发明的组合物中的活性成分金龟子绿僵菌和氰氟虫腙具有对斜纹夜蛾的显著协同增效作用。(The invention belongs to the technical field of biocides containing microbial fungi, and particularly relates to a composition for killing prodenia litura. The composition comprises metarhizium anisopliae and metaflumizone. The active ingredients metarhizium anisopliae and metaflumizone in the composition have obvious synergistic effect on prodenia litura.)

金龟子绿僵菌和氰氟虫腙杀斜纹夜蛾的组合物

技术领域

本发明属于含有微生物真菌的杀生剂技术领域，具体涉及一种金龟子绿僵菌和氰氟虫腙杀斜纹夜蛾的组合物。

背景技术

斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)又名莲纹夜蛾、夜盗虫、乌头虫、荷叶虫、五花虫等，属昆虫纲，鳞翅目，夜蛾科(“斜纹夜蛾(Spodoptera litura)在我国的时空分布概述”，武怀恒等，安徽农业科学，2016年第44卷第9期，第142页左栏第2段第1-3行，公开日2016年06月27日)。斜纹夜蛾幼虫共6龄，有假死性。4龄后进入暴食期，猖獗时可吃尽大面积寄主植物叶片，并迁徙他处为害。成虫体长14-20mm，翅展35-46mm，体暗褐色，胸部背面有白色丛毛，前翅灰褐色，花纹多，内横线和外横线白色，呈波浪状，中间有明显的白色斜阔带纹，所以称斜纹夜蛾(“桃园斜纹夜蛾发生情况及防治措施”，李靖等，四川农业科学，2010年第9期，第53页左栏第1段1-9行，公开日2010年11月24日)。

斜纹夜蛾是一种间歇性发生的世界性暴食性害虫，主要以幼虫为害全株，其在我国各地发生普遍，尤其以长江流域和淮河流域危害较大，且危害十分严重，其寄主范围十分广泛，可危害109科389种植物，寄主植物包括槟榔芋、草莓、滁菊、川芎、花生、大白菜、大葱、大豆、番茄、甘薯、柑橘、贡菊、枸杞、荷花、黑皮冬瓜、花椰菜、淮山、黄秋葵、火龙果、姜、康乃馨、空心菜、辣椒、李、梨、莲藕、莴笋、棉花、木薯、苜蓿、葡萄、脐橙、桑树、月季、烟草、桃、西瓜、西兰花、橡胶、向日葵、亚麻、银杏、油茶等，其中尤以十字花科蔬菜、绿化植物等受害最重(“斜纹夜蛾抗药性及其防治对策的研究进展”，周晓梅等，昆虫知识，2002年第39卷第2期，第98页左栏第1段第1-3行，公开日2002年01月08日；“印楝素乳油对斜纹夜蛾的生物活性及田间防效研究”，戴建青等，应用生态学报，2005年第16卷第6期，第1095页左栏第1段第1-3行，公开日2005年7月20日；“斜纹夜蛾的人工饲养技术”，黄艳君等，中国蚕业，2011年第32卷第3期，第76页左栏第1段第1-7行，公开日2011年12月31日；“斜纹夜蛾(Spodopteralitura)在我国的时空分布概述”，武怀恒等，安徽农业科学，2016年第44卷第9期，第143页左栏第3段第1-6行，公开日2016 年06月27日)。

斜纹夜蛾幼虫小龄时群集叶背啃食，3龄后分散为害叶片、嫩茎，老龄幼虫可蛀蚀果实，其食性既杂又能为害各器官，老龄时形成暴食(“桃园斜纹夜蛾发生情况及防治措施”，李靖等，四川农业科学，2010年第9期，第53页左栏第1段11-14行，公开日2010年11月24日)。

因此，研究能够有效防治斜纹夜蛾的药剂具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种杀斜纹夜蛾的组合物，该组合物中的活性成分金龟子绿僵菌和氰氟虫腙具有对斜纹夜蛾的显著协同增效作用。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

杀斜纹夜蛾的组合物，活性成分包括金龟子绿僵菌和氰氟虫腙。

所述杀斜纹夜蛾是指物质提高昆虫纲，鳞翅目，夜蛾科，斜纹夜蛾属，斜纹夜蛾种昆虫的死亡率或抑制其生长率的能力。

发明人在研究过程中意外发现，包括金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的组合物中的活性成分金龟子绿僵菌和氰氟虫腙具有对斜纹夜蛾的显著协同增效作用。

进一步，所述金龟子绿僵菌为金龟子绿僵菌CQMa421。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为1×1000亿个孢子-14×1000亿个孢子：8-32g 氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为4×1000亿-12×1000亿个孢子：12-28g氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为6×1000亿-10×1000亿个孢子：16-24g氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为8×1000亿个孢子：20g氰氟虫腙。

本发明的目的还在在于保护杀斜纹夜蛾的制剂，其活性成分包括金龟子绿僵菌和氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为1×1000亿个孢子-14×1000亿个孢子：8-32g 氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为4×1000亿-12×1000亿个孢子：12-28g氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为6×1000亿-10×1000亿个孢子：16-24g氰氟虫腙。

进一步，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为8×1000亿个孢子：20g氰氟虫腙。

进一步，所述制剂为油悬浮剂。

进一步，所述制剂还包括溶剂、乳化剂和稳定剂。

进一步，所述溶剂包括菜籽油、芝麻油、玉米油或花生油等植物油。

进一步，所述乳化剂包括山梨醇酐单油酸脂、失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚、脂肪醇与环氧乙烷缩合物、聚氧乙烯脂肪酸酯、三乙醇胺单油酸脂、蓖麻油和环氧乙烷缩合物中的一种或几种。

进一步，所述乳化剂的用量为制剂总质量的5％-10％。

进一步，所述稳定剂包括叔丁基对羟基茴香醚、2,6-二叔丁基对甲酚、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮中的一种或多种。

进一步，所述稳定剂的用量为制剂总质量的1％-3％。

进一步，所述制剂，包括金龟子绿僵菌、氰氟虫腙，溶剂、乳化剂和稳定剂，金龟子绿僵菌和氰氟虫腙的配比为1×1000亿个孢子-14×1000亿个孢子：8-32g氰氟虫腙，氰氟虫腙的含量为制剂质量的8％-32％，乳化剂的用量为制剂质量的5％-10％，稳定剂的用量为制剂质量的1％-3％，用溶剂补足100％。

本发明的有益效果在于：

本发明的组合物中的活性成分金龟子绿僵菌和氰氟虫腙具有对斜纹夜蛾的显著协同增效作用。

本发明的组合物药效优异。

本发明的制剂速效性好。

本发明的制剂持效性好。

本发明的制剂害虫不易产生抗药性。

具体实施方式

所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

室内生测复配联合毒力测定试验：

检测金龟子绿僵菌CQMa421干孢子粉、氰氟虫腙单剂及其组合物(仅由金龟子绿僵菌 CQMa421干孢子粉和氰氟虫腙组成，具体见表1)对斜纹夜蛾的毒力，同时，计算共毒系数，测试结果如表1所示。

供试药剂：金龟子绿僵菌CQMa421干孢子粉、94％wt氰氟虫腙原药。

供试虫源：斜纹夜蛾，重庆大学基因工程研究中心实验室连续多代饲养敏感品系。

试验方法：

浸虫法，配制好药液后，将三龄斜纹夜蛾幼虫浸入药液中5秒取出，吸干多余水分后放入新鲜饲料中饲养。每个处理三个重复，每重复15头试虫。

于药后72h调查斜纹夜蛾的死亡率，并进行数据处理，比较供试药剂的活性。

数据处理：

采用POLO Plus软件计算毒力回归式，计算参数包括：斜率b值及标准误差、卡平方、自由度、LC₅₀值及95％置信限。

联合毒力评价方法：

采用孙云沛共毒系数法：

毒力指数(TI)＝(标准药剂的LC₅₀/供试药剂的LC₅₀)×100

混剂实际毒力指数(ATI)＝药剂A单用的LC₅₀/药剂A和B混用的LC₅₀)×100

混剂理论毒力指数(TTI)＝TI(A)×a+TI(B)×b

式中，a表示药剂A在混剂中的百分含量，b表示药剂B在混剂中的百分含量。

共毒系数CTC＝(混剂实际毒力指数ATI/混剂理论毒力指数TTI)×100；

根据农业部农药检定所的规定，混剂配方增效的判断标准为：共毒系数大于120为增效作用；共毒系数80-120为相加作用；共毒系数小于80为拮抗作用；

以上各个组别除药剂不同外，其他处理方式相同；结果如表1所示。

表1绿僵菌CQMa421与氰氟虫腙单剂及其组合物对斜纹夜蛾的毒力测试结果

药剂及配比	LC<sub>50</sub>(mg/L)	共毒系数CTC
			A：金龟子绿僵菌CQMa421	64.56	-
B：氰氟虫腙	41.36	-
			A:B＝1:32	27.35	152.9
A:B＝4:28	19.68	220.1
			A:B＝6:24	12.66	351.9
A:B＝8:20	10.42	442.3
			A:B＝10:16	15.50	309.7
A:B＝12:12	22.58	223.3
			A:B＝14:8	42.06	127.5

备注：所用绿僵菌CQMa421含孢量为200亿孢子/克，表中配比为简化描述，绿僵菌：氰氟虫腙＝x： y，指的是绿僵菌孢子数为x×1000亿个：氰氟虫腙重量y/克。

由表1可知，在金龟子绿僵菌CQMa421干孢子粉中孢子个数与氰氟虫腙的克数比在(1-14)×1000亿个孢子：8-32g氰氟虫腙范围内，两者复配，其共毒系数均大于120，均表现出协同增效作用；其中在8×1000亿个孢子：20g氰氟虫腙时，协同增效作用最为显著。由此证明，金龟子绿僵菌CQMa421与氰氟虫腙复配具有对斜纹夜蛾的显著协同增效作用。

实施例1

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为10 亿个/克，氰氟虫腙含量为32％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为1×1000亿个孢子：32g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例2

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为40 亿个/克，氰氟虫腙含量为28％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为4×1000亿个孢子：28g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例3

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为60 亿个/克，氰氟虫腙含量为24％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为6×1000亿个孢子：24g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例4

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为80 亿个/克，氰氟虫腙含量为20％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为8×1000亿个孢子：20g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例5

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为100 亿个/克，氰氟虫腙含量为16％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为10×1000亿个孢子：16g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例6

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为120 亿个/克，氰氟虫腙含量为12％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为12×1000亿个孢子：12g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例7

制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421和氰氟虫腙，其中绿僵菌干孢子粉含量为140 亿个/克，氰氟虫腙含量为8％wt，绿僵菌孢子数：氰氟虫腙重量为14×1000亿个孢子：8g 氰氟虫腙；添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

实施例8

金龟子绿僵菌单剂制剂，活性成分为金龟子绿僵菌CQMa421，其中绿僵菌干孢子粉含量为80亿个/克。添加6％wt失水山梨醇脂肪酸酯聚氧乙烯醚，3％wt特丁基对苯二酚，1％wt 膨润土，0.8％wt白炭黑，用色拉油补足100％，所述百分比均以制剂总质量的质量百分比计。

所述制剂的制备方法为：

将除绿僵菌孢子外的所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，加入绿僵菌干孢子粉，混匀后得到制剂。

所述制剂的制备方法为：

将所有成分混合，经高速剪切混合均匀，再通过砂磨机砂磨2-3小时，使平均粒径达到1-5微米，得到制剂。

室内兼容性测试

将实施例1-8的制剂样品置于37℃培养箱中孵育，分别于3d、14d检测孢子萌发率，确定氰氟虫腙对绿僵菌孢子的萌发是否有影响；

孢子萌发率检测方法为：利用无菌水将各制剂样品稀释至孢子含量为1×10⁷/ml，取50uL 孢悬液均匀涂布至1/4SDAY平板上，28℃培养14h后检测萌发率；

以上各组除药剂不同外，其他管理方式相同；结果如表2所示。

表2萌发率结果

样品	3d后萌发率	14d后萌发率
			实施例1	89.9％Aa	70.3％Aa
实施例2	87.1％Aa	69.1％Aa
			实施例3	88.5％Aa	66.0％Aa
实施例4	83.7％Aa	67.3％Aa
			实施例5	85.8％Aa	69.5％Aa
实施例6	89.0％Aa	70.1％Aa
			实施例7	87.1％Aa	67.9％Aa
实施例8	84.2％Aa	66.5％Aa

备注：小写字母不同表示在0.05水平上差异显著，大写字母不同表示在0.01水平上差异显著。

由表2可知，实施例1-7的制剂的萌发率与实施例8(即金龟子绿僵菌单剂制剂)制剂的萌发率无显著性差异。由此证明，氰氟虫腙与金龟子绿僵菌CQMa421的兼容性好。

田间应用试验：甘蓝斜纹夜蛾田间试验

用实施例1-8的制剂及24％氰氟虫腙SC(艾法迪，德国巴斯夫生产)开展甘蓝斜纹夜蛾田间防效对比试验，同时设置空白对照组(用清水处理)；

具体为：于斜纹夜蛾2龄幼虫期用药，用药1次；每处理重复三次，每小区面积为15平米，各小区随机区组排列；

于药前、药后3、7、21d调查斜纹夜蛾活虫数；每小区按五点取样法定点调查50株甘蓝，调查所有的幼虫数量，计算防效并进行方差分析。

计算防治效果，防治效果按以下公式计算：

式中，PT₀表示施药前，PT₁表示施药后，PT表示药剂处理组，CK表示空白对照组；

以上各个组别除药剂不同外，其他处理方式相同；结果如表3所示。

表3甘蓝斜纹夜蛾田间试验结果

备注：所用绿僵菌CQMa421含孢量为200亿孢子/克，表中配比为简化描述，绿僵菌CQMa421(A)：氰氟虫腙(B)＝x：y，指的是绿僵菌孢子数为x×1000亿个：氰氟虫腙重量y/克。小写字母不同表示在 0.05水平上差异显著，大写字母不同表示在0.01水平上差异显著；各处理的施药用量换算成原药成本一致，原药成本均设置为3元/15L水。

由表3可知，在相同成本下，按上述比例混配后增效明显，对甘蓝斜纹夜蛾的防效明显优于单剂。由此证明，本发明的药剂对斜纹夜蛾的防治效果优异，且速效性好，持效期长。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。