阅读说明：本技术 一种复方红景天组合物及其制备方法 (Compound rhodiola rosea composition and preparation method thereof ) 是由 马家骅 韩元丰 刘青 熊亚男 向丽萍 周剑 于 2019-09-02 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种复方红景天组合物及其制备方法,该复方红景天组合物主要由以下重量份原料制备而成：红景天8-20份,甘草0.5-6份,乌梅0.5-6份,多肽0.1-0.5份；该复方红景天组合物仅通过三味中药的协同作用,使组合物的抗缺氧效果显著提高；同时,还通过添加多肽成分,有效的钝化了红景天提取液的苦涩味,且钝化后的鞣质能被体内酶逆分解,从而不影响药物疗效,显著提高了组合物的口感；本发明组合物的制备方法简、可靠,药效稳定性好,成本低廉,从而有利于红景天抗缺氧产品的大规模生产和广泛应用。(The invention discloses a compound rhodiola rosea composition and a preparation method thereof, wherein the compound rhodiola rosea composition is mainly prepared from the following raw materials in parts by weight: 8-20 parts of rhodiola rosea, 0.5-6 parts of liquorice, 0.5-6 parts of dark plum and 0.1-0.5 part of polypeptide; the compound rhodiola rosea composition has the advantages that the anti-hypoxia effect of the composition is obviously improved only through the synergistic effect of the three traditional Chinese medicines; meanwhile, the bitter taste of the rhodiola rosea extracting solution is effectively passivated by adding polypeptide components, and the passivated tannin can be decomposed by enzymes in vivo, so that the curative effect of the medicine is not influenced, and the taste of the composition is obviously improved; the preparation method of the composition is simple and reliable, the stability of the drug effect is good, and the cost is low, thereby being beneficial to the large-scale production and wide application of the rhodiola anti-hypoxia product.)

一种复方红景天组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药材药物制剂领域，具体涉及一种抗高原缺氧、缓解疲劳效果好、口感好的复方红景天组合物及其制备方法。

背景技术

随着生活节奏的加快与高原运动的快速发展，人们对抗缺氧产品的需求也不断增加，因而，在目前抗缺氧的化学药物品种不多，且存在多种不良反应的情况下，使不良反应较小、抗缺氧药效较好的抗缺氧中药制剂的研究具有了极大的研究价值和经济效益。其中，红景天能显著提高人体缺氧耐受力，且副作用很小，是制备抗缺氧产品的最佳原料药之一。红景天又名大花红景天，为景天科植物大花红景天Rhodiola crenulata(Hook.f.etThoms.)H.Ohba的干燥根和根茎，民间多以其根状茎作药用。目前，国外已将红景天片剂、提取物以及各种饮料等应用于潜水员、运动员、飞行员、宇航员等在特殊环境中工作人员的保健，国内在保健品、化妆品、药品等领域均有研究。红景天的化学成分复杂，包括酚苷类、黄酮类、香豆素类、氨基酸类等多种成分，其中酚苷类的红景天苷(salidroside)和黄酮类是主要的药理活性成分。现代药理学研究表明，红景天对抗低(缺)氧、抗疲劳、抗衰老、抗辐射、抗病毒、抗微波辐射等均有较好疗效，能促进细胞生长繁殖，降低小鼠心肌耗氧量等。

现今，虽然红景天相关的抗缺氧产品种类繁多，也具有一定的抗缺氧效果，但是，由于组方的配伍不尽合理，导致产品的疗效不明确，抗缺氧药效高低不一，产品成本也较高，从而严重限制了红景天抗缺氧产品的大规模生产和广泛应用。同时，红景天提取液中含有大量易与蛋白质结合形成不溶于水沉淀的鞣质成分，使其产品具有收敛性和强烈涩味，口感很差，一般消费者难以接受，而除去红景天鞣质(如专利公开号CN103977056A)后，又会显著降低其药效，极大的影响其产品的开发与推广。

发明内容

本发明的主要目的是解决现有的红景天组合物产品中存在的抗缺氧效果较差、口感差的缺陷，提出了一种复方红景天组合物及其制备方法。该复方红景天组合物仅通过三味中药的协同作用，使组合物的抗缺氧效果显著提高；同时，还通过添加多肽成分，有效的钝化了红景天提取液的苦涩味，且钝化后的鞣质能被体内酶逆分解，从而不影响药物疗效，显著提高了患者的用药依从性，本发明组合物的制备方法简、可靠，药效稳定性好，成本低廉，从而有利于红景天抗缺氧产品的大规模生产和广泛应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种复方红景天组合物，该复方红景天组合物主要由以下重量份原料药制备而成：红景天8-20份，甘草0.5-6份，乌梅0.5-6份，多肽0.1-0.5份。

本发明的复方红景天组合物，以红景天、甘草、乌梅为主要原料，采用现代医学与传统中草药学结合研究的方法，创新提出多种活性成分相互协调配合促进的中药组合物配方，能够发挥出优秀的抗缺氧功效作用，同时具有良好的口感。在组合物中，红景天补气活血，通脉平喘，为君药；甘草益气补脾、润肺止咳，与红景天相配，更增补气平喘之功，为臣药；乌梅涩肠，敛肺，生津，安蛔，尤善生津止渴，为佐药；三药相配，协同增效，用于治疗心气虚、心悸怔忡、脉结代，以及脾胃气虚、倦怠乏力等症。其中，急性缺氧是因供氧量不足，导致的脑水肿和肺水肿，主要表现有胸闷气短，口干舌燥，头晕目眩等症状；根据中医辨证理论，急性缺氧即为心肺气虚，本发明复方红景天组合物中的三味中药在药效上相得益彰，具有协同增效作用。同时，为了进一步矫正红景天提取液中大量鞣质带来的涩味影响且不降低药效，本发明的组合物中使用了多肽成分，利用酰胺基与酚羟基作用原理，使多肽与鞣质结合，产生混悬在提取液中的细小物质，可随提取液一起浓缩，发明人发现，本发明的组合物既能很好矫正红景天产品的苦涩味，又具备较好的抗缺氧效果。临床试验结果得知，本发明复方红景天组合物抗氧化效果好，口感佳。

其中，优选的，所述复方红景天组合物主要由以下重量份原料制备而成：红景天8-20份，甘草0.5-3份，乌梅0.5-3份，多肽0.05-0.4份；通过优选，各原料药之间的协同增效作用更好，多肽对鞣质的钝化效果更好，复方红景天组合物的抗缺氧功效和口感更好。

更优选的，所述复方红景天组合物主要由以下重量份原料制备而成：红景天10份，甘草1份，乌梅1份，多肽0.13份；通过优选，各原料药之间的协同增效作用最好，多肽对鞣质的钝化效果最好，复方红景天组合物的抗缺氧功效和口感最好。

其中，所述的多肽是蛋白质水解后形成的产物；经研究发现，多肽分子量过小，与鞣质结合后，对鞣质苦涩味的钝化效果显著降低；多肽分子量过大，与鞣质结合后，会形成大颗粒沉淀，既不利于生产，也不利于在人体内的逆分解，从而严重影响组合物的药效；优选的，所述的多肽分子量为2kda-6kda；优选的多肽分子量，对鞣质的钝化效果好，且易被逆分解，不会影响组合物药效。最优选的，所述的多肽分子量为4kda。

为了实现上述发明目的，进一步的，本发明提供了一种复方红景天组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)制备原料提取液：将红景天药材粉碎后，加入溶剂并进行微波破壁处理，过滤，静置分层后，取上层滤液；对滤渣进行加热回流提取1-3次，合并各次滤液，得到红景天提取液；将甘草、乌梅粉碎混合后，采用水提法提取1-3次，合并各次提取液，得到甘草乌梅提取液；

(2)制备复方红景天组合物：将红景天提取液与甘草乌梅提取液进行混合，得到混合提取液；对混合提取液进行浓缩处理，在浓缩至药材/药液(g/ml)为1︰1.0-3.0时,加入多肽，在搅拌条件下，继续浓缩至药材/药液(g/ml)为1︰0.5-1.5,得复方红景天组合物。

本发明复方红景天组合物的制备方法中，先对红景天采用微波破壁处理，利用微波电磁场作用使细胞破碎，细胞内有效活性成分扩散到溶剂中而被溶解，且所提成分由物质内部向溶剂界面扩散加快，根据红景天分子结构中含有苯环结构，采用乙醇-K₂HPO₄双水相萃取剂作为破壁溶剂，在双水相体系萃取作用下，红景天苷被有效溶解富集在上层液体乙醇溶液中，大大增加了红景天苷提取率，与微波联合作用下，能更快速、有效地溶解红景天中有效成分，既显著提高了红景天中有效成分的转移率，又能缩短提取时间；再对滤渣进行回流提取，以乙醇水溶液作为溶剂，不仅能最大程度的提取出滤渣中剩余有效成分，又能避免过多的水溶性杂质进入溶剂，反而降低有效成分的提取率；此外，本发明在提取液中加入适宜分子量的多肽粉，多肽粉与提取液中鞣质结合有效改善提取液苦涩味，且能随提取液一起浓缩后制备在制剂中，不仅有效解决了红景天提取液苦涩味问题，并且保证了制剂中有效成分含量，不影响制剂疗效；本发明制备方法简单、可靠，且稳定性好，有利于复方红景天组合物的大规模工业化生产。

其中，步骤(1)中，优选的，原料的粉碎细度为5-20目；优选的原料粉碎细度，提取速度更快，转移率更高。

其中，优选的，步骤(1)所述的微波破壁处理溶剂为乙醇-K₂HPO₄双水相萃取剂；更优选的，乙醇-K₂HPO₄双水相萃取剂中，乙醇的体积百分数为40％-80％，K₂HPO₄质量分数为10％-30％；优选的溶剂，对红景天苷等有效成分溶解性更好。

其中，优选的，步骤(1)中红景天滤渣加热回流溶剂为乙醇体积百分数为20％-80％乙醇水溶液；优选的溶剂，对红景天苷等有效成分溶解性更好。

其中，优选的，在步骤(1)红景天的微波破壁处理中，微波功率为100-300W。优选的微波功率，对红景天中有效成分的转移率更高，速度更快，杂质更少。

其中，优选的，在步骤(1)的微波破壁处理中，药材(g)与溶剂(ml)之比为1︰1.5-5；优选的药材与溶剂之比，对有效成分的提取效果更好提取效率更高。优选的，优选的微波破壁处理时间为5-20min；优选的微波破壁处理时间，对有效成分的提取效果好，能减少杂质进入溶剂。

其中，优选的，在步骤(1)红景天的加热回流提取中与甘草和乌梅的水提中，药材(g)与溶剂(ml)之比1︰4-10；优选的药材与溶剂之比，对有效成分的提取效果更好。优选的，提取时间30-180min/次；优选的提取时间，提取效率更高。

本发明复方红景天组合物在制备抗缺氧药物、食品和/或保健品中的应用。

本发明复方红景天组合物可以按照常规工艺加入常规辅料或载体制成汤剂、饮料、口服液、合剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、糖浆、冲剂或丸剂中的一种或多种产品。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、本发明复方红景天组合物中的三味中药在药效上相得益彰，具有协同增效作用，显著提高了红景天产品的抗缺氧药效(有效率不低于90％)。

2、与现有技术直接沉淀除去鞣质不同，本发明利用小分子多肽与鞣质的结合，不仅显著改善红景天制剂的口感，而且不影响制剂中有效成分含量，从而保证制剂疗效。

3、本发明复方红景天组合物的制备方法中，先采用“微波+双水相”对红景天进行破壁处理，再进行回流提取，并根据需要调整溶剂成分，更大限量地提取出红景天中有效成分含量，缩短了提取时间，且稳定性好，有利于复方红景天组合物的大规模工业化生产。

4、本发明复方红景天组合物的制备方法简单、可靠，稳定性好，能降低复方红景天组合物的生产成本，改善口感，提高药效，有利于复方红景天组合物的大规模生产和应用。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段，做出各种替换和变更，均应包括在本发明的范围内。

以下列举的实施例中所使用的红景天、甘草、乌梅为储藏期不超过半年、符合《中国药典》2015年版要求的药材，均可从商业途径获得。

实施例1

一种复方红景天片剂，其制备方法如下：

称取红景天200g，将红景天药材粉碎至10目，加入400ml的15％K₂HPO4-45％乙醇水溶液，在频率为200w的微波辅助条件下进行破碎10min，过滤、静置分层后，取上层滤液；将滤渣用1200ml的20％乙醇水溶液回流提取30min,过滤，取滤液，将滤渣用1200ml的20％乙醇水溶液重提取2次，合并滤液，得红景天提取液；称取甘草20g、乌梅20g，将甘草、乌梅粉碎至10目，混合均匀后，以240ml水作为溶剂，进行提取30min，过滤，取滤液；将滤渣用240ml的水重复提取2次，合并滤液，得甘草乌梅提取液；将所得红景天提取液在60℃下减压浓缩除去乙醇后，与甘草、乌梅提取液混合，浓缩至药材：药液(g/ml)为1：3时加入18g分子量为3kda的肽粉，在搅拌下浓缩至药材：药液(g/ml)为1：0.5，再加入适量糊精、淀粉、阿司帕坦，混合制粒，加入滑石粉，压片，0.3g/片，每片含生药量1g，即得。

实施例2

一种复方红景天混悬液，其制备方法如下：

称取红景天80g，将红景天药材粉碎至5目，加入120ml的10％K₂HPO4-60％乙醇水溶液，在频率为100w的微波辅助条件下进行破碎20min，过滤，静置，取上层液体；将滤渣用640ml的40％乙醇水溶液回流提取60min,过滤，取滤液，将滤渣用640ml的40％乙醇水溶液重提取2次，合并滤液，得红景天提取液；称取甘草5g、乌梅5g，将甘草、乌梅粉碎至5目，混合均匀后，以50ml水作为溶剂，进行提取60min，过滤，取滤液；将滤渣用50ml的水重复提取2次，合并滤液，得甘草乌梅提取液；将所得红景天提取液在60℃下减压浓缩去除乙醇后，与甘草、乌梅提取液混合，浓缩至药材：药液(g/ml)为1：2.5时加入24g分子量为2kda的肽粉，在搅拌下浓缩至药材：药液(g/ml)为1：1.5，减压干燥，粉碎，得干浸膏粉，加水分散，调节pH值，加入混悬剂、防腐剂、矫味剂，灌装，10ml/支，每支含生药量2g，即得。

实施例3

一种复方红景天颗粒，其制备方法如下：

称取红景天150g，将红景天药材粉碎至15目，加入450ml的15％K₂HPO4-60％乙醇水溶液，在频率为150w的微波辅助条件下进行破碎10min，过滤，静置，取上层液体；将滤渣用1500ml的60％乙醇水溶液回流提取150min,过滤，取滤液，将滤渣用1500ml的60％乙醇水溶液重复提取1次，合并滤液，得红景天提取液；称取甘草30g、乌梅30g，将甘草、乌梅粉碎至10目，混合均匀后，以240ml水作为溶剂，进行提取90min，过滤，取滤液；将滤渣用240ml的水重复提取2次，合并滤液，得甘草乌梅提取液；将所得红景天提取液在50℃下减压浓缩去除乙醇后，与甘草、乌梅提取液混合，浓缩至药材：药液(g/ml)为1：3时加入8g分子量为6kda的肽粉，在搅拌下浓缩至药材：药液(g/ml)为1：0.5，再加入适量糊精、淀粉、阿司帕坦，混匀，加入适量80％乙醇，按常规工艺制粒，装袋，1.2g/袋，每袋含生药量4g，即得。

实施例4

一种复方红景天胶囊，其制备方法如下：

称取红景天200g，将红景天药材粉碎至20目，加入1200ml的25％K₂HPO4-80％乙醇水溶液，在频率为300w的微波辅助条件下进行破碎5min，过滤，静置，取上层液体；将滤渣用1200ml的80％乙醇水溶液回流提取60min,过滤，取滤液，将滤渣用1200ml的80％乙醇水溶液重复提取2次，合并滤液，得红景天提取液；称取甘草30g、乌梅30g，将甘草、乌梅粉碎至20目，混合均匀后，以300ml水作为溶剂，进行提取120min，过滤，取滤液；将滤渣用300ml的水重复提取1次，合并滤液，得甘草乌梅提取液；将所得红景天提取液在55℃下减压浓缩去除乙醇后，与甘草、乌梅提取液混合，浓缩至药材：药液(g/ml)为1：0.5，加入适量糊精、淀粉、阿司帕坦、滑石粉，混匀，按常规工艺制粒，装胶囊，0.4g/粒，每粒含生药量1g，即得。

实施例5

一种复方红景天散剂，其制备方法如下：

称取红景天120g，将红景天药材粉碎至20目，加入300ml的15％K₂HPO4-50％乙醇水溶液，在频率为250w的微波辅助条件下进行破碎15min，过滤，静置，取上层液体；将滤渣用960ml的20％乙醇水溶液回流提取60min,过滤，取滤液，将滤渣用960ml的20％乙醇水溶液重复提取2次，合并滤液，得红景天提取液；称取甘草15g、乌梅15g，将甘草、乌梅粉碎至20目，混合均匀后，以90ml水作为溶剂，进行提取40min，过滤，取滤液；将滤渣用300ml的水重复提取2次，合并滤液，得甘草乌梅提取液；将所得红景天提取液在65℃下减压浓缩去除乙醇后，与甘草、乌梅提取液混合，浓缩至药材：药液(g/ml)为1：1，干燥，粉碎，过筛，加入适量淀粉、糊精、阿司帕坦、硬脂酸镁，混匀，过筛，分剂量，包装，1.2g/袋，每袋含生药量4g，即得。

试验例：

1、动物试验：

1.1常压耐缺氧实验：每个组各6只小鼠，雌雄各半，各组小鼠质量无显著差别。按小鼠质量0.02ml/g剂量对每只小鼠进行灌胃(每天灌胃前称重后计算)，连续灌胃15d，受试物每日临用前配置，各组小鼠灌胃量按小鼠质量的0.02ml/g剂量进行灌胃，1次/d。于末次灌胃给予受试动物1h后，将各组动物分别放入盛有5g钠石灰的250ml磨口瓶中，每瓶一只，用预先涂有凡士林的瓶塞封口，盖严，立即计时，以呼吸停止为指标，记录小鼠因缺氧而死亡的时间。

2.1力竭游泳试验：每个组各6只小鼠，雌雄各半，各组小鼠质量无显著差别。按小鼠质量0.02ml/g剂量对每只小鼠进行灌胃(每天灌胃前称重后计算)，连续灌胃15d,受试物每日临用前配置，各组小鼠灌胃量按小鼠质量的0.02ml/g剂量进行灌胃，1次/d。于末次灌胃给予受试动物1h后，将其自身体重5％的铅丝缠绕于尾根部后，置小鼠于水深30cm，水温26℃±2℃的游泳箱中，强迫游泳至力竭。以小鼠全身没入水平以下，5s内不能浮出水面判定为力竭，记录小鼠开始游泳至力竭时间。

常压耐缺氧试验模拟的是小鼠全身性缺氧，小鼠的存活时间可直接反应药物对机体抗缺氧能力的影响，缺氧和疲劳密切相关，疲劳的过程中往往伴随有组织缺氧现象，若机体携氧、利用氧的能力强，可显著缓解甚至消除疲劳，因而小鼠游泳力竭时间也可反映小鼠抗缺氧能力的大小。

空白组：生理盐水；

试验组：试验组1：取20片本发明实施例1复方红景天片，粉碎，计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。试验组2：取本发明实施例2复方红景天口服液，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。试验组3：取本发明实施例3复方红景天颗粒，粉碎，计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。试验组4：取本发明实施例4复方红景天胶囊囊心物，粉碎，计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。试验组5：取本发明实施例5复方红景天散剂，计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。

将上述实验组1-5和空白组分别进行常压耐缺氧实验，整理记录试验结果如下表1：(与空白组结果进行显著性统计，“*”显著；“**”极显著)

表1

由表1的实验结果可以看出，本发明实施例1-5中制备得到的复方红景天片处方具有显著的抗缺氧效果。

对照组：对照组1：使用缺少红景天提取物的组合物，其他成分按实施例1中比例制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。对照组2：使用缺少甘草和乌梅混合提取物的组合物，其他成分按按实施例1中比例制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。对照组3：选用市场上常见的红景天参杞胶囊，去除囊壳，将囊心物粉碎溶解，配置浓度为成人用量的18倍的水液。对照组4：用五味子和玉竹替换组方中的甘草和乌梅，按照实施例1中处方及制备方法进行制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。

将空白组、实施例1和上述对照组1-4分别进行力竭游泳试验，整理记录试验结果如下表2：(与空白组结果进行显著性统计，“*”显著；“**”极显著)

表2

将表2的实验结果与表1进行结合对比，可分析发现，本发明中三味中药各成分相得益彰，具有协同增效作用，任意替换或缺少组方中的药材，均会导致组合物的抗缺氧效果显著降低；且实施例1中所用最优选处方制得的复方红景天片剂比市售产品红景天参杞胶囊效果更好。

对照组5：使用牛奶蛋白质粉替代肽粉，并过滤回收沉淀，将沉淀粉碎，添加回片剂中，其他成分按实施例1中比例制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。对照组6：使用牛奶蛋白质粉替代肽粉，并过滤去除沉淀，其他成分按实施例1中比例制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。对照组7：使用分子量为1kda的肽粉替换分子量为3kda的肽粉，其他成分按实施例1中比例制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。对照组8：使用分子量为7kda的肽粉替换分子量为3kda的肽粉，其他成分按实施例1中比例制备得到片剂，取20片，粉碎计算，称量，配制成含生药量为1.0g/ml的水液。

将空白组、实施例1和上述对照组5-8分别进行力竭游泳试验，整理记录试验结果如下表3：(与空白组结果进行显著性统计，“*”显著；“**”极显著)

表3

将表3的实验结果与表1进行结合对比，可分析发现，本发明中添加多肽后，组合物的药效显著优于添加蛋白质的，且添加的多肽在一定的分子量范围内，组合物的药效并无显著变化。

2、临床试验：

志愿者筛选：

为确保实验结果准确性，对志愿者苦味敏感度、身体健康状况、年龄等进行严格筛选。择选标准：味觉功能正常，年龄在20-35岁之间，无糖尿病、心脏病、高血压、贫血、传染病等疾病，未去过高海拔地区的志愿者。在受试前签订知情同意书，本试验共筛选出200名志愿者。

试验环境：本次试验地点位于高反发生率达70％以上的甘孜色达，海拔约3700m。到达色达后，200名志愿者中有153人出现不同程度的高原反应，表现为头痛，心跳加快，呼吸急促、呕吐及失眠。

将上述患者分为4个组，各组病例情况无显著差异，高原反应发生3天内，分别服用本发明实施例1、实施例5、对比例7、对比例8所得复方红景天制剂，按规定剂量(片剂为每次4片，一日三次，散剂为每次一袋，一日三次)服用，治疗效果见下表4：

用药内别	病例数	起效例数	有效率(％)
				实施例1	46	44	95.65
实施例5	32	30	93.75
				对比例7	41	39	95.12
对比例8	34	32	91.67

表4

起效：用药后症状消失或改善。

口味描述见下表5(满分4分)：苦涩味重，0分；略有苦涩味，1分；无苦涩味，3分；微甜，4分；很甜，2分。

表5

临床试验结果得知，本发明实施例中的复方红景天组合物起效快，口感佳；而添加的多肽在本发明规定的范围内，既不会影响组合物的药效，又能显著改性口感。