一种花生根结线虫诱杀剂及其制备方法
阅读说明：本技术 一种花生根结线虫诱杀剂及其制备方法 (A kind of peanut root-knot nematode attractant and preparation method thereof ) 是由 高宗军 李如美 李瑞娟 戴争 于 2019-08-10 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种花生根结线虫诱杀剂及其制备方法,利用可降解基质和复合发酵液制成,可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用,复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到,可自然降解,并伴随降解缓慢释放其负载的新鲜花生根超微粉和复合发酵微生物,对花生根结线虫具有极强的诱捕作用,并起到杀灭作用,安全有效地防治花生根结线虫。(The present invention provides a kind of peanut root-knot nematode attractants and preparation method thereof, it is made using degradable matrix and composite fermentation liquid, degradable matrix is the crosslinked action using sodium alginate and calcium ion, compound fresh Roots of Peanut Ultramicro-powder, expanded vermiculite powder obtain, it can natural degradation, and with degradation slow release its load fresh Roots of Peanut Ultramicro-powder and composite fermentation microorganism, there is extremely strong trapping effect to peanut root-knot nematode, and killing effect is played, safely and effectively prevent and treat peanut root-knot nematode.)
技术领域
本发明涉及花生种植技术领域，特别是涉及一种花生根结线虫诱杀剂及其制备方法。
背景技术
花生根结线虫病，俗称地黄病、地落病、矮黄病、黄秧病等，是一种世界性病害，在根结线虫发病土壤里，根结线虫、花生和根际微生物组成了一个小的生态系统，表明根结线虫病的发生与根际微生物有非常重要的关系。
花生根结线虫病主要为害植株的地下部，因地下部受害引起地上部生长发育不良。幼苗被害，一般出土半个月后即可表现症状，植株萎缩不长，下部叶变黄，始花期后，整株茎叶逐渐变黄，叶片小，底叶叶缘焦灼，提早脱落，开花迟，病株矮小，似缺肥水状，田间常成片成窝发生。根结线虫作为一种顽固的土壤病害，直接危害花生的根部营养吸收。花生感病后根的吸收功能被破坏，植株矮小发黄，结果少而稀。一般减产20％～30％，严重的可减产70％以上，甚至绝收。
由于抗根结线虫病的种质资源稀少，所以目前花生根结线虫还是依赖于人工防治干预，主要分为化学农药防治、物理防治和生物防治。物理防治主要是用来处理温室的种子、苗床和苗木，可能需要较长一段休棚期，打乱生产计划，影响作物生长周期，一般不适用于大田防治线虫。其应用范围有限，防治效果一般，有些需要特殊的仪器设备，增加生产成本。故当前广泛使用的还是化学防治和生物防治，并且大部分单纯起到杀灭作用，尚缺乏对花生根结线虫的诱捕作用，杀灭效果有限。
专利申请CN106889116A公开了一种花生根结线虫诱杀剂，是以南瓜子、仙人掌、桑叶、羊蹄草、白萝卜、薄荷叶、榕树叶、海带、地肤子、皂角、紫花地丁、花生秧等原料制成，薄荷叶等自带的气味较大，反倒会影响对花生根结线虫的诱捕作用，而且，各原料配合杀虫作用有限，随着时间的推移逐渐丧失诱杀作用，对花生根结线虫的杀灭效果，特别是长期杀灭效果并不理想。
发明内容
本发明的目的就是要提供一种花生根结线虫诱杀剂及其制备方法，对花生根结线虫具有极强的诱捕作用，并起到杀灭作用，安全有效地防治花生根结线虫。
为实现上述目的，本发明是通过如下方案实现的：
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
优选的，所述新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成2～3mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径0.5～1mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。
进一步优选的，在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在1～2.5MPa条件下保持1～2分钟后迅速释放压力即可。
进一步优选的，采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为60～80分钟。
优选的，将可降解基质倒入复合发酵液中，以20～22L/分钟的气流速度通空气，1000～1200转/分钟搅拌30～40分钟，密闭静置8～10小时，室温(25℃)真空干燥12～15小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为15～20：1。
优选的，所述可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应30～40分钟，，密闭静置10～12小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：5～8：0.3～0.5：2～3，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为2～3％、2～3％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤2～3次。
优选的，在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.3～0.5。
优选的，好氧发酵的条件为：空气流量1.2～1.4m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度26～29℃，pH为6.5～7.5，时间为5～6小时。
优选的，先将红糖用40～50℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡20～30分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为20～30：5～8：100。
优选的，所述复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.6～0.7：0.4～0.8：1～1.2混合，即得所述复合发酵菌剂。
进一步优选的，活化培养至菌体浓度为108～1010cfu·mL-1。
进一步优选的，蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8～7.2；培养温度为28～30℃。
进一步优选的，哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8～7.2；培养温度为27～29℃。
进一步优选的，轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7～7.2；培养温度为28～30℃。
进一步优选的，娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8～7.2；培养温度为27～29℃。
利用上述制备方法得到的一种花生根结线虫诱杀剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)本发明利用可降解基质和复合发酵液制成一种花生根结线虫诱杀剂，可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到，可自然降解，并伴随降解缓慢释放其负载的新鲜花生根超微粉和复合发酵微生物，对花生根结线虫具有极强的诱捕作用，并起到杀灭作用，安全有效地防治花生根结线虫。
(2)海藻酸钠遇到钙离子可迅速发生离子交换，实现凝胶化，形成新鲜花生根超微粉和膨胀蛭石粉均匀分散的凝胶网状结构，新鲜花生根超微粉是利用新鲜花生根制成，本身具有浓郁的气味，超微处理后放大了该气味，分布在所述凝胶网状结构中，一方面空气流转促进气味的扩散，另一方面随着基质的自然降解缓慢流转到土壤中，进一步强化气味，从而对土壤中的根结线虫起到极强的诱捕作用，使得根结线虫集中在诱杀剂周围，进而在复合微生物的作用下被杀灭。基质的自然降解对其负载的复合发酵微生物也起到类似缓释的作用，有效延长作用时间，起到长期杀灭花生根结线虫的作用。
(3)本发明的复合发酵物是将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433在含有新鲜花生根超微粉的水分散物中发酵得到。在含有新鲜花生根超微粉的水分散物中发酵使得复合发酵物也具有花生根的气味，对花生根结线虫起到极强的诱捕作用。哈茨木霉生长迅速，可以抢占花生根表面位点，形成一个保护罩，从而保护花生根免受花生根线虫的侵染，蜡样芽孢杆菌可抵抗外界有害因子，娄彻氏链霉菌的代谢产物可以起到杀虫作用，轮枝菌可以引导对线虫的寄生作用，最终结合蜡样芽孢杆菌和娄彻氏链霉菌的作用杀灭花生根结线虫。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成2mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径0.5mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在1MPa条件下保持1分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为60分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以20L/分钟的气流速度通空气，1000转/分钟搅拌30分钟，密闭静置8小时，室温(25℃)真空干燥12小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为15：1。
可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应30分钟，，密闭静置10小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：5：0.3：2，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为2％、2％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤2次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.3。
好氧发酵的条件为：空气流量1.2m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度26℃，pH为6.5，时间为5小时。
先将红糖用40℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡20分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为20：5：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.6：0.4：1混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为108cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8；培养温度为28℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8；培养温度为27℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为28℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8；培养温度为27℃。
实施例2
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成3mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径1mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在2.5MPa条件下保持2分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为80分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以22L/分钟的气流速度通空气，1200转/分钟搅拌40分钟，密闭静置10小时，室温(25℃)真空干燥15小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为20：1。
可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应40分钟，，密闭静置12小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：8：0.5：3，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为3％、3％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤3次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.5。
好氧发酵的条件为：空气流量1.4m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度29℃，pH为7.5，时间为6小时。
先将红糖用50℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡30分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为30：8：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.7：0.8：1.2混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为1010cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为30℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为29℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为30℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为29℃。
实施例3
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成2mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径1mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在1MPa条件下保持2分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为60分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以22L/分钟的气流速度通空气，1000转/分钟搅拌40分钟，密闭静置8小时，室温(25℃)真空干燥15小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为15：1。
可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应40分钟，，密闭静置10小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：8：0.3：3，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为2％、3％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤2次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.5。
好氧发酵的条件为：空气流量1.2m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度29℃，pH为6.5，时间为6小时。
先将红糖用40℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡30分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为20：8：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.6：0.8：1混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为1010cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.8；培养温度为28～30℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为27℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为28℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为27℃。
实施例4
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成3mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径0.5mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在2.5MPa条件下保持1分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为80分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以20L/分钟的气流速度通空气，1200转/分钟搅拌30分钟，密闭静置10小时，室温(25℃)真空干燥12小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为20：1。
可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应30分钟，，密闭静置12小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：5：0.5：2，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为3％、2％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤3次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.3。
好氧发酵的条件为：空气流量1.4m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度26℃，pH为7.5，时间为5小时。
先将红糖用50℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡20分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为30：5：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.7：0.4：1.2混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为108cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为28℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为27℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为28℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.2；培养温度为27℃。
实施例5
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成2.5mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径0.8mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在2MPa条件下保持1分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为70分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以21L/分钟的气流速度通空气，1100转/分钟搅拌35分钟，密闭静置9小时，室温(25℃)真空干燥13小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为18：1。
可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应35分钟，，密闭静置11小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：6：0.4：2.5，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为2.5％、2.5％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤3次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.4。
好氧发酵的条件为：空气流量1.3m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度28℃，pH为7，时间为5小时。
先将红糖用45℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡25分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为25：6：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.65：0.6：1.1混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为109cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为29℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为28℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.1；培养温度为29℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.9；培养温度为28℃。
对比例1
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成2.5mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径0.8mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在2MPa条件下保持1分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为70分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以21L/分钟的气流速度通空气，1100转/分钟搅拌35分钟，密闭静置9小时，室温(25℃)真空干燥13小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为18：1。
可降解基质的制备方法如下：将膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应35分钟，，密闭静置11小时，洗涤，得到可降解基质；膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为6：0.4：2.5，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为2.5％、2.5％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤3次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.4。
好氧发酵的条件为：空气流量1.3m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度28℃，pH为7，时间为5小时。
先将红糖用45℃温水化开，自然冷却至室温，加入新鲜花生根超微粉，超声波振荡25分钟，得到新鲜花生根超微粉、红糖与水的混合物；其中，新鲜花生根超微粉、红糖与水的质量比为25：6：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.65：0.6：1.1混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为109cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为29℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为28℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.1；培养温度为29℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.9；培养温度为28℃。
对比例2
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，是将可降解基质倒入复合发酵液中，通空气搅拌，密闭静置，干燥得到；所述可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉得到；所述复合发酵液是向红糖与水的混合物中，加入蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂，好氧发酵，过滤即得。
新鲜花生根超微粉的制备方法如下：未患病花生地收获时趁新鲜摘除花生，从根部切断，留花生根，然后将花生根切成2.5mm的小丁，接着利用粗碎机粉碎制成粒径0.8mm的花生根粉，最后进行超微粉碎，得到粒径10μm以下的新鲜花生根超微粉。在超微粉碎前先将花生根粉装入蒸汽***设备的***腔中，在2MPa条件下保持1分钟后迅速释放压力即可。采用气流粉碎机进行超微粉碎，工艺条件为：气流压力为1100kPa，进料速度为180r/min，分级频率为35Hz，粉碎时间为70分钟。
将可降解基质倒入复合发酵液中，以21L/分钟的气流速度通空气，1100转/分钟搅拌35分钟，密闭静置9小时，室温(25℃)真空干燥13小时，得到所述的一种花生根结线虫诱杀剂；可降解基质与复合发酵液的质量比为18：1。
可降解基质的制备方法如下：将新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉加入海藻酸钠溶液中，滴入氯化钙溶液，交联反应35分钟，，密闭静置11小时，洗涤，得到可降解基质；新鲜花生根超微粉、膨胀蛭石粉、海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量比为10：6：0.4：2.5，海藻酸钠溶液、氯化钙溶液的质量浓度依次为2.5％、2.5％。洗涤的具体方法是：去离子水洗涤3次。
在制备复合发酵液时，混合物与复合发酵菌剂的质量比为1:0.4。
好氧发酵的条件为：空气流量1.3m3空气/(m3发酵液·分钟)，温度28℃，pH为7，时间为5小时。
先将红糖用45℃温水化开，自然冷却至室温，得到红糖与水的混合物；其中，红糖与水的质量比为6：100。
复合发酵菌剂的制备方法如下：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.65：0.6：1.1混合，即得所述复合发酵菌剂。活化培养至菌体浓度为109cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为29℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为28℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.1；培养温度为29℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.9；培养温度为28℃。
对比例3
一种花生根结线虫诱杀剂的制备方法，蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合得到。具体方法是：先将蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433分别进行活化培养，然后以体积比1：0.65：0.6：1.1混合，即得。活化培养至菌体浓度为109cfu·mL-1。
蜡样芽孢杆菌ACCC03288的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，琼脂18g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为29℃。
哈茨木霉ACCC30423的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7；培养温度为28℃。
轮枝菌ACCC36253的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含硝酸钠3g·L-1、磷酸氢二钾胰1g·L-1、硫酸镁0.5g·L-1、氯化钾0.5g·L-1、硫酸亚铁0.01g·L-1、蔗糖30g·L-1、琼脂18g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为7.1；培养温度为29℃。
娄彻氏链霉菌ACCC41433的活化培养条件为：培养基以蒸馏水配制，含马铃薯200g·L-1，羟腺嘌呤0.3g·L-1，烯酰腺嘌呤0.3g·L-1，葡萄糖20g·L-1，经121℃灭菌20分钟所得，pH为6.9；培养温度为28℃。
试验例
在花生根结线虫危害较严重的花生地中进行实验，实验组分别在播种时施用实施例1～5或对比例1～3所得诱杀剂(每亩花生地施用200mg诱杀剂)，对照组不进行任何处理。分别在播种时和播种3天、播种2个月后抽样检查实验组和对照组土壤中的线虫密度，求取平均值，结果见表1。
表1.诱杀剂的使用效果比较
由表1可知，实施例1～5所得诱杀剂具有强烈的诱捕作用，在播种3天后就能明显减少土壤中花生根结线虫数量，并且能长时间起到杀灭花生根结线虫的作用。对比例1可降解基质是利用海藻酸钠与钙离子的交联作用，复合膨胀蛭石粉得到，诱捕效果变差；对比例2复合发酵液是向红糖与水的混合物中加入复合发酵菌剂后发酵得到，诱捕效果变差；对比例3接采用蜡样芽孢杆菌ACCC03288、哈茨木霉ACCC30423、轮枝菌ACCC36253、娄彻氏链霉菌ACCC41433复合发酵菌剂作为诱杀剂，诱捕效果变差，无法长时间起到杀灭作用。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
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