一种含蒿甲醚与火把花的药物组合物、制剂及其制备方法
阅读说明：本技术 一种含蒿甲醚与火把花的药物组合物、制剂及其制备方法 (A kind of pharmaceutical composition containing Artemether and tripterygium hypoglaucum hutch, preparation and preparation method thereof ) 是由 莫宗成 杨炀 罗先钦 宋小仙 王敏 罗超利 罗金萍 于 2019-09-19 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种含蒿甲醚与火把花的药物组合物、制剂及其制备方法。药物组合物包括蒿甲醚与火把花,二者的质量比为0.1～0.2:7.5～15。本发明利用蒿甲醚与火把花两种成分的协同增效作用,提高了对关节炎的疗效,缩短了治疗时间,同时降低了毒性。(The present invention relates to a kind of pharmaceutical compositions containing Artemether and tripterygium hypoglaucum hutch, preparation and preparation method thereof.Pharmaceutical composition includes Artemether and tripterygium hypoglaucum hutch, and the mass ratio of the two is 0.1~0.2:7.5~15.The present invention utilizes the synergistic function of Artemether and two kinds of ingredients of tripterygium hypoglaucum hutch, improves to arthritic curative effect, shortens treatment time, while reducing toxicity.)
技术领域
本发明涉及药物领域，特别涉及一种含蒿甲醚与火把花的药物组合物、制剂及其制备方法。
背景技术
关节炎(arthritis)泛指发生在人体关节及其周围组织，由炎症、感染、退化、创伤或其他因素引起的炎性疾病，可分为数十种。我国的关节炎患者有1亿以上，且人数在不断增加。临床表现为关节的红、肿、热、痛、功能障碍及关节畸形，严重者导致关节残疾、影响患者生活质量。据统计我国50岁以上人群中半数患骨关节炎，65岁以上人群中90％女性和80％男性患骨关节炎。我国的患病率为0.34％～0.36％，严重者寿命约缩短10～15年。关节炎的病因复杂，主要与自身免疫反应、感染、代谢紊乱、创伤、退行性病变等因素有关，根据病因可将关节炎分为骨性、类风湿性、强直性、反应性、痛风性、风湿性、化脓性等。
目前临床上主要采用药物治疗关节炎，只有到严重阶段才会采用外科手术、骨髓移植等其它创伤性疗法。火把花是一种被广泛用于治疗关节炎的中药材，然而单一药物的治疗效果有限，有待改善。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含蒿甲醚与火把花的药物组合物，该组合物利用蒿甲醚与火把花两种成分的协同增效作用，提高了对关节炎的疗效，缩短了治疗时间，同时降低了毒性。
为了实现以上目的，本发明提供了以下技术方案：
一种含蒿甲醚与火把花的药物组合物，包括蒿甲醚与火把花，二者的质量比为0.1～0.2:7.5～15。
本发明发现，将蒿甲醚与火把花复配后，能提高对关节炎的疗效，缩短治疗时间，降低毒性。
以大鼠、小鼠为试验对象发现，本发明的药物组合物能显著抑制小鼠红细胞所致的小鼠溶血素抗体生成，还能显著抑制2，4-二硝基氟苯所致的小鼠迟发超敏反应，能显著降低大鼠的关节肿胀度。
经小鼠毒性试验发现，在同样大剂量下，蒿甲醚与火把花复配后相比单一的蒿甲醚毒性致死率降低了6％，相比单一的火把花毒性致死率降低了12％。
本发明中，蒿甲醚与火把花的质量比可采用0.1～0.2:7.5～15范围内的任意值，其中，优选蒿甲醚与火把花的质量比为0.1:7.5～15时，协同增效效果更显著。
本发明所述的火把花为火把花的根部，直接提取所得，可采用常规的提取方法而得，例如浸提等，即本发明所述的火把花为火把花提取物。
本发明所述的蒿甲醚可以自制或市售。
在一些实施方式中，药物组合物还包括药学上可接受的至少一种辅助剂。
在一些实施方式中，所述辅助剂包括增溶剂、防腐剂、矫味剂、润湿剂、崩解剂、助悬剂、螯合剂、填充剂、润滑剂、粘结剂、助流剂中的一种或多种。
通常根据制剂类型选择辅助剂。
本发明所述的药物组合物制成任意的制剂，例如片剂、口服液、散剂、胶囊剂、注射剂或外敷剂。不同剂型选择不同的辅助剂。
以片剂为例，所述填充剂选自乳糖、糊精、甘露醇和山梨醇中的一种或多种，在制剂中的含量优选为10～30wt％；
所述粘结剂为预胶化淀粉，在制剂中的含量优选为2～10wt％；
所述崩解剂为交联聚维酮，在制剂中的含量优选为0.5～5wt％；
所述润滑剂为十二烷基硫酸钠，在制剂中的含量优选为1～5wt％；
所述助流剂为滑石粉，在制剂中的含量优选为1～5wt％。
以口服液为例，常用的辅助剂有增溶剂、防腐剂、矫味剂、助悬剂、润湿剂、表面活性剂、乳化剂等。
本发明所述的药物组合物的制备方法为：按照配方，将所有原料组合。
本发明所述的制剂的制备方法采用常规的制备方法即可，以片剂为例，将所有原料混合后造粒、压片即得。可根据助剂的类型及药物的物化性质选择合适的造粒方法。
综上，与现有技术相比，本发明达到了以下技术效果：
(1)蒿甲醚与火把花复配后，产生协同增效作用，提高了对关节炎的疗效，缩短了治疗时间，同时降低了毒性。
(2)所提供的片剂无创伤，给药方便，顺应性好。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
药效实验
1、剂量设计
蒿甲醚剂量：小鼠：A1为200mg/kg，A2为100mg/kg；大鼠：A3为100mg/kg，A4为50mg/kg；
火把花剂量：小鼠：B1为15g生药/kg，B2为7.5g生药/kg；大鼠：B3为7.5g生药/kg，B4为3.75g生药/kg。
2实验内容
2.1对小鼠溶血素抗体生成的影响
2.1.1药物配制
试验组用药：取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液；取1.1g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A2:B2)的溶液(蒿甲醚终浓度为5mg/ml，火把花根终浓度为0.375g生药/ml)。
取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液；取2.2g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A2:B1)的溶液(蒿甲醚终浓度为5mg/ml，火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
取400mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液；取1.1g火把花根浸膏(13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A1:B2)的溶液(蒿甲醚终浓度为10mg/ml，火把花根终浓度为0.375g生药/ml)。
取400mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液；取2.2g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A1:B1)的溶液(蒿甲醚终浓度为10mg/ml，火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得所需的蒿甲醚溶液(A1)(蒿甲醚终浓度为10mg/ml)。
取1.1g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得所需的火把花根浸膏溶液(B1)(火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
2.1.2实验方法
在灭菌操作下，自小鼠下静脉采血，将小鼠血加入到50mL 0.9％氯化钠注射液中混匀，然后用0.9％氯化钠注射液洗涤3次，前两次离心速度为1500r/min，离心5min，弃上清液和界面的白细胞层，最后再连续两次离心(2000r/min，5min)直至红细胞比容恒定，按此值用0.9％氯化钠注射液配成5％的小鼠红细胞混悬液。
对小鼠进行心脏采血，待血液凝固后，2000r/min离心5min，吸取上方的血清混合，用生理盐水配成10％的血清。
检疫及适应性饲养结束后，选取健康合格的56只小鼠，体重不超过平均体重的±20％，随机分为7组，即空白对照组、蒿甲醚与火把花A2:B2组、蒿甲醚与火把花A1:B2组、蒿甲醚与火把花A2:B1组、蒿甲醚与火把花A1:B1组、蒿甲醚A1组、火把花B1组，每组8只(雌雄各半)。分组后，各药物组分别灌胃给予相对应的药物，空白对照组给予相应体积的纯化水，给药体积为0.2ml/10g体重，每日一次，连续给药7次。
给药第一天，各组按0.2ml/只腹腔注射5％小鼠红细胞悬液进行免疫。
末次给药后1h，眼球取血，3000r/min离心10min，分离血清，用0.9％氯化钠注射液将血清稀释100倍。取稀释血清1ml，与5％小鼠红细胞悬液0.5ml、10％小鼠血清(补体)0.5ml混匀，在37℃恒温箱温育30min，然后置0℃冰水中30min中止反应，将上述液体3000r/min离心10min，取上清液(不加小鼠血清的上清液调零)，用分光光度计于540nm处测定OD值。
2.1.3实验结果
如表1，蒿甲醚与火把花的不同配比对小鼠红细胞所致的小鼠溶血素抗体生成均有明显的抑制作用，提示其对体液免疫功能有抑制作用，并且明显优于单用的药物。
表1
组别
比例
OD值
空白对照
/
1.260±0.709
蒿甲醚：火把花
A2:B2
0.091±0.099
蒿甲醚：火把花
A1:B2
0.140±0.187
蒿甲醚：火把花
A2:B1
0.103±0.150
蒿甲醚：火把花
A1:B1
0.178±0.183
蒿甲醚
A1
0.191±0.317
火把花
B1
0.149±0.255
2.2对DNFB致小鼠迟发超敏反应的影响
2.2.1药物配制
试验组用药：取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液；取1.1g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A2:B2)的溶液(蒿甲醚终浓度为5mg/ml，火把花根终浓度为0.375g生药/ml)。
取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液；取2.2g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A2:B1)的溶液(蒿甲醚终浓度为5mg/ml，火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
取400mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液；取1.1g火把花根浸膏(13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A1:B2)的溶液(蒿甲醚终浓度为10mg/ml，火把花根终浓度为0.375g生药/ml)。
取400mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液；取2.2g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A1:B1)的溶液(蒿甲醚终浓度为10mg/ml，火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得所需的蒿甲醚溶液(A1)(蒿甲醚终浓度为10mg/ml)。
取1.1g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得所需的火把花根浸膏溶液(B1)(火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
2.2.2实验方法
检疫及适应性饲养结束后，选取健康合格的56只小鼠，体重不超过平均体重的±20％，随机分为7组，即空白对照组、蒿甲醚与火把花A2:B2组、蒿甲醚与火把花A1:B2组、蒿甲醚与火把花A2:B1组、蒿甲醚与火把花A1:B1组、蒿甲醚A1组、火把花B1组，每组8只(雌雄各半)。分组后，各药物组分别灌胃给予相对应的药物，空白对照组给予相应体积的纯化水，给药体积为0.2ml/10g体重，每日一次，连续给药7次。
给药第3天，各组小鼠于腹部去毛处均匀涂抹0.5％的2,4-二硝基氟苯丙酮橄榄油溶液(25ul/只)致敏，给药第4天强化1次。
末次给药1小时后，将0.2％2,4-二硝基氟苯丙酮橄榄油溶液(20ul/只)均匀涂于小鼠右耳，左耳涂抹基质(丙酮橄榄油)，模型对照组涂抹基质。30分钟后，脱颈椎处死小鼠，剪下左右耳廓，用打孔器(直径8mm)取下耳片，称左右耳重，计算肿胀度及肿胀抑制率，计算公式如下：
肿胀度＝右耳重－左耳重
肿胀抑制率＝(模型组肿胀度－药物组肿胀度)/模型组肿胀度×100％
2.2.3实验结果
如表2，蒿甲醚与火把花的不同配比对2，4-二硝基氟苯所致耳肿胀有明显的抑制作用，提示其对2，4-二硝基氟苯所致的迟发超敏反应有明显的抑制作用，配比作用强于单用。
表2
组别
比例
肿胀度
肿胀抑制率
空白对照
/
0.0070±0.0020
/
蒿甲醚：火把花
A2:B2
0.0057±0.0036
18.57
蒿甲醚：火把花
A1:B2
0.0067±0.0022
4.29
蒿甲醚：火把花
A2:B1
0.0049±0.0019
30.00
蒿甲醚：火把花
A1:B1
0.0061±0.0023
12.86
蒿甲醚
A1
0.0067±0.0025
4.29
火把花
B1
0.0068±0.0026
2.86
2.3对大鼠佐剂性关节炎模型的影响
2.3.1药物配制
试验组用药：取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液；取1.1g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A4:B4)的溶液(蒿甲醚终浓度为5mg/ml，火把花根终浓度为0.375g生药/ml)。
取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液；取2.2g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为10mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A4:B3)的溶液(蒿甲醚终浓度为5mg/ml，火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
取400mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液；取1.1g火把花根浸膏(13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为0.75g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A3:B4)的溶液(蒿甲醚终浓度为10mg/ml，火把花根终浓度为0.375g生药/ml)。
取400mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液；取2.2g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液。将配制好的浓度为20mg/ml的蒿甲醚溶液和浓度为1.5g生药/ml的火把花根浸膏溶液按体积比1:1混合后，即得所需配比(A3:B3)的溶液(蒿甲醚终浓度为10mg/ml，火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
取200mg蒿甲醚，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得所需的蒿甲醚溶液(A3)(蒿甲醚终浓度为10mg/ml)。
取1.1g火把花根浸膏(含量为13.64g生药/g浸膏)，加入0.5％CMC-Na溶液充分碾磨均匀后定容至20ml，即得所需的火把花根浸膏溶液(B3)(火把花根终浓度为0.75g生药/ml)。
2.3.2实验方法
参照文献方法进行模型制备：检疫及适应性饲养结束后，将检疫合格的大鼠(留8只大鼠不做处理，雌雄各半)于右后足趾皮内注射CFA 0.1mL/只。
注射后第14天，选择造模型成功的大鼠根据关节肿胀度随机分为7组，即模型对照组、蒿甲醚与火把花A4:B4组、蒿甲醚与火把花A3:B4组、蒿甲醚与火把花A4:B3组、蒿甲醚与火把花A3:B3组、蒿甲醚A3组、火把花B3组，每组8只(雌雄各半)；另8只未做处理动物为空白对照组。分组后，各药物组分别灌胃给予相对应的药物，空白对照组、模型对照组给予相应体积的纯化水，给药体积为1ml/100g体重，每日给药一次，连续给药21日。
在造模前、给药前(第0天)和给药第7、14、21天分别测量所有大鼠左后足(继发病变侧)及右后足的踝关节直径1次，计算关节肿胀度。计算公式如下：
关节肿胀度＝给药后大鼠踝关节直径-造模前大鼠踝关节直径
2.3.3实验结果
如表3，蒿甲醚与火把花的不同配比对大鼠佐剂性关节炎有一定的治疗作用，提示其对大鼠佐剂性关节炎继发关节肿胀有明显的治疗作用，配比作用强于单用。
表3
药效学筛选研究结果提示以大鼠关节炎模型为主要评价标准，蒿甲醚与火把花的A4:B3配比(该剂量等同于小鼠的A2:B1配比)有比较明显的作用，该配比对DNFB致小鼠迟发超敏反应及小鼠溶血素抗体生成实验均有明显的抑制作用。
3、急性毒性实验结果
实验方法：检疫及适应性饲养结束后，选取健康合格的60只小鼠，体重不超过平均体重的±20％，随机分为3组，每组20只(雌雄各半)。按组别分别灌胃给予相应药物，给药体积为0.4ml/10g体重，给药一次。
火把花200g生药/kg：死亡18只，存活2只；
蒿甲醚4g/kg：死亡19只，存活1只；
火把花200g生药/kg+蒿甲醚4g/kg：死亡17只，存活3只。
由此可见，火把花和蒿甲醚联用后毒性微弱下降，从以上结果也可看出，给药时火把花和蒿甲醚的给药量不应当超过上述有较高致死率的量。
实施例1
含火把花和蒿甲醚的复方片剂
配方：以质量百分比计，蒿甲醚和火把花总共57％(二者的质量比为1:150)，乳糖30wt％，预胶化淀粉2wt％，交联聚维酮5wt％，十二烷基硫酸钠1wt％，滑石粉5wt％。
制备过程：将以上所有原料混合，加入适量水，搅拌均匀，湿法造粒，之后干燥，最后压片。
实施例2
含火把花和蒿甲醚的复方片剂
配方：以质量百分比计，蒿甲醚和火把花总共73.5％(二者的质量比为1:150)，乳糖10wt％，预胶化淀粉10wt％，交联聚维酮0.5wt％，十二烷基硫酸钠5wt％，滑石粉1wt％。
制备过程：将以上所有原料混合，加入适量水，搅拌均匀，湿法造粒，之后干燥，最后压片。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。