一种具有抑菌活性的中药组合物及应用
阅读说明：本技术 一种具有抑菌活性的中药组合物及应用 (Traditional Chinese medicine composition with antibacterial activity and application ) 是由 刘东玲 刘小凤 侯雯倩 宁艳梅 海洋 郭清毅 苏敬 董劲曲 徐兰 于 2021-09-10 设计创作，主要内容包括：本发明属于中药领域,具体涉及一种具有抑菌活性的中药组合物及应用。所述具有抑菌活性的中药组合物包括黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子；所述中药组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌均有显著的抑菌效果,且其抑菌效果优于单味中药；在降低药物使用剂量的同时,降低毒性和细菌耐药性；所述中药组合物稳定性高,同时操作简单、生产成本低、提取率高、生产应用方便；提供的中药组合物可用于制备消杀产品和健康用品,包括具有抑菌功能的洗手液、喷雾剂、抑菌香皂等,不但拓展了中药开发应用的范围与深度,同时将中药抑菌成分应用于产品中,该技术的市场应用前景广阔必会受到广大消费者青睐。(The invention belongs to the field of traditional Chinese medicines, and particularly relates to a traditional Chinese medicine composition with antibacterial activity and application thereof. The Chinese medicinal composition with antibacterial activity comprises Scutellariae radix, flos Lonicerae, radix Isatidis, fructus forsythiae, fructus crataegi, herba Menthae, and Galla chinensis; the traditional Chinese medicine composition has obvious bacteriostatic effect on staphylococcus aureus, escherichia coli and candida albicans, and the bacteriostatic effect is superior to that of a single traditional Chinese medicine; the toxicity and the bacterial drug resistance are reduced while the dosage of the drug is reduced; the traditional Chinese medicine composition has high stability, and is simple to operate, low in production cost, high in extraction rate and convenient to produce and apply; the provided traditional Chinese medicine composition can be used for preparing disinfection products and health products, including hand sanitizer, spray, bacteriostatic soap and the like with bacteriostatic functions, so that the range and the depth of development and application of traditional Chinese medicines are expanded, meanwhile, bacteriostatic components of the traditional Chinese medicines are applied to the products, and the technology has wide market application prospect and is certainly favored by consumers.)
技术领域
本发明属于中药领域，具体涉及一种具有抑菌活性的中药组合物及应用。
背景技术
中药抑菌剂不但能防治疾病、消毒清洁空气，而且不良反应少，不需要添加任何化学试剂。迄今为止已有许多学者通过现代药理研究表明许多传统中草药具有较为明显的抗菌抗病毒作用，中药抑菌剂在消毒学领域取得新进展，将中药应用于抑菌剂不仅开辟了中药药源，还扩大了中药的使用范围。中药抑菌剂取材天然，安全无毒，气味芳香。某些中药成分具有多靶点及显著的体外抗病毒、抗菌效果，可有效抑制病源复制、阻断病源传播,具有广泛的应用价值，并由于组方中的多元成分协同作用，不易产生耐药性。中药消毒剂具有毒性低、抑菌温和、抑菌谱广的特点，可以得到很好的推广。
病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体，属于中医外感病因中“虫邪”致病。虫具走窜之性，与风邪相关，古人多认为风、湿热、秽浊等环境易生虫，为虫的重要发生原因，如《医宗金鉴·癣》载：“此证总由风热湿邪，侵袭皮肤，郁久风盛，则化为虫等”，又柯琴说：“虫得酸则静，得辛则伏，得苦则下”，故而中医多用辛散祛风、苦燥祛湿、清热解毒、酸涩及芳香辟秽的物质以驱除病原微生物。
本发明提供了一种抗菌作用显著的中药组合物，所述中药组合物包括黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子；所述中药组合物抑菌效果比单味中药更佳；有助于降低药物使用剂量，降低毒性和细菌耐药性。
发明内容
针对上述技术问题，本发明提供了一种具有抑菌活性的中药组合物，具体包括以下内容：
第一方面，本发明提供了一种具有抑菌活性的中药组合物，所述中药组合物包括以下质量份的组分：黄芩1-2份、金银花1-2份、板蓝根1-2份、连翘1-2份、山楂1-2份、薄荷1-2份、五倍子1-2份。
优选地，所述中药组合物包括以下质量份的组分：黄芩2份、金银花1份、板蓝根2份、连翘2份、山楂1份、薄荷1份、五倍子2份。
优选地，所述中药组合物还包括以下质量份的组分：五味子1-2份、肉桂1-2份、白芍1-2份。
优选地，包括以下质量份的组分：黄芩2份、金银花1份、板蓝根2份、连翘2份、山楂1份、薄荷1份、五倍子2份、五味子1份、肉桂1份、白芍1份。
第二方面，本发明提供了一种上述第一方面所述的中药组合物的制备方法，所述方法为：取中药组合物加水煮沸；过滤；取滤液，加热浓缩即得。
优选地，所述方法包括以下步骤：
(1)取中药组合物，加十倍量蒸馏水，武火加热至沸腾然后文火加热，时间持续1h；
(2)过滤，取药渣，加入十倍量蒸馏水，冲回复步骤(1)；
(3)过滤合并滤液，加热浓缩至1g/mL，室温放置24h，离心取上清液，高压灭菌即得。
第三方面，本发明提供了一种上述第一方面所述的中药组合物在制备抗菌药物中的应用。
第四方面，本发明提供了一种上述第一方面所述中药组合物加入药学上可接受的载体制成药学上可接受的任一剂型。
优选地，所述剂型包括片剂、注射剂、口服液、喷雾剂。
第五方面，本发明提供了一种上述第一方面所述的中药组合物在制备洗手液、抑菌香皂、化妆品、保健食品、健康用品中的应用。
本发明的有益效果是：①本发明提供了一种具有抗菌活性的中药组合物，包括黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子；②所述中药组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌均有显著的抑菌效果，且其抑菌效果比单味中药更佳；有助于降低药物使用剂量，降低毒性和细菌耐药性；③所述中药组合物抑菌效果较好，稳定性高，同时操作简单、生产成本低、提取率高、生产应用方便；④提供的中药组合物可用于制备消杀产品，包括具有抑菌功能的洗手液、喷雾剂、抑菌香皂等，不但拓展了中药开发应用的范围与深度，同时将中药抑菌成分应用于产品中，该技术的市场应用前景广阔必会受到广大消费者青睐。
附图说明
图1制备的喷雾剂。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的保护范围进行详细说明，但应当指出的是，本发明的保护范围并不限于以下实施例。凡本领域技术人员按照本发明的思路在现有技术上通过逻辑分析、推断和实验得出的技术方案，均属于本发明所请求保护的范围。
实施例1单味中药抑菌效果检测
1.单味中药提取物的制备：
分别称取50g黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子、五味子、肉桂、白芍，放入烧杯中加十倍量蒸馏水，武火加热至沸腾然后文火加热，不断搅拌持续1h；用8层纱布过滤；取药渣，再倒入十倍量蒸馏水，步骤同上；过滤合并滤液，并加热浓缩至1g/mL，室温放置24h，1000r/min离心5min，取上清液，高压灭菌，得到的中药材母液置4℃中保存。
2.抑菌圈检测
采用琼脂平板打孔法，取100μL供试菌均匀的涂布于营养琼脂上，放置15min后在营养琼脂上用直径6mm的打孔器均匀打孔，除去琼脂块，将含生药量1g/mL的中药或复方提取液加于孔中以药液满而不溢为原则，每板5孔，孔间距>20mm，设置蒸馏水为阴性对照于中心，并设置阳性对照，37℃培养24h，测定抑菌圈直径，观察结果，试验重复3次。抑菌直径≥20mm为极敏，15～19mm为高度敏感，10～14mm为中度敏感，10mm以下为低度敏感。
结果如表1所示，上述单味中药中，只有五倍子、黄芩、金银花和山楂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌具有一定的抑菌活性，而板蓝根、连翘和薄荷对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑菌活性不敏感。
表1不同中药水提物对检测菌的抑菌圈直径(mm)
3.MIC及MBC测定
用打孔器将滤纸圆形滤纸片，高压灭菌后备用；根据圆形滤纸片内药物的不同浓度采用试管二倍稀释法配制药物原液，原液浓度为：500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.91mg/mL，将不同浓度药液浸满圆形滤纸片；取100μL供试菌液至已成型的空白琼脂平板上，用涂菌棒涂布均匀，待平板上的菌悬液完全吸收后开始依次将浸满了不同药液浓度的滤纸片平整贴于琼脂平板上。并于贴好滤纸片后的15min内置37℃经紫外灭菌后的培养箱内培养18～24h后，读取并测量结果。以滤纸片周围不产生抑菌圈(即抑制被测细菌生长)的最低药物原液浓度为该药液的最低抑菌浓度(MIC)，将所有K-B纸片法上有抑菌圈产生的培养液浓度接种于琼脂平板，37℃培养24h，以菌落数不超过5个的最低药物质量浓度为该药物的最小杀菌质量浓度MBC(即杀死某种菌株的药物最低浓度的统称)。
结果如表2所示，虽然上述单味中药中五倍子、黄芩、金银花和山楂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均在500mg/mL及500mg/mL以下有抑菌活性，其余单味药抑菌效果不明显；但除五倍子外，其余单味中药对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的MBC均高于500mg/mL，杀菌效果不显著。
表2单味中药对不同菌中药MIC、MBC测定结果(mg/mL)
实施例2中药配方筛选
1.不同配比中药组合物的制备
按下表3所述质量比，配置不同配比的中药组合物。
表3中药组合物中各单味中药的质量配比
连翘
山楂
板蓝根
五倍子
金银花
黄芩
薄荷
中药组合物1
1
1
1
1
1
1
1
中药组合物2
1
1
1
2
2
2
2
中药组合物3
1
2
2
1
1
2
2
中药组合物4
1
2
2
2
2
1
1
中药组合物5
2
1
2
1
2
1
2
中药组合物6
2
1
2
2
1
2
1
中药组合物7
2
2
1
1
2
2
1
中药组合物8
2
2
1
2
1
1
2
2.正交实验结果
大肠杆菌的抑菌活性的正交实验结果如表4所示，由黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子按不同比例组合的中药组合物(生药量剂为1g/mL)对大肠杆菌的抑菌圈均显著高于黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子单味中药(生药量剂1g/mL)对大肠杆菌的抑菌圈，能够显著抑制大肠杆菌，具有显著的抑菌活性。
表4 L7(28)正交试验表及对大肠杆菌的抑制效果
金黄色葡萄球菌的抑菌活性的正交实验结果如表5所示，由黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子按不同比例组合的中药组合物(生药量剂1g/mL)对金黄色葡萄球菌的抑菌圈均显著高于黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷单味中药(生药量剂1g/mL)对金黄色葡萄球菌的抑菌圈，能够显著抑制金黄色葡萄球菌，具有显著的抑菌活性。
表5 L7(28)正交试验表及对金黄色葡萄球菌的抑制效果
由表4和表5可知，各因素影响大肠杆菌抑菌效果关系为A＞D＞F＞G＞C＞B＝E；B、E对大肠杆菌的抑菌作用效果较弱，A、D对大肠杆菌的抑菌作用较强各因素影响金黄色葡萄球菌抑菌效果的关系为D＞C＞F＞A＞B＝E＝G。因此，B、E对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌作用效果较弱，而A、D对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果起到一定作用。通过筛选，可得到的最优配比为A2B1C2D2E1F2G1，即连翘、山楂、板蓝根、五倍子、金银花、黄芩、薄荷的质量比为、2：1：2：2：1：2：1，即上述所述的中药组合物6，其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有显著的抑菌效果。
3.MIC和MBC测定
用打孔器将滤纸圆形滤纸片，高压灭菌后备用；根据圆形滤纸片内药物的不同浓度采用试管二倍稀释法配制药物原液，原液浓度为：500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.91mg/mL，将不同浓度药液浸满圆形滤纸片；取100μL供试菌液至已成型的空白琼脂平板上，用涂菌棒涂布均匀，待平板上的菌悬液完全吸收后开始依次将浸满了不同药液浓度的滤纸片平整贴于琼脂平板上。并于贴好滤纸片后的15min内置37℃经紫外灭菌后的培养箱内培养18～24h后，读取并测量结果。以滤纸片周围不产生抑菌圈(即抑制被测细菌生长)的最低药物原液浓度为该药液的最低抑菌浓度(MIC)，将所有K-B纸片法上有抑菌圈产生的培养液浓度接种于琼脂平板，37℃培养24h，以菌落数不超过5个的最低药物质量浓度为该药物的最小杀菌质量浓度MBC(即杀死某种菌株的药物最低浓度的统称)。
结果如表6所示，由连翘、山楂、板蓝根、五倍子、金银花、黄芩、薄荷的质量比为2：1：2：2：1：2：1组成的中药组合物6(黄芩10mg、金银花5mg、板蓝根10mg、连翘10mg、山楂5mg、薄荷5mg、五倍子10mg)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为1.95mg/mL和3.9mg/mL；MBC为7.81mg/mL和31.25mg/mL，在具有显著抑菌效果的同时，又显著降低了MIC和MBC。
表6中药组合物6对不同菌的MIC、MBC测定(mg/mL)
实施例3添加五味子、肉桂、白芍后的中药组合物的抑菌活性
1.不同配比中药组合物的制备
中药组合物9：组方：黄芩10mg、金银花5mg、板蓝根10mg、连翘10mg、山楂5mg、薄荷5mg、五倍子10mg、五味子10mg、肉桂5mg、白芍5mg；
中药组合物10：组方：黄芩10mg、金银花5mg、板蓝根10mg、连翘10mg、山楂5mg、薄荷5mg、五倍子10mg、五味子5mg、肉桂5mg、白芍5mg。
2.抑菌圈检测
采用琼脂平板打孔法，取100μL供试菌均匀的涂布于营养琼脂上，放置15min后在营养琼脂上用直径6mm的打孔器均匀打孔，除去琼脂块，将含生药量1g/mL的中药复方提取液加于孔中以药液满而不溢为原则，每板5孔，孔间距>20mm，设置蒸馏水为阴性对照于中心，并设置阳性对照，37℃培养24h，测定抑菌圈直径，观察结果，试验重复3次。抑菌直径≥20mm为极敏，15～19mm为高度敏感，10～14mm为中度敏感，10mm以下为低度敏感。
抑菌圈检测结果如表7所示，在黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子的基础上，添加五味子、肉桂和白芍后组成的中药组合物，也具有一定的抑菌效果，其效果与黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子组成的中药组合物的效果相当或更好。
表7中药组合物11、12对不同菌的抑菌圈(mm)
3.MIC及MBC测定
用打孔器将滤纸圆形滤纸片，高压灭菌后备用；根据圆形滤纸片内药物的不同浓度采用试管二倍稀释法配制药物原液，原液浓度为：500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.91mg/mL，将不同浓度药液浸满圆形滤纸片；取100μL供试菌液至已成型的空白琼脂平板上，用涂菌棒涂布均匀，待平板上的菌悬液完全吸收后开始依次将浸满了不同药液浓度的滤纸片平整贴于琼脂平板上。并于贴好滤纸片后的15min内置37℃经紫外灭菌后的培养箱内培养18～24h后，读取并测量结果。以滤纸片周围不产生抑菌圈(即抑制被测细菌生长)的最低药物原液浓度为该药液的最低抑菌浓度(MIC)，将所有K-B纸片法上有抑菌圈产生的培养液浓度接种于琼脂平板，37℃培养24h，以菌落数不超过5个的最低药物质量浓度为该药物的最小杀菌质量浓度MBC(即杀死某种菌株的药物最低浓度的统称)。
结果如表8所示，黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子的基础上，添加五味子、肉桂和白芍后组成的中药组合物，也具有一定的抑菌效果，在具有显著的抑菌效果的同时，显著降低了单味中药的MIC和MBC，其效果与黄芩、金银花、板蓝根、连翘、山楂、薄荷、五倍子组成的中药组合物的抑菌效果相当或更好。
表8中药组合物11、12对不同菌的MIC、MBC(mg/mL)
对比例
1.中药组合物的制备
对比组合物1：黄芩10mg、金银花5mg、板蓝根10mg、五倍子10mg；
对比组合物2：黄芩10mg、金银花5mg、五倍子10mg
对比组合物3：黄芩10mg、五倍子10mg；
对比组合物4：黄芩10mg、金银花5mg、连翘10mg；
2.抑菌圈检测
采用琼脂平板打孔法，取100μL供试菌均匀的涂布于营养琼脂上，放置15min后在营养琼脂上用直径6mm的打孔器均匀打孔，除去琼脂块，将含生药量1g/mL的中药复方提取液加于孔中以药液满而不溢为原则，每板5孔，孔间距>20mm，设置蒸馏水为阴性对照于中心，并设置阳性对照，37℃培养24h，测定抑菌圈直径，观察结果，试验重复3次。抑菌直径≥20mm为极敏，15～19mm为高度敏感，10～14mm为中度敏感，10mm以下为低度敏感。
抑菌圈检测结果如表9所示，对比组合物虽然对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌效果，但其抑菌效果显著低于本发明所述的中药组合物。
表9对比组合物的抑菌圈测定(mm)
3.MIC及MBC测定
用打孔器将滤纸圆形滤纸片，高压灭菌后备用；根据圆形滤纸片内药物的不同浓度采用试管二倍稀释法配制药物原液，原液浓度为：500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.91mg/mL，将不同浓度药液浸满圆形滤纸片；取100μL供试菌液至已成型的空白琼脂平板上，用涂菌棒涂布均匀，待平板上的菌悬液完全吸收后开始依次将浸满了不同药液浓度的滤纸片平整贴于琼脂平板上。并于贴好滤纸片后的15min内置37℃经紫外灭菌后的培养箱内培养18～24h后，读取并测量结果。以滤纸片周围不产生抑菌圈(即抑制被测细菌生长)的最低药物原液浓度为该药液的最低抑菌浓度(MIC)，将所有K-B纸片法上有抑菌圈产生的培养液浓度接种于琼脂平板，37℃培养24h，以菌落数不超过5个的最低药物质量浓度为该药物的最小杀菌质量浓度MBC(即杀死某种菌株的药物最低浓度的统称)。
结果如表10所示，对比组合物虽然对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌效果，但其MIC、MBC均显著高于本发明所述的中药组合物。
表10对比组合物对不同菌的MIC、MBC(mg/mL)
实施例4喷雾剂的制备
1.制备工艺
组方：黄芩10mg、金银花5mg、板蓝根10mg、连翘10mg、山楂5mg、薄荷5mg、五倍子10mg
在剂型及配制工艺研究中，确定剂型为溶液型喷雾剂，并进一步对溶剂、增溶剂、潜溶剂和防腐剂种类与剂量做了文献调研，试验处方为：向75％醇沉过后的中药抑菌液中加入1％吐温-80，5％1，2-丙二醇，0.2％苯甲酸。
喷雾剂的制备工艺为在40℃水浴中，向中药抑菌液中搅拌加入苯甲酸，混合均匀，然后加入吐温-80和1，2-丙二醇，充分搅匀，过滤，滤液加蒸馏水至全量，摇匀，即得。
所制得的抑菌喷雾剂成分天然安全，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌均有较强的抑菌作用，气味为淡淡的中草药芳香、药液呈淡黄且澄清，气雾细密均匀，将具有抑菌活性的中药组合物制成喷雾剂，既有雾化给药的特点和优势，又避免使用抛射剂，即安全又可靠，可长时间悬浮停留，保持空气中中药消毒剂浓度，特别适用于医院、学校等大面积消毒杀菌，不仅具有消毒作用还能净化空气(使尘埃沉降)、湿化、清香空气等多种效果，也适用于皮肤等日常消毒。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种用于阴道的紧致抑菌组合物及制备方法