具体实施方式

本发明公开了一种含有多种保湿舒缓平衡功效成分的舒缓平衡护肤功效的化妆水组合物及其制备方法。该保湿舒缓平衡护肤功效化妆水组合物，包括的原料组分有：

1.0-35.0％的保湿舒缓平衡功效组合物、5-30％的保湿剂、0-30％的皮肤调理剂、0-10％增稠剂、0.3-5％的防腐剂、0.01-2％螯合剂、0.01-1％增溶剂、0.01-1.0％的日用香精、适量的pH调节剂及去离子水余量。

所述保湿舒缓平衡功效组合物是由星芒杉藻提取物、沙漠蔷薇叶细胞提取物、及棕榈酰三肽-5/盐生杜氏藻/透明质酸钠/维他命原B5混合而成。

①星芒杉藻提取物

星芒杉藻提取物富含硫酸多糖，可以有助肌肤修复过程，改善皮肤质感并为干燥的肌肤注满水分，令肌肤更有弹性和更柔嫩。具体而言，星芒杉藻提取物能诱导激活皮肤多功能屏障，调节皮肤湿润度和控制皮肤屏障渗透性，减少皮肤水分流失，补水保湿；促进、调节、改善皮肤的修复过程，维持表皮的动态平衡；全面提升三重皮肤屏障防护功能；具有重要的抗氧化和排毒潜力，可抵抗多种应激环境，构建强效抗氧化屏障。

其制备方法包括以下步骤：

1)选藻类：选取新鲜的星芒杉藻，去除附着于藻叶中的草棍，泥沙等杂质，于75％乙醇溶液中浸泡15～30min，晾干备用；

2)烘干打粉：将步骤1)中预处理过的星芒杉藻置于50～80℃环境中烘干36～48h，至藻类叶中水分含量降至8％以下，取出烘干的星芒杉藻，打粉，过80～200目筛，得到藻粉；

3)泡发、超声：将步骤2)中藻粉与水按1：20的质量比混合拌匀，泡发8h得到混合液，将混合液置于超声波细胞破碎机中，在功率200～500W的条件下超声6～8h得到星芒杉藻超声溶液；

4)酶解发酵：向步骤3)中藻类超声溶液中加柠檬酸，调节溶液pH至4.0～6.0后，向所述藻类超声溶液中加入6×10⁴～8×10⁴U/L果胶酶及0.1×10⁴～1×10⁴U纤维素酶，40～60℃条件下进行酶解3～5小时；将经过酶解的所述藻类超声溶液加热至沸腾，灭酶5～20分钟，冷却至室温，得到藻类酶解液；

5)过滤减压蒸馏收集：将步骤4)中藻类酶解液加入90％乙醇于30℃提取12h后过滤，取滤液减压蒸馏，除去溶液中的乙醇，得到星芒杉藻提取物。

②沙漠蔷薇叶细胞提取物

沙漠蔷薇，又名天宝花，属夹竹桃科，原产东非至阿拉伯半岛南部，分布于突巧斯、阿尔及利亚、摩洛哥等北非国家。沙漠蔷薇喜高温干燥和阳光充足环境，耐酷暑，耐干旱。沙漠蔷薇花形似小喇叭，玫瑰红色，非常艳丽。从沙漠蔷薇的叶子中提取出来的复合精萃能帮助肌肤深入持久保湿，激发肌肤天然的保湿潜能，抵御环境压力及衰老的影响。

沙漠蔷薇叶细胞提取物作用于三个层次，重新推动肌肤的保水能力：促进表皮层的细胞更新，帮助保留水分子，增强水系统。改善和提高真皮层糖胺聚糖的合成。提高透明质酸的合成、保证水份能畅通无阻地从真皮层运输到表皮层。能够减少自由基的生成。抑制自由基造成的细胞功能障碍，包括皮肤失水等。使用植物细胞培养技术进行沙漠玫瑰叶细胞提取，最大程度的保留了细胞活性，且形成天然脂质包裹体，更有利于皮肤的吸收渗透。

其制备方法包括以下步骤：

1)种子细胞采集：

优取2份新鲜的沙漠蔷薇叶，清洗消毒后用10％-30％的次氯酸钠消毒液浸泡20分钟，再用无菌水清洗除去消毒液残留，接着将清洁消毒后的原料放入粉碎机，加入50mL MS培养基后粉碎得到浆液，加入60-100mg/kg的纤维素酶处理3-5小时，经100微米微孔滤器过滤后低速离心分离，弃上清，收集种子细胞；

2)种子细胞培养：

将步骤1)中收集的种子细胞接种至含MS培养基的摇瓶中，于pH 5-6，25℃，100r/min震荡培养48小时，细胞计数20000/mL以上即可停止培养；

3)继代扩大培养：

将步骤2)中培养结束的种子细胞再次接种于MS培养基中，再加入生长素IAA5-10mg/L，果胶酶50-100mg/L，于生物反应器内悬浮培养，搅拌速率100r/min，pH5-6，以0.03m³/s通入无菌氧气，暗培养20-30天，细胞计数45000/mL以上即可停止培养；

4)离心收集得到上清液，沙漠蔷薇叶细胞提取物。

③棕榈酰三肽-5/盐生杜氏藻/透明质酸钠/维他命原B5

棕榈酰三肽-5促进肌肤细胞生长，抑制氧自由基和羟基自由基，促进基质蛋白尤其是胶原蛋白的合成，同时还可能增加弹性蛋白、透明质酸、糖胺聚糖和纤维连接蛋白的生成。盐生杜氏藻是绿藻的一种，作为单细胞有机体，杜氏藻可以在极端炎热和高盐度的条件下生存。作为其自身适应极端条件的方式，杜氏藻细胞可以产生特殊材料帮助其生存。这种特殊材料同样可以帮助人类皮肤再生，可以改良皮肤的新陈代谢，注入重要养分，保持肌肤水润，保护肌肤不受环境因素(辐射和高温)而导致损害，并且减缓皮肤衰老。透明质酸钠是皮肤固有的生物物质，外源性的透明质酸钠是对皮肤内源性透明质酸钠的补充，可渗入皮肤表皮层，促进皮肤营养的供给。同时具有促进表皮细胞的增殖和分化以及清除氧自由基的作用，可促进受伤部位皮肤的再生，修复受损肌肤。此外还具有很强的润滑感和成膜性，可在皮肤表面形成一层薄膜，使皮肤产生良好的光滑感和湿润感，对皮肤起到保护作用。维他命原B5又名泛醇，易渗透角质层，有较强的保湿作用，有助于舒缓皮肤不适、瘙痒，刺激表皮细胞生长。

棕榈酰三肽-5/盐生杜氏藻/透明质酸钠/维他命原B5是合成肽与高效的皮肤生物活性成分结合而来的高品质活性混合物，可形成皮肤屏障有效抵抗外部刺激，同时刺激表皮更新和胶原蛋白合成，协助修复皮肤组织的功能，有效保湿舒缓肌肤，保持健康皮肤状态。

具体的，混合物质量比范围为(2～5):(1～3):(3～6):(1～4)，将2～5份质量的棕榈酰三肽-5、1～3份质量的盐生杜氏藻提取物、3～6份的透明质酸钠和1～4份质量的维他命原B5与0.2份质量的苯氧乙醇、0.8份质量的苯甲酸钠、1份质量的山梨酸钾及0.5份质量的乙基己基甘油混合，在35℃下以1000r/min均质30min即得混合物。

本发明的保湿舒缓平衡功效化妆水组合物是由上述星芒杉藻提取物、沙漠蔷薇叶细胞提取物、及棕榈酰三肽-5/盐生杜氏藻/透明质酸钠/维他命原B5组成，通过组合物内源性和外源性的补水、保湿作用，缓解皮肤干燥状态，改善真皮层质量，保湿作用机理图如图1所示。

组合物各成分协同作用，能促进保湿相关因子的基因表达(图2，对照物为由水94.5％、丙二醇5.0％和乙二醇苯醚0.5％组成的化妆水)，如SPT基因、AQP3基因和HAS3基因。其中，SPT基因调控丝氨酸棕榈酰转移酶的合成，丝氨酸棕榈酰转移酶(SPT)可合成神经酰胺，皮肤中神经鞘脂类的神经酰胺约占角质层脂质总重量的一半，参与表皮屏障功能的形成，形成防止水分丢失的屏障；AQP3基因编码皮肤的水通道蛋白酶，控制着皮肤水分的进出，可以运输皮肤中的水和非极性小分子到表皮，形成屏障层，提升皮肤的保湿能力；HAS3基因位于人第16号染色体q22.1带，编码是透明质酸合成酶的基因之一。透明质酸合成酶是合成人体生命活动中透明质酸极为重要的来源，透明质酸具有良好的保湿效果，透明质酸主要以胶质形式存在于真皮层中，主要负责储水，使皮肤看起来丰满富有弹性。

综上所述，本发明的保湿舒缓平衡功效化妆水组合物高效补水保湿，促进皮肤营养供给，形成皮肤防护屏障，有效抵御外界环境对肌肤的损伤，同时修复受损肌肤，具有舒缓平衡皮肤的作用。

下面列举一部分具体实施例对本发明进行说明，这些实例只用于对本发明作进一步的说明，并不用来限定本发明，不代表对本发明保护范围的限制。其他人根据本发明作出的一些非本质的修改和调整仍属于本发明的保护范围。

如无特别说明，以下的百分比(％)均为质量百分含量。本发明所有的原料成分均为市售产品。

实施例1-4

一种具有保湿舒缓平衡护肤功效的化妆水组合物，实施例1-4原料组分配比含量，如下表1所示。

表1实施例1-4原料组分配比(单位：质量％)

本发明实施例1-4的具有舒缓平衡护肤功效的化妆水的制作工艺方法，可表述如下：

1)将水、尿囊素、EDTA-二钠、柠檬酸、柠檬酸钠、甘油聚醚-26、甘油、甘油丙烯酸酯/丙烯酸共聚物、1，3-丙二醇、聚乙二醇-32、羟苯甲酯加入水相锅，搅拌加热到80-85℃，保温搅拌20-25分钟；

2)开冷却水，搅拌降温至40-45℃时，加入舒缓平衡功效组合物、稻糠提取物、北美金缕梅提取物、聚山梨醇酯-20、聚丙烯酸钠、香精、苯氧乙醇加入乳化锅中，搅拌15-20分钟；

3)继续搅拌冷却至温度低于38℃，停止搅拌，检测合格后，出料。

效果验证试验例

短效保湿效果试验1

1、测试者：33人健康人(20-35岁)，女性；试用实施例1配方。

2、测试部位：前臂内侧；双前臂为正常皮肤，且无皮损、发红、皮屑等不适症状；

3、测试方法：受试者双手前臂内侧各标注1个面积为3cm×3cm的测试区域，1个作为测试样品使用区域，1个作为空白对照区域，2个测试区域分别用胶带剥离15次，使皮肤屏障受损(表现为皮肤经表皮失水率值增加)，样品区使用实施例1。

4、测试仪器：皮肤水分流失测定仪TM300。

5、测试指标：皮肤经表皮失水率。

经皮失水变化率＝(试用后经皮失水率-试用前经皮失水率)/试用前经皮失水率。

6、测试结果如下图3及表2所示：

表2使用实施例1后皮肤经表皮失水率

通过图3及表2的结果看出，相比损伤剥离后即时：使用后10min，样品区域皮肤经表皮失水率显著性减小25.05％，对照区域减小11.14％；使用1天后，样品区域皮肤经表皮失水率显著性减小27.83％，对照区域减小26.53％；使用3天后，样品区域皮肤经表皮失水率显著性减小42.86％，对照区域减小36.77％；使用7天后，样品区域皮肤和对照区域皮肤均恢复正常保湿水平，样品区域经表皮失水率显著性减小37.69％，对照区域减小37.10％。

使用实施例1后，皮肤经皮失水率均有降低。10min时降低效果最为明显，说明具有短效即时的保湿作用，并且在3天内都可以维持经皮失水率降低，说明有较持久的保湿性。从样品结果可以看出，本实施例1使用3天内具有短效保湿效果，7天受损部位已恢复，对照和样品数据接近。

本发明的化妆水组合物具有比较显著的短效保湿效果。

舒缓功效测试试验例2

1、测试者：33人健康人(20-35岁)，女性；试用实施例1配方。2、测试部位：前臂内侧；双前臂为正常皮肤，且无皮损、发红、皮屑等不适症状；

3、测试方法：受试者在温度21±1℃，相对湿度50±5％RH的环境中休息20min，随后实验员测量受试者前臂内侧皮肤血红细胞浓度、皮肤颜色。

实验员在2个测试区域分别用胶带剥离15次，然后实验员测量受试者前臂内侧皮肤血红细胞浓度、皮肤颜色。实验员在样品使用区域涂抹测试样品后立即测量前臂内侧皮肤血红细胞浓度，对照区为空白对照。

在使用后3min、使用后6min、使用后8min、使用后10min、使用后30min、使用后60min、使用后120min，实验员分别测量前臂内侧皮肤血红细胞浓度，使用后10min测试皮肤颜色。

在使用1天后、使用3天后、使用7天后，受试者进行回访，用干面巾纸擦拭前臂后受试者在温度21±1℃，相对湿度50±5％RH的环境中休息20min，实验员测量前臂内侧皮肤皮肤颜色。

4、测试仪器：皮肤颜色测定仪CL400；皮肤血红细胞测定仪TiVi700。

5、测试指标：皮肤颜色，a*值越高，说明皮肤颜色越红；皮肤血红细胞浓度。测量值越大，说明皮肤血红细胞浓度越高。

6、测试结果如下图4-6及表3-4所示：

表3使用实施例1后皮肤颜色a*值

表4使用实施例1后皮肤血红细胞浓度

如图4及表3所示，皮肤颜色a*值相比损伤剥离后即时：使用后10min，样品区域皮肤颜色a*值显著性减小7.26％，对照区域减小3.58％；使用1天后，样品区域皮肤颜色a*值显著性减小21.59％，对照区域显著性减小19.86％；使用3天后，样品区域皮肤颜色a*值显著性减小23.70％，对照区域显著性减小23.91％；使用7天后，样品区域皮肤颜色a*值显著性减小17.32％，对照区域显著性减小16.17％。

数据表明，在使用实施例1即时，剥离损伤区域皮肤颜色恢复效果明显，与对照组相比，实施例1修复损伤速率快。在使用期间，损伤区域皮肤颜色均小于对照区域，说明实施例具有显著的快速褪红效果。

如图5及表4所示，皮肤血红细胞浓度相比损伤剥离后即时：使用后即时，样品区域皮肤血红细胞浓度显著性增加2.42％，对照区域显著性增加1.76％；使用后3min，样品区域皮肤血红细胞浓度显著性增加2.27％，对照区域显著性增加0.93％；使用后6min，样品区域皮肤血红细胞浓度显著性增加1.70％，对照区域无显著性增加0.40％；使用后8min，样品区域皮肤血红细胞浓度显著性增加1.54％，对照区域无显著性增加0.23％；使用后10min，样品区域皮肤血红细胞浓度无显著性增加0.66％，对照区域无显著性减小0.70％；使用后30min，样品区域皮肤血红细胞浓度无显著性减小1.12％，对照区域显著性减小1.86％；使用后60min，样品区域皮肤血红细胞浓度显著性减小3.02％，对照区域显著性减小3.06％；使用后120min，样品区域皮肤血红细胞浓度显著性减小4.36％，对照区域显著性减小3.61％。

数据表明，在使用本发明实施例1后120min，皮肤血红细胞浓度即可恢复至对照区域血红细胞浓度水平，宏观表现为受损区域红肿消退(图6)。

以上数据及图6说明，本发明的化妆水具有显著的修复和舒缓肌肤的效果。

安全性测试试验例3

1、测试人数：30个健康人，男13人，女17人；年龄范围为20-45岁。

2、测试方法：选择面积不超过50mm²，深度约为1mm的合适斑试器，以封闭式斑贴试验方法，将受试物约0.020～0.025mL(g)加于斑试器内。将斑试器贴敷于受试者前臂曲侧，24小时后去除受试物，分别于去除后0.5、24、48小时观察皮肤反应，按《化妆品安全技术规范2015》中皮肤反应分级标准记录其结果。

3、评定标准如下表5：

表5皮肤不良反应分级标准

结果显示：人体皮肤斑贴实验结果显示，30名受试者移除斑贴后3个观察时间点0.5h、24h和48h评分等级均为0分，即30人中0例出现阳性反应，根据《化妆品安全技术规范》(2015年版)中规定，该受试物对本批次受试者不会引起皮肤不良反应。

协同增效试验例4

对照例1-6

一种具有保湿舒缓功效的化妆水组合物的原料配方组成如下表6所示。

表6对照例1-6的原料组分配比(单位：质量％)

对照例1-6的具有保湿和舒缓功效的化妆水的制作工艺方法，可表述如下：

1)将水、尿囊素、EDTA-二钠、柠檬酸、柠檬酸钠、甘油聚醚-26、甘油、甘油丙烯酸酯/丙烯酸共聚物、1，3-丙二醇、聚乙二醇-32、羟苯甲酯加入水相锅，搅拌加热到80-85℃，保温搅拌20-25分钟；

2)开冷却水，搅拌降温至40-45℃时，加入保湿舒缓平衡功效组合物、稻糠提取物、北美金缕梅提取物、聚山梨醇酯-20、聚丙烯酸钠、香精、苯氧乙醇加入乳化锅中，搅拌15-20分钟；

3)继续搅拌冷却至温度低于38℃，停止搅拌，检测合格后，出料。

对上述表1中的实施例1及表6中的对照例1-6进行保湿效果测试及舒缓效果测试，测试结果见图7、图8，图中对照为空白对照。

从图7可以看出，对皮肤经皮失水率减少量排序为：实施例1>对照例3>1>2>4>6>5；

对实施例1及对照例1-6进行舒缓效果测试，测试结果如图8所示：

使用10min后，皮肤颜色a*值减少值按大小排序为：实施例1>对照例3>1>2>4>6>5。

综上所述，保湿舒缓复合物通过组分间的协同作用，具有比较显著保湿、舒缓平衡肌肤的效果，比单独一种、两种成分组合的保湿舒缓效果更明显。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，故凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。