一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法
阅读说明：本技术 一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法 (Quantum dot fluorescence immunochromatography detection method for drug detection ) 是由 刘晓 毛勇辉 施有猛 于 2021-07-30 设计创作，主要内容包括：本发明涉及毒品检测技术领域,具体是一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法,具体包括四大步骤。本发明采用量子点荧光免疫层析方法,通过荧光阅读仪阅读检测线和质控线的荧光值,根据不同浓度毒品抗原的检测线和质控线荧光值的不同,得出检测线和质控线的比值,该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线,进而实现对传统毒品和新型毒品的快速检测,具有检测精准、灵敏度高的特点,应用范围高,适合广泛推广,为打击犯罪分子提供有力证据。(The invention relates to the technical field of drug detection, in particular to a quantum dot fluorescence immunochromatography detection method for drug detection, which specifically comprises four steps. The invention adopts a quantum dot fluorescence immunochromatography method, reads the fluorescence values of a detection line and a quality control line through a fluorescence reader, obtains the ratio of the detection line and the quality control line according to the difference of the fluorescence values of the detection line and the quality control line of drug antigens with different concentrations, and makes a standard curve corresponding to the concentration of the drug antigens, thereby realizing the rapid detection of the traditional drugs and the novel drugs.)
技术领域
本发明涉及毒品检测技术领域，具体是一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法。
背景技术
毒品一般是指使人形成瘾癖的药物，这里的药物一词是个广义的概念，主要指吸毒者滥用的鸦片、海洛因、冰毒等。
为了打击犯罪分子，通常需要对吸食毒品的涉案人员进行检测，目前使用较多的是金免疫层析和酶联免疫吸附法，但是这两种方法操作繁琐，对环境和操作人员的要求高，同时两者的灵敏度和精确度交底，进而经常导致吸食轻量毒品的不法分子脱网。因此，本领域技术人员提供了一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，以解决上述
背景技术
中提出的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，涉及样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫、PVC底板；
其检测方法如下：
步骤1：将毒品抗原制成液体并喷射在结合垫上，于35-38℃下干燥后形成量子点标记抗体；
步骤2：将SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体分别包被于NC膜上，于40-45℃下干燥后分别形成检测线和质控线；
步骤3：将样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫按顺序组装于PVC底板上，组合成量子点免疫层析试纸；
步骤4：将样品溶液滴在样品垫上，在毛细虹吸作用下沿层析方向移动，在到达检测线和质控线时，通过荧光阅读仪阅读检测线和质控线的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线和质控线荧光值的不同，得出检测线和质控线的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现毒品的检测。
作为本发明更进一步的方案：所述结合垫采用聚酯膜荧光垫。
作为本发明更进一步的方案：毒品抗原的制备方法如下：
S1、取50mg的BSA溶于0.13mol/L的NaHCO3中，制得BSA活化液，测定pH值为7.6；
S1、取1mg的毒品抗毒分子、1.073mg二环己基碳二亚胺、0.598mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解于无水四氢呋喃中，在30-40℃下振荡24h后，于4000r/min下离心15min；
S1、离心后采用无水四氢呋喃洗涤沉淀2-3次，取上清液Ⅰ，待上清液Ⅰ中四氢呋喃挥发完全后，将残留物溶于0.2ml的二甲基甲酰胺中，沉淀后取上清液Ⅱ；
S1、将待上清液Ⅰ与上清液Ⅱ合并后缓慢滴入BSA活化液中，置入震荡器上，于15-25℃下震荡4h，进一步纯化得到毒品抗原。
作为本发明更进一步的方案：所述毒品抗毒分子采用吗啡抗体、冰毒抗体、K粉抗体或可卡因抗体。
作为本发明更进一步的方案：所述SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体在使用前需采用缓冲液稀释至浓度为0.3-0.4mg/mL。
作为本发明更进一步的方案：所述缓冲液采用MES，pH值为4.5-5。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明采用量子点荧光免疫层析方法，通过荧光阅读仪阅读检测线和质控线的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线和质控线荧光值的不同，得出检测线和质控线的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现对传统毒品和新型毒品的快速检测，具有检测精准、灵敏度高的特点，应用范围高，适合广泛推广，为打击犯罪分子提供有力证据。
附图说明
图1为一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法中量子点免疫层析试纸的结构示意图。
图中：1、PVC底板；2、样品垫；3、结合垫；4、质控线；5、吸水垫；6、检测线；7、NC膜。
具体实施方式
实施例1
请参阅图1，本发明实施例中，一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，涉及样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5、PVC底板1；
其检测方法如下：
步骤1：将毒品抗原制成液体并喷射在结合垫3上，于35℃下干燥后形成量子点标记抗体；
步骤2：将SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体分别包被于NC膜7上，于40℃下干燥后分别形成检测线6和质控线4；
步骤3：将样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5按顺序组装于PVC底板1上，组合成量子点免疫层析试纸；
步骤4：将样品溶液滴在样品垫2上，在毛细虹吸作用下沿层析方向移动，在到达检测线6和质控线4时，通过荧光阅读仪阅读检测线6和质控线4的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线6和质控线4荧光值的不同，得出检测线6和质控线4的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现毒品的检测。
进一步，结合垫3采用聚酯膜荧光垫。
进一步，毒品抗原的制备方法如下：
S1、取50mg的BSA溶于0.13mol/L的NaHCO3中，制得BSA活化液，测定pH值为7.6；
S1、取1mg的毒品抗毒分子、1.073mg二环己基碳二亚胺、0.598mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解于无水四氢呋喃中，在30℃下振荡24h后，于4000r/min下离心15min；
S1、离心后采用无水四氢呋喃洗涤沉淀2-3次，取上清液Ⅰ，待上清液Ⅰ中四氢呋喃挥发完全后，将残留物溶于0.2ml的二甲基甲酰胺中，沉淀后取上清液Ⅱ；
S1、将待上清液Ⅰ与上清液Ⅱ合并后缓慢滴入BSA活化液中，置入震荡器上，于15℃下震荡4h，进一步纯化得到毒品抗原。
进一步，毒品抗毒分子采用吗啡抗体。
进一步，SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体在使用前需采用缓冲液稀释至浓度为0.3mg/mL。
进一步，缓冲液采用MES，pH值为4.5-5。
测试例1
测试组别：实施例1、参考例1(吗啡胶体金免疫层析试纸)、参考例2(酶联免疫吸附法)；
测试人员：收集吸食吗啡人员毛发样本150份，分为3组(每组50人)；
测试方法：将唾液/血液/尿液/毛发样本，(毛发样本需置入毛发消解液中，震荡45S)分别通过3组产品进行检测；
测试结果如下：
项目
样本数
检出人数
实施例1
50人
50
参考例1
50人
26
参考例2
50人
28
结合上述数据可以得出本实施例1在针对吗啡毒品检测时，准确率均高于参考例1和参考例2，为抓取犯罪分子提供有力证据。
实施例2
请参阅图1，本发明实施例中，一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，涉及样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5、PVC底板1；
其检测方法如下：
步骤1：将毒品抗原制成液体并喷射在结合垫3上，于36℃下干燥后形成量子点标记抗体；
步骤2：将SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体分别包被于NC膜7上，于41℃下干燥后分别形成检测线6和质控线4；
步骤3：将样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5按顺序组装于PVC底板1上，组合成量子点免疫层析试纸；
步骤4：将样品溶液滴在样品垫2上，在毛细虹吸作用下沿层析方向移动，在到达检测线6和质控线4时，通过荧光阅读仪阅读检测线6和质控线4的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线6和质控线4荧光值的不同，得出检测线6和质控线4的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现毒品的检测。
进一步，结合垫3采用聚酯膜荧光垫。
进一步，毒品抗原的制备方法如下：
S1、取50mg的BSA溶于0.13mol/L的NaHCO3中，制得BSA活化液，测定pH值为7.6；
S1、取1mg的毒品抗毒分子、1.073mg二环己基碳二亚胺、0.598mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解于无水四氢呋喃中，在35℃下振荡24h后，于4000r/min下离心15min；
S1、离心后采用无水四氢呋喃洗涤沉淀2-3次，取上清液Ⅰ，待上清液Ⅰ中四氢呋喃挥发完全后，将残留物溶于0.2ml的二甲基甲酰胺中，沉淀后取上清液Ⅱ；
S1、将待上清液Ⅰ与上清液Ⅱ合并后缓慢滴入BSA活化液中，置入震荡器上，于18℃下震荡4h，进一步纯化得到毒品抗原。
进一步，毒品抗毒分子采用冰毒抗体。
进一步，SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体在使用前需采用缓冲液稀释至浓度为0.38mg/mL。
进一步，缓冲液采用MES，pH值为4.5-5。
测试例2
测试组别：实施例1、参考例1(冰毒胶体金免疫层析试纸)、参考例2(酶联免疫吸附法)；
测试人员：收集吸食冰毒人员毛发样本150份，分为3组(每组50人)；
测试方法：将唾液/血液/尿液/毛发样本，(毛发样本需置入毛发消解液中，震荡45S)分别通过3组产品进行检测；
测试结果如下：
项目
样本数
检出人数
实施例1
50人
50
参考例1
50人
18
参考例2
50人
23
结合上述数据可以得出本实施例2在针对冰毒毒品检测时，准确率均高于参考例1和参考例2，为抓取犯罪分子提供有力证据。
实施例3
请参阅图1，本发明实施例中，一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，涉及样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5、PVC底板1；
其检测方法如下：
步骤1：将毒品抗原制成液体并喷射在结合垫3上，于38℃下干燥后形成量子点标记抗体；
步骤2：将SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体分别包被于NC膜7上，于43℃下干燥后分别形成检测线6和质控线4；
步骤3：将样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5按顺序组装于PVC底板1上，组合成量子点免疫层析试纸；
步骤4：将样品溶液滴在样品垫2上，在毛细虹吸作用下沿层析方向移动，在到达检测线6和质控线4时，通过荧光阅读仪阅读检测线6和质控线4的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线6和质控线4荧光值的不同，得出检测线6和质控线4的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现毒品的检测。
进一步，结合垫3采用聚酯膜荧光垫。
进一步，毒品抗原的制备方法如下：
S1、取50mg的BSA溶于0.13mol/L的NaHCO3中，制得BSA活化液，测定pH值为7.6；
S1、取1mg的毒品抗毒分子、1.073mg二环己基碳二亚胺、0.598mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解于无水四氢呋喃中，在35℃下振荡24h后，于4000r/min下离心15min；
S1、离心后采用无水四氢呋喃洗涤沉淀2-3次，取上清液Ⅰ，待上清液Ⅰ中四氢呋喃挥发完全后，将残留物溶于0.2ml的二甲基甲酰胺中，沉淀后取上清液Ⅱ；
S1、将待上清液Ⅰ与上清液Ⅱ合并后缓慢滴入BSA活化液中，置入震荡器上，于22℃下震荡4h，进一步纯化得到毒品抗原。
进一步，毒品抗毒分子采用K粉抗体。
进一步，SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体在使用前需采用缓冲液稀释至浓度为0.46mg/mL。
进一步，缓冲液采用MES，pH值为4.5-5。
测试例3
测试组别：实施例1、参考例1(K粉胶体金免疫层析试纸)、参考例2(酶联免疫吸附法)；
测试人员：收集吸食K粉人员毛发样本150份，分为3组(每组50人)；
测试方法：将唾液/血液/尿液/毛发样本，(毛发样本需置入毛发消解液中，震荡45S)分别通过3组产品进行检测；
测试结果如下：
项目
样本数
检出人数
实施例1
50人
47
参考例1
50人
32
参考例2
50人
15
结合上述数据可以得出本实施例3在针对K粉毒品检测时，准确率均高于参考例1和参考例2，为抓取犯罪分子提供有力证据。
实施例4
请参阅图1，本发明实施例中，一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法，涉及样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5、PVC底板1；
其检测方法如下：
步骤1：将毒品抗原制成液体并喷射在结合垫3上，于38℃下干燥后形成量子点标记抗体；
步骤2：将SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体分别包被于NC膜7上，于45℃下干燥后分别形成检测线6和质控线4；
步骤3：将样品垫2、结合垫3、NC膜7、吸水垫5按顺序组装于PVC底板1上，组合成量子点免疫层析试纸；
步骤4：将样品溶液滴在样品垫2上，在毛细虹吸作用下沿层析方向移动，在到达检测线6和质控线4时，通过荧光阅读仪阅读检测线6和质控线4的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线6和质控线4荧光值的不同，得出检测线6和质控线4的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现毒品的检测。
进一步，结合垫3采用聚酯膜荧光垫。
进一步，毒品抗原的制备方法如下：
S1、取50mg的BSA溶于0.13mol/L的NaHCO3中，制得BSA活化液，测定pH值为7.6；
S1、取1mg的毒品抗毒分子、1.073mg二环己基碳二亚胺、0.598mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解于无水四氢呋喃中，在40℃下振荡24h后，于4000r/min下离心15min；
S1、离心后采用无水四氢呋喃洗涤沉淀2-3次，取上清液Ⅰ，待上清液Ⅰ中四氢呋喃挥发完全后，将残留物溶于0.2ml的二甲基甲酰胺中，沉淀后取上清液Ⅱ；
S1、将待上清液Ⅰ与上清液Ⅱ合并后缓慢滴入BSA活化液中，置入震荡器上，于25℃下震荡4h，进一步纯化得到毒品抗原。
进一步，毒品抗毒分子采用可卡因抗体。
进一步，SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体在使用前需采用缓冲液稀释至浓度为0.5mg/mL。
进一步，缓冲液采用MES，pH值为4.5-5。
测试例4
测试组别：实施例1、参考例1(可卡因胶体金免疫层析试纸)、参考例2(酶联免疫吸附法)；
测试人员：收集吸食可卡因人员毛发样本150份，分为3组(每组50人)；
测试方法：将唾液/血液/尿液/毛发样本，(毛发样本需置入毛发消解液中，震荡45S)分别通过3组产品进行检测；
测试结果如下：
项目
样本数
检出人数
实施例1
50人
49
参考例1
50人
19
参考例2
50人
31
结合上述数据可以得出本实施例4在针对可卡因毒品检测时，准确率均高于参考例1和参考例2，为抓取犯罪分子提供有力证据。
综上所述：本发明采用量子点荧光免疫层析方法，通过荧光阅读仪阅读检测线和质控线的荧光值，根据不同浓度毒品抗原的检测线和质控线荧光值的不同，得出检测线和质控线的比值，该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线，进而实现对传统毒品和新型毒品的快速检测，具有检测精准、灵敏度高的特点，应用范围高，适合广泛推广，为打击犯罪分子提供有力证据。
以上所述的，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种新型冠状病毒肺炎重症区分与疗效评价系统