具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：

本发明实施例提供一种子宫宫膜修复凝胶，包括以下组分，按重量计算：磷酸和磷酸氢二钠所组成的缓冲液15份，缓冲液配比磷酸和磷酸氢二钠的含量，使得缓冲液的pH的范围为7～8，生理周期中期宫颈分泌液pH为7～8.5,保证药物与体液环境一致。另外正常阴道pH小于4.5，配置缓冲液，使得凝胶给药时不受阴道酸性环境影响，可长效保持相对稳定的pH，提高凝胶作用的效果；

壳寡糖纳米银2份。纳米银具有强效且持久抗菌性，由于粒径小比表面积大，易团聚沉降影响抗菌稳定性。壳寡糖为壳聚糖经生物酶解或化学降解技术得到的一种聚合度在2～20之间寡糖，具有抗氧化、保护细胞和增强免疫等生物活性，且水溶性好易于配制和人体吸收。壳寡糖也具有一定抑菌消炎作用，但比较有限。以壳寡糖接枝硫辛酸得到稳定性良好的壳寡糖硫辛酸聚合物，然后壳寡糖硫辛酸聚合物中的二硫键在纳米银表面进行共价螯合，对纳米银粒子进行表面改性修饰，得到了性能稳定的壳寡糖纳米银。壳寡糖纳米银将纳米银和壳寡糖的抗菌性协同，提高抗菌效率，同时也引入壳寡糖的生物活性作用；

甘油5份，甘油对人体无生毒性，可提高药物对皮肤的渗透能力，提高药效，同时促进维生素等的溶解，同时甘油润滑能力好，若身体产生排异，可以将修复凝胶从体内排出，也促进损坏的组织排出体外；

脂氧素0.3份，现有的研究中，脂氧素治疗炎性或自体免疫疾病有作用，对于子宫宫膜损伤修复中，可以降低发炎的几率；

维生素C 0.4份，维生素C为抗体及胶原形成，组织修补(包括某些氧化还原作用)，维持免疫功能，保持血管的完整，促进非血红素铁吸收等所必需，可以提高伤口的修复效率；

维生素B₂ 0.1份，维生素B2的主要生理功用是作为辅酶促进代谢，同时具有消炎的作用。

所述修复凝胶的制备方向如下：

缓冲液的配置如下内容：在配置容器中加入去离子水，然后加入磷酸和磷酸氢二钠，待溶液恢复常温后，使用试纸检测溶液的pH，再添加入磷酸和磷酸氢二钠，满足所需的pH后，进行过滤，所得滤液即为缓冲液，备用；

壳寡糖纳米银制备如下内容：1)将壳寡糖和硫辛酸用EDC[1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐]和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)交联得壳寡糖硫辛酸聚合物，首先配制5％的壳寡糖水溶液，然后加入1％EDC和0.5％NHS，再取1％硫辛酸溶于15倍体积比的无水乙醇至完全溶解后加入前述溶液，40℃水浴搅拌24h，搅拌结束后置于截留分子量2000Da透析袋中用去离子水透析3天，每12h换水一次，透析截留物加入无水乙醇旋蒸，然后冷冻干燥的壳寡糖硫辛酸聚合物；2)纳米银溶液的制备，取1mmol/L硝酸银溶液10份和401mmol/L柠檬酸钠溶液2份混合后缓慢滴加到30份10mmol/L硼氢化钠溶液中快速搅拌30min，陈化2h得到纳米银溶液；3)将前面冻干的壳寡糖硫辛酸聚合物配制成2mg/mL水溶液，取20份壳寡糖硫辛酸聚合物溶液缓慢滴加到上一步制备的纳米银溶液中，快速搅拌后置于截留分子量10000Da透析袋中透析，最后冷冻干燥即得壳寡糖修饰的纳米银。

在室温常压下向缓冲液中依次加入甘油、维生素C、维生素B₂、脂氧素均匀搅拌后，再加入壳寡糖纳米银充分搅拌后获得修复凝胶。

缓冲液配比磷酸和磷酸氢二钠的含量，使得缓冲液的pH的范围为7～8。

实施例二：

本发明实施例提供一种子宫宫膜修复凝胶，包括以下组分，按重量计算：磷酸和磷酸氢二钠所组成的缓冲液20份，缓冲液配比磷酸和磷酸氢二钠的含量，使得缓冲液的pH的范围为7～8，生理周期中期宫颈分泌液pH为7～8.5,保证药物与体液环境一致。另外正常阴道pH小于4.5，配置缓冲液，使得凝胶给药时不受阴道酸性环境影响，可长效保持相对稳定的pH，提高凝胶作用的效果；

壳寡糖纳米银3份。纳米银具有强效且持久抗菌性，由于粒径小比表面积大，易团聚沉降影响抗菌稳定性。壳寡糖为壳聚糖经生物酶解或化学降解技术得到的一种聚合度在2～20之间寡糖，具有抗氧化、保护细胞和增强免疫等生物活性，且水溶性好易于配制和人体吸收。壳寡糖也具有一定抑菌消炎作用，但比较有限。以壳寡糖接枝硫辛酸得到稳定性良好的壳寡糖硫辛酸聚合物，然后壳寡糖硫辛酸聚合物中的二硫键在纳米银表面进行共价螯合，对纳米银粒子进行表面改性修饰，得到了性能稳定的壳寡糖纳米银。壳寡糖纳米银将纳米银和壳寡糖的抗菌性协同，提高抗菌效率，同时也引入壳寡糖的生物活性作用；

甘油5份，甘油对人体无生毒性，可提高药物对皮肤的渗透能力，提高药效，同时促进维生素等的溶解，同时甘油润滑能力好，若身体产生排异，可以将修复凝胶从体内排出，也促进损坏的组织排出体外；

脂氧素0.2份，现有的研究中，脂氧素治疗炎性或自体免疫疾病有作用，对于子宫宫膜损伤修复中，可以降低发炎的几率；

维生素C 0.2份，维生素C为抗体及胶原形成，组织修补(包括某些氧化还原作用)，维持免疫功能，保持血管的完整，促进非血红素铁吸收等所必需，可以提高伤口的修复效率；

维生素B₂ 0.2份，维生素B2的主要生理功用是作为辅酶促进代谢，同时具有消炎的作用。

所述修复凝胶的制备方向如下：

缓冲液的配置如下内容：在配置容器中加入去离子水，然后加入磷酸和磷酸氢二钠，待溶液恢复常温后，使用试纸检测溶液的pH，再添加入磷酸和磷酸氢二钠，满足所需的pH后，进行过滤，所得滤液即为缓冲液，备用；

壳寡糖纳米银制备如下内容：1)将壳寡糖和硫辛酸用EDC[1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐]和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)交联得壳寡糖硫辛酸聚合物，首先配制5％的壳寡糖水溶液，然后加入1％EDC和0.5％NHS，再取1％硫辛酸溶于15倍体积比的无水乙醇至完全溶解后加入前述溶液，40℃水浴搅拌24h，搅拌结束后置于截留分子量2000Da透析袋中用去离子水透析3天，每12h换水一次，透析截留物加入无水乙醇旋蒸，然后冷冻干燥的壳寡糖硫辛酸聚合物；2)纳米银溶液的制备，取1mmol/L硝酸银溶液10份和401mmol/L柠檬酸钠溶液2份混合后缓慢滴加到30份10mmol/L硼氢化钠溶液中快速搅拌30min，陈化2h得到纳米银溶液；3)将前面冻干的壳寡糖硫辛酸聚合物配制成2mg/mL水溶液，取20份壳寡糖硫辛酸聚合物溶液缓慢滴加到上一步制备的纳米银溶液中，快速搅拌后置于截留分子量10000Da透析袋中透析，最后冷冻干燥即得壳寡糖修饰的纳米银。

在室温常压下向缓冲液中依次加入甘油、维生素C、维生素B₂、脂氧素均匀搅拌后，再加入壳寡糖纳米银充分搅拌后获得修复凝胶。

缓冲液配比磷酸和磷酸氢二钠的含量，使得缓冲液的pH的范围为7～8。

实施例三：

本发明实施例提供一种子宫宫膜修复凝胶，包括以下组分，按重量计算：磷酸和磷酸氢二钠所组成的缓冲液25份，缓冲液配比磷酸和磷酸氢二钠的含量，使得缓冲液的pH的范围为7～8，生理周期中期宫颈分泌液pH为7～8.5,保证药物与体液环境一致。另外正常阴道pH小于4.5，配置缓冲液，使得凝胶给药时不受阴道酸性环境影响，可长效保持相对稳定的pH，提高凝胶作用的效果；

壳寡糖纳米银5份，纳米银具有强效且持久抗菌性，由于粒径小比表面积大，易团聚沉降影响抗菌稳定性。壳寡糖为壳聚糖经生物酶解或化学降解技术得到的一种聚合度在2～20之间寡糖，具有抗氧化、保护细胞和增强免疫等生物活性，且水溶性好易于配制和人体吸收。壳寡糖也具有一定抑菌消炎作用，但比较有限。以壳寡糖接枝硫辛酸得到稳定性良好的壳寡糖硫辛酸聚合物，然后壳寡糖硫辛酸聚合物中的二硫键在纳米银表面进行共价螯合，对纳米银粒子进行表面改性修饰，得到了性能稳定的壳寡糖纳米银。壳寡糖纳米银将纳米银和壳寡糖的抗菌性协同，提高抗菌效率，同时也引入壳寡糖的生物活性作用；

甘油5份，甘油对人体无生毒性，可提高药物对皮肤的渗透能力，提高药效，同时促进维生素等的溶解，同时甘油润滑能力好，若身体产生排异，可以将修复凝胶从体内排出，也促进损坏的组织排出体外；

脂氧素0.2份，现有的研究中，脂氧素治疗炎性或自体免疫疾病有作用，对于子宫宫膜损伤修复中，可以降低发炎的几率；

维生素C 0.2份，维生素C为抗体及胶原形成，组织修补(包括某些氧化还原作用)，维持免疫功能，保持血管的完整，促进非血红素铁吸收等所必需，可以提高伤口的修复效率；

维生素B₂ 0.3份，维生素B2的主要生理功用是作为辅酶促进代谢，同时具有消炎的作用。

所述修复凝胶的制备方向如下：

缓冲液的配置如下内容：在配置容器中加入去离子水，然后加入磷酸和磷酸氢二钠，待溶液恢复常温后，使用试纸检测溶液的pH，再添加入磷酸和磷酸氢二钠，满足所需的pH后，进行过滤，所得滤液即为缓冲液，备用；

壳寡糖纳米银制备如下内容：1)将壳寡糖和硫辛酸用EDC[1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐]和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)交联得壳寡糖硫辛酸聚合物，首先配制5％的壳寡糖水溶液，然后加入1％EDC和0.5％NHS，再取1％硫辛酸溶于15倍体积比的无水乙醇至完全溶解后加入前述溶液，40℃水浴搅拌24h，搅拌结束后置于截留分子量2000Da透析袋中用去离子水透析3天，每12h换水一次，透析截留物加入无水乙醇旋蒸，然后冷冻干燥的壳寡糖硫辛酸聚合物；2)纳米银溶液的制备，取1mmol/L硝酸银溶液10份和401mmol/L柠檬酸钠溶液2份混合后缓慢滴加到30份10mmol/L硼氢化钠溶液中快速搅拌30min，陈化2h得到纳米银溶液；3)将前面冻干的壳寡糖硫辛酸聚合物配制成2mg/mL水溶液，取20份壳寡糖硫辛酸聚合物溶液缓慢滴加到上一步制备的纳米银溶液中，快速搅拌后置于截留分子量10000Da透析袋中透析，最后冷冻干燥即得壳寡糖修饰的纳米银。

在室温常压下向缓冲液中依次加入甘油、维生素C、维生素B₂、脂氧素均匀搅拌后，再加入壳寡糖纳米银充分搅拌后获得修复凝胶。

缓冲液配比磷酸和磷酸氢二钠的含量，使得缓冲液的pH的范围为7～8。

实施例四：

选取若干只雌鼠，雌鼠的体重为250±20g，并在培养3～7天，在老鼠的饲料中加入淫羊藿，促进老鼠发情，用于提高繁殖系统的活跃度。

去除饲养中活力差的雌鼠，然后进行分组，每组至少随机选取5只雌鼠。使用机械刮宫法形成雌鼠机械性子宫内膜损伤：首先使用10％水合氯醛麻醉，以75％酒精对下腹部消毒，尿道上端1cm处切开皮肤进入腹腔，暴露子宫，并使用刮宫工具对宫膜处理，模拟临床上人子宫内膜刮除术，确保每只雌鼠的处理方式一致，然后缝合伤口。

然后在向雌鼠的子宫内注射由实施例一生产的凝胶1.5ml，实施例二生产的凝胶1.5ml，实施例三生产的凝胶1.5ml，实施例三生产的凝胶2.0ml，实施例三生产的凝胶2.5ml，对照组注射生理盐水1.5ml，然后正常饲养2～3天，接着对雌鼠的子宫进行解剖观察，并作出判断，结果如下表：

注：恢复情况是根据雌鼠饲养期间的活力，如食量、活动量，以及宫膜的康复预估时间综合判断。

从上表得出，本发明制备的修复凝胶具有抗菌消炎的作用，同时合理给定药剂量，可提高宫膜修复的速度，过多或者过少的剂量，均不能达到最好的效果。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。