具体实施方式

现将详细地提供本发明实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本发明。实际上，对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本发明进行多种修改和变化而不背离本发明的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。

因此，旨在本发明覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本发明的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本发明更广阔的方面。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。

除了在操作实施例中所示以外或另外表明之外，所有在说明书和权利要求中表示成分的量、物化性质等所使用的数字理解为在所有情况下通过术语“约”来调整。例如，因此，除非有相反的说明，否则上述说明书和所附权利要求书中列出的数值参数均是近似值，本领域的技术人员能够利用本文所公开的教导内容寻求获得的所需特性，适当改变这些近似值。用端点表示的数值范围的使用包括该范围内的所有数字以及该范围内的任何范围，例如，1至5包括1、1.1、1.3、1.5、2、2.75、3、3.80、4和5等等。

本发明实施例提供了一种防治黄栌枯萎病的方法，包括以下步骤：

对黄栌植株的根部施加第一抗黄栌枯萎病药剂；以及

对黄栌植株的树干注射第二抗黄栌枯萎病药剂；

所述第一抗黄栌枯萎病药剂为枯草芽孢杆菌溶液，所述第二抗黄栌枯萎病药剂为咪鲜胺溶液或多菌灵溶液。

在一些实施方式中，所述枯草芽孢杆菌溶液中枯草芽孢杆菌的浓度为0.17亿芽孢/mL～0.25亿芽孢/mL之间的任意值。所述枯草芽孢杆菌溶液可以通过枯草芽孢杆菌可湿粉剂、枯草芽孢杆菌悬浮剂、枯草芽孢杆菌水乳剂、枯草芽孢杆菌水分散粒剂或枯草芽孢杆菌颗粒剂等各种药剂形式，加水稀释得到。在一些实施方式中，所述枯草芽孢杆菌水悬液可由枯草芽孢杆菌可湿性粉剂和水以质量比1：(400～600)混合形成，所述枯草芽孢杆菌可湿性粉剂中枯草芽孢杆菌含量为100亿芽孢/克。

在一些实施方式中，所述咪鲜胺溶液中咪鲜胺活性成分的浓度为0.450mg/mL～0.563mg/mL之间的任意值。所述咪鲜胺溶液可以通过咪鲜胺可湿粉剂、咪鲜胺悬浮剂、咪鲜胺水乳剂、咪鲜胺水分散粒剂或咪鲜胺颗粒剂等各种药剂形式，加水稀释得到。在一些实施方式中，所述咪鲜胺溶液由咪鲜胺水乳剂和水以质量比1：(800～1000)混合形成，所述咪鲜胺水乳剂中咪鲜胺活性成分的质量比分含量为45％。

在一些实施方式中，所述多菌灵溶液中多菌灵活性成分的浓度为0.50mg/mL～0.625mg/mL之间的任意值。所述多菌灵溶液可以通过多菌灵可湿粉剂、多菌灵悬浮剂、多菌灵水乳剂、多菌灵水分散粒剂或多菌灵颗粒剂等各种药剂形式，加水稀释得到。在一些实施方式中，所述多菌灵溶液由多菌灵可湿性粉剂和水以质量比1:(800～1000)混合形成，所述多菌灵可湿性粉剂中多菌灵活性成分的质量百分含量为50％。

在一些更优选地实施方式中，所述第一抗黄栌枯萎病药剂为枯草芽孢杆菌溶液，所述第二抗黄栌枯萎病药剂为多菌灵溶液。通过根部施加枯草芽孢杆菌结合树干注射多菌灵的施药组合方式，可以更有效的降低枯萎病对黄栌的破坏。

在一些实施方式中，所述对黄栌植株的根部施加第一抗黄栌枯萎病药剂的步骤为对黄栌植株的根部施加第一抗黄栌枯萎病药剂2次，每次施加的药量为400mL/cm(树干地径)～600mL/cm(树干地径)。

优选地，对黄栌植株的根部施加第一抗黄栌枯萎病药剂时，相邻两次施药之间的时间间隔为10天～15天。

在一些实施方式中，所述对黄栌植株的树干注射第二抗黄栌枯萎病药剂的步骤为对黄栌植株的树干注射第二抗黄栌枯萎病药剂2次，每次施加的药量为200g/cm(树干地径)～250g/cm(树干地径)。

优选地，对黄栌植株的树干注射第二抗黄栌枯萎病药剂时，相邻两次施药之间的时间间隔为10天～15天。

优选地，对黄栌植株的树干注射第二抗黄栌枯萎病药剂的注射位置为距离病枝分叉端0～80cm处的树干。该距离为相对于地面的垂直距离。

一般地，所述黄栌植株树干地径大于10cm。

以下结合具体实施例对本发明的防治黄栌枯萎病的方法进一步详细的说明。旨在对本发明做进一步的详细说明，以帮助本领域技术及研究人员进一步理解本发明，有关技术条件等并不构成对本发明的任何限制。在本发明权利要求范围内所做的任何形式的修改，均在本发明权利要求的保护范围之内。实施例中采用药物和仪器如非特别说明，均为本领域常规选择。实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件，例如文献、书本中所述的条件或者生产厂家推荐的方法实现。

试验地点位于北京市香山公园内的黄栌种植区:青未了景区，青未了位于香山静翠湖东，山脊之上，样地海拔约125～200m，坡向东北，坡度3-30°，林分类型为黄栌人工混交林，不同树龄黄栌均有。

在春季解冻至发芽前，在黄栌种植地周围土壤中施用渝峰99植保(除了施用渝峰99植保之外，其他能增加黄栌植株生长势的肥料均适用于本发明，其作用是提高植株的生长势)，促进黄护长枝长叶，增强其长势。

实施例1

1、配制抗枯萎病药剂溶液

(1)将枯草芽孢杆菌菌悬液(100亿芽孢/克)加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成枯草芽孢杆菌水悬液，即配制成枯草芽孢杆菌500倍水悬液，其中，枯草芽孢杆菌菌悬液与水的重量配比为1:500。

(2)将45％咪鲜胺水乳剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成咪鲜胺800倍稀释液，其中，45％咪鲜胺水乳剂与水的重量配比为1:800。

2、处理方法

在试验地中选取树高、树龄、长势相似的50棵患病黄栌，分4个处理组和1个对照组，每组10棵树。于2020年8月下旬开始对4个处理组分别进行药剂处理。

(1)于8月下旬进行灌根，共进行2次罐根，第1次灌根和第2次灌根之间的时间间隔为10天。灌根药剂选择为步骤1制备的枯草芽孢杆菌500倍水悬液，药剂用量按照树干地径每厘米施加500mL枯草芽孢杆菌500倍水悬液，即每棵树用药量为500mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次施加枯草芽孢杆菌500倍水悬液的量为500mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次施加枯草芽孢杆菌500倍水悬液的量为5000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

(3)9月上旬进行树干注药，将咪鲜胺800倍稀释液灌装入树木输液袋，在距离病枝分叉下端约80cm的树干基部进行注射，采用挂吊针的方法，一次注射一袋，一袋药可注射10天左右，注射完毕再替换另一袋，共注射5次。每次药剂注射量按照树干地径每厘米注射200mL咪鲜胺800倍稀释液，即每次每棵树的注射剂量为200mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次注射咪鲜胺800倍稀释液的量为200mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次注射咪鲜胺800倍稀释液的量为2000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

实施例2

1、配制抗枯萎病药剂溶液

(1)将枯草芽孢杆菌菌悬液(100亿芽孢/克)加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成枯草芽孢杆菌水悬液，即配制成枯草芽孢杆菌500倍水悬液，其中，枯草芽孢杆菌菌悬液与水的重量配比为1:500。

(2)将50％多菌灵可湿性粉剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成多菌灵800倍稀释液，其中，50％多菌灵与水的重量配比为1:800。

2、处理方法

在试验地中选取树高、树龄、长势相似的50棵患病黄栌，分4个处理组和1个对照组，每组10棵树。于2020年8月下旬开始对4个处理组分别进行药剂处理。

(1)于8月下旬进行灌根，共进行2次罐根，第1次灌根和第2次灌根之间的时间间隔为15天。灌根的药剂选择为步骤1制备的枯草芽孢杆菌500倍水悬液，药剂用量按照树干地径每厘米施加500mL枯草芽孢杆菌500倍水悬液，即每棵树用药量为500mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次施加枯草芽孢杆菌500倍水悬液的量为500mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次施加枯草芽孢杆菌500倍水悬液的量为5000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

(2)9月上旬进行树干注药，将多菌灵800倍稀释液灌装入树木输液袋，在距离病枝分叉下端约80cm的树干基部进行注射，采用挂吊针的方法，一次注射一袋，一袋药可注射10天左右，注射完毕再替换另一袋，共注射5次。每次药剂注射量按照树干地径每厘米注射200mL多菌灵800倍稀释液，即每棵树的注射剂量为200mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则注射多菌灵800倍稀释液的量为200mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则注射多菌灵800倍稀释液的量为2000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

对比例1

1、配制抗枯萎病药剂溶液

将枯草芽孢杆菌菌悬液(100亿芽孢/克)加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成枯草芽孢杆菌水悬液，即配制成枯草芽孢杆菌500倍水悬液，其中，枯草芽孢杆菌菌悬液与水的重量配比为1:500。

2、处理方法

在试验地中选取树高、树龄、长势相似的80棵患病黄栌，分2个处理组和1个对照组，每组20棵树。于2020年8月下旬开始对2个处理组分别进行药剂处理。

于8月下旬进行灌根，共进行2次罐根，第1次灌根和第2次灌根之间的时间间隔为15天。灌根药剂选择为步骤1制备的枯草芽孢杆菌500倍水悬液，药剂用量按照树干地径每厘米施加500g枯草芽孢杆菌500倍水悬液，即每棵树用药量为500g/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次施加枯草芽孢杆菌500倍水悬液的量为500g，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次施加枯草芽孢杆菌500倍水悬液的量为5000g。一般来说，树干地径大于10cm。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

对比例2

1、配制抗枯萎病药剂溶液

将25％嘧菌酯悬浮剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成嘧菌酯500倍稀释液，其中，25％嘧菌酯悬浮剂与水的重量配比为1:500。

2、处理方法

对比例2处理方法与对比例1基本相同，不同之处在于，将药剂枯草芽孢杆菌500倍水悬液替换为嘧菌酯500倍稀释液，施药量不变。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

对比例3

1、配制抗枯萎病药剂溶液

将50％多菌灵可湿性粉剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成多菌灵800倍稀释液，其中，50％多菌灵与水的重量配比为1:800。

2、处理方法

在试验地中选取树高、树龄、长势相似的80棵患病黄栌，分2个处理组和1个对照组，每组20棵树。于2020年9月上旬开始对2个处理组分别进行药剂处理。

将50％多菌灵800倍稀释液灌装入树木输液袋，在距离病枝分叉下端约80cm的树干基部进行注射，持续注射至10月底。持续注射是指，采用挂吊针的方法，一袋药可注射10天左右，注射完毕再替换另一袋。总的药剂注射量按照树干地径每厘米注射200g多菌灵800倍稀释液，即每次的注射剂量为200g/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次注射多菌灵800倍稀释液的量为200g，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次注射多菌灵800倍稀释液的量为2000g。一般来说，树干地径大于10cm。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

对比例4

1、配制抗枯萎病药剂溶液

将45％咪鲜胺水乳剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成咪鲜胺800倍稀释液，其中，45％咪鲜胺水乳剂与水的重量配比为1:800。

2、处理方法

对比例4处理方法与对比例3基本相同，不同之处在于，将注射药剂多菌灵800倍稀释液替换为咪鲜胺800倍稀释液，施药量不变。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

对比例5

1、配制抗枯萎病药剂溶液

(1)将25％嘧菌酯悬浮剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成嘧菌酯500倍稀释液，其中，25％嘧菌酯悬浮剂与水的重量配比为1:500。

(2)将45％咪鲜胺水乳剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成咪鲜胺800倍稀释液，其中，45％咪鲜胺水乳剂与水的重量配比为1:800。

2、处理方法

在试验地中选取树高、树龄、长势相似的50棵患病黄栌，分4个处理组和1个对照组，每组10棵树。于2020年8月下旬开始对4个处理组分别进行药剂处理。

(1)于8月下旬进行灌根，共进行2次罐根，第1次灌根和第2次灌根之间的时间间隔为10天。灌根的药剂选择为步骤1制备的嘧菌酯500倍稀释液，药剂用量按照树干地径每厘米施加500mL嘧菌酯500倍稀释液，即每棵树用药量为500mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次施加嘧菌酯500倍稀释液的量为500mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次施加嘧菌酯500倍稀释液的量为5000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

(2)9月上旬进行树干注药，将咪鲜胺800倍稀释液灌装入树木输液袋，在距离病枝分叉下端约80cm的树干基部进行注射，采用挂吊针的方法，一次注射一袋，一袋药可注射10天左右，注射完毕再替换另一袋，共注射5次。每次药剂注射量按照树干地径每厘米注射200mL咪鲜胺800倍稀释液，即每次每棵树的注射剂量为200mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次注射咪鲜胺800倍稀释液的量为200mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次注射咪鲜胺800倍稀释液的量为2000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

对比例6

1、配制抗枯萎病药剂溶液

(1)将25％嘧菌酯悬浮剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成嘧菌酯500倍稀释液，其中，25％嘧菌酯悬浮剂与水的重量配比为1:500。

(2)将50％多菌灵可湿性粉剂加入到水中，与水混合，搅拌溶解、分散均匀，配制成多菌灵800倍稀释液，其中，50％多菌灵与水的重量配比为1:800。

2、处理方法

在试验地中选取树高、树龄、长势相似的50棵患病黄栌，分4个处理组和1个对照组，每组10棵树。于2020年8月下旬开始对4个处理组分别进行药剂处理。

(1)于8月下旬进行灌根，共进行2次罐根，第1次灌根和第2次灌根之间的时间间隔为15天。灌根的药剂选择步骤1中制备的嘧菌酯500倍稀释液，药剂用量按照树干地径每厘米施加500mL嘧菌酯500倍稀释液，即每棵树用药量为500mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次每棵树施加嘧菌酯500倍稀释液的量为500mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次每棵树施加嘧菌酯500倍稀释液的量为5000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

(2)9月上旬进行树干注药，将多菌灵800倍稀释液灌装入树木输液袋，在距离病枝分叉下端约80cm的树干基部进行注射，持续注射至10月底。持续注射是指，采用挂吊针的方法，一袋药可注射10天左右，注射完毕再替换另一袋。总的药剂注射量按照树干地径每厘米注射200mL多菌灵800倍稀释液，即每次的注射剂量为200mL/cm(树干地径)，也就是说如果黄栌树干的地径为1cm，则每次注射多菌灵800倍稀释液的量为200mL，如果黄栌树干的地径为10cm，则每次注射多菌灵800倍稀释液的量为2000mL。一般来说，树干地径大于10cm。

以不进行任何处理的黄栌植株作为空白对照组。

黄栌枯萎病的分级标准如表1所示。

表1 黄栌枯萎病分级标准

实施例1～2和对比例5～6的黄栌植株在灌根第二次施药10天后，开始调查并记录黄栌发病的严重程度，每隔10天调查一次，共调查3次，并计算病情指数以及防治效果和相对防治效果，应用SPASS 26.0软件进行统计分析。其中病情指数、防治效果和相对防治效果按照如下公式进行计算，调查和计算结果如表2所示。

相对防治效果＝处理组防治效果—对照组防治效果

表2

对比例1和对比例2的黄栌植株在灌根第二次施药10天后，开始调查并记录黄栌发病的严重程度，隔10天调查1次，共调查3次，计算病情指数以及防治效果和相对防治效果，应用SPASS 26.0软件进行统计分析。其中病情指数、防治效果和相对防治效果按照上述公式进行计算，调查和计算结果如表3所示。

表3

对比例3和对比例4的黄栌植株在注射施药20天后，开始调查并记录黄栌发病的严重程度，每隔10天调查一次，共调查3次，并计算病情指数以及防治效果和相对防治效果，应用SPASS 26.0软件进行统计分析。其中病情指数、防治效果和相对防治效果按照上述公式进行计算，调查和计算结果如表4所示。

表4

由此可知，本发明实施例提供的防治黄栌枯萎病的方法具有更佳的防治效果。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，便于具体和详细地理解本发明的技术方案，但并不能因此而理解为对发明专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。应当理解，本领域技术人员在本发明提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或者有限的试验得到的技术方案，均在本发明所附权利要求的保护范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书可以用于解释权利要求的内容。