具体实施方式

本发明描述的一个方面是化合物1的用途，化合物1是一种小分子，其名称为5-氟-2-(6-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N⁴-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-4,6-二胺，其具有如下式(Ⅰ)结构：

或者用于治疗白血病的其药学上可接受的盐或药物组合物。化合物1及其制备方法公开在国际申请公开号WO2014/081906(引用为化合物109)中，其通过引用并入本文。

本发明描述的一个方面是治疗有需要的受试者的急性髓性白血病(AML)的方法，包括向受试者施用有效量的化合物1。

本发明描述的另一个方面是治疗有需要的受试者的AML的方法，包括向受试者组合施用有效量的化合物1和化学治疗剂。

本发明描述的另一个方面是化合物1在制备用于治疗有需要的受试者的AML的药物中的用途，包括向受试者施用有效量的该药物。

本发明描述的另一个方面是化合物1在制备用于治疗有需要的受试者的AML的药物中的用途，包括向受试者组合施用有效量的该药物和化学治疗剂。

本发明描述的一个方面是治疗有需要的受试者的CALM-AF10介导的急性髓性白血病(AML)的方法，包括向受试者施用有效量的化合物1。

本发明描述的另一个方面是治疗有需要的受试者的CALM-AF10介导的AML的方法，包括向受试者组合施用有效量的化合物1和化学治疗剂。

本发明描述的另一个方面是化合物1在制备用于治疗有需要的受试者的CALM-A10介导的AML的药物中的用途，包括向受试者施用有效量的该药物。

本发明描述的另一个方面是化合物1在制备用于治疗有需要的受试者的CALM-AF10介导的AML的药物中的用途，包括向受试者组合施用有效量的该药物与化学治疗剂。

本发明描述的一个方面是治疗有需要的受试者的p53突变体介导的急性髓性白血病(AML)的方法，包括向受试者施用有效量的化合物1。

本发明描述的另一个方面是治疗有需要的受试者的p53突变体介导的AML的方法，包括向受试者组合施用有效量的化合物1和化学治疗剂。

本发明描述的另一个方面是化合物1在制备用于治疗有需要的受试者的p53突变体介导的AML的药物中的用途，包括向受试者施用有效量的该药物。

本发明描述的另一个方面是化合物1在制备用于治疗有需要的受试者的p53突变体介导的AML的药物中的用途，包括向受试者组合施用有效量的该药物和化学治疗剂。

本发明描述的一个方面是治疗有需要的受试者的急性髓性白血病的方法，包括向受试者施用有效量的5-氟-2-(6-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N⁴-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-4,6-二胺，其具有如下式(Ⅰ)结构：

或者其药学上可接受的盐或药物组合物。

本发明描述的另一个方面是治疗急性髓性白血病的方法，其中所述急性髓性白血病是CALM-AF10介导的急性髓性白血病。

本发明描述的另一个方面是治疗急性髓性白血病的方法，其中所述急性髓性白血病是p53突变体介导的急性髓性白血病。

本发明描述的另一个方面是向受试者组合施用有效量的5-氟-2-(6-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N⁴-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-4,6-二胺或其药学上可接受的盐或药物组合物以及有效量的一种或多种化学治疗剂。

在本发明描述的另一个方面中，当化合物1与有效量的一种或多种化学治疗剂组合施用时，一种或多种化学治疗剂是4-氯苯基(S)-6-氯-1-(4-甲氧基苯基)-1,3,4,9-四氢-2H-吡啶并[3,4-b]吲哚-2-羧酸酯(化合物2)，其具有如下式(Ⅱ)结构：

国际申请公开号WO2005/089764提供了化合物2的制备方法，其通过引用并入本文。化合物2也描述于美国专利7,601,840(相应的国际申请公开号为WO2005/089764)；美国专利7,767,689(相应的国际申请公开号为WO2006/113703)；国际申请公开号WO2010/138758；美国专利8,076,352(相应的国际申请公开号为WO 2008/127715)；美国专利8,076,353；美国专利8,367,694；美国公开号2010/0158858(相应的国际申请公开号为WO2008/127714)，这些也通过引用并入本文。

定义

在本发明中，术语“约”是指在给定值附近的范围，其中所得值与明确列举的值基本相同。一方面，“约”是指在给定值或范围的25％以内。例如，“约70重量％”一词至少包括从52重量％至88重量％的所有值。在另一方面，术语“约”是指在给定值或范围的10％以内。例如，“约70重量％”一词至少包括从63重量％至77重量％的所有值。第三方面，术语“约”是指在给定值或范围的7％内。例如，“约70重量％”一词至少包括从65重量％到75重量％的所有值。浓度、量、细胞数、百分比和其他数值可以在本文中以范围形式表示。应理解的是，这样的范围形式仅仅是为了方便和简洁而使用，应当灵活地解释为不仅包括明确列举为限制范围的数值，而且还包括包含在范围内的所有单独的数值或子范围，如同每个数值和子范围都被明确列举一样。

在本发明中，术语“治疗方法(therapies)”和“疗法(therapy)”指可用于预防、治疗、控制或改善病症或失调或其一种或多种症状(例如：急性髓性白血病或其一种或多种症状或与其相关的一种或多种病症；CALM-AF10介导的急性髓性白血病或其一种或多种症状或与其相关的一种或多种病症；或者，p53突变体介导的急性髓性白血病或其一种或多种症状或与其相关的一种或多种病症)的任何方案、方法、组合物、制剂和/或药剂。

在某些方面，术语“治疗方法”和“疗法”是指药物疗法，例如化学疗法、辅助疗法、放射疗法、手术疗法、生物疗法、支持疗法、抗病毒疗法和/或其他可用于治疗、控制、预防或改善病症或失调或其一种或多种症状(例如，急性髓性白血病或其一种或多种症状或与其相关的一种或多种病症)的疗法。在某些方面，术语“疗法”是指除化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物之外的疗法。在具体方面，“附加疗法”和“附加治疗方法”是指除使用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物进行治疗之外的疗法。在具体方面，疗法包括使用化合物1作为辅助疗法。例如，将化合物1与药物疗法联用，药物疗法例如为化学疗法、生物疗法、手术疗法、支持疗法、抗病毒疗法和/或其他可用于治疗、控制、预防或改善病症或失调或其一种或多种症状的疗法(例如，急性髓性白血病或其一种或多种症状或与其相关的一种或多种病症)。

在本发明中，术语“人类婴儿”是指新生儿至年龄为1岁的人。

在本发明中，术语“人类幼儿”是指年龄在1岁至3岁的人。

在本发明中，术语“人类儿童”是指年龄在1岁至18岁的人。

在本发明中，术语“人类成人”是指年龄在18岁或以上的人。

在本发明中，术语“中年人”是指年龄在30至64岁之间的人。

在本发明中，术语“老年人”是指年龄在65岁或以上的人。

在本发明中，术语“受试者”是指接受本文所述治疗的个体，在具体方面，个体为人类。

在本发明中，术语“急性髓性白血病”一般是指如本文中所述的急性髓性白血病。在具体方面，通用术语白血病也可用于指急性髓性白血病，而不特别使用术语急性髓性白血病。在另一个具体方面，术语急性髓性白血病也可用于指CALM-AF10介导的AML或p53突变体介导的AML，而不特别使用术语CALM-AF10介导的AML或p53突变体介导的AML。

在本发明中，在向患有急性髓性白血病的受试者施用化合物的1的语境中，术语“有效量”是指化合物1能产生有益或治疗效果的剂量。在具体的方面，化合物1的“有效量”是指足以实现以下有益或治疗效果中的至少一种、两种、三种、四种或更多种的化合物1的量：(i)抑制急性髓性白血病；(ii)消退急性髓性白血病；(iii)根除、清除或完全缓解急性髓性白血病；(iv)预防与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的发展或发作；(v)减轻或改善与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的严重程度；(vi)减少与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的数量；(vii)改善与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的严重程度；(viii)缩短与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的持续时间；(ix)预防增殖或与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的复发；(x)降低死亡率；(xi)提高受试者存活率；(xii)提高无复发存活率；(xiii)增加急性髓性白血病受试者缓解期的人数；(xiv)减少受试者住院治疗；(xv)缩短住院时间；(xvi)降低住院率；(xvii)增加受试者存活期；(xviii)提高急性髓性白血病受试者无症状存活率；(xix)延长受试者急性髓性白血病的缓解期；(xx)改善生活质量(QOL)，通过本领域已知的方法进行评估，例如QOL调查问卷等；(xxi)在使用另一种化学治疗剂治疗前施用化合物1引起的增殖减少；(xxii)在使用另一种化学治疗剂后施用化合物1引起的增殖减少；(xxiii)在联合治疗中施用化合物1和另一种化学治疗剂引起的增殖减少；(xxiv)在联合治疗中施用化合物1与另一种化学治疗剂产生的附加抗增殖作用；(xxv)在联合治疗中施用化合物1与另一种化学治疗剂产生的协同抗增殖作用；(xxvi)在放射治疗前施用化合物1引起的增殖减少；(xxvii)在放射治疗后施用化合物1引起的增殖减少；(xxviii)在与放射治疗的联合治疗中施用化合物1引起的增殖减少；(xxix)在手术治疗前施用化合物1引起的增殖减少；(xxx)在与手术治疗的联合治疗中施用化合物1引起的增殖减少；(xxxi)施用化合物1与姑息治疗来增强或改善治疗效果；(xxxii)降低急性髓性白血病受试者的BMI-1血浆浓度；(xxxiii)减少急性髓性白血病受试者血浆中的循环增殖细胞；(xxxiv)急性髓性白血病受试者血浆中急性髓性白血病生物标记物(例如BMI-1、微管蛋白聚合、凋亡标记物或组织等)浓度的改变(如降低或升高)；(xxxv)急性髓性白血病受试者的生物样本(例如血浆、血清、尿液或其他任何生物液体)中的BMI-1浓度降低；(xxxvi)施用本发明所述的治疗方法后增殖细胞计数减少，通过本领域技术人员能够使用的常规方法进行测量，例如：磁共振成像(MRI)、动态对比增强MRI(DCE-MRI)、X射线、计算机断层扫描(CT)、正电子发射断层扫描(PET)、7-ADD荧光或DAPI荧光；(xxxvii)施用本发明所述的治疗方法后增殖细胞计数维持，通过本领域技术人员能够使用的常规方法进行测量，例如：磁共振成像(MRI)、动态对比增强MRI(DCE-MRI)、X射线、计算机断层扫描(CT)、正电子发射断层扫描(PET)、7-ADD荧光或DAPI荧光；或者，(xxxviii)施用本发明所述的治疗方法后增殖细胞计数没有增加或增加少于预期，通过本领域技术人员能够使用的常规方法进行测量，例如：磁共振成像(MRI)、动态对比增强MRI(DCE-MRI)、X射线、计算机断层扫描(CT)、正电子发射断层扫描(PET)、7-ADD荧光或DAPI荧光。

在本发明中，术语“在24小时内”是指维持某一状况一段时间，例如，当化合物1的平均血浆浓度达到并维持多个24小时，确定化合物1的有效量。换言之，化合物1的平均血浆浓度可能在适宜的时间内达到，这个时间可以大于或小于24小时。

在本发明中，术语“如本发明所述的治疗方法”是指使用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物作为微管蛋白聚合反应抑制剂来治疗或改善有需要的受试者的急性髓性白血病的方法，包括向受试者施用有效量的化合物1。

在本发明所述疗法的一个方面，化合物1的用途或使用方法包括其药学上可接受的盐或药物组合物。在本发明所述疗法的另一个方面，化合物1的用途或使用方法包括化合物1、化合物1药学上可接受的盐或药物组合物、或者化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物与另一种化学治疗剂的组合的用途或使用方法。其中，该组合具有协同抗增殖活性。在另一个方面，其他化学治疗剂抑制微管蛋白聚合。在另一个方面，其他化学治疗剂抑制BMI-1的功能活性。

在本发明中，术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的包括无机酸和碱以及有机酸和碱在内的无毒酸或碱制备的盐；例如参见于：Remington’s PharmaceuticalSciences,18^th eds,Mack Publishing,Easton PA(1990)或者Remington:The Science andPractice of Pharmacy,19^th eds,Mack Publishing,Easton PA(1995)。

在本发明中，术语“化合物1”是指5-氟-2-(6-氟-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-N⁴-[4-(三氟甲基)苯基]嘧啶-4,6-二胺或其药学上可接受的盐或药物组合物。在各个方面，术语“化合物1”是指国际申请公开号WO2014/081906中公开的化合物109，其通过引用并入本文。

使用方法

通过机理研究，在不受理论限制的情况下，化合物1已被证明可以抑制微管聚合，同时避免了其他此类药物最使人衰弱的毒性。此外，化合物1与标准临床方案相加或协同，可以产生强效且持久的癌症消退作用。

如本发明所论述，化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物是微管蛋白聚合的小分子抑制剂，用于治疗或改善有需要的受试者的急性髓性白血病，包括向受试者施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物。

在本发明所述的用途或使用方法的一方面，化合物1的用途或使用方法包括其药学上可接受的盐或药物组合物。在本发明所述的用途或使用方法的另一方面，化合物1的用途或使用方法包括化合物1的用途或使用方法、化合物1药学上可接受的盐或药物组合物的用途或使用方法、或者化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物与另一种化学治疗剂的组合的用途或使用方法。其中，该组合具有协同抗增殖活性。在另一方面，其他化学治疗剂抑制微管蛋白聚合。在另一方面，其他化学治疗剂抑制BMI-1的功能活性。

在一个方面中，本发明描述了抑制或减少微管蛋白聚合的方法，这些方法也可能间接抑制BMI-1功能，以诱导增殖细胞或细胞系中的细胞周期停滞。

在另一个方面中，抑制或减少微管蛋白聚合和间接抑制BMI-1功能以诱导增殖细胞或细胞系细胞周期停滞的方法包括，将化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物与增殖细胞或细胞系接触，其中增殖细胞或细胞系细胞可能是未成熟的，或已表现出受到微管蛋白聚合和BMI-1功能的抑制或减少的影响。

如本发明所述的小鼠和人类模型所示，在CALM-AF10介导的AML中，化合物1令人惊讶地削弱了体外和体内的白血病。这些数据和在临床开发中作为抗癌剂而证明的安全性都证实了开发化合物1单独使用或与标准护理的化学治疗联用于治疗CALM-AF10介导的AML的明确理由。

在p53突变体介导的AML(参见Nishida等人)中，化合物1表现出降低MCL-1的表达，并触发了数种与诱导线粒体凋亡相符的分子事件：线粒体膜电位消失、BAX构象变化、半胱天冬酶3裂解和磷脂酰丝氨酸外翻。伴随着源自受试者的CD34⁺CD38^low/-干/祖细胞中MCL-1和磷酸化AKT的减少，细胞凋亡以不依赖p53的方式被诱导。小鼠异种移植模型还显示出体内抗白血病活性，在体内抑制白血病细胞生长，同时保留正常造血细胞。这些数据还表明化合物1可以单独使用或与标准护理的化学治疗组合用于治疗p53突变体介导的AML。

在另一个方面中，这类细胞或细胞系的非限制性实例选自HL-60、HeLa、HT1080、HCT116、HEK293、NCI H460、U-87MG、ASPC-1、PL-45、HPAF-2、PC-3、MDA-MB-231、MDA-MB-468、A431、SNU-1、AGS、Kato III、A549、Calu-6、A375、SY5Y、SKOV3、Capan-1、sNF96.2、TIVE-L1、TIVE-L2、LNCaP等等。在更具体的方面，细胞或细胞系可以是急性髓性白血病细胞。

在一个方面中，本发明描述了抑制或减少有需要的患有急性髓性白血病受试者的微管蛋白聚合和BMI-1功能的方法，包括向受试者施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物。

在一个具体方面，被诊断为患有急性髓性白血病的受试者能够通过用于抑制或减少微管蛋白聚合的化学治疗剂进行治疗。

在一个具体方面，被诊断为患有急性髓性白血病的受试者能够通过用于抑制或降低BMI-1功能的化学治疗剂进行治疗。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或减少微管蛋白聚合的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或减少微管蛋白聚合约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或降低BMI-1功能的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或降低BMI-1功能约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或减少微管蛋白聚合的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或减少微管蛋白聚合的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或降低BMI-1功能的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或降低BMI-1功能的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或减少微管蛋白聚合的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制增殖或者减少体外或体内的增殖细胞或细胞系群约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或降低BMI-1功能的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制增殖或者减少体外或体内的增殖细胞或细胞系群约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或减少微管蛋白聚合的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制增殖或者减少体外或体内的增殖细胞或细胞系群的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的抑制或降低BMI-1功能的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制增殖或者减少体外或体内的增殖细胞或细胞系群的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在各个方面，本发明所述的抑制或减少微管蛋白聚合的方法，降低了受试者中可用于微管组装的GTP结合的αβ-微管蛋白亚基的表达，评估方法为本领域公知的方法，例如ELISA。

在各个方面，本发明所述的抑制或降低BMI-1功能的方法，降低了受试者的BMI-1血浆浓度，评估方法为本领域公知的方法，例如ELISA。

在一个方面中，本发明描述了在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，包括施用能有效抑制或减少受试者微管蛋白聚合的量的化合物1。

在一个方面中，本发明描述了在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，包括施用能有效抑制或降低受试者BMI-1功能的量的化合物1。

在一个具体方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或减少微管蛋白聚合约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或降低BMI-1功能约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或减少微管蛋白聚合的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制或降低BMI-1功能的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在各个方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，降低了受试者的BMI-1血浆浓度，评估方法为本领域公知的方法，例如ELISA。

在一个方面中，本发明描述了在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，包括施用能有效抑制增殖或减少受试者体外或体内的增殖细胞或细胞系群的量的化合物1。

在一个具体方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制增殖或减少受试者体外或体内的增殖细胞或细胞系群约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、80％、85％、90％、95％、或100％，评估方法为本领域公知的方法。

在一个具体方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法相较于将化合物1施用于受试者之前，能够抑制增殖或减少受试者体外或体内的增殖细胞或细胞系群的范围在约5％至约20％，10％至30％，15％至40％，15％至50％，20％至30％，20％至40％，20％至50％，30％至60％，30％至70％，30％至80％，30％至90％，30％至95％，30％至99％，或约40％至约100％，或者其间的任何范围，评估方法为本领域公知的方法。

在各个方面，本发明所述的在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，抑制了增殖或减少了受试者体外或体内的增殖细胞或细胞系群，评估方法为本领域公知的方法，例如ELISA。

在一个方面中，本发明描述了在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，包括将能有效抑制增殖或减少受试者体内或体外的增殖细胞或细胞系群的量的化合物1与另一种疗法(例如，一种或多种不包含化合物1或含有不同抗增殖剂的附加疗法)组合施用。

这类方法包括在施用附加疗法之前、同时或之后施用化合物1。在某些方面，这类方法具有相加或协同作用。

在一个具体方面，本发明提供了一种在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，包括向有需要的受试者施用有效量的化合物1和有效量的另一种疗法。

一方面，本发明所述的方法包括可根据本发明提供的方法来预防、治疗或改善血液癌症，包括但不限于急性髓性白血病。

在一个具体方面，可根据本发明提供的方法来预防、治疗或改善的血液癌症的实例包括但不限于急性髓性白血病。

在一个方面中，本发明提供了一种预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，包括：(a)向有需要的受试者施用一剂或多剂化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物；(b)在步骤(a)之前和/或之后监测某些生物标记物的浓度。

在一个具体方面，监测步骤(b)是在一定剂数(例如，1、2、4、6、8、10、12、14、15、或29剂，或更多剂量；2-4剂、2-8剂、2-20剂或2-30剂)之前和/或之后进行的，或者在施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的一段时间(例如，1、2、3、4、5、6或7天；或1、2、3、4、5、10、15、20、30、40、45、48或50周)之前或之后进行的。

在一个具体方面，在向受试者施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物之前检测这些监测参数中的一个或多个。

在一个具体方面，在施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物后，体外或体内增殖细胞或细胞系群的增殖减少指示该治疗过程对于预防、治疗或改善急性髓性白血病是有效的。

在一个具体方面，在施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物后，体外或体内增殖细胞或细胞系群的增殖变化可以指示，化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的给药剂量、给药频率和/或给药时长可以调整(例如，增加、减少或维持)。

在一个具体方面，在涉及向受试者施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的急性髓性白血病的治疗过程之前、期间和/或之后监测生物样本中某些生物标记物的浓度。

向受试者施用的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的给药剂量、给药频率和/或给药时长可能因体外或体内增殖细胞或细胞系群的增殖而改变。或者，这些监测参数(例如，某些生物标记物的浓度)的改变可能指示，涉及施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的治疗过程可有效预防、治疗或改善急性髓性白血病。

可以通过本领域技术人员已知的任何技术来检测受试者中某些生物标记物的浓度，在某些方面，用于检测受试者的某些生物标记物的浓度的方法包括从受试者获得生物样品(例如，组织或液体样品)，检测已进行某些类型处理(例如，离心)的生物样品中(例如，来自血浆、血清、尿液或任何其他生物液体)的生物标记物的浓度，利用免疫学技术进行检测，例如ELISA。

在一个具体方面，本发明所述的ELISA可用于检测已经过某些类型的处理(例如，离心)的生物样品(例如，来自血浆、血清、尿液或任何其他生物液体)中生物标记物的浓度。本领域中已知的可用于检测生物样品中生物标记物浓度的其他技术包括多重测定或蛋白质组学分析。

在具体方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法缓解或控制与急性髓性白血病相关的一种、两种或多种症状。缓解或控制急性髓性白血病的一种、两种或多种症状可用作化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物在预防、治疗或改善急性髓性白血病疗效上的临床终点。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法减小了与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的持续时间和/或严重程度。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法抑制了与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的发作、发展和/或复发。在某些方面，本发明提供的治疗急性髓性白血病的方法减少了与急性髓性白血病相关症状的数量。

在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法延长或延迟了细胞周期的G1/S期或G1/S末期(即末期检查点(静止期或DNA合成前期)与DNA合成早期之间的时期)。在其他方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法延长或延迟了细胞周期的S期或G2/M期(即DNA合成和早期分裂期之间的时期)。

在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法减少、改善或减轻急性髓性白血病和/或其一种或多种症状的严重程度。在其他方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法减少了被诊断患有急性髓性白血病受试者的住院治疗(例如，住院治疗的次数和持续时间)。

在某些方面，本发明提供的方法增加了被诊断患有急性髓性白血病受试者的存活期。在具体的方面，本发明提供的方法使被诊断患有急性髓性白血病的受试者存活期增加约6个月或更长时间、约7个月或更长时间、约8个月或更长时间、约9个月或更长时间、或者约12个月或更长时间。

在具体方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法抑制或减少了急性髓性白血病或与其相关的一种或多种症状的发展。在具体方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法能够增强或提高其他治疗方法(例如，抗癌剂、放射疗法、药物疗法，诸如化学疗法、抗雄激素疗法、或手术疗法)的疗效。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法涉及使用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物作为辅助疗法。

在具体方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法降低了被诊断为患有急性髓性白血病受试者的死亡率。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法增加了处于缓解期受试者的数量或者降低了住院率。在其他方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法预防与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的进展、发作或发展。

在具体方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法增加了急性髓性白血病无症状受试者的存活率。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法不能治愈受试者的急性髓性白血病，但可以防止疾病的发展或恶化。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法提高了受试者的生活质量。

在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法增加了急性髓性白血病无癌症受试者的存活率。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法提高了无复发存活率。在某些方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法增加了处于缓解期受试者的数量。在其他方面，本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法延长了受试者的缓解期。

治疗群体

在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是患有或被诊断有急性髓性白血病的人类。在其他方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是对急性髓性白血病易感或敏感的人类。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是具有发展急性髓性白血病风险的人类。

在一个方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是人类婴儿。在另一方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是人类幼儿。在另一方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是人类儿童。在另一方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是人类成人。在另一方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是中年人。在另一方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是老年人。

在某些方面，根据本发明提供的方法治疗癌症的受试者患有转移至身体其他部位(例如骨骼、肺和肝脏)的急性髓性白血病。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者处于急性髓性白血病的缓解期。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者出现急性髓性白血病的复发。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者正承受与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的复发。

在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是约1至5岁，约5至10岁，约10至18岁，约18至30岁，约25至35岁，约35至45岁，约40至55岁，约50至65岁，约60至75岁，约70至85岁，约80至90岁，约90至95岁或约95至100岁，或者其间的任何年龄的人类。

在一个具体方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是18岁或以上的人类。在一个具体方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是年龄在1岁至18岁之间的人类儿童。在某个方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是年龄在12岁至18岁之间的人类。在某个方面，受试者是人类男性。在另一方面中，受试者是人类女性。在一个方面，受试者是未怀孕或不处于哺乳期的人类女性。在一个方面，受试者是怀孕或即将/可能怀孕或处于哺乳期的女性。

在具体方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是处于免疫受损状态或免疫抑制状态的人类。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是正在接受免疫抑制治疗或从免疫抑制治疗中恢复的人类。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是具有或处于患上急性髓性白血病的人类。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是正在、将要或已经接受手术疗法、药物疗法(例如化学疗法)、激素疗法和/或放射疗法的人类。

在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者在对除化合物1以外的疗法产生任何不良反应或不耐受之前，施用以化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物，或进行联合治疗。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是难治性受试者。在某些方面，难治性受试者是指标准疗法(例如手术疗法、放射疗法和/或药物疗法，如化学疗法)难治的受试者。在某些方面，当急性髓性白血病未被明显根除和/或一种或多种症状没有明显缓解时，患有急性髓性白血病的受试者是难治的。在使用本领域公认的“难治性”定义的情况下，通过本领域任何已知的在体内或体外分析急性髓性白血病治疗有效性的方法来判断受试者是否为难治性。

在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是已证明为用除化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物治疗以外的疗法难治的人类，并不再接受这些疗法。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是已经接受一种或多种常规抗癌疗法，例如手术疗法、药物疗法(如化学疗法)、抗雄激素疗法或放射疗法的人类。这些受试者包括难治性受试者、对于常规疗法而言太年幼的受试者以及尽管用现有疗法治疗但仍具有复发性急性髓性白血病的受试者。

在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是对常规疗法的不良反应敏感的人类。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是在施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物之前，尚未接受治疗(例如，药物疗法，如化学疗法、手术疗法、抗雄激素疗法或放射疗法)的人类。在其他方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是在施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物之前已经接受治疗的人类。在某些方面，根据本发明提供的方法治疗急性髓性白血病的受试者是经历了先前治疗的不良反应或者因先前治疗的毒性水平不可接受而中断治疗的人类。

剂量和给药

根据本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物可以通过多种途径以能产生有益或治疗效果的量施用于受试者。根据本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，可以将化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物以口服给药的方式施用于受试者。化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的口服给药方式能够促进需要这种治疗的受试者遵守服用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的方案。因此，在具体方面，化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物以口服给药的方式施用于受试者。在另一方面，受试者以口服的方式服用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物时，可能有食物或水，也可能没有食物或水。

其他给药方式包括但不限于静脉注射、皮内注射、鞘内注射、肌肉内注射、皮下注射、经鼻内给药、吸入法、经皮给药、局部给药、经粘膜给药、颅内给药、硬膜外给药和滑膜内给药。在一个方面，将化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物经全身性方式(例如，不经肠道)施用于有需要受试者。在一个方面，化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物通过允许化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物穿过血脑屏障的方式给药(例如，口服)。

根据本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，涉及将化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物与一种或多种附加疗法组合施用，化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物与一种或多种附加疗法可以通过相同或不同的方式施用。

根据本发明提供的用于预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法向有需要的受试者施用化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的剂量和给药频率是有效的，同时使任何副作用最小化。化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的确切剂量和给药频率可由执业医师根据与需要治疗的受试者相关的因素确定。

可以考虑的因素包括疾病状态的严重程度、受试者的总体健康状况、受试者的年龄、体重和性别、饮食、给药时间和频率、药物组合、反应敏感性和对治疗的耐受性/反应。化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物的给药剂量和频率可随时间调整，以提供有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物或者维持所需的效果。

如本发明所述，用于在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中所述有效量是每周两次在不同天内向受试者施用的剂量，其中一周中的第二剂在第一剂之后三天施用，其中后一周中的第一剂在前一周中的第二剂之后四天施用。

在一个具体方面，有效量是施用于受试者的剂量，该剂量可以根据受试者的反应增加或减少。

在一个具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中有效量选自范围在约50mg至约200mg、约100mg至约200mg、约150mg至约200mg等，或其间的任何范围的剂量，每周两次，口服给药。

在一个具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中有效量选自约50mg、约100mg、约150mg或约200mg等，或其间的任何范围的剂量，每周两次，口服给药。

在一个具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或药物组合物，其中有效量为约50mg，每周两次，口服给药。

在某些方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量表示为毫克每平方米(mg/m²)的剂量。例如，化合物1的mg/m²可以通过将动物的换算系数乘以动物剂量(单位为mg/kg)来确定，从而得到人体剂量当量的mg/m²剂量。出于调控目的，可以使用以下转换因子：小鼠＝3，仓鼠＝4.1，大鼠＝6，豚鼠＝7.7(基于Freieich et al.,Cancer Chemother.Rep.50(4):219-244(1996))。人体的身高和体重可应用博伊德体表面积公式(Boyd's Formula ofBody Surface Area)来计算人体表面积。在具体的方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量是介于约0.1mg/m²至约1000mg/m²，或其间的任何范围的量。

在一个方面中，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量是在患有急性髓性白血病的受试者或者预先建立的急性髓性白血病动物模型中达到化合物1目标平均血浆浓度的剂量。

在一个具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量是在患有急性髓性白血病的受试者或者预先建立的急性髓性白血病动物模型中，在24小时内达到如下化合物1平均血浆浓度的剂量：介于约3hr·μg/mL至约70hr·μg/mL，约3hr·μg/mL至约60hr·μg/mL，约3hr·μg/mL至约50hr·μg/mL，约3hr·μg/mL至约40hr·μg/mL，约3hr·μg/mL至约30hr·μg/mL，约3hr·μg/mL至约20hr·μg/mL，约3hr·μg/mL至约10hr·μg/mL等，或其间的任何范围。

在一个具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量在患有急性髓性白血病的受试者或者预先建立的急性髓性白血病动物模型中，在24小时内达到如下化合物1平均血浆浓度的剂量：约3hr·μg/mL、约10hr·μg/mL、约20hr·μg/mL、约30hr·μg/mL、约40hr·μg/mL、约50hr·μg/mL、约60hr·μg/mL、约70hr·μg/mL等，或其间的任何范围。

为了达到这样的血浆浓度，可以施用本发明所述剂量的化合物1或其药物组合物。在某些方面，化合物1或其药物组合物的后续剂量可基于施用于受试者的化合物1或其药物组合物而获得的化合物1平均血浆浓度进行相应的调整。

在具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量是在患有急性髓性白血病的受试者或者预先建立的急性髓性白血病动物模型中，实现一种或多种生物标记物的目标平均血浆浓度降低的剂量。

在具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中有效量是在患有急性髓性白血病受试者或者预先建立的急性髓性白血病动物模型中，实现所需的组织与化合物1或其药物组合物平均血浆浓度的比值的剂量，例如通过本领域已知的任何成像技术来确定。

在某些方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物，其中对于每一剂的有效量可能相同也可能不相同。在具体方面，将化合物1或其药物组合物的第一(即初始)剂量施用于有需要的受试者第一段时间，随后将化合物1或其药物组合物的第二(即加量)剂量施用于受试者第二段时间，随后将化合物1或其药物组合物的第三(即维持)剂量施用于受试者第二段时间。第一剂量可能大于第二剂量，或第一剂量可能小于第二剂量。以类似的方式，化合物1或其药物组合物的第三剂量可以大于或小于第二剂量，以及大于或小于第一剂量。

在某些方面，本发明所述的剂量是指施用的总量；即，如果施用一种以上的化合物，那么，剂量对应于施用的总量。在具体方面，口服组合物按重量计包含约5％至约95％的化合物1。

根据本发明提供的预防、治疗或改善有需要的受试者的急性髓性白血病的方法，向有需要的受试者施用化合物1或其药物组合物的时间长度将由无癌症存活或无症状存活所决定。在某些方面，本发明提供的治疗急性髓性白血病的方法包括施用化合物1或其药物组合物一段时间，直到与急性髓性白血病相关的一种或多种症状的严重程度和/或数量降低。

在某些方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，施用化合物1或其药物组合物长达48周。在其他方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，施用化合物1或其药物组合物长达4周、8周、12周、16周、20周、24周、26周(0.5年)、52周(1年)、78周(1.5年)、104周(2年)，或130周(2.5年)或更长时间。

在某些方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，无限期施用化合物1或其药物组合物。在某些方面，本发明提供的治疗急性髓性白血病的方法包括，施用化合物1或其药物组合物一段时间，然后是停药一段时间(即，该时期内不施用化合物1或其药物组合物)，再恢复施用化合物1或其药物组合物。

在具体方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，按周期施用化合物1或其药物组合物，例如，1周的周期，2周的周期、3周的周期、4周的周期、5周的周期、6周的周期、8周的周期、9周的周期、10周的周期、11周的周期或12周的周期。在这样的周期中，化合物1或其药物组合物可以每周给药一次或两次。在一周周期的具体方面中，化合物1或其药物组合物可以每周给药两次。在这样的一周周期具体方面中，化合物1或其药物组合物可以每天给药一次。

在具体方面，化合物1或其药物组合物的给药时间可由一种或多种监测参数(例如，某些生物标记物的浓度)决定。

在具体方面，化合物1或其药物组合物的给药时间可基于一种或多种监测参数(例如，生物标记物的浓度)进行调整。

在某些方面，根据在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，化合物1或其药物组合物在用餐前、用餐中或用餐后(例如，早餐，午餐或晚餐)施用于有需要的受试者。在具体的方面，根据本发明提供的治疗急性髓性白血病的方法，化合物1或其药物组合物在早晨(例如，上午5点至中午12点之间)给予有需要的受试者。

在某些方面，根据在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法，化合物1或其药物组合物在中午(即中午12点)施用于有需要的受试者。在具体方面，根据本发明提供的治疗急性髓性白血病的方法，化合物1或其药物组合物在下午(例如，中午12点至下午5点之间)、晚上(例如，下午5点至就寝时间)和/或在就寝时间之前施用于有需要的受试者。

在具体方面，每天一次和每周两次向受试者施用有效量的化合物1或其药物组合物。

联合疗法

本发明提供了治疗急性髓性白血病的联合疗法，其涉及向有需要的受试者组合施用化合物1或其药物组合物和一种或多种附加疗法。在具体的方面，本发明提供了治疗急性髓性白血病的联合疗法，其涉及向有需要的受试者组合施用有效量的化合物1或其药物组合物和有效量的另一种疗法。

在本发明中，在施用化合物1或其药物组合物的语境中，术语“联合”是指在施用用于治疗急性髓性白血病的一种或多种附加疗法(例如药剂、手术或放射)之前、同时或之后，施用化合物1或其药物组合物。术语“联合”的使用并不限制对受试者施用一种或多种治疗剂和一种或多种附加疗法的顺序。在具体方面，施用化合物1或其药物组合物与施用一种或多种附加疗法之间的时间间隔可以是约1-5分钟，1-30分钟，30分钟至60分钟，1小时，1-2小时，2-6小时，2-12小时，12-24小时，1-2天，2天，3天，4天，5天，6天，7天，1周，2周，3周，4周，5周，6周，7周，8周，9周，10周，15周，20周，26周，52周，11-15周，15-20周，20-30周，30-40周，40-50周，1个月，2个月，3个月，4个月，5个月，6个月，7个月，8个月，9个月，10个月，11个月，12个月，1年，2年，或其间的任何时间段。在某些方面，化合物1或其药物组合物和一种或多种附加疗法之间的给药间隔少于1天，1周，2周，3周，4周，1个月，2个月，3个月，6个月，1年，2年或5年。

在某些方面，本发明提供的联合疗法涉及每天施用化合物1或其药物组合物，并且每周一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每月一次、每两个月一次(例如，大约8周)、每三个月一次(例如，大约12周)或每四个月一次(例如，大约16周)施用一种或多种附加疗法。在某些方面，将化合物1或其药物组合物和一种或多种附加疗法循环施用于受试者。循环疗法包括施用化合物1或其药物组合物一段时间，随后施用一种或多种附加疗法一段时间，重复该顺序施用。在某些方面，循环疗法还可包括停药一段时间，其中化合物1或其药物组合物或者附加疗法在一段时间内(例如，2天，3天，4天，5天，6天，7天，1周，2周，3周，4周，5周，10周，20周，1个月，2个月，3个月，4个月，5个月，6个月，7个月，8个月，9个月，10个月，11个月，12个月，2年或3年)不施用。在一方面中，施用的循环次数为1至12个周期，2至10个周期，或2至8个周期。

在某些方面，在有需要的受试者中预防、治疗或改善急性髓性白血病的方法包括，在将化合物1或其药物组合物与附加疗法组合施用之前，将化合物1或其药物组合物作为单一药剂施用一段时间。在某些方面，本发明提供的治疗急性髓性白血病的方法包括，在施用化合物1或其药物组合物与附加疗法之前，单独施用附加疗法一段时间。

在某些方面，根据本发明提供的方法将化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法组合施用，相对于化合物1或其药物组合物或者一种或多种附加疗法的单独施用，具有累加效应。在某些方面，根据本发明提供的方法将化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法组合施用，相对于化合物1或其药物组合物或者一种或多种附加疗法的单独施用，具有协同效应。

在本发明中，术语“协同”是指化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法(例如，药剂)组合施用的效果，该联合比任何两种或多种单一疗法(例如，药剂)的效果相加更有效。

在具体方面，联合治疗的协同效应允许使用更低剂量(即次优剂量)的化合物1或其药物组合物或者附加疗法，和/或频率更低地向受试者施用化合物1或其药物组合物或者附加治疗。

在某些方面，在不降低化合物1或其药物组合物或者附加疗法在分别治疗急性髓性白血病疗效的前提下，使用更低剂量的化合物1或其药物组合物或者附加疗法，和/或以更低频率施用化合物1或其药物组合物或者附加疗法，能够分别降低施用化合物1或其药物组合物或者附加疗法相关的毒性。

在某些方面，协同效应导致化合物1或其药物组合物或每种所述附加疗法在治疗急性髓性白血病中的功效提高。在某些方面，化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法联合使用的协同效应减少了与使用任何单一种疗法相关的不利或有害的副作用。

化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法的组合可以在相同的药物组合物中施用于受试者。或者，化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法可以在分开的药物组合物中同时施用于受试者。化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法可以在分开的药物组合物中依次施用于受试者。化合物1或其药物组合物与一种或多种附加疗法也可以通过相同或不同的给药途径施用于受试者。

本发明提供的联合疗法涉及将化合物1或其药物组合物与用于治疗急性髓性白血病的常规或已知疗法组合施用于有需要的受试者。用于急性髓性白血病或与其相关的病症的其他疗法旨在控制或缓解一种或多种症状。因此，在某些方面，本发明提供的联合疗法涉及向有需要的受试者施用止痛药，或者其他旨在缓解或控制与急性髓性白血病相关的一种或多种症状或与其相关的病症的疗法。

可与化合物1或其药物组合物联合用于治疗急性髓性白血病的抗癌剂的具体实例包括：激素剂(例如，芳香酶抑制剂，选择性雌激素受体调节剂(SERM)和雌激素受体拮抗剂)，化学治疗剂(例如，微管解聚阻断剂，抗代谢物，拓扑异构酶抑制剂和DNA交联剂或损伤剂)，抗血管生成剂(例如VEGF拮抗剂、受体拮抗剂、整合素拮抗剂、血管靶向剂(VTA)/血管破坏剂(VDA)，放射治疗和常规手术。

可与化合物1或其药物组合物联合用于治疗急性髓性白血病的激素剂的非限制性实例包括芳香酶抑制剂、SERM和雌激素受体拮抗剂。作为芳香酶抑制剂的激素剂可以是甾体或非甾体。非甾体激素剂的非限制性实例包括来曲唑、阿那曲唑、氨鲁米特、法曲唑和伏氯唑。甾体激素剂的非限制性实例包括阿诺新(依西美坦)、福美司坦和睾酮内酯。作为SERM激素剂的非限制性实例包括他莫昔芬(商标/销售为)，阿非昔芬、阿佐昔芬、巴多昔芬、氯米芬、芙婷宝、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬和托瑞米芬。作为雌激素受体拮抗剂的激素剂的非限制性实例包括氟维司群。其他激素剂包括但不限于阿比特龙和洛那普生。

可与化合物1或其药物组合物联合用于治疗癌症的化学治疗剂的非限制性实例包括微管解聚阻断剂、抗代谢物、拓扑异构酶抑制剂和DNA交联剂或损伤剂。

作为微管解聚阻断剂的化学治疗剂包括但不限于紫杉类药物(taxenes)(例如紫杉醇(paclitaxel，商标/销售为)，多西他赛(docetaxel)，白蛋白结合型紫杉醇(nabPaclitaxel，商标/销售为)，拉洛他赛(larotaxel)，奥他赛(ortataxel)和替司他赛(tesetaxel))；埃坡霉素(例如，伊沙匹隆)；和长春花生物碱(例如，长春瑞滨，长春碱，长春地辛和长春新碱(商标/销售为))。

作为抗代谢物的化学治疗剂包括但不限于叶酸抗代谢物(例如甲氨蝶呤，氨基蝶呤，培美曲塞，雷替曲塞)；嘌呤抗代谢物(例如克拉屈滨，氯法拉滨，氟达拉滨，巯基嘌呤，喷司他丁，硫鸟嘌呤)；嘧啶抗代谢物(例如，5-氟尿嘧啶，卡培他滨，吉西他滨阿糖胞苷，地西他滨，氟尿苷，替加氟)；和脱氧核糖核苷酸抗代谢物(例如，羟基脲)。

作为拓扑异构酶抑制剂的化学治疗剂包括但不限于I类(喜树碱)拓扑异构酶抑制剂(例如，拓扑替康(商标/销售为)，伊立替康，鲁比替康和贝洛替康)；Ⅱ类(鬼臼属)拓扑异构酶抑制剂(例如，依托泊苷或VP-16和替尼泊苷)；蒽环类药物(例如，多柔比星，表柔比星，盐酸多柔比星脂质体，阿柔比星，氨柔比星，柔红霉素，伊达比星，吡柔比星，戊柔比星和佐柔比星)；和蒽二酮(例如，米托蒽醌和匹杉琼)。

作为DNA交联剂(或DNA损伤剂)的化学治疗剂包括但不限于烷化剂(例如，环磷酰胺，二氯甲基二乙胺，异环磷酰胺(商标/销售为)，曲洛磷胺，苯丁酸氮芥，美法仑，泼尼莫司汀，苯达莫司汀，乌拉莫司汀，雌莫司汀，卡莫司汀(商标/销售为)，洛莫司汀，司莫司汀，福莫司汀，尼莫司汀，雷莫司汀，链脲佐菌素，白消安，甘露舒凡，曲奥舒凡，卡巴醌，N,N'N'-三亚乙基硫代磷酰胺，三亚胺醌，曲他胺)；类烷化剂(例如，卡铂(商标/销售为)，顺铂，奥沙利铂，奈达铂，四硝酸三铂，赛特铂，吡铂)；非经典DNA交联剂(例如，丙卡巴肼，达卡巴嗪，替莫唑胺(商标/销售为)，六甲蜜胺，二溴甘露醇)；和嵌入剂(例如，放线菌素，博来霉素，丝裂霉素和普卡霉素)。

可与化合物1或其药物组合物联合用于治疗急性髓性白血病的抗血管生成剂的非限制性实例包括VEGF拮抗剂，受体拮抗剂，整合素拮抗剂(例如，Vitaxin，西仑吉肽和S247)和VTAs/VDAs(例如，Fosbretabulin)。VEGF拮抗剂包括但不限于抗VEGF抗体(例如贝伐单抗(商标/销售为)和兰尼单抗(商标/销售为))，VEGF融合蛋白(VEGFtrap)(例如，阿柏西普)，反义VEGF基因(VEGF antisense)或siRNA或miRNA和适体(例如，哌加他尼钠(商标/销售为))。作为受体拮抗剂的抗血管生成剂包括但不限于抗体(例如，雷莫芦单抗)和激酶抑制剂(例如，舒尼替尼，索拉非尼，西地尼布，帕唑帕尼，凡德他尼，阿西替尼和AG-013958)，例如酪氨酸激酶抑制剂。抗血管生成剂的其他非限制性实例包括ATN-224，醋酸阿奈可他(商标/销售为)，微管解聚抑制剂(例如，考布他汀A4前药)，蛋白质或蛋白质片段(例如，胶原蛋白18(内皮抑素))。

可与化合物1或其药物组合物组合施用于受试者以治疗急性髓性白血病的其他疗法的非限制性实例包括：

(1)他汀类药物，例如洛伐他汀(例如，商标/销售为)；

(2)mTOR抑制剂，例如西罗莫司，也称为雷帕霉素(例如，商标/销售为)，替西罗莫司(例如，商标/销售为)，依罗莫司(例如，商标/销售为)和42-(二甲基亚膦酰)雷帕霉素(Deforolimus)；

(3)法尼基转移酶抑制剂，例如替吡法尼(例如，商标/销售为)；

(4)抗纤维化剂，例如吡非尼酮；

(5)聚乙二醇化干扰素，例如PEG干扰素α-2b；

(6)CNS中枢神经系统兴奋剂，例如哌醋甲酯(商标/销售为)；

(7)HER-2拮抗剂，例如抗HER-2抗体(例如，曲妥珠单抗)和激酶抑制剂(例如，拉帕替尼)；

(8)IGF-1拮抗剂，例如抗IGF-1抗体(例如，AVE1642和IMC-A11)或IGF-1激酶抑制剂；

(9)EGFR/HER-1拮抗剂，例如抗EGFR抗体(例如，西妥昔单抗、帕尼单抗)或EGFR激酶抑制剂(例如，厄洛替尼(例如，商标/销售为)、吉非替尼)；

(10)SRC拮抗剂，例如博舒替尼；

(11)细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂，例如塞利西利；

(12)Janus激酶2抑制剂，例如来他替尼；

(13)蛋白酶体抑制剂，例如硼替佐米；

(14)磷酸二酯酶抑制剂，例如阿那格雷；

(15)肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂，例如噻唑呋林；

(16)脂氧合酶抑制剂，例如马索罗酚；

(17)内皮素拮抗剂；

(18)类维生素A受体拮抗剂，例如维甲酸或阿利维A酸；

(19)免疫调节剂，例如来那度胺、泊马度胺或沙利度胺(例如，商标/销售为)；

(20)激酶(例如，酪氨酸激酶)抑制剂，例如伊马替尼(例如，商标/销售为)，达沙替尼，厄洛替尼，尼罗替尼，吉非替尼，索拉非尼，舒尼替尼(例如，商标/销售为)，拉帕替尼，AEE788，或TG100801；

(21)非甾体抗炎药，例如塞来昔布(商标/销售为)；

(22)人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)，例如非格司亭(商标/销售为)

(23)亚叶酸或亚叶酸钙；

(24)整合素拮抗剂，例如整合素α5β1-拮抗剂(例如，JSM6427)；

(25)核因子κβ(NF-kβ)拮抗剂，例如OT-551，它也是一种抗氧化剂；

(26)刺猬抑制剂，例如CUR61414，环巴胺，GDC-0449或抗刺猬抗体；

(27)组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂，例如SAHA(也称为伏立诺他(商标/销售为、PCI-24781、SB939、CHR-3996、CRA-024781、ITF2357、JNJ-26481585或PCI-24781；

(28)类维生素A，例如异维A酸(例如，商标/销售为)；

(29)肝细胞生长因子/分散因子(HGF/SF)拮抗剂，例如HGF/SF单克隆抗体(例如AMG 102)；

(30)合成化学药品，例如抗肿瘤药；

(31)抗糖尿病药，例如马来酸罗格列酮(例如，商标/销售为)；

(32)抗疟药和杀阿米巴药，例如氯喹(例如，商标/销售为)；

(33)合成缓激肽，例如RMP-7；

(34)血小板源性生长因子受体抑制剂，例如SU-101；

(35)Flk-1/KDR/VEGFR2、FGFR1和PDGFRβ受体酪氨酸激酶抑制剂，例如SU5416和SU6668；

(36)抗炎剂，例如柳氮磺胺吡啶(例如，商标/销售为)；和

(37)TGF-β反义疗法。

可与化合物1或其药物组合物组合施用于受试者以治疗急性髓性白血病的其他疗法的非限制性实例包括：天然存在的促性腺激素释放激素的合成九肽类似物，例如醋酸亮丙瑞林(商标/销售为)；非甾体抗雄激素剂，例如氟他胺(商标/销售为)或尼鲁他胺(商标/销售为)；非甾体雄激素受体抑制剂，例如比卡鲁胺(商标/销售为；类固醇激素，例如孕酮；抗真菌剂，例如酮康唑(商标/销售为)；糖皮质激素，例如泼尼松；雌莫司汀磷酸钠(商标/销售为)；和双膦酸盐，例如帕米膦酸盐、阿仑膦酸盐和利塞膦酸盐。

可与化合物1或其药物组合物联合用于治疗急性髓性白血病的疗法的其他具体实例包括但不限于与癌症免疫疗法相关的药剂(例如，细胞因子、白细胞介素和癌症疫苗)。

可与化合物1或其药物组合物联合用于缓解急性髓性白血病相关副作用的药剂具体实例包括但不限于：止吐药，例如盐酸昂丹司琼(商标/销售为)，盐酸格拉司琼(商标/销售为)，劳拉西泮(商标/销售为)，地塞米松(商标/销售为)。

在某些方面，本发明提供的用于治疗急性髓性白血病的联合疗法包括将化合物1或其药物组合物与一种或多种用于治疗和/或控制副作用的药剂组合施用；副作用例如为：出血(通常是暂时性、低度鼻出血)，动脉和静脉栓塞，高血压，伤口愈合延迟，无症状尿蛋白，鼻中隔穿孔，与高血压相关的可逆性后部白质脑病综合征，头晕，运动失调，头痛，声音嘶哑，恶心，呕吐，腹泻，皮疹，甲下出血，骨髓增生异常综合征，骨髓抑制，疲劳，甲状腺功能减退，QT间期延长或心力衰竭。

在某些方面，在治疗急性髓性白血病中，化合物1或其药物组合物不与主要由CYP2D6代谢的药物联用；由CYP2D6代谢的药物例如为：抗抑郁药(例如三环类抗抑郁药，选择性5-羟色胺再摄取抑制剂等)，抗精神病药，β-肾上腺素受体阻断剂，或某些抗心律失常类型的药。

试剂盒

本发明提供了一种药物包装或试剂盒，包括一个或多个填充有化合物1或其药物组合物的容器。此外，药物包装或试剂盒中还可以包括一种或多种可用于治疗急性髓性白血病的其他疗法或其他相关药剂。本发明还提供了一种药物包装或试剂盒，其包括一个或多个容器，所述容器填充有本发明所述的药物组合物的一种或多种组分。

可选地，与这种试剂盒相关的是一份由政府机构规定的规范药品或生物制品生产、使用或销售的通知表单，该通知反映了生产、使用或销售机构对人类用药的批准。

通过参考以下非限制性的具体实施例将进一步理解本发明。

实施例

实施例1

将P31-Fujioka细胞系注入免疫缺陷小鼠(NRG-SGM3)。注射10天后，通过流式细胞术检测人CD45标记物，证实了P31细胞在小鼠体内的植入(未示出数据)。其中一组小鼠口服化合物1，另一组年龄与移植物都相匹配的小鼠服用载体对照。结果如图1所示，用化合物1和用载体治疗的小鼠(每组n＝5只小鼠，*P＜0.002)的存活曲线。结果表明，与对照组相比，化合物1能明显延缓小鼠疾病的潜伏期。

实施例2

将人MOLT-4-AML细胞经静脉(IV)注射到雄性非肥胖糖尿病(Non-ObeseDiabetic，NOD)严重联合免疫缺陷(Severe Combined Immunodeficiency，SCID)小鼠内，基于此建立急性髓性白血病(AML)小鼠模型，用于进行以下研究。MOLT-4细胞呈CD3阳性，NOD-SCID小鼠来源于缅因州巴尔港的杰克逊实验室(Jackson Laboratory,Bar HarborMaine)。

用来自ATCC的MOLM13人AML肿瘤细胞(200μL PBS中含5×10⁶个细胞)接种雄性NOD-SCID小鼠，每只小鼠通过静脉注射0.2mL。接种肿瘤三天后，将小鼠随机分为4组，每组5只，每组按如下方案每天给药一次：(第1组)口服载体(0.5％HPMC)，(第2组)口服化合物1的HPMC溶液(12.5mg/kg)，(第3组)口服化合物2的HPMC溶液(10mg/kg)，(第4组)口服化合物1的HPMC溶液(12.5mg/kg)和化合物2的HPMC溶液(10mg/kg)的组合，持续75天。

研究结果如图2至图5所示，图2示出了治疗75天后第1组和第2组(载体对比化合物1)的体重变化百分比，而图3示出了第1组和第2组小鼠的存活曲线。结果表明，与施用载体的小鼠相比，施用化合物1的小鼠寿命明显延长。图4示出了所研究的所有四组小鼠的体重变化百分比，而图5示出了所有四组小鼠的存活曲线。单独施用化合物1或组合施用化合物1与化合物2的小鼠比单独施用化合物2的小鼠存活时间明显延长。

实施例3

用来自ATCC的MOLT人急性淋巴性白血病(Acute Lymphocytic Leukemia，ALL)肿瘤细胞(200μL PBS中含1×10⁷个细胞)接种雄性NOD-SCID小鼠，每只小鼠通过静脉注射0.2mL。接种肿瘤7天后，将小鼠随机分成7组，每组5只，每组按如下方案给药：(第1组)每日口服载体(0.5％HPMC和0.1％Tween 80)，(第2组)每周两次口服化合物1(10mg/kg)，(第3组)每日口服化合物2(10mg/kg)，(第4组)每周一次通过腹膜内(IP)注射阿霉素(1mg/kg)，(第5组)每周一次通过IP注射阿霉素(0.5mg/kg)，(第6组)每周两次通过IP注射Ara-C(50mg/kg)，(第7组)每周一次通过IP注射Ara-C(70mg/kg)。

该研究7组小鼠的存活曲线结果如图6所示。由图6可以看出，每组小鼠的最大存活天数如下：第1组(载体)70天，第2组(化合物1)65天，第3组(化合物2)160天，第4组(阿霉素1.0qw)40天，第5组(阿霉素0.5qw)40天，第6组(Ara-C 50biw)65天，第7组(Ara-C 70qw)70天。

在不考虑本发明引用的文件是否被具体和单独地表示为通过引用并入的情况下，本发明中引用的所有文件出于任何和所有目的均以引用方式并入本申请中，其程度如同每个单独的参考文献在此被完全阐述一样。

现在已经完整地描述了权利要求的主题，本领域普通技术人员将理解，在不影响本文描述的主题或方面的范围的情况下，可以在广泛的等同范围内执行权利要求的主题。所附权利要求旨在解释为包括所有这样的等同物。