阅读说明：本技术 一种鳕鱼肽及其制备方法和应用 (Cod peptide and preparation method and application thereof ) 是由 王朝辉 于 2021-09-24 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种鳕鱼肽及其制备方法和应用,其公开的一种鳕鱼肽的制备方法,包括以下步骤：预处理、均质、酶解、灭酶、超微膜纯化、真空热隔膜浓缩、喷雾干燥,得到鳕鱼肽粉。本发明鳕鱼肽及其制备方法,以鳕鱼为主要原料,保证了来源的安全性和天然性,制得的鳕鱼肽具有较高的活性和消化吸收性,鳕鱼肽能够增加人体皮肤弹性和活力,还可促进骨的形成,增强低钙水平下的骨胶原结构,从而提高了骨强度；能改善骨代谢,增强成骨作用；预防骨质疏松、骨质增生、骨关节肿痛等骨病。(The invention discloses a cod peptide and a preparation method and application thereof, and discloses a preparation method of the cod peptide, which comprises the following steps: pretreating, homogenizing, performing enzymolysis, inactivating enzyme, purifying with ultramicro membrane, vacuum heat membrane concentrating, and spray drying to obtain cod peptide powder. The cod peptide and the preparation method thereof have the advantages that the cod is used as the main raw material, the safety and the naturalness of the source are ensured, the prepared cod peptide has higher activity and digestion and absorption, the cod peptide can increase the skin elasticity and the activity of a human body, the formation of bones can be promoted, the bone collagen structure under the low calcium level is enhanced, and the bone strength is improved; can improve bone metabolism and enhance osteogenesis; preventing osteopathia such as osteoporosis, hyperostosis, osteoarticular swelling and pain, etc.)

具体实施方式

为使本发明专利实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明专利。

实施例1

一种鳕鱼肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）预处理：将鳕鱼去除鱼皮及鱼骨后用蒸馏水洗干净，漂洗后的鳕鱼肉中加入食醋，并进行超声波处理，以去除鳕鱼肉腥味，食醋的加入量为2%wt，挤出水分获得鳕鱼肉备用；

（2）均质：将获得的鳕鱼肉采用绞肉机进行初次均质处理，把初次均质后的鱼肉与蒸馏水按照质量体积比为1:3的料液比混合，采用胶体磨进行二次均质，二次均质的时间为15min，二次均质后鱼肉均质成300μm的鳕鱼肉糜；

（3）酶解：调节pH至7.5-8.0加入总量占鳕鱼肉质量0.6-0.8％的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例为1:1，50-55℃酶解2-2.5h；然后调节pH至7.0-7.5加入鳕鱼肉质量0.6-0.8％的风味蛋白酶，50-55℃酶解1.5-2h；

（4）灭酶：酶解完成后，再在95℃灭酶，离心分离上清液即为鳕鱼酶解液；

（5）超微膜纯化：将鳕鱼酶解液通过0.2μm-1.0μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化鳕鱼蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da鳕鱼蛋白小肽液；

（6）真空热隔膜浓缩：将鳕鱼蛋白小肽液在真空度60Pa，蒸发温度为60℃，除去40％的水份，获得鳕鱼蛋白小肽浓缩液；

（7）将鳕鱼蛋白小肽浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度185℃，出口温度92℃；

（8）将喷雾干燥得到的产品过50目筛，制备得到鳕鱼肽粉。

实施例2

一种鳕鱼肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）预处理：将鳕鱼去除鱼皮及鱼骨后用蒸馏水洗干净，漂洗后的鳕鱼肉中加入食醋，并进行超声波处理，以去除鳕鱼肉腥味，食醋的加入量为3%wt，挤出水分获得鳕鱼肉备用；

（2）均质：将获得的鳕鱼肉采用绞肉机进行初次均质处理，把初次均质后的鱼肉与蒸馏水按照质量体积比为1:4的料液比混合，采用胶体磨进行二次均质，二次均质的时间为20min，二次均质后鱼肉均质成200μm的鳕鱼肉糜；

（3）酶解：调节pH至7.5-8.0加入总量占鳕鱼肉质量0.6-0.8％的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例为1:1，50-55℃酶解2-2.5h；然后调节pH至7.0-7.5加入鳕鱼肉质量0.6-0.8％的风味蛋白酶，50-55℃酶解1.5-2h；

（4）灭酶：酶解完成后，再在100℃灭酶，离心分离上清液即为鳕鱼酶解液；

（5）超微膜纯化：将鳕鱼酶解液通过0.5μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化鳕鱼蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da鳕鱼蛋白小肽液；

（6）真空热隔膜浓缩：将鳕鱼蛋白小肽液在真空度90Pa，蒸发温度为70℃，除去50％的水份，获得鳕鱼蛋白小肽浓缩液；

（7）将鳕鱼蛋白小肽浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度175℃，出口温度87℃；

（8）将喷雾干燥得到的产品过100目筛，制备得到鳕鱼肽粉。

实施例3

一种鳕鱼肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）预处理：将鳕鱼去除鱼皮及鱼骨后用蒸馏水洗干净，漂洗后的鳕鱼肉中加入食醋，并进行超声波处理，以去除鳕鱼肉腥味，食醋的加入量为3%wt，挤出水分获得鳕鱼肉备用；

（2）均质：将获得的鳕鱼肉采用绞肉机进行初次均质处理，把初次均质后的鱼肉与蒸馏水按照质量体积比为1:5的料液比混合，采用胶体磨进行二次均质，二次均质的时间为20min，二次均质后鱼肉均质成100μm的鳕鱼肉糜；

（3）酶解：调节pH至7.5-8.0加入总量占鳕鱼肉质量0.6-0.8％的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例为1:1，50-55℃酶解2-2.5h；然后调节pH至7.0-7.5加入鳕鱼肉质量0.6-0.8％的风味蛋白酶，50-55℃酶解1.5-2h；

（4）灭酶：酶解完成后，再在100℃灭酶，离心分离上清液即为鳕鱼酶解液；

（5）超微膜纯化：将鳕鱼酶解液通过1.0μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化鳕鱼蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da鳕鱼蛋白小肽液；

（6）真空热隔膜浓缩：将鳕鱼蛋白小肽液在真空度120Pa，蒸发温度为80℃，除去70％的水份，获得鳕鱼蛋白小肽浓缩液；

（7）将鳕鱼蛋白小肽浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度185℃，出口温度92℃；

（8）将喷雾干燥得到的产品过150目筛，制备得到鳕鱼肽粉。

对比例1

一种鳕鱼肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）预处理：将鳕鱼去除鱼皮及鱼骨后用蒸馏水洗干净，漂洗后的鳕鱼肉中加入食醋，并进行超声波处理，以去除鳕鱼肉腥味，食醋的加入量为2%wt，挤出水分获得鳕鱼肉备用；

（2）均质：将获得的鳕鱼肉采用绞肉机进行初次均质处理，把初次均质后的鱼肉与蒸馏水按照质量体积比为1:3的料液比混合，采用胶体磨进行二次均质，二次均质的时间为15min，二次均质后鱼肉均质成300μm的鳕鱼肉糜；

（3）酶解：调节pH至7.5-8.0加入总量占鳕鱼肉质量0.6-0.8％的胰蛋白酶50-55℃酶解2-2.5h；然后调节pH至7.0-7.5加入鳕鱼肉质量0.6-0.8％的风味蛋白酶，50-55℃酶解1.5-2h；

（4）灭酶：酶解完成后，再在95℃灭酶，离心分离上清液即为鳕鱼酶解液；

（5）超微膜纯化：将鳕鱼酶解液通过0.2μm-1.0μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化鳕鱼蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da鳕鱼蛋白小肽液；

（6）真空热隔膜浓缩：将鳕鱼蛋白小肽液在真空度60Pa，蒸发温度为60℃，除去40％的水份，获得鳕鱼蛋白小肽浓缩液；

（7）将鳕鱼蛋白小肽浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度185℃，出口温度92℃；

（8）将喷雾干燥得到的产品过50目筛，制备得到鳕鱼肽粉。

对比例2

一种鳕鱼肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）预处理：将鳕鱼去除鱼皮及鱼骨后用蒸馏水洗干净，漂洗后的鳕鱼肉中加入食醋，并进行超声波处理，以去除鳕鱼肉腥味，食醋的加入量为2%wt，挤出水分获得鳕鱼肉备用；

（2）均质：将获得的鳕鱼肉采用绞肉机进行初次均质处理，把初次均质后的鱼肉与蒸馏水按照质量体积比为1:3的料液比混合，采用胶体磨进行二次均质，二次均质的时间为15min，二次均质后鱼肉均质成300μm的鳕鱼肉糜；

（3）酶解：调节pH至7.5-8.0加入总量占鳕鱼肉质量0.6-0.8％的胰木瓜蛋白酶，50-55℃酶解2-2.5h；然后调节pH至7.0-7.5加入鳕鱼肉质量0.6-0.8％的风味蛋白酶，50-55℃酶解1.5-2h；

（4）灭酶：酶解完成后，再在95℃灭酶，离心分离上清液即为鳕鱼酶解液；

（5）超微膜纯化：将鳕鱼酶解液通过0.2μm-1.0μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化鳕鱼蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da鳕鱼蛋白小肽液；

（6）真空热隔膜浓缩：将鳕鱼蛋白小肽液在真空度60Pa，蒸发温度为60℃，除去40％的水份，获得鳕鱼蛋白小肽浓缩液；

（7）将鳕鱼蛋白小肽浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度185℃，出口温度92℃；

（8）将喷雾干燥得到的产品过50目筛，制备得到鳕鱼肽粉。

对比例3

一种鳕鱼肽的制备方法，包括以下步骤：

（1）预处理：将鳕鱼去除鱼皮及鱼骨后用蒸馏水洗干净，漂洗后的鳕鱼肉中加入食醋，并进行超声波处理，以去除鳕鱼肉腥味，食醋的加入量为2%wt，挤出水分获得鳕鱼肉备用；

（2）均质：将获得的鳕鱼肉采用绞肉机进行初次均质处理，把初次均质后的鱼肉与蒸馏水按照质量体积比为1:3的料液比混合，采用胶体磨进行二次均质，二次均质的时间为15min，二次均质后鱼肉均质成300μm的鳕鱼肉糜；

（3）酶解：调节pH至7.5-8.0加入总量占鳕鱼肉质量0.6-0.8％的胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例为1:1，50-55℃酶解2-2.5h；

（4）灭酶：酶解完成后，再在95℃灭酶，离心分离上清液即为鳕鱼酶解液；

（5）超微膜纯化：将鳕鱼酶解液通过0.2μm-1.0μm的微滤器和200-3000Da的超微膜机粗纯化鳕鱼蛋白小肽分子，获得分子量小于等于3000Da鳕鱼蛋白小肽液；

（6）真空热隔膜浓缩：将鳕鱼蛋白小肽液在真空度60Pa，蒸发温度为60℃，除去40％的水份，获得鳕鱼蛋白小肽浓缩液；

（7）将鳕鱼蛋白小肽浓缩液进行喷雾干燥，喷雾干燥的进口温度185℃，出口温度92℃；

（8）将喷雾干燥得到的产品过50目筛，制备得到鳕鱼肽粉。

测试例1

将实施例1-5和对比例1-2制备的鳕鱼肽的祛皱性能进行测试：

皮肤弹性的测定采用吸力法，以恒定负压模式，即测试探头在皮肤表面施加负压将皮肤吸入探针孔，负压消失后皮肤形变恢复，皮肤形变随负压和时间变化可通过测试仪中发射光和接受光的装置测得，该装置可反映皮肤被吸入深度，这样可得到皮肤拉伸长度随时间变化的曲线图，用Uf表示皮肤最大拉伸量，Ue表示恒定负压加到皮肤上0.1秒时皮肤的拉伸量，Ur表示无负压0.1S后皮肤恢复量，Uv＝Uf-Ue黏弹性部分，Ua表示取消负压到下次连续测试再加负压皮肤的恢复量，R2＝Ua/Uf，R2为一个反映皮肤弹力的参数，R2值越大则皮肤弹性越好，越接近1弹性越好。

选择年龄40-60岁的受试者，男女各半，随机分成6组，每组30名。受试者具有皱纹、皮肤松弛或者皮肤干燥等皮肤衰老现象。受试者无严重系统疾病，无活动性过敏性疾病，也没有接受过皮肤治疗、美容以及其他可能影响结果的测试。受试者在性别、年龄、病情等方面无显著差异(P>0.05)，具有可比性。

试验方法：测试对象每日食用3次鳕鱼肽，每次3克，进行测试。

在使用本发明的鳕鱼肽之前，在脸部用皮肤弹性测试仪(德国CK公司提供，型号为MPA580)检测脸部弹性值；在食用30天后再次分别检测脸部弹性值。每个试验区域检测5次弹性R2，并取其平均值。

具体测试数据见表1

	弹性值
		实施例1	0.75
实施例2	0.78
		实施例3	0.76
对比例1	0.68
		对比例2	0.72

综合上述，本发明的鳕鱼肽的制备方法，是以去头、去内脏的鳕鱼为原料，经过预处理、均质、酶解、灭酶、超微膜纯化、真空热隔膜浓缩喷雾干燥制备而成，其制备方法简单，制备条件温和易实现，且由本发明制备的鳕鱼肽苦味低，利用率高，具有较好的风味，具有良好的抗运动疲劳功效。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。