具体实施方式

为了解决现有技术中的一个或者多个上述技术问题，本发明在第一方面提供了一种犬用营养粉，其中，所述营养粉包含如下组分或由如下组分组成：蛋黄粉、鸡肝粉、奶粉、啤酒酵母粉、葡萄糖、麦芽糊精、益生菌乳酸钙、磷酸氢钙、维生素C、维生素D3、酪蛋白磷酸肽和牛胶原蛋白。

本发明采用的蛋黄粉是以新鲜鸡蛋为原料，经清洗消毒、打蛋、过滤、冷却、巴氏杀菌、喷雾干燥等数十道工序制成，保留了蛋黄全部营养，包含动物机体所需的氨基酸、钙、铁、磷、维生素、卵磷脂、牛磺酸、叶黄素、玉米黄素、DHA、EPA等，与鲜蛋黄营养等同。维生素D是属于脂溶性维生素，其吸收过程需要脂质的参与，蛋黄粉为维生素D的有效吸收提供了优质的脂肪来源。

本发明犬用营养粉中蛋黄粉的含量为1重量份3重量份，优选1.2重量份-2.5重量份，更优选1.5重量份-2重量份。

本发明采用的鸡肝粉可以商购。

本发明犬用营养粉中鸡肝粉的含量为10重量份-15重量份，优选11重量份-14重量份，更优选12重量份-13重量份。

本发明采用的奶粉可以商购。

本发明犬用营养粉中奶粉的含量为2重量份-5重量份，优选3重量份-4重量份，更优选3.5重量份。

本发明采用的啤酒酵母粉可以商购。

本发明犬用营养粉中啤酒酵母粉的含量为5重量份-8重量份，优选6重量份-7重量份，更优选6.5重量份。

本发明采用的葡萄糖可以商购。

本发明犬用营养粉中葡萄糖的含量为11重量份-15重量份，优选12重量份-14重量份，更优选13重量份。

本发明采用的麦芽糊精可以商购。

本发明犬用营养粉中麦芽糊精的含量为11重量份-15重量份，优选12重量份-14重量份，更优选13重量份

本发明采用的益生菌乳酸钙水溶性好，吸收率高于无机钙，同时缓解了无机钙导致的犬类便秘问题。

本发明犬用营养粉中益生菌乳酸钙的含量为10重量份-13重量份，优选11重量份-12重量份，更优选11.6重量份。

本发明采用的乳酸钙优选是益生菌发酵乳酸钙，所述益生菌发酵乳酸钙能保留大量乳酸菌代谢产物(乳酸菌素，多糖，寡糖，维生素等)，促进肠道发育，维持肠道健康。此外，益生菌发酵乳酸钙气味酸香、味甜，对爱宠有很好的诱食效果。虽然机理尚未明了，但是本发明研究发现，采用益生菌发酵产生的乳酸钙组合物比其他来源的乳酸钙具有更好的促生长作用。并且添加特定比例的益生菌发酵产生的乳酸钙组合物比其他含量更加适宜促进骨骼生长。

所述益生菌发酵乳酸钙的制备方法为：

1、乳酸菌的活化：取一环生长良好的斜面种子，接入液体活化培养基中，至于36℃培养箱中培养，连续活化2次备用；

2、乳酸菌富集培养：在无菌条件下，用移液管吸取一定量活化后的菌悬液，加入MRS培养基中，置于恒温培养箱中培养；

3、乳酸菌发酵产酸培养：在250mL锥形瓶中加入50mL发酵培养基，在无菌条件下，用移液管吸取一定量活化后的菌悬液，加入发酵培养基中，置于恒温培养箱中培养；

4、发酵法制取乳酸钙：将活化后的菌悬液接入添加有碳酸钙的发酵培养基中，在试验所得的最优条件下进行培养；

5、乳酸钙的提取：将在最佳条件下获得的发酵液过滤，以除去菌体及未反应的碳酸钙，在滤液中加入氧化钙调pH值至12～13，并加入0.4％的MgSO4沉聚菌体蛋白，在80℃，搅拌反应30min后，趁热抽滤得乳酸钙母液，再将母液进行加热浓缩，当母液中乳酸钙质量浓度达到145g/L～150g/L时，冷却静置结晶24h；分离晶体和母液，由于乳酸钙在水中的溶解度较大，结晶母液中还留有大量的乳酸钙，浓缩后再次结晶，合并晶体。

本发明采用的磷酸氢钙可以商购。

本发明犬用营养粉中磷酸氢钙的含量为20重量份-24重量份，优选21重量份-23重量份，更优选22重量份。

本发明采用的维生素D3决定了机体是否具有强大的骨骼发育系统，促进骨骼发育。

本发明犬用营养粉中维生素D3的含量为0.001重量份-0.01重量份，优选0.005重量份-0.008重量份，更优选0.006重量份。

本发明犬用营养粉中酪蛋白磷酸肽的含量为0.5重量份-1重量份，优选0.6重量份-0.8重量份，更优选0.7重量份。

本发明采用的酪蛋白磷酸肽在与乳酸钙配合使用的时候，能够产生协同作用，促进骨骼发育。

本发明采用的牛胶原蛋白可以商购。

本发明犬用营养粉中牛胶原蛋白的含量为1重量份-2重量份，优选1.5重量份。

本发明中益生菌乳酸钙和磷酸氢钙提供钙和磷，益生菌乳酸钙和磷酸氢钙之间的比例为1：2-1：1.88，优选1.2：1。如果比例在之外，则可能降低对犬起到的补钙作用。

本发明中益生菌乳酸钙与酪蛋白磷酸肽之间的比例为(10-14)：(0.5-1)，最优选12.75:1。如果比例在之外，则不能产生协同作用，难以最大促进骨骼发育。

本发明犬用营养粉的制备方法包括例如以下步骤：

1).预混：将配方量的益生菌乳酸钙、磷酸氢钙、奶粉、葡萄糖、酪蛋白磷酸肽、牛胶原蛋白、鸡肝粉、蛋黄粉和麦芽糊精过100目筛网，防止结块物料和杂质混入，过筛后将物料混匀：

2).烘干：将上述混匀的物料放入烘箱中进行烘干，烘干后的物料冷却至室温：

3).总混：将配方量的维生素C、维生素D3和啤酒酵母粉加入冷却后的物料中，于混合机中充分混合均匀，将混匀的物料过100目筛网：

4).灭菌：灌装前灭菌：

5).灌装：灭菌后的粉剂，转移至灌装线，在消毒条件下进行灌装、密封：

6).可选的灌装后灭菌：灌装后采用巴氏消毒法进行杀菌。

实施例

下文将以实施例的形式对本发明进行进一步的说明，但是本发明请求保护的范围不限于这些实施例。实施例中使用到的原料除非另有说明，否则都是可以商购得到的常规原料。

制备例

按照下表1所示的配方进行，每种营养粉制备2kg：

表1不同营养粉的配方

根据上述配方A、B、C、D和E分别制得营养粉A、B、C、D和E，所述制备方法包括以下步骤：

1、预混：将配方量的益生菌乳酸钙、磷酸氢钙、奶粉、葡萄糖、酪蛋白磷酸肽、牛胶原蛋白、鸡肝粉、蛋黄粉和麦芽糊精过100目筛网，防止结块物料和杂质混入，过筛后将物料混匀；

2、烘干：将上述混匀的物料放入烘箱中进行烘干，烘干温度为70℃，烘干时间为6小时，烘干后的物料冷却至室温；

3、总混：将配方量的维生素C、维生素D3和啤酒酵母粉加入冷却后的物料中，于混合机中充分混合均匀，将混匀的物料过100目筛网；

4、灭菌：灌装前灭菌；

5、灌装：灭菌后的粉剂，转移至灌装线，在2000风量的空气动态消毒机开启60分钟后的条件下(避免二次污染)分别进行灌装、密封；

6、灌装后灭菌：灌装后采用巴氏消毒法进行杀菌(70～80℃，30～40分钟)。

其中，本发明的益生菌发酵乳酸钙制备方法包括：

1、乳酸菌的活化：取一环生长良好的斜面种子，接入液体活化培养基中，至于36℃培养箱中培养，连续活化2次备用；

2、乳酸菌富集培养：在无菌条件下，用移液管吸取一定量活化后的菌悬液，加入MRS培养基中，置于恒温培养箱中培养；

3、乳酸菌发酵产酸培养：在250mL锥形瓶中加入50mL发酵培养基，在无菌条件下，用移液管吸取一定量活化后的菌悬液，加入发酵培养基中，置于恒温培养箱中培养；

4、发酵法制取乳酸钙：将活化后的菌悬液接入添加有碳酸钙的发酵培养基中，在试验所得的最优条件下进行培养；

5、乳酸钙的提取：将在最佳条件下获得的发酵液过滤，以除去菌体及未反应的碳酸钙，在滤液中加入氧化钙调pH值至12～13，并加入0.4％的MgSO4沉聚菌体蛋白，在80℃，搅拌反应30min后，趁热抽滤得乳酸钙母液，再将母液进行加热浓缩，当母液中乳酸钙质量浓度达到145g/L～150g/L时，冷却静置结晶24h；分离晶体和母液，由于乳酸钙在水中的溶解度较大，结晶母液中还留有大量的乳酸钙，浓缩后再次结晶，合并晶体。

试验例1

1动物饲养

试验选取15只比格犬(8公7母)，均为8～10月龄的青年犬，初始体重差异在1kg以内。

试验犬单笼饲养，每天定量喂食300g。上午、下午各喂1次，自由饮水。每天有运动时间。每天清粪。

2.实验设计

根据体重及性别比例相近的原则，试验分3组，空白对照组4只、配方A组7只、配方B组(对照组)4只。空白组饲喂基础全价犬粮，配方A组饲喂基础全价犬粮+配方A营养粉(每次2.8克，每日2次)，配方B组(对照组)饲喂基础全价犬粮+配方B营养粉(每次2.8克，每日2次)，试验从2020年4月24日开始，5月14日结束，持续21天。

见下表2。

表2试验分组情况

注：1、青年犬按日采食量300g计算钙的添加量。

3采样指标与方法

3.1体重：在试验开始的第0、7、14、21天称体重。

3.2采食量：每日每只犬共记录1次采食量，

3.3被毛情况：每日早上巡视时通过拍照的方式记录每只犬的毛发状况1次，照片要求能够清晰看到毛发的蓬松度和光泽度。

3.4皮肤状态：每日早上巡视时记录每只犬的皮肤状态1次，每次拨开犬背部、胸部、面部三处毛发观察皮肤有无红斑、红疹、皮屑等异常情况。记录在表。

3.5排便情况：每日早上清粪时记录每只犬粪便情况共1次，记录在表。

3.6精神状态：每日早晚巡视时记录每只犬精神状态共2次，打分记录。

3.7选择记录：试验前3天，每日早上牵引每只犬进行诱导饮食，并记录首次选择的营养品。牵引试验结束后，进行上述常规记录。

4.结果与讨论

4.1体重

试验期间共记录试验犬体重4次，结果见表3。试验第7天、第14天、第21天相比试验开始前(D0)的体重变化情况见表4，试验每周的体重变化情况见表4。试验犬体重分析情况见表5、表6、表7。

表3试验犬体重记录 单位：kg

说明：D0：试验开始前一天；D7：试验开始第7天；D14：试验开始后第14天，依此类推。

表4试验犬体重变化 单位：kg

说明：D0：试验开始前一天；D7：试验开始第7天；D14：试验开始后第14天，依此类推。

表5试验犬在不同试验阶段的平均体重 单位：kg

注：同列数据肩标小写字母不同者，表示差异显著；同列数据肩标大写字母不同者，表示差异极显著；无肩标字母或有相同字母者，表示差异不显著。下同。

表6与初始体重相比，试验犬在不同试验阶段的平均增重情况单位：kg

表7试验犬每周平均增重情况 单位：kg

利用R语言对数据进行了统计分析，结果表明表5中各组均值差异不显著；但表6中，配方A组和配方B组(对照组)在整个试验期的总增重存在显著差异(P＝0.0563)；表7中，第二周空白组的增重极显著低于配方A组(P＝0.0117)，第三周配方B组(对照组)的增重显著低于配方A组(P＝0.05)，

从表5可以看出，各组犬的体重在各个试验阶段没有显著差异。但试验开始时，配方B组(对照组)的体重最大，比配方A组犬重了0.98kg，而试验结束时，这一差距缩小到了0.66kg。空白组在试验开始时比配方A组重了0.26kg，而试验结束时，这一差距缩小到了0.06kg。这些数据表明配方A组在试验期间的增重速度超过了空白组和配方B组。表6、表7的数据也证明了这一点，即从增重的角度来说，各组之间是存在显著差异的。表6表明，总增重(3周试验期的增重总和)以A型营养粉最多，并与B型营养粉存在显著差异。表7表明，试验第2周，A型营养粉组的周增重最高，与空白组之间差异极显著；试验第3周，A型营养粉组的周增重仍然是最大的，并与B型营养粉组产生了显著差异。

从体重数据来看，A型营养粉的表现最好，B型营养粉最差。由于A型营养粉钙磷比更适宜，因此，认为A型营养粉促进了犬粮中钙、磷等矿物质的利用，使犬增重最快。

4.2选择记录

营养品选择试验结果表8所示。利用R语言对数据进行了统计分析，结果表明不同营养粉的适口性存在显著差异，B型营养粉显著降低了日粮的适口性(P＝0.04975)。表8中，加了A型营养粉的日粮被选择次数最多，基础日粮次之，加了B型营养粉的日粮最差。

表8试验犬选择日粮情况

注：同行数据肩标小写字母不同者，表示差异显著；有相同字母者，表示差异不显著。

根据这一结果，接下来又进行了另一类选择试验。我们又从市场购买了“卫仕”牌钙片和“凯锐思”牌钙片。这两种钙片各取一片及本试验用到的A型营养粉、B型营养粉各2.0克，放在犬的面前，让其采食，15只犬中只有一只犬把四种钙都吃了，但其它14只犬只吃了本发明的营养粉。这说明，本发明的营养粉的适口性好于片剂。

4.3被毛情况

见表9。除了个别犬有轻微脱毛现象，其它被毛异常情况都没有出现。空白组在试验第5天有1只犬出现轻微脱毛现象，配方A组在试验第19天有1只犬出现轻微脱毛现象，配方B组(对照组)在第5天和第17天各有1只犬出现了轻微脱毛。这充分说明本发明的营养粉对比格犬无害。

从被毛图片(图1、图2、图3)来看，配方A组和配方B组(对照组)比空白组犬的被毛看上去更顺滑、更有光泽。其中，配方A组的表现最好。这表明，钙磷比适宜的营养粉对被毛也是有好处的。

表9试验犬被毛情况异常统计

注：一天一只犬的被毛状态记为1犬次。

4.4皮肤状态

从记录表来看，除了个别犬表现轻微脱毛外，皮肤无皮屑、红疹、红肿及其他异常情况。说明本发明的营养粉对犬无害。

4.5粪便情况

各组试验犬的粪便情况总结见表10。经R语言分析，各组粪便异常情况无显著差异(P＝1)。整个试验期内，空白组在第5天、第16天、第19天各有1只犬出现了褐色硬便，配方A组在第4天、第11天、第17-18天各有1只犬了褐色硬粪，配方B组(对照组)在第4-7天、第11天、第16天各有1只犬出现了褐色硬便。

总体来看，本发明的营养粉对犬的粪便有一定影响，容易造成硬便，特别是在钙、磷比例不恰当的B型营养粉组。但对犬的健康无碍。

表10试验犬粪便异常状态统计

注：一天一只犬的粪便状态记为1犬次。

4.6精神状态

从记录来看，各组犬都未出现任何精神异常。这说明本发明的营养粉对比格犬无害。试验过程中，各组犬都很活跃，即除眨眼外，吠叫、走步、摇尾、攀栏、攀栏等活跃活动都有。

4.7采食

从记录表来看，有的犬每天采食量低于300g。整个试验期内，空白组每只犬每天平均采食297.9g，配方A组是298.6g，配方B组(对照组)是299.0g，经R语言对数据进行方差分析，结果表明各组的平均采食量无显著差异(P＝0.097)。这表明，本发明的营养粉对比格犬无害。

5.结论

从被毛、皮肤、粪便、精神情况、采食量来看，本发明的营养粉对犬无害，可以长期食用。

从体重来看，A型营养粉的促生长效果明显。从营养粉组成来看，A型营养粉应该对骨骼更有益。

从选择性实验结果来看，本发明的营养粉的适口性好。从被采食次数来看，本发明的营养粉的适口性高于全价犬粮(21次vs.15次)。

试验例2

1.动物饲养

8只比格犬(4公4母)，均为8～10月龄的青年犬，初始体重差异在1kg以内。每只犬的左后肢跗关节经人工设计为炎症肿胀。

试验犬单笼饲养，每天定量喂食300g。上午、下午各喂1次，自由饮水。每天有运动时间。每天清粪。

2.试验设计

根据体重及性别比例相近的原则，试验分4组，每组1公1母共2只犬，每组犬的日粮中分别加入不同的营养粉。A组饲喂基础全价犬粮+配方A营养粉(每次2.8克，每日2次)，C组饲喂基础全价犬粮+配方C营养粉(每次2.8克，每日2次)，D组饲喂基础全价犬粮+配方D营养粉(每次2.8克，每日2次)，E组饲喂基础全价犬粮+配方E营养粉(每次2.8克，每日2次)。

试验从2020年5月15日开始，6月5日结束，持续21天。

见下表。

表11试验分组情况

注：1、试验犬按日采食量300g计算钙的添加量。

3.采样指标与方法

跗关节周长：在试验开始的第0、7、14、21天分别用卷尺测量犬左后肢跗关节的周长。

4.结果与讨论

试验期间共记录试验犬跗关节周长4次，结果见表12。

表12试验犬跗关节周长记录 单位：mm

说明：D0：试验开始前一天；D7：试验开始第7天；D14：试验开始后第14天，依此类推。

从表12可以看出，各组犬左后肢的跗关节肿胀程度都有减轻，其中，以A组犬的恢复情况最好，整个试验期内肿胀的关节周长平均减小了14.5mm，远超过其它组的8mm、8.5mm、10mm。这表明，配方A营养粉对骨骼生长更加有益。

从各组营养粉的组成来看，A型营养粉中益生菌发酵乳酸钙添加量为12.5％，C型营养粉中只用了12.5％的普通乳酸钙，D型和E型营养粉中添加的益生菌乳酸钙分别是9％和15％。各组试验犬中，C组肿胀的跗关节在21天的试验期内减值最少，表明益生菌发酵乳酸钙被动物吸收、利用的效果超过非发酵来源的乳酸钙。而D组、E组犬的跗关节在21天的试验期内减值均少于A组，说明不是日粮中钙、磷含量越高就越有利于动物骨髓健康，必须考虑日粮中的钙磷比，以及益生菌发酵乳酸钙的适宜用量。

5.结论

从比格犬肿胀的左后肢跗关节的恢复情况来看，配方A营养粉对犬的骨骼健康更有利，这说明配方A的配比更科学、更符合犬的营养需要。

试验例2充分表明了适宜含量的益生菌乳酸钙比普通乳酸钙、或含量不适宜的益生菌乳酸钙对犬的骨骼健康具有更好的效果。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的主旨。