具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一实施方式的在胃酸中稳定的微囊粉，包括芯材以及包覆在芯材外的囊材，囊材的熔点大于42℃，囊材不会在蛋白酶和胃酸的作用下分解或溶解，从而保证微囊粉在胃内不会融化、分解或溶解，从而避免芯材在胃内被释放出来；且囊材会在肠道消化酶的作用下分解从而使得微囊粉在进入肠道后，将内部的芯材释放出来，从而保证芯材被肠道吸收或在肠道发挥作用。

优选的，囊材的熔点为60℃～140℃。

囊材的熔点为60℃～140℃，一方面可以确保囊材在胃内不会熔化，另一方面也使得囊材便于熔化包覆，可以制备出品质较高的微囊粉。此外，60℃～140℃是优选的囊材的熔点区间，超过该温度区间的话，很多需要被包覆的芯材(例如，NADH、NADPH)会被破坏。

本发明囊材选自米糠脂肪烷醇和C原子数为12以上的高级脂肪烷醇中的至少一种。

首先，高级脂肪烷醇和米糠脂肪烷醇均具有较好的化学稳定性，其均不会被胃酸分解，并且会在肠道的肠道消化酶的作用下分解，从而将内部的芯材释放出来；其次，高级脂肪烷醇和米糠脂肪烷醇还具有较好的常温稳定性，从而可以保证微囊粉的体外开放环境下的储存稳定性；再次，高级脂肪烷醇和米糠脂肪烷醇的熔点合适，使其达到熔融状态时芯材不受破坏、也使得囊材便于熔化包覆，以便制备出品质较高的微囊粉；此外，米糠脂肪烷醇和高级脂肪烷醇尤其是二十八烷醇、三十烷醇和三十二烷醇，其自身也可以作为营养补充剂，既保证了实用的安全性，也可以起到营养补充的作用。

当囊材为米糠脂肪烷醇时，因其本身具有显著的抗疲劳、降脂和增加性功能效果，在功能食品、保健食品、药品以及化妆品中具有很好的应用潜力，已于2017年6月9日被收纳为新资源食品。然而由于米糠脂肪烷醇的溶解性能极差，使其出色的生物学功能难以发挥。因此现有技术一般采用水溶性较好的囊材如阿拉伯胶等将其包埋。

本申请首次将米糠脂肪烷醇作为微囊粉的囊材，这是由于米糠脂肪烷醇熔点为80℃～83℃，室温条件下粉末的流动性好，可以作为囊材保护芯材，起到隔水、隔氧和抗胃酸的作用，从而保持芯材稳定性，解决了芯材在胃酸条件下分解的问题，提高了芯材在肠道的吸收、利用率。

当囊材为高级脂肪烷醇时，优选二十八烷醇、三十烷醇和三十二烷醇。这是由于高级烷醇性质稳定，不易氧化，耐酸碱，不吸潮，具有良好的生物降解性和生物活性；常温下常以白色蜡状固体、粉末或鳞片状晶体等形式存在，无毒，可食，并与大多数有机物一样不溶于水，易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。将其作为囊材，可以实现与米糠脂肪烷醇一致的技术效果。

本申请芯材理论上可以为任意的肠吸收或需要在肠内发挥功能的物质。

一般来说，芯材为易被胃液破坏且需要到肠道中被吸收或发挥作用的物质。通过囊材的包覆，可以保证需要到肠道中被吸收或发挥作用的物质不会在胃内分解或融化。

芯材优选还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸中的至少一种。

一般来说，囊材和芯材的质量比为70～90：10～30。结合实施例这样的比例，一方面可以保证较高的芯材包覆量；另一方面，实际制得的产品中，芯材的包覆率也可以保持在较高水平。

本实施方式中，微囊粉的粒径可以根据实际需求以及制备方法确定。优选粒径为1μm～1000μm。

结合图1，本发明公开了一实施方式的上述微囊粉的制备方法，通过冷冻喷雾干燥法制备上述微囊粉，包括如下步骤：

S110、将囊材加热至熔化。

其中，囊材的熔点大于42℃，囊材不会在蛋白酶和胃酸的作用下分解或溶解，且囊材会在肠道消化酶的作用下分解。

S120、保温状态下将芯材和熔化后的囊材充分混合，得到混悬液。

优选的，保温状态下充分混合后得到混悬液的操作为：保温状态下，以转速500rpm～1200rpm搅拌3min～10min，得到混悬液。

S130、对混悬液进行冷冻喷雾干燥制粒，得到所需要的微囊粉。

制得的微囊粉包括芯材以及包覆在芯材外的囊材。

优选的，对混悬液进行冷冻喷雾干燥制粒的操作为：用喷雾干燥器对混悬液进行冷冻喷雾干燥制粒。

更优选的，喷雾干燥器的参数为：进风温度2℃～20℃，出风温度15℃～30℃，腔体中部温度5℃～25℃，进料速度为100mL/min～1500mL/min。

结合图2，本发明还公开了另一实施方式的上述微囊粉的制备方法，通过热熔混合喷雾法制备上述微囊粉，包括如下步骤：

S210、将芯材和囊材充分混合后得到混合物。

其中，囊材的熔点大于42℃，囊材不会在蛋白酶和胃酸的作用下分解或溶解，且囊材会在肠道消化酶的作用下分解。

优选的，可以采用混合机将芯材和囊材充分混合。

更优选的，混合机的参数为：混合频率为25Hz～40Hz，混合时间为30min～60min。

S220、对混合物依次进行热熔和喷雾制粒，得到所需要的微囊粉。

制得的微囊粉包括芯材以及包覆在芯材外的囊材。

优选的，对混合物依次进行热熔和喷雾制粒的操作为：将混合物加热熔化后，用雾化系统对加热熔化后的混合物进行喷雾制粒。

更优选的，雾化系统的参数如下：雾化轮转速为15000rpm～25000rpm，进风温度为2℃～15℃，出风温度为15℃～30℃，腔体中部温度为5℃～10℃，进料速度为100mL/min～1500mL/min。

本实施方式中，为了方便生产，混合物加热融化的操作采用热熔挤出机的加料系统实现。

结合图3，本发明还公开了再一实施方式的上述微囊粉的制备方法，通过液中冷凝法制备上述微囊粉，包括如下步骤：

S310、将囊材加热至熔化。

其中，囊材的熔点大于42℃，囊材不会在蛋白酶和胃酸的作用下分解或溶解，且囊材会在肠道消化酶的作用下分解。

S320、保温状态下将芯材和熔化后的囊材混合，得到混合物。

S330、保温状态下对混合物进行剪切。

其中，剪切的速度为8000rpm～10000rpm，剪切的时间为6min～15min。

S340、对剪切后的混合物在冷凝液中进行喷雾制粒，得到所需要的微囊粉。

制得的微囊粉包括芯材以及包覆在芯材外的囊材。

优选的，对剪切后的混合物在冷凝液中进行喷雾制粒的操作在冷凝干燥器中进行的。

更优选的，冷凝干燥器的参数如下：喷雾转轮的转速为15000rpm～25000rpm，冷凝液温度为10℃～20℃，进料速度为100mL/min～1500mL/min。

结合图4，本发明还公开了又一实施方式的上述微囊粉的制备方法，通过热熔挤出法制备上述微囊粉，包括如下步骤：

S410、将芯材和囊材充分混合后得到混合物。

其中，囊材的熔点大于42℃，囊材不会在蛋白酶和胃酸的作用下分解或溶解，且囊材会在肠道消化酶的作用下分解。

优选的，可以采用混合机将芯材和囊材充分混合。

更优选的，混合机的参数为：混合频率为25Hz～40Hz，混合时间为30min～60min。

S420、对混合物依次进行热熔挤出制粒和剪切，得到所需要的微囊粉。

制得的微囊粉包括芯材以及包覆在芯材外的囊材。

优选的，剪切的速度为8000rpm～10000rpm。

优选的，对混合物依次进行热熔挤出制粒和剪切的操作为：用热熔挤出机对混合物进行热熔挤出制粒，接着用剪切系统对冷却后的热熔挤出制粒产物进行剪切。

更优选的，热熔挤出机的参数如下：挤出温度为100℃～120℃，挤出模孔为0.5mm～5mm，挤出速度为5rpm～150rpm。

以下为具体实施例。

实施例1

冷冻喷雾干燥法制备微囊粉

准确称取540g米糠脂肪烷醇于1000mL夹层锅中，保持水浴锅温度80℃至米糠脂肪烷醇熔化，保温状态下将60g NADH投入熔化后的米糠脂肪烷醇，在500rpm转速下搅拌10min充分混合，得到混悬液。用喷雾干燥器对混悬液进行冷冻喷雾干燥制粒，调节喷雾干燥器工作参数为：进风温度2℃，出风温度15℃，腔体中部温度5℃，进料速度为1500mL/min，得到米糠脂肪烷醇包NADH微囊粉，记作样品1。

实施例2

热熔混合喷雾法制备微囊粉

准确称取480g米糠脂肪烷醇和120g NADH投入到混合机内。开启混合机，混合频率为25Hz，混合时间为60min，对米糠脂肪烷醇和NADH进行充分混合。混合完成后，将混合物投入到热熔挤出机的加料系统，混合物经140℃热融，输出至雾化系统进行喷雾包埋制粒。调整雾化轮转速为15000rpm，进风温度为2℃，出风温度为15℃，腔体中部温度为5℃，进料速度为1500mL/min，得到米糠脂肪烷醇包NADH微囊粉，记作样品2。

实施例3

液中冷凝法制备微囊粉

准确称取420g米糠脂肪烷醇投入1000mL夹层锅内，水浴加热至90℃以使米糠脂肪烷醇熔化，保温状态下将180g NADH后投入到熔化后的米糠脂肪烷醇得到混合物，同时对混合物进行10000rpm的高剪切。6min后将夹层锅接上含冷凝液的冷凝干燥器进行液中冷凝喷雾制粒。调整冷凝干燥器喷雾转轮的转速为25000rpm，冷凝液温度为10℃，进料速度为1500mL/min。得到米糠脂肪烷醇包NADH微囊粉，记作样品3。

实施例4

冷冻喷雾干燥法制备微囊粉

准确称取540g三十烷醇于1000mL夹层锅中，保持水浴锅温度100℃至米糠脂肪烷醇熔化，保温状态下将60g NADPH投入熔化后的三十烷醇，在1200rpm转速下搅拌3min充分混合，得到混悬液。用喷雾干燥器对混悬液进行冷冻喷雾干燥制粒，调节喷雾干燥器工作参数为：进风温度20℃，出风温度30℃，腔体中部温度25℃，进料速度为100mL/min，得到三十烷醇包NADPH微囊粉，记作样品4。

实施例5

热熔混合喷雾法制备微囊粉

准确称取480g三十烷醇和120g NADPH投入到混合机内。开启混合机，混合频率为40Hz，混合时间为30min，对三十烷醇和NADPH进行充分混合。混合完成后，将混合物投入到热熔挤出机的加料系统，混合物经120℃热融，输出至雾化系统进行喷雾包埋制粒。调整雾化轮转速为25000rpm，进风温度为15℃，出风温度为30℃，腔体中部温度为10℃，进料速度为100mL/min，得到三十烷醇包NADPH微囊粉，记作样品5。

实施例6

热熔挤出法制备微囊粉

准确称取420g三十烷醇和180g NADPH投入到混合机内，在40Hz频率下混合30min后，将混合物投入到热熔挤出机的加料系统，混合物经热融、挤出后，进入成型系统冷却。冷却后，进入剪切系统进行剪切。调整挤出温度为120℃，挤出模孔为0.5mm，挤出速度为150rpm，剪切速度为10000rpm，收集剪切粉末，得到三十烷醇包NADPH微囊粉，记作样品6。

测试例1芯材和囊材的质量占比对包埋率的影响

由于芯材NADH和NADPH极易溶于水，而囊材米糠脂肪烷醇、高级脂肪烷醇不溶于水，那么将本申请制备的微囊粉置于水中，则未被包埋的芯材会溶于水中，检测水中芯材含量，即可计算出微囊粉中芯材的包埋率。芯材的包埋率＝(样品中芯材理论包埋量—HPLC检测出水溶液中芯材含量)/样品中芯材理论包埋量，样品中芯材理论包埋量即为样品中芯材的添加量。

HPLC检测芯材NADH及NADPH的含量：准确称取50mg的样品置于25mL容量瓶中，加入浓度为100mmol/L的碳酸氢钠溶液25mL定容，超声30min溶出未被包埋的NADH或NADPH后，分别取上述容量瓶中溶液1mL经0.22μm滤膜过滤后注入HPLC进样瓶，通过HPLC分别检测并计算出样品溶液NADH或NADPH的含量。HPLC法检测分析参数为：Agilent 1260InfinityⅡ，其具有四元泵、自动取样器、柱恒温器和可变波长的检测器(VWD)；分离柱为ChromCore AQC18(5μm)4.6x250mm，检测波长260nm，NADH和NADPH检测的具体参数如下表1所示。

表1 HPLC检测NADH和NADPH含量的具体参数

实施例样品1～6的芯材包埋量检测结果如表2所示。可以看出，当芯材与囊材的质量百分比在(10～30)：(70～90)时，包埋率达到93％以上，包埋效果较好。

表2 样品1～6芯材的包埋量及包埋率

测试例2室温开放环境下稳定性实验

分别取2g实施例样品2和样品5置于室温开放环境中放置7天，先观察外观，然后分别称取50mg放置7天后的样品2和样品5于50mL的离心管中，倒入45mL的二甲苯，拧紧盖子，连续震荡30min后，将离心管中的液体完全移入125mL的分液漏斗中，向分液漏斗加入约80mL浓度为100mmol/L碳酸氢钠溶液，连续震荡萃取30min，然后静置5～10min。待液体完全分层，取下层溶液置于100mL容量瓶中，再以浓度为100mmol/L碳酸氢钠溶液定容至100mL，摇匀。分别采用测试例1相同的检测方法检测样品中芯材含量。

芯材保留率＝检测出样品中芯材含量/样品中芯材理论包埋量，样品中芯材理论包埋量即为样品中芯材的添加量，结果如表3所示。

表3 室温开放环境样品中芯材保留结果

由表3结果可以看出，通过本发明制得的微囊粉，室温开放环境放置7天后，芯材保留率达到97％以上，说明本发明微囊粉可以有效隔绝空气中水分及氧气对芯材的影响，很大程度上提高了芯材的稳定性，拓宽了芯材的工业化应用前景。

测试例3模拟胃酸溶液中的释放实验

启动片剂四用测定仪进行预热，温度设置为37℃，安装好篮轴与篮体，利用定位球定位(做好标记)，放入溶出杯(每个溶出杯中分别倒入900mL pH为1.2的盐酸溶液)并固定好。然后分别取实施例样品2和样品5各200mg用纱布包裹后放入相应篮体中。在100r/min转速下旋转4小时后分别取溶出杯液体1mL，分别采用实施例1相同的检测方法检测样品中芯材含量。

芯材保留率＝(样品中芯材理论包埋量—检测出盐酸溶液中芯材含量)/样品中芯材理论包埋量，样品中芯材理论包埋量即为样品中芯材的添加量，经计算得出结果如表4所示。可以看出，在强酸环境下4小时后，样品2和样品5中芯材保留率仍在90％以上，耐酸效果表现优秀，证明芯材没有在胃液环境中被释放出来。

表4 模拟胃液中样品芯材保留结果

测试例4人工肠液中的释放实验

使用片剂四用测定仪进行测定，启动测定仪进行预热，温度设置为37℃，安装好篮轴与篮体，利用定位球定位(做好标记)，放入溶出杯(每个溶出杯中分别倒入900mL配置好的人工肠液)，并固定好。然后分别取实施例样品2和样品5及对应芯材原料各200mg用纱布包裹后放入相应篮体中。在100r/min转速下旋转1、2、3、4小时后分别取溶出杯液体1mL，分别采用实施例1相同的检测方法检测样品中芯材含量。

芯材保留率＝(样品中芯材理论包埋量—检测出人工肠液中芯材含量)/样品中芯材理论包埋量，样品中芯材理论包埋量即为样品中芯材的添加量，经计算得出结果如表5所示。在人工肠液环境下1小时后，样品2、样品5中芯材溶出率均在85％以上；3小时后，样品2、样品5中芯材溶出率均在95％以上，说明本申请的微囊粉囊材可以在肠道内顺利分解，以保证芯材被肠道吸收或在肠道发挥作用。

表5 人工肠液中样品芯材溶出结果

测试例5加速稳定性实验

将实施例样品2和样品5同时放入37℃、75％湿度的加速箱中，对两组样品同时进行1个月、2个月、3个月产品稳定性实验，在0个月、1个月、2个月、3个月分别称取50mg样品1、2于50mL的离心管中，倒入45mL的二甲苯，拧紧盖子，连续震荡30min后，将离心管中的液体完全移入125mL的分液漏斗中，向分液漏斗加入约80mL浓度为100mmol/L碳酸氢钠溶液，连续震荡萃取30min，然后静置5～10min。待液体完全分层，取下层溶液置于100mL容量瓶中，再以浓度为100mmol/L碳酸氢钠溶液定容至100mL，摇匀。分别吸取上述样品1mL，采用实施例1相同的检测方法检测样品中芯材含量。

芯材保留率＝检测出样品中芯材含量/样品中芯材理论包埋量，样品中芯材理论包埋量即为样品中芯材的添加量，结果如表6所示。经过三个月加速后，两组样品芯材含量的保留率虽略有下降，但均在90％以上，符合一般加速实验的产品合格标准，表明通过本发明制备的微囊粉稳定性良好。

表6 加速稳定试验后样品中芯材保留结果

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对申请专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。