一种海参肽的制备方法
阅读说明：本技术 一种海参肽的制备方法 (Preparation method of sea cucumber peptide ) 是由 闫云霞 于 2020-06-24 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种海参肽的制备方法,其包括：S1、选取新鲜海参,预处理备用；S2、向预处理后的海参中加入2～6倍纯净水,研磨磨碎,制匀浆,依次加入脂肪酶、中性蛋白酶,氨肽酶进行酶解；S3、固液分离,将所得液体进行脱脂纯化,吸附脱色得澄清液；S4、澄清液过离子交换树脂脱钠、再浓缩干燥。本发明方法生产周期短、成本低、对环境无污染,而且所得产品安全性高,纯度高、颜色浅、口感好。所得产品可广泛应用于食品、特殊医学用配方食品、保健品等领域。(The invention relates to a preparation method of sea cucumber peptide, which comprises the following steps: s1, selecting fresh sea cucumbers, and pretreating for later use; s2, adding 2-6 times of purified water into the pretreated sea cucumber, grinding, preparing homogenate, and sequentially adding lipase, neutral protease and aminopeptidase for enzymolysis; s3, carrying out solid-liquid separation, carrying out degreasing purification on the obtained liquid, and carrying out adsorption decoloration to obtain a clear liquid; and S4, passing the clear liquid through ion exchange resin to remove sodium, and then concentrating and drying. The method has the advantages of short production period, low cost, no environmental pollution, high safety of the obtained product, high purity, light color and good taste. The obtained product can be widely applied to the fields of food, formula food for special medicine, health care products and the like.)
技术领域
本发明属于海产品深加工的技术领域，具体涉及一种海参肽的制备方法。
背景技术
《本草纲目拾遗》中记载，海参具有补肾经、益精髓、消痿涎、摄小便、壮阳、生白脉的功效：具有较高的营养价值和保健作用。传统海参产品有盐渍海参、半干海参以及冻干海参等，存在着使用麻烦及蛋白质吸收率低的问题。传统海参产品在食用上通常片状随机食用，存在食用多吸收不了，食用少作用微的问题。
近年随着生物工程技术的提高，有些企业逐渐进入到海参深加工的行业，也有涉及到海参肽的生产加工，只是其产品颜色深、腥味重、口感差，在使用过程中比较受限制，终端产品通常用胶囊和片剂，使用起来安全性比较差，也比较麻烦。
发明内容
(一)要解决的技术问题
为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种海参肽的制备方法。
(二)技术方案
为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：
一种海参肽的制备方法，其包括如下步骤：
S1、选取新鲜海参，预处理备用；
S2、向预处理后的海参中加入2～6倍纯净水，研磨磨碎，制匀浆，依次加入脂肪酶、中性蛋白酶，氨肽酶进行酶解；
S3、固液分离，将所得液体进行脱脂纯化，吸附脱色得澄清液；
S4、澄清液过离子交换树脂脱钠、再浓缩干燥。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S1中，所述预处理方法为：选取新鲜海参，解剖去除内脏，剪切成﹤0.5cm的小块，用纯净水洗净备用。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S2中，制备匀浆的过程为：先向预处理后的海参中加入1～3倍纯净水，用研磨机将其研磨成浆液；向浆液中再加入1～3倍纯净水，搅拌均匀，形成匀浆。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S2中，将匀浆升温至40℃～50℃，加入新鲜海参质量的0.1％～0.3％脂肪酶和1％～3％中性蛋白酶，保持40min～60min，然后加入新鲜海参质量的0.3％～0.5％氨肽酶，保持温度90min～150min。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S2中，所述酶解后，将酶解液升温至105℃，保持5min～10min灭酶。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S3中，固液分离采用设备为：卧锣离心机过滤，其离心转速为3400r/min，获得液体进行脱脂纯化采用三相离心机。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S3中，所述吸附脱色的方法为：用活性炭吸附脱色，活性炭使用量为新鲜海参的0.5％～5％，时间为30min～60min，再用质押式板框过滤机过滤。
如上所述的制备方法，优选地，在步骤S4中，所述浓缩干燥所用的设备为：双效降膜浓缩机及压力式喷雾干燥机。
本发明提供的海参肽的制备方法中，采用研磨和脂肪酶水解，这样能使海参细胞的结构更容易被破坏，能进一步促进细胞中活性成分的释放，利于海参肽的提取，提高产品得率。同时也避免了生产使用高温蒸煮的环节，减少了部分褐变反应造成的颜色深的问题。经大量实验研究发现，所用的脂肪酶添加小于新鲜海参质量的0.1％时，不能有效去除脂肪，产品最后还有微微的腥味，产率也会降低，当使用量大于0.3％后，所起效果变化不明显，为节约成本，使用量优选0.1％～0.3％。中性蛋白酶的使用量小于新鲜海参质量的1％，产品得率大大降低，且获得海参肽大于1000Kd，产品纯度降低，当使用量大于3％，会过度水解，所以优选用量为新鲜海参质量的1％～3％。
大分子的蛋白经过酶解后，肽链末端的疏水性氨基酸暴露出来，接触味蕾时会产生苦味。本发明中在使用内切中性蛋白酶水解之后，又用外切氨肽酶切除酶解肽键两端的苦味基团，使产品口感更好，充分满足食品和保健品对原料口感的要求。研究发现，外切氨肽酶的使用量在新鲜海参质量的0.3％～0.5％可有效去除苦味，用量小于0.3％，还留有苦味，当用量大于0.5％，会发生水解过度，使产品中游离氨基酸增高，不但影响产品口感，其产品生物活性也被削弱。所以，外切氨肽酶的使用量优选为0.3％～0.5％。
产品中主要的咸味是谷氨酸钠盐，带产品脱色之后，用离子交换树脂脱去产品中的钠离子，可有效的去除产品中钠，改善产品口感。
(三)有益效果
本发明的有益效果是：
本发明提供的海参肽的制备方法中，采用脂肪酶、内切中性蛋白酶、外切氨肽酶进行酶解，固液分离、脱脂纯化、脱色处理、浓缩干燥，得到高纯度的海参肽。获得产品海参肽中分子量小于1000Kd，活性较高，有较强的抗氧化能力，产品没有腥味，钠含量极低，含有较高的锌含量，本发明方法生产周期短、成本低、对环境无污染，而且所得产品安全性高，纯度高、颜色浅、口感好，没有苦味。本发明方法获得的产品可广泛应用于食品、特殊医学用配方食品、保健品等领域。
具体实施方式
为了更好的解释本发明，以便于理解，下面通过具体实施方式，对本发明作详细描述，所用的酶制剂可采用市购产品。
实施例1
一种海参肽的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、选取新鲜海参10公斤，解剖去除内脏，剪切成﹤0.5cm的小块，用纯净水洗净备用；
步骤2、向步骤1中处理后的海参中加入20公斤纯净水，用研磨机将海参小块研磨成浆液；
步骤3、向浆液中加入20公斤纯净水，搅拌均匀，形成匀浆，升温至45℃，加入20g脂肪酶(100000U/g)和100g内切中性蛋白酶(200000U/g)，保持60min，然后加入30g外切氨肽酶(30000U/g)，保持温度120min，最后升温至105℃，保持5min灭酶；
步骤4、灭酶后用卧锣离心机过滤(离心转速为3400r/min)，过滤液再用三相离心机脱脂纯化，获得纯化液；
步骤5、将纯化液加入1公斤活性炭吸附脱色40min，用质押式板框过滤机过滤，得到澄清滤液；
步骤6、将澄清滤液通过离子交换树脂脱钠，然后用双效浓缩器进一步浓缩；
步骤7、用喷雾干燥在80℃对浓缩液进行干燥，得到海参肽。
实施例2
一种海参肽的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、选取新鲜海参10公斤，解剖去除内脏，剪切成﹤0.5cm的小块，用纯净水洗净备用；
步骤2、海参中加入15公斤纯净水，用研磨机将海参小块研磨成浆液；
步骤3、向浆液中加入25公斤纯净水，搅拌均匀，形成匀浆，升温至40℃，加入15g脂肪酶(100000U/g)和200g内切中性蛋白酶(200000U/g)，保持50min，然后加入40g外切氨肽酶(30000U/g)，保持温度100min，最后升温至105℃，保持7min灭酶；
步骤4、灭酶后用卧锣离心机过滤(离心转速为3400r/min)，过滤液再用三相离心机脱脂纯化，获得纯化液；
步骤5、纯化液加入0.8公斤活性炭吸附脱色50min，用质押式板框过滤机过滤，得到澄清滤液。
步骤6、澄清滤液通过离子交换树脂脱钠，然后用双效浓缩器进一步浓缩；
步骤7、用喷雾干燥对浓缩液进行干燥，得到海参肽。
实施例3
一种海参肽的制备方法，具体包括以下步骤：
步骤1、选取新鲜海参10公斤，解剖去除内脏，剪切成﹤0.5cm的小块，用纯净水洗净备用；
步骤2、海参中加入25公斤纯净水，用研磨机将海参小块研磨成浆液；
步骤3、向浆液中加入10公斤纯净水，搅拌均匀，形成匀浆，升温至48℃，加入23g脂肪酶(100000U/g)和250g内切中性蛋白酶(200000U/g)，保持45min，然后加入45g外切氨肽酶(30000U/g)，保持温度90min，最后升温至105℃，保持10min灭酶；
步骤4、灭酶后用卧锣离心机过滤(离心转速为3400r/min)，过滤液再用三相离心机脱脂纯化，获得纯化液；
步骤5、纯化液加入1.5公斤活性炭吸附脱色30min，用质押式板框过滤机过滤，得到澄清滤液。
步骤6、澄清滤液通过离子交换树脂脱钠，然后用双效浓缩器进一步浓缩；
步骤7、用喷雾干燥对浓缩液进行干燥，得到海参肽。
对比例1
按照实施例1的方法进行，不同在于未加入脂肪酶。
对比例2
按照实施例1的方法进行，不同在于未加入氨肽酶。
对比例3
按照实施例2的方法进行，不同在于未采用活性炭吸附脱色，未采用离子交换树脂脱钠。
采用高效凝胶过滤色谱法对相对分子质量小于1000u的蛋白质水解物所占比例进行检测，经测量获得海参肽小于1000Da如下表，测得产品得率，钠含量，评估产品颜色，口感，结果见表1。
表1检测结果
其中，产品得率是通过获得的干燥的海参肽与新鲜海参质量的百分比，新鲜海参的蛋白质含量约为6％，由上制得的产品得率说明，本发明方法获得的海参肽得率较高，有效提高了经济效益。由上述检测结果说明，本发明的方法，所用的酶制剂能够制备获得酶解产物的分子量几乎全部小于1000Kd，获得的产品得率较高。所制备的产品极易溶于水，可冲泡后直接食用，无任何沉淀。
所制备的产品除可直接食用外，还可与其它食品配合食用制备成保健品等特殊用途的产品共同食用。
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