阅读说明：本技术 一种提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法 (Method for improving content of alpha-linolenic acid in prodenia litura ) 是由 王娇 盛晟 宋妍 严孟文 丁键浩 刘志翔 吴福安 王俊 于 2021-06-02 设计创作，主要内容包括：一种提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法,通过喂食大豆叶和桑叶中的至少一种饲料来提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量。本发明首次从重大害虫不饱和脂肪酸利用的角度,挖掘和拓展α-亚麻酸的来源,降低其开发成本。同时,由于斜纹夜蛾的种群极易暴发成灾,传统化学防治等治理手段难以对其形成有效胁迫,控制其为害,导致防治失败的局面经常出现。部分地区由于斜纹夜蛾抗药性等原因,正面临治理斜纹夜蛾无药可用的尴尬局面。通过将斜纹夜蛾作为潜在的α-亚麻酸来源,将有助于昆虫源的功能性食品开发,也为综合治理重大农业害虫提供新的思路和途径。(Prodenia litura improvement agent α Method for increasing linolenic acid content of prodenia litura by feeding at least one of soybean leaf and mulberry leaf α -linolenic acid content. The invention firstly excavates and expands the utilization of unsaturated fatty acid of major pests α The source of linolenic acid, reducing the development cost thereof. Meanwhile, as the population of the prodenia litura is easy to outbreak and cause disasters, the control means such as the traditional chemical control and the like are difficult to form effective stress on the prodenia litura, and the control of the prodenia litura is harmful, so that the situation of control failure is often caused. In some areas, due to the drug resistance of prodenia litura, the embarrassing situation that no drug is available for controlling prodenia litura is faced. By using prodenia litura as potential α Linolenic acid source, which is helpful for the development of functional food of insect source and provides a new way for the comprehensive treatment of major agricultural pestsThe idea and approach of (a).)

一种提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法

技术领域

本发明属于农业害虫的综合治理领域，涉及一种提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法。

背景技术

α-亚麻酸(α-linolenic acid，C18:3)属于ω-3多不饱和脂肪酸，是人体必需脂肪酸之一，人体自身不能合成，只能通过食物获取。α-亚麻酸在人体内具有多种生物学功能，如调节血脂、抗血栓、降黏度增氧量、降血压、抗过敏、抗炎、保护视力和增强智力等作用。此外，α-亚麻酸还有抗衰老、抗癌、预防老年痴呆的作用。一些国家已将α-亚麻酸以及其他ω-3多不饱和脂肪酸作为临床药品用于预防和治疗糖尿病、心血管疾病、肿瘤、炎症等疾病，有的国甚至还将α-亚麻酸作为添加剂加入到食品中。虽然α-亚麻酸在植物中属于常见脂肪酸，但是在大多数植物中的含量却非常低，只有在紫苏、亚麻等少数几种植物的种子中含量较为丰富。然而，近年来越来越多的研究表明一些昆虫特别是鳞翅目昆虫中含有丰富的α-亚麻酸，是一种极具潜力的α-亚麻酸来源(Guil-Guerrero et al.,2018)。在一些食用昆虫中，α-亚麻酸得到了较好的研究，如家蚕蛹中的α-亚麻酸含量可高达38％以上。但是对害虫α-亚麻酸的研究却十分有限，例如在烟叶蛾中α-亚麻酸含量为7.8％，在银纹夜蛾中α-亚麻酸含量为11.0％(李生梅等，2004)。

斜纹夜蛾Spodoptera litura属鳞翅目Lepidoptera，夜蛾科Noctuidae，是一种多食性和暴食性害虫，危害植物近100科、300多种，广泛分布中国各地，是桑树、大豆、烟草和棉花等经济作物的重要害虫。斜纹夜蛾一年发生4-5代，以蛹在土中越冬，广东地区世代重叠严重，且无越冬现象(Senthil-Nathan et al.,2021；李湘洲等,2020)。利用化学防治可以有效防治斜纹夜蛾的种群数量，但是会造成农药残留，危害人畜健康。斜纹夜蛾分布广泛，种群数量大，是一种潜在的α-亚麻酸来源，但是尚未见其脂肪酸的研究报道。因此，开发斜纹夜蛾α-亚麻酸，不仅可以拓宽α-亚麻酸来源，还可以为桑树斜纹夜蛾的防治提供新的思路。

发明内容

解决的技术问题：本发明针对上述技术问题，提供一种提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法。

技术方案：通过喂食桑叶和大豆叶中的至少一种饲料来提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法。

具体包括以下步骤：(1)获得初孵的斜纹夜蛾幼虫；(2)饲喂桑叶和大豆叶中的至少一种饲料供斜纹夜蛾取食；(3)在不同的发育阶段收集对应虫态的斜纹夜蛾。

上述步骤(1)初孵幼虫不经任何喂养，供后续喂食处理。

优选的，上述方法中首先使用人工饲料喂食斜纹夜蛾幼虫1～5天。

上述步骤(2)中桑叶和大豆叶按质量比0:1、1:0、1:1、1:2、1:3、2:1、2:3、3:1和4:1的比例混合提供给喂食过人工饲料的斜纹夜蛾幼虫取食。

上述步骤(3)中，收集3～5龄幼虫及1～7日龄的蛹。

有益效果：本发明首次从重大害虫不饱和脂肪酸利用的角度，挖掘和拓展α-亚麻酸的来源，降低其开发成本。同时，由于斜纹夜蛾的种群极易暴发成灾，传统化学防治等治理手段难以对其形成有效胁迫，控制其为害，导致防治失败的局面经常出现。部分地区由于斜纹夜蛾抗药性等原因，正面临治理斜纹夜蛾无药可用的尴尬局面。通过将斜纹夜蛾作为潜在的α-亚麻酸来源，将有助于昆虫源的功能性食品开发，也为综合治理重大农业害虫提供新的思路和途径。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐明本发明。应理解，这些实施实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明介绍的内容后，本领域技术人员可以对本发明做各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1一种通过喂食不同食物提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法

获得初孵的斜纹夜蛾幼虫，并保证其无任何取食经历。将桑叶和大豆叶按质量比0:1、1:0、1:1、1:2、1:3、2:1、2:3、3:1和4:1的比例饲喂斜纹夜蛾幼虫(取食过1天的人工饲料)。分别收集各喂食处理下的3、4、5龄斜纹夜蛾幼虫和1、3、5、7日龄蛹，幼虫冻干，蛹烘干。将烘干的虫体用于α-亚麻酸测定。测定步骤为：首先，分别将每只斜纹夜蛾称重后，置于10mL的EP管中，加入2mL正己烷，捣碎后，静置3小时，8000r/min离心10mins，取上清。吸取200μL上清液于新的10mL EP中，加入2mL 0.5mol/L KOH-CH₃OH溶液和1.5mL正己烷，保鲜膜包裹，60℃水浴1h。取出离心管，分别加入4mL蒸馏水，8000r/s离心5mins，取上清液。其次，将上清液用正己烷定量至1mL，进行气相色谱分析。并以α-亚麻酸标准品浓度与峰面积的关系，计算标准曲线。根据标准曲线计算斜纹夜蛾α-亚麻酸的含量。脂肪酸含量以每个虫体所含的脂肪酸质量与虫体重量之比展示。各发育阶段测定15-20头个体。所用色谱条件为：色谱柱为Agilent HP-INNOWAX Coiumns型，毛细管柱的规格为长度30m，直径0.25mm，薄层厚度0.25μm；方法：进样口温度：250℃，检测器温度：250℃，柱温：起始80℃，升温梯度：15℃/min,升温至200℃；梯度二：1.5℃/min，升到240℃，保留0min。由表1可知，桑叶和豆叶的比例对斜纹夜蛾体内α-亚麻酸含量影响显著，此外，斜纹夜蛾的虫态也显著影响α-亚麻酸含量。当桑叶与豆叶的比例为3:1时，1日龄蛹的α-亚麻酸含量最高，为38.77±2.65μg/g。

表1不同食物喂食处理下斜纹夜蛾各发育阶段的α-亚麻酸含量(mg/g)

实施例2一种通过喂食不同食物提高斜纹夜蛾α-亚麻酸含量的方法

获得初孵的斜纹夜蛾幼虫，并保证其无任何取食经历。使用人工饲料(按下列配方制作：麦胚芽600g，大豆粉200g，维生素C 20g，山梨酸5g，尼泊金甲酯10g,琼脂50g，复合维生素2g，肌醇1g，水1300mL)喂食斜纹夜蛾幼虫1天、2天、3天、4天、5天和6天后，再使用桑叶和大豆叶混合喂养方式(质量比为3:1)继续饲喂斜纹夜蛾幼虫，保证斜纹夜蛾幼虫正常发育。分别收集各喂食处理下的3、4、5龄斜纹夜蛾幼虫和1、3、5、7日龄蛹，幼虫冻干，蛹烘干，用于后续α-亚麻酸含量测定。测定方法同实施例1。由表2可知，人工饲料饲喂2天后再继续喂食桑叶和豆叶混合食物的斜纹夜蛾，1日龄蛹中的α-亚麻酸含量最高，达到39.24±2.66μg/g。

表2不同人工饲料喂食处理下斜纹夜蛾各发育阶段的α-亚麻酸含量(mg/g)