阅读说明：本技术 一种大蒜降压肽的制备方法 (Preparation method of garlic antihypertensive peptide ) 是由 李宇馨 王婷婷 于 2021-02-06 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种大蒜降压肽的制备方法,本发明涉及大蒜降压肽制备技术领域,包括：A1．原料选择：取新鲜大蒜为原料,清洗干净,用刀片剁碎成渣,并放入冷冻保鲜；再选择一颗新鲜大蒜,将大蒜清洗干净,将大蒜碾压成蒜泥；A2．蒜泥处理：蒜泥加入玻璃容器中,A3．酶解液提取；将冷冻的大蒜渣取出,大蒜渣放入玻璃容器中,向玻璃容器中加入重量为大蒜渣重量十倍的蒸馏水和95wt％乙醇以及蒜泥液,在本发明中,将装有冷冻后的大蒜渣的玻璃容器置于水浴盘上,有利于大蒜渣快速进行回流反应。提高提取效率,利用蒸馏水与蒜泥搅拌得到蒜泥的溶液和蒸馏水以及乙醇充分融合,提高降压肽产量,便于对降压肽进行分组份研究。(The invention discloses a preparation method of garlic antihypertensive peptide, relating to the technical field of garlic antihypertensive peptide preparation, and comprising the following steps: A1. selecting raw materials: taking fresh garlic as a raw material, cleaning, chopping into residues by using a blade, and freezing for preservation; selecting a fresh garlic, cleaning the garlic, and grinding the garlic into mashed garlic; A2. and (3) mashed garlic treatment: adding the mashed garlic into a glass container, and A3, extracting enzymatic hydrolysate; taking out the frozen garlic residues, putting the garlic residues into a glass container, and adding distilled water and 95 wt% ethanol which are ten times of the weight of the garlic residues and garlic paste liquid into the glass container. The extraction efficiency is improved, the solution of mashed garlic obtained by stirring the distilled water and the mashed garlic is fully fused with the distilled water and the ethanol, the yield of the antihypertensive peptide is improved, and the research on the antihypertensive peptide in groups is facilitated.)

一种大蒜降压肽的制备方法

技术领域

本发明属于大蒜降压肽制备技术领域，具体涉及一种大蒜降压肽的制备方法。

背景技术

降压肽来源于食品的降血压肽是一类能够降低人体血压的小分子多肽的总称，一般具有活性的降血压肽的分子量在1000以下，通常是由蛋白酶在比较温和的情况下水解蛋白质获得，降压肽的降血压效果明显且对正常血压无影响、无副作用，大蒜中含有三种活性肽，在生活中，大蒜产量高，取料容易，因此采用大蒜的活性肽制备降压肽已成为研究热点；

目前，研究人员采用酶解法酶解大蒜渣，经过冷冻的大蒜渣，需要经过室温正常状态下进行解冻，解冻速度慢，且一次性提取一个大蒜中的降压肽，降压肽产量低，不便于将得到的降压肽分份研究。

发明内容

鉴于此，本发明的目的在于提供一种大蒜降压肽的制备方法，以有效解决上述背景技术中提出的室温正常状态下进行解冻，解冻速度慢，且一次性提取一个大蒜中的降压肽，降压肽产量低的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种大蒜降压肽的制备方法，包括如下步骤：

A1.原料选择：取新鲜大蒜为原料，清洗干净，用刀片剁碎成渣，并放入冷冻保鲜；再选择一颗新鲜大蒜，将大蒜清洗干净，将大蒜碾压成蒜泥；

A2.蒜泥处理：蒜泥加入玻璃容器中，向玻璃容器中加入重量为蒜泥重量四倍的蒸馏水，充分搅拌；

A3.酶解液提取；将冷冻的大蒜渣取出，大蒜渣放入玻璃容器中，向玻璃容器中加入重量为大蒜渣重量十倍的蒸馏水和95wt％乙醇以及蒜泥液，在 95℃下回流反应2h；

滤液酶解：冷却滤液至45-60℃，调pH值为9-11，基于大蒜渣原料重量的3-5％加入碱性蛋白酶，并搅拌酶解3h，然后得到酶解液；

A4.在100℃下保持酶解液15min灭酶；

A5.酶解液通过超膜过滤，除去蛋白酶；

A6.除蛋白酶后的溶液再次加入体积量为1/2酶解液体积的蛋白酶，并搅拌酶解0.5h。

A7.通过质谱仪质谱分离过滤得到的溶液，质谱分离溶液之后，将得到的溶液进行浓缩；

A8.浓缩后的溶液进行真空低温干燥；

优选的，在所述步骤A3的处理中，所加入的95wt％乙醇和蒜泥液体积相同，95wt％乙醇和蒜泥液均为2ml。

优选的，在所述步骤A3的处理中，冷冻的大蒜渣放置于玻璃杯中，玻璃杯放置于温度为30°的水浴盘中。

优选的，在所述步骤A5的过滤处理中，超滤膜采用醋酸纤维素膜，过滤环境温度为30°-35°。

优选的，在所述步骤A6的处理中，加入的蛋白酶为1ml，处理过程的温度为40°-45°。

优选的，在所述步骤A7的质谱分离中，分离环境温度为40°-50°，气压为23MPa。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)在本发明中，将冷冻后的大蒜渣，通过将大蒜渣装入导热的玻璃容器中，玻璃容器置于装有温水的水浴盘上，利用热传导原理，温水的温度被大蒜渣吸收，提高大蒜渣的解冻速度，不通过加热方式解冻，保护了大蒜渣中的多肽活性，提高了大蒜渣的解冻速度，有利于大蒜渣快速进行回流反应。提高提取效率。

(2)在本发明中，蒸馏水与蒜泥搅拌得到蒜泥的溶液，蒜泥的溶液中含有大量的多肽，利用蒸馏水与蒜泥搅拌得到蒜泥的溶液和蒸馏水以及乙醇充分融合，提高降压肽产量，便于对降压肽进行分组份研究，不需要多次提取降压肽，节约成本和时间。

(3)在本发明中，通过两次蛋白酶分解大蒜渣的溶液，有效消除大蒜渣的溶液中的气味，减少刺激性气味，避免气味残留在提取设备内壁，有利于清洁提取设备，改善酶解后的溶液的质量。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：

一种大蒜降压肽的制备方法，包括如下步骤：

A1.原料选择：取新鲜大蒜为原料，清洗干净，用刀片剁碎成渣，并放入冷冻保鲜；再选择一颗新鲜大蒜，将大蒜清洗干净，将大蒜碾压成蒜泥；

A2.蒜泥处理：蒜泥加入玻璃容器中，向玻璃容器中加入重量为蒜泥重量四倍的蒸馏水，充分搅拌；

A3.酶解液提取；将冷冻的大蒜渣取出，冷冻的大蒜渣放置于玻璃杯中，玻璃杯放置于温度为30°的水浴盘中，大蒜渣放入玻璃容器中，向玻璃容器中加入重量为大蒜渣重量十倍的蒸馏水和95wt％乙醇以及蒜泥液，在95℃下回流反应2h；

滤液酶解：冷却滤液至45-60℃，调pH值为9-11，基于大蒜渣原料重量的3-5％加入碱性蛋白酶，并搅拌酶解3h，然后得到酶解液；

A4.在100℃下保持酶解液15min灭酶；

A5.酶解液通过超膜过滤，除去蛋白酶；

A6.除蛋白酶后的溶液再次加入体积量为1/2酶解液体积的蛋白酶，并搅拌酶解0.5h。

A7.通过质谱仪质谱分离过滤得到的溶液，质谱分离溶液之后，将得到的溶液进行浓缩；

A8.浓缩后的溶液进行真空低温干燥；

实施例二：

一种大蒜降压肽的制备方法，包括如下步骤：

A1.原料选择：取新鲜大蒜为原料，清洗干净，用刀片剁碎成渣，并放入冷冻保鲜；再选择一颗新鲜大蒜，将大蒜清洗干净，将大蒜碾压成蒜泥；

A2.蒜泥处理：蒜泥加入玻璃容器中，向玻璃容器中加入重量为蒜泥重量二倍的蒸馏水，充分搅拌；

A3.酶解液提取；将冷冻的大蒜渣取出，冷冻的大蒜渣放置于玻璃杯中，玻璃杯放置于温度为50°的水浴盘中，大蒜渣放入玻璃容器中，向玻璃容器中加入重量为大蒜渣重量十倍的蒸馏水和95wt％乙醇以及蒜泥液，在95℃下回流反应1h；

滤液酶解：冷却滤液至45-60℃，调pH值为9-11，基于大蒜渣原料重量的3-5％加入碱性蛋白酶，并搅拌酶解1.5h，然后得到酶解液；

A4.在100℃下保持酶解液7.5min灭酶；

A5.酶解液通过超膜过滤，除去蛋白酶；

A6.除蛋白酶后的溶液再次加入体积量为1/2酶解液体积的蛋白酶，并搅拌酶解25min。

A7.通过质谱仪质谱分离过滤得到的溶液，质谱分离溶液之后，将得到的溶液进行浓缩；

A8.浓缩后的溶液进行真空低温干燥；

针对上述2个实施例：

对冷冻后的大蒜渣解冻时间进行对比，获得下表：

	温度	时间
			实施例1	30°	20min
实施例2	50°	11min

由上表克制，经本发明所提供的方法进行降温，大蒜渣的解冻速度明显加快，可提高大蒜渣进入回流反应的速度。

对冷冻后的大蒜渣溶液中加入蒜泥液后的降压肽含量进行对比，获得下表：

	蒜泥液量	降压肽含量
			实施例1	2ml	5％
实施例2	1ml	2.5％

由上表可知，经本发明所提供的方法进行解冻后，大蒜渣解冻时间加快，有效提高降压肽提取的速度，并且在加入蒜泥液后，有效提高了降压肽的提取量。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。