阅读说明：本技术 Pd-i配体的关键中间体的合成方法 (Synthesis method of key intermediate of PD-I ligand ) 是由 黄保华 刘小栋 徐伟 胡新礼 戴建 于 2020-03-31 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种PD-I配体的关键中间体的合成方法,通过化合物2制得中间体5,将其直接溶于溶剂得化合物6；将化合物3和化合物4反应得化合物7；将化合物7回流后,浓缩至干溶解于四氢呋喃中,滴加至含有化合物6和正丁基锂溶液中；反应结束后得化合物8；向含有化合物8的干燥四氢呋喃中加入硼氢化锂,搅拌,淬灭,经萃取等步骤得粗品并纯化得化合物9；将化合物9和二氧化锰混于甲苯中,反应液冷却后过滤,滤液浓缩干后纯化得化合物10；在干燥的四氢呋喃中加入化合物10和Lawesson试剂,加热至回流至反应完成；将反应液浓缩干经纯化得化合物1。本发明路线仅有一步使用了金属催化,且该步骤远离最终化合物,极大降低了药物分子中的金属残留。(The invention provides a synthesis method of a key intermediate of a PD-I ligand, wherein an intermediate 5 is prepared from a compound 2 and directly dissolved in a solvent to obtain a compound 6; reacting the compound 3 with the compound 4 to obtain a compound 7; refluxing the compound 7, concentrating until the compound is dried and dissolved in tetrahydrofuran, and dropwise adding the mixture into a solution containing the compound 6 and n-butyllithium; after the reaction is finished, obtaining a compound 8; adding lithium borohydride into dry tetrahydrofuran containing the compound 8, stirring, quenching, extracting to obtain a crude product, and purifying to obtain a compound 9; mixing the compound 9 and manganese dioxide in toluene, cooling the reaction liquid, filtering, concentrating the filtrate, drying, and purifying to obtain a compound 10; adding the compound 10 and Lawesson reagent into dried tetrahydrofuran, and heating until the reaction is finished; concentrating the reaction solution, drying and purifying to obtain the compound 1. The route of the invention uses metal catalysis in only one step, and the step is far away from the final compound, thus greatly reducing the metal residue in the drug molecule.)

PD-I配体的关键中间体的合成方法

技术领域

本发明属于化学合成

技术领域

，具体涉及一种PD-I配体的关键中间体的合成方法。

背景技术

免疫系统在控制和根除癌症等疾病方面发挥着重要作用。然而，癌细胞能够发展新的办法来逃避或抑制免疫系统，以利于其生长。其中一种机制就是改变免疫细胞上共刺激和共抑制分子的表达。阻断抑制性免疫检查点的信号，如PD-I，已被证明是一种有希望和有效的治疗方式。

程序性死亡受体1(PD-I)，也称为CD279，是一种细胞表面受体，表达在活化T细胞、自然杀手T细胞、B细胞和巨噬细胞上。它作为一个内在的负反馈系统，防止T细胞的激活，这反过来又降低了自动免疫，促进自我容忍。此外，对于癌症和病毒感染等疾病中的抗原特异性T细胞，PD-1在抑制其反应方面有关键的作用。

临床前动物研究的几条证据表明，PD-I及其配体对免疫反应有负面调节。PD-I缺乏小鼠已被证明发展红斑狼疮状肾上腺炎和扩张性心肌病。使用慢性感染的LCMV模型，表明PD-I/PD-LI相互作用抑制病毒特异性CD8T细胞的活化、扩张和获取效应器功能。这些数据共同支持开发一种治疗方法，以阻止PD-I介导的抑制信号级联，以增强增强器"拯救"T细胞反应。因此，需要新的化合物来阻止PD-I/PD-LI蛋白/蛋白在相互作用。

式1是一种用来阻止PD-I/PD-LI蛋白/蛋白相互作用的化合物的关键中间体。该中间体可以衍生得到多种可用于PD-I/PD-LI蛋白/蛋白相互作用的候选药物。

现有的合成方法步骤繁琐，且反应中采用多次金属催化，导致最终的产物中可能会具有金属物质的残留，使得终产物纯度不够，对后续制备成药物应用带来影响。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种PD-I配体的关键中间体的合成方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：

PD-I配体的关键中间体的合成方法，所述中间体的结构式为，

所述合成反应如下所示：

优选地，所述的PD-I配体的关键中间体的合成方法，包括如下步骤，

S1、化合物2溶于有机溶剂中，在催化剂作用下进行氢化；反应结束后，过滤，滤液浓缩干后得到中间体5；

S2、将中间体5直接溶于有机溶剂中，加入三乙胺，并缓慢滴加叠氮磷酸二苯酯制得化合物6；

S3、将化合物3和化合物4溶解于乙醇中，加入碳酸钾，置换氮气3次，在氮气保护下加入S-Phos，并升温至35℃-45℃反应10-15小时；

S4、反应结束后，降温至室温，过滤，浓缩，加入水和二氯甲烷，有机相用稀盐酸洗涤，无水硫酸钠干燥，粗品用柱层析纯化得到化合物7；

S5、将S4制得的化合物7在二氯亚砜中回流后，在减压条件下浓缩至干，将上述混合物溶解于四氢呋喃中，在-78℃下，将其滴加至含有化合物6和正丁基锂的溶液中；

S6、反应结束后，恢复至室温，并缓慢加入氯化铵水溶液和二氯甲烷，有机相浓缩干后，经硅胶柱纯化得到化合物8；

S7、向化合物8的干燥的四氢呋喃溶液中加入硼氢化锂，在室温下搅拌4-6小时后，加入氯化铵水溶液进行淬灭；得到的混合物经二氯甲烷萃取，盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，在减压条件下进行浓缩，粗品在硅胶柱上进行纯化得到化合物9；

S8、将化合物9和二氧化锰混合于甲苯中；室温反应4-7小时后，加热至回流反应2小时，反应液冷却后过滤，滤液浓缩干后，经硅胶柱层析纯化得到化合物10；

S9、在干燥的四氢呋喃中加入化合物10和Lawesson试剂，在氮气保护条件下加热至回流直到反应完成；

S10、在减压条件下将反应液浓缩干，得到的混合物经过硅胶柱层析纯化得到化合物1。

优选地，所述S6和S7中的硅胶柱层析的系统为乙酸乙酯/石油醚系统。

优选地，所述S1中有机溶剂为四氢呋喃，催化剂为雷尼镍。

优选地，所述S2中通过滴加叠氮磷酸二苯酯反应结束后，将溶液浓缩后，加入二氯甲烷和水，有机相经碳酸氢钠水溶液洗涤后，用无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱纯化得到化合物6。

优选地，所述S3中升温至40℃反应12小时。

优选地，所述S8中将化合物9和二氧化锰混合于甲苯，并在室温反应5小时。

本发明的有益效果体现在：本发明路线仅有一步使用了金属催化，且该步骤远离最终化合物，极大降低了药物分子中的金属残留。

具体实施方式

以下结合实施例具体阐述本发明的技术方案，本发明揭示了一种PD-I配体的关键中间体的合成方法。

实施例1

化合物6的制备，其反应式如下所示：

2.43g化合物2溶于四氢呋喃中，在Raney Ni催化下进行氢化。反应结束后，过滤，滤液浓缩干后得到中间体5，直接投入下一步反应。将中间体5溶于四氢呋喃中，加入三乙胺，并缓慢滴加叠氮磷酸二苯酯(DPPA)。反应结束后，将溶液浓缩后，加入二氯甲烷和水，有机相经碳酸氢钠水溶液洗涤后，用无水硫酸钠干燥。最后硅胶柱纯化得到化合物6，1.74g，收率72％。

实施例2

化合物7的制备，其反应式如下所示，

1.2eq化合物3和340mg化合物4溶解于100mL乙醇中，加入5当量碳酸钾，置换氮气3次，在氮气保护下加入2mol％S-Phos，并升温至40℃反应12小时。反应结束后，降温至室温，过滤，浓缩，加入水和二氯甲烷，有机相用稀盐酸洗涤，无水硫酸钠干燥。粗品用柱层析纯化得到化合物7，355mg，收率84％。

实施例3

化合物8的制备，其反应式如下所示：

340mg化合物7在50mL二氯亚砜中回流后，在减压条件下浓缩至干。将上述混合物溶解于四氢呋喃中，在-78℃下，将其滴加至含有1当量化合物6和1.2当量正丁基锂的溶液中。反应结束后，恢复至室温，并缓慢加入氯化铵水溶液和二氯甲烷。有机相浓缩干后，经硅胶柱纯化得到化合物8，350mg，收率83％。

实施例4

化合物(式9)的制备，其反应式如下所示：

向含有化合物(式8)(436mg)的干燥的四氢呋喃溶液(20mL)中加入硼氢化锂(3当量)，在室温下搅拌5小时后，加入氯化铵水溶液进行淬灭。得到的混合物经二氯甲烷萃取，盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，在减压条件下进行浓缩。粗品在硅胶柱上进行纯化得到化合物9，383mg，产率93％。

实施例5

化合物10的制备，其反应式如下所示：

将205mg化合物9和新制10当量二氧化锰混合于10mL甲苯中。室温反应5小时后，加热至回流反应2小时。反应液冷却后过滤，滤液浓缩干后，经硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚)纯化得到化合物10，150mg，收率73％。

实施例6

化合物1的制备，其反应式如下所示：

在5mL干燥的四氢呋喃中加入204mg化合物10和2当量Lawesson试剂。在氮气保护条件下加热至回流直到反应完成。然后在减压条件下将反应液完全浓缩干，得到的混合物经过硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚)纯化得到化合物1，162mg，79.8％。

当然本发明尚有多种具体的实施方式，在此就不一一列举。凡采用等同替换或者等效变换而形成的所有技术方案，均落在本发明要求保护的范围之内。