一种茶黑毒蛾性信息素组合物、性诱剂及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 一种茶黑毒蛾性信息素组合物、性诱剂及其制备方法和应用 (Tea black moth sex pheromone composition, sex attractant, preparation method and application thereof ) 是由 罗宗秀 蔡晓明 周利 李兆群 王新茹 边磊 修春丽 付楠霞 陈宗懋 于 2020-12-29 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种茶黑毒蛾性信息素组合物,包括质量比为(1～4):(1～4):(1～6)的顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮。本发明通过对茶黑毒蛾性信息素种类的选择,以特定比例的复配,得到的茶黑毒蛾性信息素组合物对茶黑毒蛾雄虫具有极强的引诱力,高于茶黑毒蛾雌虫。实施例的结果表明,本发明提供的茶黑毒蛾性信息素组合物制备的性诱剂用于田间诱捕时,茶黑毒蛾雄虫的诱捕数可达27.67±2.33a,远高于茶黑毒蛾雌虫对于雄虫的诱捕数15.00±1.73b。(The invention provides a sex pheromone composition for tea black moths, which comprises cis-3, cis-6-9, 10-epoxy heneicosadiene, cis-3, cis-6, trans-11-9, 10-epoxy heneicosadriene and cis-3, cis-6-heneicosadiene-11-ketone in a mass ratio of (1-4) to (1-6). According to the invention, the sex pheromone composition of the tea black moth is obtained by selecting the variety of the sex pheromone of the tea black moth and compounding the sex pheromone composition according to a specific proportion, has extremely strong attractive power to male tea black moth, and is higher than that of female tea black moth. The results of the examples show that when the sex attractant prepared from the tea black moth sex pheromone composition provided by the invention is used for field trapping, the trapping number of male tea black moth can reach 27.67 +/-2.33 a, which is far higher than the trapping number of male tea black moth female moth, which is 15.00 +/-1.73 b.)
技术领域
本发明属于生物防治技术领域，尤其涉及一种茶黑毒蛾性信息素组合物、性诱剂及其制备方法和应用。
背景技术
茶黑毒蛾Dasychira baibarana Matsumura又称茶茸毒蛾，属鳞翅目毒蛾科，自20世纪60年代后成为我国茶区日趋发生严重的茶树害虫种类之一。在安徽、浙江西北部、贵州、闽北等地年发生4代，浙江中南部4～5代、江西5代。茶黑毒蛾幼虫取食茶树的新芽、嫩叶、老叶甚至嫩茎都被取食，严重的茶园叶片无存，严重影响茶叶产量和树势。幼虫毒毛触及人体致红肿痛痒，妨碍茶叶的采摘及田间管理工作。
昆虫性信息素是由同种昆虫的某一性别个体的特殊分泌器官分泌于体外，能被同种异性个体的感受器所接受，并引起异性个体产生一定的行为反应或生理效应(如觅偶、定向求偶、交配等)的微量化学物质。一种昆虫的性信息素被鉴定后，有多种应用方式，第一种方式是虫情监测，性信息素诱捕器内是否有目标昆虫可准确反映相应区域范围内是否存在目标昆虫以及成虫孵化情况。利用性信息素进行虫情监测从而为化学施药提供指导，如确定防治阈值、确定防治时机等。第二种应用方式是交配迷向，就是通过人为释放性信息素制造性信息素味源，使得昆虫在求偶通讯中获得错误信号，从而延迟、减少或者阻止昆虫顺利找到异性完成交配。第三种应用方式是大量诱杀法，就是通过性诱剂大量吸引一种性别或雌雄两种性别昆虫，再结合大容量的诱捕器或化学农药将被引诱的昆虫消灭。
目前，关于茶黑毒蛾的诱杀一般采用交配期的茶黑毒蛾雌虫，但是，采用茶黑毒蛾雌虫进行诱杀的效果仍不能满足农业需求。因此，需要提供一种对茶黑毒蛾雄虫具有强烈引诱力的性诱剂。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种茶黑毒蛾性信息素组合物、性诱剂及其制备方法和应用。本发明提供的茶黑毒蛾性信息素组合物对茶黑毒蛾雄虫的引诱力高于茶黑毒蛾雌虫。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了一种茶黑毒蛾性信息素组合物，包括质量比为(1～4):(1～4):(1～6)的顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮。
优选的，所述茶黑毒蛾性信息素组合物包括质量比为(2～3):(3～4):(5～6)的顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮。
本发明还提供了一种性诱剂，包括缓释载体和负载于所述缓释载体中的活性组分溶液，所述活性组分溶液中的活性组分为上述技术方案所述茶黑毒蛾性信息素组合物。
优选的，所述活性组分溶液中活性组分的浓度为5～15μg/μL。
优选的，活性组分溶液中的溶剂包括正己烷。
优选的，所述活性组分溶液的添加量为80～100μL。
优选的，所述缓释载体为橡胶塞。
优选的，所述橡胶塞在使用前进行脱硫处理。
本发明还提供了上述技术方案所述性诱剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分分别与溶剂混合，得到各性信息素溶液；
(2)将所述步骤(1)得到的各信息素溶液按照茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分的配比混合，得到活性组分溶液；
(3)将所述步骤(2)得到的活性组分溶液滴加至缓释载体中，然后静置，得到性诱剂。
本发明还提供了上述技术方案所述性诱剂或上述技术方案所述制备方法制备的性诱剂在诱杀茶黑毒蛾中的应用。
本发明提供了一种茶黑毒蛾性信息素组合物，包括质量比为(1～4):(1～4):(1～6)的顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮。本发明通过对茶黑毒蛾性信息素种类的选择，以特定比例的复配，得到的茶黑毒蛾性信息素组合物对茶黑毒蛾雄虫具有极强的引诱力，高于茶黑毒蛾雌虫。实施例的结果表明，本发明提供的茶黑毒蛾性信息素组合物制备的性诱剂用于田间诱捕时，茶黑毒蛾雄虫的诱捕数可达27.67±2.33a，远高于茶黑毒蛾雌虫对于雄虫的诱捕数15.00±1.73b。
具体实施方式
本发明提供了一种茶黑毒蛾性信息素组合物，包括质量比为(1～4):(1～4):(1～6)的顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯(Z3,Z6,epo9-21:H)、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯(Z3,Z6,E11,epo9-21:H)和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮(Z3,Z6,11-one-21:H)。
在本发明中，所述茶黑毒蛾性信息素组合物优选包括质量比为(2～3):(3～4):(5～6)的顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮。在本发明中，所述顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比更优选为1:1:1，或者2:3:5，或者4:2:4。
本发明通过对茶黑毒蛾性信息素种类的选择，以特定比例的复配，得到的茶黑毒蛾性信息素组合物对茶黑毒蛾雄虫具有极强的引诱力，高于茶黑毒蛾雌虫。
本发明还提供了一种性诱剂，包括缓释载体和负载于所述缓释载体中的活性组分溶液，所述活性组分溶液中的活性组分为上述技术方案所述茶黑毒蛾性信息素组合物。
本发明提供的性诱剂包括缓释载体。在本发明中，所述缓释载体优选为橡胶塞。本发明对所述橡胶塞的种类及来源没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的用于缓释载体的橡胶塞即可。在本发明中，所述橡胶塞的高度优选为13.5～14.5mm，所述橡胶塞的添加口外径优选为7.5～10.5mm，所述橡胶塞的内径优选为7.3～7.7mm。
在本发明中，所述橡胶塞在使用前优选进行脱硫处理。本发明优选将所述橡胶塞在无水乙醇中浸泡22～26h脱硫，然后放入38～42℃烘箱中保持22～26h，得到缓释载体；所述浸泡的时间优选为24h，所述烘箱的温度优选为40℃，保持的时间优选为24h。
本发明提供的性诱剂还包括负载于所述缓释载体中的活性组分溶液，所述活性组分溶液中的活性组分为上述技术方案所述茶黑毒蛾性信息素组合物。
在本发明中，所述活性组分溶液中活性组分的浓度优选为5～15μg/μL，更优选为8～12μg/μL，最优选为10μg/μL。在本发明中，所述活性组分的浓度在上述范围内时，对于茶黑毒蛾雄虫的引诱力更大。
在本发明中，所述活性组分溶液中的溶剂优选包括正己烷。
在本发明中，所述活性组分溶液的添加量优选为80～100μL，更优选为90～100μL。
本发明提供的性诱剂以上述技术方案所述茶黑毒蛾性信息素组合物作为活性组分，对茶黑毒蛾雄虫具有极强的引诱力。
本发明还提供了上述技术方案所述性诱剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分分别与溶剂混合，得到各性信息素溶液；
(2)将所述步骤(1)得到的各信息素溶液按照茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分的配比混合，得到活性组分溶液；
(3)将所述步骤(2)得到的活性组分溶液滴加至缓释载体中，然后静置，得到性诱剂。
本发明将茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分分别与溶剂混合，得到各性信息素溶液。本发明对所述茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分分别与溶剂的混合的操作没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的制备混合溶液的技术方案即可。在本发明中，所述各性信息素溶液的浓度优选相同，为5～15μg/μL，更优选为8～12μg/μL，最优选为10μg/μL。
得到各性信息素溶液后，本发明将所述各信息素溶液按照茶黑毒蛾性信息素组合物中的各组分的配比混合，得到活性组分溶液。
得到活性组分溶液后，本发明将所述活性组分溶液滴加至缓释载体中，然后静置，得到性诱剂。本发明对所述滴加的速率没有特殊的限定，能够将溶液负载到缓释载体中即可。
在本发明中，所述静置的时间优选为2～4h，更优选为3h。在本发明中，所述静置的温度优选为室温。
本发明还提供了上述技术方案所述性诱剂或上述技术方案所述制备方法制备的性诱剂在诱杀茶黑毒蛾中的应用。
在本发明中，所述性诱剂优选结合船形诱捕器使用，每两个船形诱捕器的间隔优选为15m。在本发明中，当诱捕茶园中的茶黑毒蛾时，将所述船形诱捕器置于高于茶树25cm处进行诱捕。
本发明提供的性诱剂及其应用对于茶黑毒蛾雄虫有极强的引诱力。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为1:1:1。
实施例2
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为2:3:5。
实施例3
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为4:2:4。
对比例1
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为5:0:5。
对比例2
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为0:5:5。
对比例3
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为5:5:0。
对比例4
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为8:1:1。
对比例5
茶黑毒蛾性信息素组合物：顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯和顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮的质量比为6:2:2。
实施例4
1)选择高度为14.0±0.5mm mm，性信息素添加口外径10.0±0.2mm；内径7.5±0.2mm的橡胶塞，；诱芯形状为钟形；在无水乙醇中浸泡24h脱硫，取出的橡胶塞放入40℃烘箱中保持24h，得到缓释载体；
2)顺3,顺6-9,10-环氧二十一碳二烯、顺3,顺6,反11-9,10-环氧二十一碳三烯、顺3,顺6-二十一碳二烯-11-酮，分别加入色谱纯正己烷均匀溶解，分别得到10μg/μL的溶液，按实施例1中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比混合，得到活性组分溶液；
3)将步骤2)制得的活性组分溶液100μL滴加至步骤1)制得的缓释载体中，然后室温下置于通风橱静置3h，即制得茶黑毒蛾性诱剂。
实施例5
按照实施例4的方法，采用实施例2中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
实施例6
按照实施例4的方法，采用实施例3中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
对比例6
按照实施例4的方法，采用对比例1中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
对比例7
按照实施例4的方法，采用对比例2中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
对比例8
按照实施例4的方法，采用对比例3中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
对比例9
按照实施例4的方法，采用对比例4中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
对比例10
按照实施例4的方法，采用对比例5中茶黑毒蛾性信息素组合物的配比制备茶黑毒蛾性诱剂。
实施例7
性诱剂诱捕试验在浙江省杭州市中国农业科学院茶叶所实验基地进行。本实施例所用性诱剂为实施例4中制备。性诱剂结合船形诱捕器使用，每个处理3次重复。船形诱捕器棋盘式随机布置于茶园，每个诱捕器高于茶树25cm，诱捕器间隔15m，共统计4次诱捕虫数。
实施例8
与实施例7进行相同操作，采用实施例5制备的性诱剂。
实施例9
与实施例7进行相同操作，采用实施例6制备的性诱剂。
应用对比例1
与实施例7进行相同操作，采用对比例6制备的性诱剂。
应用对比例2
与实施例7进行相同操作，采用对比例7制备的性诱剂。
应用对比例3
与实施例7进行相同操作，采用对比例8制备的性诱剂。
应用对比例4
与实施例7进行相同操作，采用对比例9制备的性诱剂。
应用对比例5
与实施例7进行相同操作，采用对比例10制备的性诱剂。
表1.茶黑毒蛾性诱剂田间诱捕试验
表2.茶黑毒蛾性诱剂田间诱捕试验
实施例7～9和应用对比例1～5的引诱力的实验结果分别如表1和表2所示。从表1可以看出，三种化合物缺一不可，任意两种化合物配方均不能引诱到雄虫，只有三种化合物混合后才能引诱雄虫。从表2可以看出，三种化合物按不同比例混合时，引诱活性表现出一定差异，其中以2:3:5时，引诱效果最佳，显著优于其它比例组合。
对本发明中茶黑毒蛾性诱剂与茶黑毒蛾雌虫进行引诱力对比试验，在浙江省杭州市中国农业科学院茶叶所实验基地进行。试验所用性诱剂为实施例5制备，对比为羽化后第二天未交配的茶黑毒蛾雌虫，空白对照为添加正己烷的橡胶塞。性诱剂结合船形诱捕器使用，每个处理3次重复。船形诱捕器棋盘式随机布置于茶园，每个诱捕器高于茶树25cm，诱捕器间隔15m，共统计4次诱捕虫数。
表3.茶黑毒蛾性诱剂与雌虫引诱效果对比试验
本发明中茶黑毒蛾性诱剂与茶黑毒蛾雌虫的引诱力对比实验结果如表3所示。从表3可以看出，茶黑毒蛾性诱剂与茶黑毒蛾雌虫均能成功诱到茶黑毒蛾雄虫，性诱剂引诱效果显著优于雌虫。茶黑毒蛾雌虫能引诱一定距离范围内的雄虫，本发明的茶黑毒蛾性诱剂由于性信息素组分含量高于雌虫，因此能引诱更远范围内的雄虫。
由以上实施例可以看出，采用本发明提供的茶黑毒蛾性诱剂的引诱力显著优于雌虫。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。