酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法及应用
阅读说明：本技术 酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法及应用 (Method for recovering sarcoplasmic proteins in minced fillet rinsing liquid by combining acid treatment with chitosan flocculation and application ) 是由 黄琪琳 周文燕 龙斯宇 熊善柏 刘念 张茜 于 2020-12-28 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法及其应用,鱼肉置于蒸馏水中漂洗,离心,上清液为鱼糜漂洗液；鱼糜漂洗液中加入壳聚糖溶液,先调节pH至2.0-4.0,再用NaOH溶液调节pH至6.0-9.0,静置、离心,沉淀即为肌浆蛋白与壳聚糖的共絮凝物。本发明相对于传统壳聚糖絮凝法,酸处理可以提高壳聚糖对肌浆蛋白的回收率一倍以上,其回收的肌浆蛋白与壳聚糖共絮凝物无需分离,呈现良好的可纺性,可直接应用于静电纺丝制作肌浆蛋白纳米纤维膜,此电纺纤维膜具有强的表面疏水性、机械性能及热稳定性。本发明絮凝回收肌浆蛋白节能降耗,减少了鱼糜漂洗废水的处理成本和压力,解决了鱼糜工业化生产中副产物的回收和高值化利用的难题。(The invention relates to a method for recovering sarcoplasmic proteins in minced fillet rinsing liquid by combining acid treatment with chitosan flocculation and application thereof, wherein fish is placed in distilled water for rinsing and centrifuging, and the supernatant is minced fillet rinsing liquid; adding chitosan solution into the minced fillet rinsing liquid, firstly adjusting the pH to 2.0-4.0, then adjusting the pH to 6.0-9.0 by NaOH solution, standing, centrifuging, and precipitating to obtain the co-flocculate of the sarcoplasmic protein and the chitosan. Compared with the traditional chitosan flocculation method, the acid treatment can improve the recovery rate of the chitosan to the sarcoplasmic protein by more than one time, the recovered sarcoplasmic protein and chitosan co-flocculate does not need to be separated, the good spinnability is presented, the acid treatment can be directly applied to electrostatic spinning to prepare the sarcoplasmic protein nano fiber membrane, and the electrospun fiber membrane has strong surface hydrophobicity, mechanical property and thermal stability. The invention can save energy and reduce consumption, reduce the treatment cost and pressure of the minced fillet rinsing wastewater, and solve the problems of recovery and high-value utilization of byproducts in the industrialized production of the minced fillet.)
技术领域
本发明属于食品技术领域，涉及酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法及应用。
背景技术
鱼糜制品因其富含优质蛋白和氨基酸，具有极高的营养价值和细嫩的口感，在世界范围内广受欢迎，其需求量常年在不断增加。到2019年，我国水产品加工总量2171.41万吨，其中鱼糜及鱼糜制品产量约139.40万吨。白鲢产量高，价格低廉，肉质鲜嫩，是用于生产鱼糜的主要淡水鱼。然而，在鱼糜生产过程中，需用大量水多次漂洗鱼肉以去除残留的血液、脂质、水溶性蛋白和肌膜等杂质，一方面会使占鱼肉蛋白20～40％的水溶性的肌浆蛋白在漂洗过程中流失，造成资源的严重浪费；另一方面产生了大量富含蛋白的漂洗废水，需要进行处理，否则会造成水体的富营养化。因此，若能将鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白充分回收，既能提升肌浆蛋白利用率和鱼制品的附加值，又能降低漂洗废水中的有机污染物，减少处理成本，从而产生良好的经济价值和环境效益。
壳聚糖是一种天然的直链高分子聚合物，其主链含有丰富的氨基，在酸性介质中会质子化，表现为典型的阳离子聚电解质特征，赋予壳聚糖良好的絮凝性能。此外，壳聚糖还兼具良好的生物相容性和可降解性，使得其在废水处理中得到广泛的使用。然而，壳聚糖在中性或碱性水溶液中的溶解性差，阻碍了其最佳使用，因此单独采用壳聚糖絮凝鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白，其回收率较低，仅在40％左右。因此，如何提升壳聚糖对肌浆蛋白的絮凝效果，提高蛋白回收率成为了亟待解决的问题。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法及其应用。
本发明的方案是：
一种酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法，所述方法为包括以下步骤：
S1：鱼糜漂洗液的制备：取鱼肉加蒸馏水漂洗，离心，上清液为鱼糜漂洗液；
S2：鱼糜漂洗液中加入壳聚糖溶液，调节pH至6.0-9.0；
S3：静置、离心，沉淀即为肌浆蛋白与壳聚糖的共絮凝物。
优选地，所述步骤S1中，鱼肉与蒸馏水的固液比为1:(1.0-3.5)(g/mL)，离心条件：8000-11000g，4℃，12-18min。
优选地，所述步骤S2中，壳聚糖的脱乙酰度为85-98％，壳聚糖在鱼糜漂洗液的添加量为150-400mg/L。
优选地，所述步骤S2中，先调节pH至2.0-4.0，再用NaOH溶液调节pH至6.0-9.0。
进一步优选地，所述步骤S2中，先调节pH至3.0，再用NaOH溶液调节pH至7.0。
更进一步优选地，所述步骤S2中，NaOH溶液浓度为1.0-6.0mol/L。
优选地，所述步骤S3中，放入水浴锅中静置的温度为10-35℃，静置的时间为30-300min后，离心的条件为：3500-4500r/min，8-15min。
所述方法回收的肌浆蛋白用于制作肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜，所述应用包括以下步骤：
1)肌浆蛋白与壳聚糖的共絮凝物冻干后，溶于六氟异丙醇中，磁力搅拌，
得到纺丝溶液；
2)纺丝溶液进行静电纺丝，并用铝箔纸滚动接收纤维膜；
3)纤维膜干燥以除去残留的有机溶剂，得到肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜。
优选地，所述步骤2)静电纺丝条件为：13-27℃，湿度30～65％，使用15-22KV的静电压，纺丝速度0.4-1.8mL/h，喷丝口距接收板距离10-18cm的条件下，进行静电纺丝。
优选地，所述步骤3)干燥条件为：室温下自然干燥或35-60℃真空干燥箱中干燥。
本发明有益效果：
1、本发明相对于传统壳聚糖絮凝法，酸处理可以提高壳聚糖对肌浆蛋白的回收率一倍以上，其作用机制源于在酸性溶液中壳聚糖质子化带正电荷，具有良好的溶解性，可以与肌浆蛋白充分相溶；当pH值升高时，蛋白质分子逐渐解离成电负态，容易迅速与带正电的壳聚糖发生静电吸引而絮凝、沉降下来。本发明回收的肌浆蛋白与壳聚糖共絮凝物无需分离，呈现良好的可纺性，可直接应用于静电纺丝制作肌浆蛋白纳米纤维膜，此电纺纤维膜具有强的表面疏水性、机械性能及热稳定性。本发明絮凝回收肌浆蛋白节能降耗，减少了鱼糜漂洗废水的处理成本和压力，解决了鱼糜工业化生产中副产物的回收和高值化利用的难题。
2、酸处理在提高壳聚糖絮凝蛋白效果的同时，也可以很好的提高其对鱼糜漂洗液中化学需氧量的去除。
3、酸处理可以显著提高肌浆蛋白的回收效率，相对于直接冷冻干燥法而言，大大减少了能耗。且相较于单一壳聚糖絮凝法回收的肌浆蛋白，酸处理结合壳聚糖絮凝的肌浆蛋白可纺性好。
附图说明
图1单一壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白；
图2酸处理结合壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白；
图3pH值对蛋白质回收率的影响；
图4壳聚糖用量对蛋白质回收率的影响；
图5温度对蛋白质回收率的影响；
图6时间对蛋白质回收率的影响；
图7不同浓度絮凝肌浆蛋白电纺膜的扫描电镜图；
图8絮凝和直接冷冻干燥肌浆蛋白纤维膜的接触角；
图9絮凝和直接冷冻干燥肌浆蛋白纤维膜的机械性能；
图10壳聚糖粉末和不同回收方式肌浆蛋白纤维膜的DSC曲线。
具体实施方式
下面结合实施例来进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于实施例表述的范围。
实施例1
1材料与试剂
白鲢鱼华中农业大学农贸市场；壳聚糖北京酷来搏科技有限公司，使用时用质量百分比1％乙酸溶解配成质量百分比1％壳聚糖溶液(1wt％壳聚糖溶液)。
2实验方法
2.1鱼糜漂洗液的制备[21]
新鲜白鲢敲晕，去头去尾去鱼皮去内脏，手工采肉，用调理机绞碎，称取鱼肉重量。取鱼肉以1:3(质量：体积，g/mL)加蒸馏水漂洗，经10000g，4℃条件下离心15min，取上清液作为鱼糜漂洗水，与4℃条件下储藏备用。
2.2单一壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白
取3支离心管，每支加入鱼糜漂洗液40mL，依次取1.2mL脱乙酰度为85％、90％、95％的1wt％壳聚糖溶液加入上述试管中。随后用3mol/L NaOH溶液调节pH至7.0。放入20℃水浴锅中静置90min后，然后4000r/min离心10min，取上清液测蛋白浓度。
2.3酸处理结合壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白
取3支离心管，每支加入鱼糜漂洗液40mL，依次取1.2mL脱乙酰度为85％、90％、95％的1wt％壳聚糖溶液加入上述试管中。调节pH至3.0，随后用3mol/L NaOH溶液调节pH至7.0。放入20℃水浴锅中静置90min后，然后4000r/min离心10min，取上清液测蛋白浓度。
2.4单因素试验
2.4.1 pH值对蛋白质回收率的影响
取10支离心管，每支加入鱼糜漂洗液40mL，再取1.2mL的1wt％壳聚糖溶液分别加入上述试管中。调节pH至3.0，随后用3mol/L NaOH溶液依次调节pH至4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0。20℃水浴锅中静置90min后，然后4000r/min离心10min，取上清液测蛋白浓度。
2.4.2壳聚糖用量对蛋白质回收率的影响
取6支离心管，每支加入鱼糜漂洗液40mL，再依次加入1wt％壳聚糖溶液0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL(计鱼糜漂洗水中壳聚糖用量依次为150、200、250、300、350、400mg/L)。调节pH至3.0，随后用3mol/L NaOH溶液调节pH至7.0。20℃水浴锅中静置90min后，然后4000r/min离心10min，取上清液测蛋白浓度
2.4.3温度对蛋白质回收率的影响
取7支离心管，每支加入鱼糜漂洗液40mL，再取1.2mL的1wt％壳聚糖溶液分别加入上述试管中。调节pH至3.0，随后用3mol/L NaOH溶液依次调节pH至7.0。分别于10、20、30、40、50、60、70℃水浴锅中静置90min后，然后4000r/min离心10min，取上清液测蛋白浓度。
2.4.4时间对蛋白质回收率的影响
取7支离心管，每支加入鱼糜漂洗液40mL，再取1.2mL的1wt％壳聚糖溶液分别加入上述试管中。调节pH至3.0，随后用3mol/L NaOH溶液调节pH至7.0。20℃水浴锅中分别静置30、60、90、120、150、180、210min后，然后4000r/min离心10min，取上清液测蛋白浓度。
2.5响应面优化试验
在单因素试验的基础上，利用Design-expert软件进行Box-Bechnken中心组合优化设计，以最终蛋白质的总回收率作为试验指标，对其中壳聚糖量、pH值、温度3个可能存在协同效应的因素进行了三因素三水平的响应面试验。其中三因素的-1、0、1的水平分别设置为：A因素pH值6.5、7.0、7.5；B因素温度10、20、30℃；C因素壳聚糖用量250、300、350mg/L。
2.6蛋白回收率
按照福林酚法测定蛋白质浓度(标准曲线回归方程为：y＝0.0023x+0.0751，R2＝0.9931)，蛋白质回收率计算方法如下：
式中：C0为原始鱼糜漂洗液中蛋白质浓度，mg/mL；C1为絮凝后上清液中蛋白质浓度，mg/mL。
3结果与分析
3.1单一壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白
单一壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白结果如图1所示。三种脱乙酰度壳聚糖回收肌浆蛋白的回收率依次为：95％脱乙酰度＞90％脱乙酰度＞85％脱乙酰度。脱乙酰度的增加会导致氨基的增多，从而质子化后正电荷密度增加，提高了电荷中和效果，使得壳聚糖具有更佳的絮凝效果。因此，后续试验选择脱乙酰度为95％的壳聚糖。本实验通过单一的95％脱乙酰度壳聚糖絮凝法所得的肌浆蛋白回收率较低，仅35％左右。
3.2酸处理结合壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白
酸处理结合壳聚糖絮凝法回收肌浆蛋白结果如图2所示。酸处理能够显著提高壳聚糖作为单一絮凝剂时的絮凝效果，肌浆蛋白回收率高达81.54％。相较于单一壳聚糖絮凝法，蛋白回收率提高了46.02％。可见，酸处理(pH调到3.0)在壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液蛋白时起着至关重要的作用，原因是经酸处理后壳聚糖质子化带正电荷，具有良好的水溶性，并与肌浆蛋白充分互溶；随后pH值升高，蛋白质分子逐渐解离成电负态，迅速与带正电的壳聚糖发生静电吸引而絮凝，共同沉降下来。期间，也伴随着蛋白质的等电点沉淀。
3.3单因素实验结果与分析
3.3.1 pH值对蛋白质回收率的影响
pH值对蛋白质回收率的影响如图3所示。pH值对壳聚糖絮凝过程具有较为显著的影响。当pH值为4.5～7.0时回收率随pH的增加而增加，在pH 7.0处达到最大值，随后回收率逐渐下降。可能在pH值较低时，蛋白质属这种两性电解质在酸性溶液中带正电，而壳聚糖的氨基在酸性溶液中质子化使壳聚糖带正电，两者的静电排斥效应赋予系统的相对动态稳定性，从而导致回收率较低；而当超过最适pH 7.0时，蛋白质在碱性环境下增溶，使其回收率下降。
3.3.2壳聚糖用量对蛋白质回收率的影响
壳聚糖用量对蛋白质回收率的影响如图4所示。随着壳聚糖添加量的增加，蛋白质回收率呈先增加后下降的趋势，在壳聚糖量为300mg/L时达到最大值。可能原因是随着壳聚糖含量增加，壳聚糖与蛋白质能够进行有效的电荷中和、桥连作用和静电相互作用而聚集沉降，并当溶液整体呈电中性时絮凝效果最佳。但壳聚糖用量过多，蛋白絮凝回收率有下降趋势。
3.3.3温度对壳聚糖絮凝回收肌浆蛋白的影响
温度对蛋白质回收率的影响如图5所示。当温度在30℃以下时，回收率随温度无显著变化，且在20℃时有一个相对较高的回收率。当温度超过30℃时，蛋白质回收率呈上升趋势，可能的原因是肌浆蛋白的变性温度为40℃左右，温度较高使蛋白质发生热变性，空间结构被破坏而失稳沉淀。总体而言，以大幅增加能耗换取回收率小幅增加并不合理，因此絮凝过程的最佳温度应选择20℃。
3.3.4时间对壳聚糖絮凝回收肌浆蛋白的影响
时间对蛋白回收率的影响如图6所示。随着絮凝时间的延长，蛋白质回收率先呈增加的趋势，在90min处达到最大值，之后回收率降低。可能的原因是在絮凝初期，壳聚糖与蛋白质未充分螯合并絮凝形成沉淀；而絮凝时间过长，壳聚糖-蛋白质聚集体不稳定出现解聚现象，导致回收率下降。
3.4响应面优化实验结果与分析
根据单因素实验结果，絮凝时间设定为90min。分别设pH、温度、壳聚糖量为三个考察因素，采Design-expert软件的Box-Bechnken中心组合优化设计，以蛋白质总回收率为考察指标进行试验，结果见表1。对表1的数据进行多元二次回归拟合，得回归方程：
Y＝84.08-1.13A-0.12B+0.24C-0.17AB+1.08AC-0.082BC-0.072B2-0.39C2。
表1 Box-Bechnken试验设计及结果
由表2可知，通过方差检验及显著性分析，A和AC项对实验结果影响极显著(P<0.01)。模型Pr>F对实验结果影响极显著(P<0.01)，失拟项Pr>F值为0.1064，对实验影响不显著(P>0.05)，表明模型拟合度好，能准确模拟响应中的变异。模型的决定系数R2为0.9201，说明此方程对试验拟合度比较好，误差小；为增加模型预测的可靠性，适当修正后的R2adj值为0.8401，说明该模型能解释84.01％响应值的变化，证明该模型可用于拟合实验自变量与响应值之间关系。
表2回归方程的方差分析结果
注:*为显著(P<0.05)，**为极显著(P<0.01)。
通过方程可知，二次项系数为负值，表明方程具有最大值。根据响应面designexpert软件分析得出预测最优条件为：pH 6.5、温度29.51℃、壳聚糖用量250mg/L，预测蛋白回收率85.72％。
4结论
根据模型优化结果及实际条件，确定肌浆蛋白最佳回收工艺为：pH 6.5、温度30℃、壳聚糖用量250mg/L、絮凝时间90min，此条件下得到的蛋白质回收率为85.23％。
实施例2
一种酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法，所述方法为包括以下步骤：
S1：鱼糜漂洗液的制备：取鱼肉以1:3(质量：体积，g/mL)加蒸馏水漂洗，离心，上清液为鱼糜漂洗液；
S2：鱼糜漂洗液中加入壳聚糖溶液，调节pH至7.0；
S3：静置，离心，沉淀即为肌浆蛋白与少许壳聚糖的共絮凝物。
优选地，所述步骤S1中，鱼肉与蒸馏水的固液比为1:3(g/mL)，离心条件：-10000g，4℃，15min。
优选地，所述步骤S2中，壳聚糖的脱乙酰度为95％，壳聚糖在鱼糜漂洗液的添加量为250mg/L。
优选地，所述步骤S2中，先调节pH至3.0，再用NaOH溶液调节pH至7.0。
优选地，所述步骤S2中，NaOH溶液浓度为3mol/L。
优选地，所述步骤S3中，放入20℃水浴锅中静置90min后，离心的条件为：4000r/min，10min。
化学需要量(COD)测定结果
漂洗液化学需氧量测定结果如表3所示。从表3可知，经实施例2絮凝条件处理后，鱼糜漂洗液中化学需要量(COD)由原始的674.55mg·L-1下降到179.98mg·L-1，COD值去除率达73.32％。由此可见，酸处理在提高壳聚糖絮凝蛋白效果的同时，也可以显著降低鱼糜漂洗液中的化学需氧量。
表3鱼糜漂洗液COD测定结果
回收的肌浆蛋白与壳聚糖的共絮凝物用于制作肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜，所述应用包括以下步骤：
1)肌浆蛋白与壳聚糖的的共絮凝物冻干后，溶于六氟异丙醇中，配置成质量分数分别为2％、4％、6％、8％、10％的溶液，在室温条件下磁力搅拌24小时后，得到纺丝溶液；
2)纺丝溶液于25℃，湿度45％，使用20KV的静电压，纺丝速度0.8mL/h，喷丝口距接收板距离14cm的条件下，进行静电纺丝，并用铝箔纸滚动接收纤维膜；
3)纤维膜40℃真空干燥48小时得到肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜。
絮凝肌浆蛋白电纺膜的扫描电镜(SEM)观察
实施例2絮凝的肌浆蛋白用于制作肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜(絮凝肌浆蛋白电纺膜，简称FL-FSP)，由图7可知当浓度较低时，溶液粘度较低，而表面张力大，纤维很难成型，纤维表面伴随着大量串珠，如2％和4％的SEM所示。当浓度提高时，粘度增大，表面张力降低，从而使表面张力、粘度、静电斥力之间形成平衡的对抗，从而得到平整均匀的纤维，表面无串珠产生，如6％的SEM所示。溶液粘度过大，流变性变差，纺丝困难,如8％,10％的SEM所示。因此，后续决定采用6％的蛋白纺丝液浓度。
SEM的结果表明，由酸处理结合壳聚糖絮凝获得的肌浆蛋白可以不用分离残留在蛋白中的壳聚糖，可直接用于静电纺丝成膜，减少了人力物力的消耗。
接触角测试结果
采用6％的蛋白纺丝液浓度，制作絮凝肌浆蛋白电纺膜(FL-FSP)，与直接冷冻干燥肌浆蛋白电纺膜(FD-FSP)比较。其中，直接冷冻干燥肌浆蛋白电纺膜制作方法：取鱼肉以1:3(质量：体积，g/mL)加蒸馏水漂洗，随后在8000r·min-1，4℃条件下离心15min，取上清液置于-80℃冰箱冻结后冷冻干燥，获得直接冷冻干燥肌浆蛋白。然后将此蛋白溶于六氟异丙醇中制备浓度为8％的纺丝溶液并于25℃，湿度45％，使用20KV的静电压，纺丝速度0.8mL/h，喷丝口距接收板距离14cm的条件下，通过静电纺丝制备成直接冷冻干燥肌浆蛋白电纺膜(FD-FSP)。
不同回收方式的肌浆蛋白电纺膜的接触角测量结果如图8，直接冷冻干燥肌浆蛋白电纺膜的接触角为97.0±0.9°，而絮凝肌浆蛋白电纺膜的接触角为124.1±1.5°，这可能是因为肌浆蛋白经酸处理后，使得到的絮凝肌浆蛋白电纺膜表面粗糙，表面能较大，从而导致接触角增加，提高了纤维膜的表面疏水性。
机械性能分析
肌浆蛋白电纺纤维膜的力学性能如图9所示，直接冷冻干燥肌浆蛋白纤维膜的弹性模量和拉伸强度分别为77.5MPa、1.0MPa，而絮凝肌浆蛋白纤维膜的弹性模量和拉伸强度分别为29.0MPa、0.4MPa，这可能是酸处理对蛋白质结构破坏所导致。直接冷冻干燥肌浆蛋白纤维和絮凝肌浆蛋白纤维的断裂伸长率分别为4.6％和4.8％，结果表明酸处理并未对蛋白纤维膜的断裂伸长率造成负面影响。
示差扫描量热分析(DSC)
肌浆蛋白达到一定温度后会发生不可逆的变形(收缩)，分子从伸展的螺旋状向无序卷曲状态转变。肌浆蛋白的变性温度越高，说明其内部结构越稳定，热稳定性越好。通过示差扫描量热(DSC)研究了壳聚糖粉末、FD-FSP、FL-FSP纤维膜的热力学行为。图10的DSC显示，壳聚糖粉末在148.4℃有一个吸热峰，对应于壳聚糖的熔点(Tm)。FD-FSP纤维和FL-FSP纤维表现出相似的吸热峰，FD-FSP纤维的熔点为167.0℃，而FL-FSP纤维膜的熔点为173.0℃，吸热峰值增高，表明肌浆蛋白电纺膜的热稳定性高，且絮凝肌浆蛋白膜还优于直接冷冻干燥肌浆蛋白膜。
絮凝比冷冻干燥节能降耗，且絮凝回收肌浆蛋白减少了鱼糜漂洗废水的处理成本和压力，解决了鱼糜工业化生产中副产物的回收和高值化利用的难题。
实施例3
一种酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法，所述方法为包括以下步骤：
S1：鱼糜漂洗液的制备：取鱼肉加蒸馏水中漂洗，离心，上清液为鱼糜漂洗液；
S2：鱼糜漂洗液中加入壳聚糖溶液，调节pH至6.5；
S3：静置，离心，沉淀即肌浆蛋白与少许壳聚糖的共絮凝物。
优选地，所述步骤S1中，鱼肉与蒸馏水的固液比为1:2(g/mL)，离心条件：9000g，4℃，12min。
优选地，述步骤S2中，壳聚糖的脱乙酰度为90％，壳聚糖在鱼糜漂洗液的添加量为300mg/L。
优选地，所述步骤S2中，先调节pH至3.0，再用NaOH溶液调节pH至6.5。
优选地，所述步骤S2中，NaOH溶液浓度为2.5mol/L。
优选地，所述步骤S3中，放入20℃水浴锅中静置的温度为15℃，静置的时间为85min后，离心的条件为：3500r/min，8min。
所述方法制备的肌浆蛋白用于制作肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜，所述应用包括以下步骤：
1)肌浆蛋白与壳聚糖的共絮凝物冻干后，溶于六氟异丙醇中，磁力搅拌，得到纺丝溶液；
2)纺丝溶液进行静电纺丝，并用铝箔纸滚动接收纤维膜；
3)纤维膜干燥以除去残留的有机溶剂。
优选地，所述步骤2)静电纺丝条件为：23℃，湿度40％，使用18KV的静电压，纺丝速度0.6mL/h，喷丝口距接收板距离12cm的条件下，进行静电纺丝。
优选地，所述步骤3)干燥条件为：在室温下自然干燥。
实施例4
一种酸处理结合壳聚糖絮凝回收鱼糜漂洗液中的肌浆蛋白的方法，所述方法为包括以下步骤：
S1：鱼糜漂洗液的制备：取鱼肉加入蒸馏水中漂洗，随后离心，上清液为鱼糜漂洗液；
S2：鱼糜漂洗液中加入壳聚糖溶液，调节pH至8.0；
S3：静置，离心，沉淀即为肌浆蛋白与少许壳聚糖的共絮凝物。
优选地，所述步骤S1中，鱼肉与蒸馏水的固液比为1:1(g/mL)，离心条件：11000g，4℃，18min。
优选地，述步骤S2中，壳聚糖的脱乙酰度为90-98％，壳聚糖在鱼糜漂洗液的添加量为150mg/L。
优选地，所述步骤S2中，先调节pH至3.0，再用NaOH溶液调节pH至8.0。
优选地，所述步骤S2中，NaOH溶液浓度为2.5-3.5mol/L。
优选地，所述步骤S3中，放入20℃水浴锅中静置的温度为25℃，静置的时间为95min后，离心的条件为：4500r/min，12min。
所述方法制备的肌浆蛋白用于制作肌浆蛋白静电纺丝纳米纤维膜，所述应用包括以下步骤：
1)沉淀即为肌浆蛋白与壳聚糖的共絮凝物冻干后，溶于六氟异丙醇中，磁力搅拌，得到纺丝溶液；
2)纺丝溶液进行静电纺丝，并用铝箔纸滚动接收纤维膜；
3)纤维膜真空干燥以除去残留的有机溶剂。
优选地，所述步骤2)静电纺丝条件为：27℃，湿度0％，使用22KV的静电压，纺丝速度1.2mL/h，喷丝口距接收板距离16cm的条件下，进行静电纺丝。
优选地，所述步骤3)干燥条件为：45℃真空干燥箱中干燥50小时。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。