具体实施方式

以下，对本发明的实施方式进行说明。

本实施方式的环境污染物质所致损伤的抑制剂将来自阳桃的果实的提取物作为有效成分。另外，本实施方式的化妆品和饮料食品用于环境污染物质所致损伤的抑制用途，配合有来自阳桃的果实的提取物。

在此，本实施方式中的“来自阳桃的果实的提取物”中，包含通过提取处理从阳桃的果实得到的提取液、该提取液的稀释液或浓缩液、将该提取液干燥而得到的干燥物、或它们的粗纯化物或精制物中的任一种。

本实施方式中使用的提取原料为阳桃(学名：Averrhoa carambola L.)的果实。阳桃属于酢浆草科，也被称为五敛子、阳桃(生药名)，其果实可食用。在中国，阳桃自公元前以来在文献中就有记载，由于其果实截面呈星形，因此被称为星果即阳桃。阳桃在冲绳、中国东南部、云南和其他热带地区种植，可以很容易从这些地区获得。

作为提取原料使用的阳桃的果实在采集后立即干燥是适当的。干燥可以采取日晒方式，也可以使用常用的干燥机进行。阳桃的果实可以在干燥后进行粉碎、破碎等处理。阳桃的果实可以通过己烷等非极性溶剂实施脱脂等预处理后作为提取原料使用。通过进行脱脂等预处理，能够高效地进行阳桃果实的极性溶剂提取处理。

作为提取溶剂，优选使用极性溶剂，例如可列举出水、亲水性有机溶剂等，优选将它们单独或组合两种以上来在室温或溶剂的沸点以下的温度下使用。

作为能够用作提取溶剂的水，除了纯水、自来水、井水、矿泉水、矿水、温泉水、涌水、淡水等之外，还包括对这些水实施了各种处理的水。作为对水实施的处理，例如包括纯化、加热、杀菌、过滤、离子交换、渗透压调整、缓冲化等。因此，在本实施方式中可用作提取溶剂的水还包括纯化水、热水、离子交换水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。

作为可用作提取溶剂的亲水性有机溶剂，可举出甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数为1～5的低级脂肪族醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪族酮；1，3-丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数为2～5的多元醇等。

在使用两种以上极性溶剂的混合液作为提取溶剂的情况下，其混合比可以适当调整。例如，在使用水与低级脂肪族醇的混合液作为提取溶剂的情况下，水与低级脂肪族醇的混合比优选为9∶1～1∶9(容量比)，进一步优选为7∶3～2∶8(容量比)。另外，在使用水与低级脂肪族酮的混合液的情况下，水与低级脂肪族酮的混合比优选为9∶1～2∶8(容量比)，在使用水与多元醇的混合液的情况下，水与多元醇的混合比优选为8∶2～1∶9(容量比)。

提取处理只要能够使提取原料中含有的可溶性成分溶出到提取溶剂中，就没有特别限定，可以按照常规方法进行。例如，将提取原料浸渍于提取原料的5～15倍量(质量比)的提取溶剂中，在常温或回流加热下提取可溶性成分，然后进行过滤而除去提取残渣，由此能够得到提取液。从得到的提取液中蒸馏除去溶剂，得到糊状的浓缩物，对该浓缩物进一步干燥，得到干燥物。

＜环境污染物质所致损伤的抑制剂＞

如上所述得到的来自阳桃的果实的提取物(以下，有时简称为“阳桃果实提取物”。)在环境污染物质所致损伤的抑制作用方面具有优异的作用，因此能够作为环境污染物质所致损伤的抑制剂的有效成分使用。本实施方式所涉及的环境污染物质所致损伤的抑制剂可以广泛地应用于医药品、准医药品、化妆品等用途。需要说明的是，将本实施方式所涉及的环境污染物质所致损伤的抑制剂分别简略为“损伤抑制剂”时，其作用及用途也是同样的。

作为环境污染物质，例如可以举出水质污染物质(烷基苯磺酸盐等)、土壤污染物质(农药等)、大气污染物质(汽油发动机的废气、隧道粉尘(tunnel dust)等)，但并不限定于这类物质。从能够更有效地抑制损伤的观点出发，可以举出大气污染物质(汽油发动机的废气、隧道粉尘等)。

在此，阳桃果实提取物所具有的损伤抑制作用例如基于对由环境污染物质导致的蛋白质羰基化的抑制作用或对由环境污染物质导致的炎症相关基因表达上升的抑制作用而发挥。但是，阳桃果实提取物所具有的损伤抑制作用并不限定于基于上述蛋白质羰基化抑制作用或上述炎症相关基因表达上升抑制作用而发挥的损伤抑制作用。

阳桃果实提取物针对由于环境污染物质诱导的蛋白质羰基化起抑制作用的部位中，可列举出皮肤(包括头皮)、支气管、血管和毛发等，特别是针对皮肤可列举出表皮或真皮等，但从能够更有效地抑制蛋白质羰基化的观点出发，在表皮中也可举出角质层。

阳桃果实提取物对由于环境污染物质而导致的炎症相关基因过表达起抑制作用的相关基因中，可列举出白细胞介素1α(IL-1α)、环氧合酶2(COX-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)等。

阳桃果实提取物对由于环境污染物质而导致的炎症相关基因过表达起抑制作用的部位中，可列举出皮肤(包括头皮)、支气管、血管等，特别是对于皮肤可以列举表皮或真皮等，从能够更有效地抑制上述炎症相关基因的表达的观点出发，在表皮中也可举出表皮角质细胞。

利用阳桃果实提取物对由环境污染物质导致的蛋白质羰基化所具有的抑制作用或对由环境污染物质导致的炎症相关基因表达上升的所具有的抑制作用、其中尤其是对由环境污染物质导致的IL-1α表达上升的抑制作用、对由环境污染物质导致的COX-2表达上升的抑制作用或对由环境污染物质导致的MMP-9表达上升的抑制作用，可作为由环境污染物质导致的蛋白质羰基化的抑制剂、由环境污染物质导致的IL-1α表达上升的抑制剂、由环境污染物质导致的COX-2表达上升的抑制剂或由环境污染物质导致的MMP-9表达上升的抑制剂等的有效成分进行使用。

本实施方式的损伤抑制剂可以由单一的阳桃果实提取物构成，也可以将阳桃果实提取物制剂化。

本实施方式的损伤抑制剂可以使用糊精、环糊精等药学上可接受的载体及其他任意助剂，按照常规方法制剂化为粉末状、颗粒状、片剂状、液状等任意剂型。此时，作为助剂，例如可以使用赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稳定剂、矫味/矫臭剂等。损伤抑制剂除了可以与其他组合物(例如化妆品等)配合使用以外，还可以作为软膏剂、外用液体制剂、贴剂等使用。

在将本实施方式的损伤抑制剂进行制剂化时，阳桃果实提取物的含量没有特别限定，可以根据目的适当设定。

需要说明的是，本实施方式的损伤抑制剂可以根据需要而将具有损伤抑制作用的其他天然提取物等与阳桃果实提取物一起配合用作有效成分。

作为本实施方式的损伤抑制剂对患者的给药方法中，可列举出经皮给药、经口给药等，根据疾患的种类，适当选择适合于该疾患的预防、治疗等的方法即可。另外，本实施方式的损伤抑制剂的给药量也可以根据疾患的种类、重症度、患者的个体差异、给药方法、给药时间等进行适当增减。

本实施方式的损伤抑制剂是通过作为有效成分的阳桃果实提取物的作用来抑制由于环境污染物质导致的损伤。本实施方式的损伤抑制剂是阳桃果实提取物对由环境污染物质导致的各种症状(例如支气管炎、哮喘、癌变、心脏病、骨或软骨破坏、发热、皮肤保水力降低、皮肤屏障功能降低、皮肤粗糙、炎症及毛发损伤等)的预防、治疗或改善所能发挥的抑制作用。。

但是，本实施方式的损伤抑制剂的用途除此之外，还可以用于对抑制由环境污染物质导致的损伤起作用的所有用途。例如，损伤抑制剂或上述的由环境污染物质导致的蛋白质羰基化的抑制剂，能够通过作为有效成分的阳桃果实提取物的作用来抑制由环境污染物质导致的蛋白质羰基化。本实施方式的损伤抑制剂是通过阳桃果实提取物的作用来抑制由环境污染物质导致的蛋白质羰基化，预防、治疗或改善癌变、发热、皮肤保水力降低、皮肤屏障功能降低、皮肤粗糙、炎症和毛发损伤等症状。

例如，本实施方式的损伤抑制剂、上述的由环境污染物质导致的IL-1α表达上升的抑制剂、由环境污染物质导致的COX-2表达上升的抑制剂或由环境污染物质导致的MMP-9表达上升的抑制剂，是通过作为有效成分的阳桃果实提取物的作用来抑制由环境污染物质导致的炎症相关基因表达上升。该炎症相关基因特别包括IL-1α、COX-2和MMP-9等。本实施方式的损伤抑制剂是通过阳桃果实提取物的作用来抑制由环境污染物质导致的炎症相关基因的表达上升，预防、治疗或改善癌变、骨或软骨破坏、发热、皮肤保水力降低、皮肤屏障功能降低、皮肤粗糙及炎症等症状。

此外，本实施方式的损伤抑制剂对损伤抑制具有优异的作用，因此适合于与如皮肤外用剂、头皮外用剂等经皮用外用剂等制剂配合使用。在该情况下，可以直接配合阳桃果实提取物，也可以配制由阳桃果实提取物制备的损伤抑制剂。

在此，作为经皮用外用剂，其划分没有限制，除了后述的化妆品以外，还广泛地包括经皮使用的准医药品、医药品等。

此外，本实施方式的损伤抑制剂具有优异的损伤抑制作用，因此也可以作为这类作用机理相关的研究用的试剂使用。

〔一种可抑制环境污染物质所致损伤的化妆品〕基于阳桃果实提取物所具有的对损伤抑制的优异作用适合配合于化妆品之中。在该情况下，可直接配合阳桃果实提取物，也可以配合由阳桃果实提取物制备的损伤抑制剂。

通过配合阳桃果实提取物或上述损伤抑制剂，可以配制成适用于损伤抑制用途的化妆品。

利用阳桃果实提取物或上述损伤抑制剂配制化妆品时其种类没有特别的限定，可以为皮肤化妆品、头发化妆品等，例如可以列举出软膏、乳霜、乳液、化妆水、爽肤水、凝胶、美容油、面膜、粉底、生发液、洗发剂、发乳、整发剂、洗发精、润发素、护理剂等。

利用阳桃果实提取物或上述损伤抑制剂配制化妆品时，其配合量可以根据化妆品的种类适当调整，优选的配合率为约0.0001～10质量％，特别优选的配合率换算成标准的提取物约为0.001～1质量％。

本实施方式的用于损伤抑制的化妆品只要不妨碍阳桃果实提取物所具有的损伤抑制作用，皆可作为通常化妆品的主剂、助剂或其他成分组合使用，例如收敛剂、杀菌/抗菌剂、美白剂、紫外线吸收剂、保湿剂、细胞活化剂、消炎/抗过敏剂、抗氧化/活性氧去除剂、油脂类、蜡类、烃类、脂肪酸类、醇类、酯类、表面活性剂、香料等。通过这样组合使用，可成为具有更一般性的产品，此外，通过与其他活性成分的协同作用可以产生出比预期更好的效果。

本实施方式的损伤抑制用化妆品能够通过阳桃果实提取物所具有的损伤抑制作用，对由环境污染物质导致的症状(例如，皮肤保水力降低、皮肤屏障功能降低、皮肤粗糙、炎症及毛发损伤等)进行预防、治疗或改善等。

〔一种可抑制环境污染物质所致损伤的饮料食品〕

基于阳桃果实提取物在损伤抑制作用方面所具有的优异作用，适合配合于饮料食品中。在该情况下，可以直接配合阳桃果实提取物，也可以配合由阳桃果实提取物制备的损伤抑制剂。通过配合阳桃果实提取物或上述损伤抑制剂，可以制成适于损伤抑制用途的饮料食品。

在此，饮料食品是指，对人的健康施加危害的可能性低、在通常的社会生活中通过经口或消化道投放而摄取的物质，并不限制于行政划分上的食品、医药品、准医药品等的划分。因此，本实施方式中的“饮料食品”广泛包括经口摄取的一般食品、健康食品(功能性饮料食品)、保健功能食品(特定保健用食品、营养功能食品)、准医药品、医药品等。本实施方式所涉及的饮料食品优选为能够在该饮料食品或其包装上显示阳桃果实提取物所具有的有利作用的饮料食品，特别优选为保健功能食品(特定保健用食品、功能性显示食品、营养功能食品)、准医药品及医药品。

利用阳桃果实提取物或由阳桃果实提取物制剂化的损伤抑制剂配合到饮料食品中时，它们中的有效成分的配合量可以根据使用目的、症状、性别等而适当变更，但考虑到作为添加对象的饮料食品的一般摄取量，优选使成人每天的提取物摄取量成为约1～1000mg。需要说明的是，在添加对象饮料食品为颗粒状、片剂状或胶囊状的饮料食品的情况下，阳桃果实提取物或由阳桃果实提取物制剂化的损伤抑制剂的添加量相对于添加对象饮料食品通常为0.1～100质量％，优选为5～100质量％。

本实施方式的损伤抑制用饮料食品可以是将阳桃果实提取物配合到不妨碍其活性的任意饮料食品，也可以是以阳桃果实提取物为主要成分的营养辅助食品。

在制造本实施方式的用于损伤抑制的饮料食品时，可以添加例如糊精、淀粉等糖类；明胶、大豆蛋白、玉米蛋白等蛋白质；丙氨酸、谷氨酰胺、异亮氨酸等氨基酸类；纤维素、阿拉伯胶等多糖类；大豆油、中链脂肪酸甘油三酯等油脂类等任意助剂而制成任意形状的饮料食品。

用于配合阳桃果实提取物的饮料食品没有特别限定，作为其具体例，可列举出：清凉饮料、碳酸饮料、营养饮料、果实饮料、乳酸饮料等饮料(包括这些饮料的浓缩原液和调整用粉末)；冰淇淋、冰冻果子露、刨冰等冷点心；荞麦面、乌冬面、粉丝、饺子皮、烧麦皮、中华面、方便面等面类；饴糖、口香糖、糖果、香口胶、巧克力、压片糖、零食、饼干、果冻、果酱、奶油、烘焙点心等糖果糕点类；鱼糕、火腿、香肠等水产/畜产加工食品；加工乳、发酵乳等乳制品；色拉油、煎炸油、人造黄油、蛋黄酱、起酥油、搅打奶油、沙拉酱等油脂和油脂加工食品；沙司、调料汁等调味料；汤、炖菜、色拉、家常菜、腌制品；其他各种形态的健康/营养辅助食品；片剂、胶囊剂、能量饮料等。在这些饮料食品中配合阳桃果实提取物时，可以组合使用常用的辅助性原料或添加物。

本实施方式的损伤抑制用饮料食品能够通过阳桃果实提取物所具有的损伤抑制作用，对由环境污染物质导致的症状(例如支气管炎、哮喘、癌变、心脏病、骨或软骨破坏、发热、皮肤保水力降低、皮肤屏障功能降低、皮肤粗糙、炎症及毛发损伤等)进行预防、治疗或改善等。

需要说明的是，本实施方式的损伤抑制剂、损伤抑制用化妆品及损伤抑制用饮料食品适合用于人，但是，只要能够发挥各自的作用效果，也可以应用于除人以外的动物(例如，小鼠、大鼠、仓鼠、狗、猫、牛、猪、猴子等)。

实施例

以下，示出试验例，对本发明进行具体说明，但本发明不受下述各例的任何限制。

〔制造例〕

将100g阳桃(学名：Averrhoa carambola L.)的果实的粗粉碎物投入到1500ml的提取溶剂中，在45～55℃下边温和地搅拌4小时边进行提取。然后过滤，将滤液在60℃下进行减压浓缩，进一步用减压干燥机干燥，得到阳桃的果实提取物。提取物的收率如表1所示。

【表1】

[试验例1]对由环境污染物质导致的蛋白质羰基化的抑制作用

对于阳桃果实提取物(试样1)，按如下方式对由环境污染物质导致的角质层蛋白质羰基化的抑制作用进行了试验。

使用角质检验器(ASAHI BIOMED公司制)通过胶带剥离法对作为非露光部的上臂内侧部的角质层进行剥离、回收。将附着有角质层的角质检验器(样品)浸渍在待测试样(试样1，试样浓度参照下述表2)的水溶液1mL中，在37℃处理24小时。需要说明的是，作为对照，使用未添加试样的水同样地进行处理。处理后，取出样品并风干。接着，使其暴露于已采集到带拉链的塑料袋中的汽油发动机的废气中，在室温下反应24小时。需要说明的是，作为空白，也准备了使其暴露于室内空气的样品。对于得到的样品，通过以下的方法评价角质层羰基化的水平。

将样品浸渍于含有20μmol/L荧光酰肼(fluorescein-5-thiosemicarbazide：荧光素-5氨基硫脲，AnaSpec公司制)的0.1mol/L MES缓冲液(pH5.5)，在室温、遮光条件下使它们反应1小时，将角质层蛋白质的羰基进行了标签化。反应结束后，用1mL PBS(-)缓冲液清洗2次，用荧光显微镜(BZ-X800，基恩士公司制造)进行图像摄影。使用图像分析软件(BZ-X800 analyzer，基恩士公司制造)对所得到的图像进行分析，将单位角质层面积的荧光亮度作为羰基化水平。由所得到的结果，通过下述式算出角质层蛋白质羰基化抑制率(％)。

角质层蛋白质羰基化抑制率(％)＝{1-(A-C)/(B-C)}×100

式中的各项分别表示以下各值：

A：废气处理、待测试样处理的羰基化水平

B：废气处理、无待测试样的处理(对照)的羰基化水平

C：无废气的处理、无待测试样的处理(空白)的羰基化水平

将结果示于表2。

【表2】

如表2所示，阳桃果实提取物(试样1)有效地抑制了由废气导致的角质层蛋白质羰基化。

[试验例2]对由环境污染物质导致的IL-1α表达上升的抑制作用

对阳桃果实提取物(试样1)，按如下方式对由环境污染物质导致的IL-1α的表达上升的抑制作用进行了试验。

使用正常人表皮角质细胞用增殖培养基(KGM)培养正常人新生儿表皮角质细胞(NHEK)后，通过胰蛋白酶处理并回收细胞。将回收到的细胞用KGM培养基稀释成细胞密度为20×10⁴cells/mL，然后接种于35mm的培养皿中，每皿接种2mL(40×10⁴cells/培养皿)，培养24小时。

培养后，将培养基更换为基础培养基(KBM)，培养24小时后，除去培养液，将溶解有待测试样(试样1，试样浓度参照下述表3)和多环芳香族烃类/有害元素分析用的隧道粉尘(产业技术综合研究所；认证标准物质NMIJCRM 7308-a，终浓度20μg/mL)的KBM培养基添加到各培养皿中，每皿添加2mL，培养24小时。需要说明的是，作为对照，使用未添加隧道粉尘的KBM培养基或未添加待测试样的KBM培养基同样地进行培养。培养后，除去培养基，用ISOGEN II(NIPPONGENE公司制，Cat.No.311-07361)提取总RNA，用分光光度计测定各自的RNA量，以达到200ng/μL的方式制备总RNA。

将该总RNA作为模板，对IL-1α和作为内标的GAPDH，测定mRNA的表达量。检测是使用实时PCR装置Smart Cycler(Cepheid公司制)，并通过TaKaRa SYBR PrimeScript RT-PCRkit(Perfect Real Time)(TAKARA生物公司制，code No.RR063A)的实时两步RT-PCR反应进行的。IL-1αmRNA的表达量是以从分别在“未添加隧道粉尘、未添加待测试样”、“添加隧道粉尘、未添加待测试样”及“添加隧道粉尘、添加待测试样”中培养的细胞中制备的总RNA标准品为依据而用GAPDH的值求出校正值。由所得到的值通过下述式算出IL-1αmRNA表达上升抑制率(％)。

IL-1αmRNA表达上升抑制率(％)＝{(A-B)-(A-C)}/(A-B)×100式中的各项分别表示以下各值：

A：未添加隧道粉尘、未添加待测试样时的校正值

B：添加隧道粉尘、未添加待测试样时的校正值

C：添加隧道粉尘、添加待测试样时的校正值

将结果示于表3。

【表3】

如表3所示，已确认，作为对由环境污染物质导致的IL-1α表达上升的抑制作用，阳桃果实提取物(试样1)具有优异的作用。

[试验例3]对由环境污染物质导致的COX-2表达上升的抑制作用

对阳桃果实提取物(试样1)，按如下方式对由环境污染物质导致的COX-2表达上升的抑制作用进行了试验。

使用正常人表皮角质细胞用增殖培养基(KGM)培养正常人新生儿表皮角质细胞(NHEK)后，通过胰蛋白酶处理并回收细胞。将回收到的细胞用KGM培养基稀释成细胞密度为20×10⁴cells/mL，然后接种于35mm的培养皿中，每皿接种2mL(40×10⁴cells/培养皿)，培养24小时。

培养后，将培养基更换为基础培养基(KBM)，培养24小时后，除去培养液，将溶解有待测试样(试样1，试样浓度参照下述表4)和多环芳香族烃类/有害元素分析用的隧道粉尘(产业技术综合研究所；认证标准物质NMIJCRM 7308-a，终浓度20μg/mL)的KBM培养基添加到各培养皿中，每皿添加2mL，培养24小时。需要说明的是，作为对照，使用未添加隧道粉尘的KBM培养基或未添加试样的KBM培养基同样地进行培养。培养后，除去培养基，用ISOGENII(NIPPONGENE公司制，Cat.No.311-07361)提取总RNA，用分光光度计测定各自的RNA量，以达到200ng/μL的方式制备总RNA。

将该总RNA作为模板，对COX-2和作为内标的GAPDH，测定mRNA的表达量。检测是使用实时PCR装置Smart Cycler(Cepheid公司制)，并通过TaKaRa SYBR PrimeScript RT-PCRkit(Perfect Real Time)(TAKARA生物公司制，code No.RR063A)的实时两步RT-PCR反应进行的。COX-2mRNA的表达量是以从分别在“未添加隧道粉尘、未添加待测试样”、“添加隧道粉尘、未添加待测试样”及“添加隧道粉尘、添加待测试样”中培养的细胞中制备的总RNA标准品为依据而用GAPDH的值求出校正值。由所得到的值通过下述式算出COX-2mRNA表达上升抑制率(％)。

COX-2mRNA表达上升抑制率(％)＝{(A-B)-(A-C)}/(A-B)×100

式中的各项分别表示以下各值：

A：未添加隧道粉尘、未添加待测试样时的校正值

B：添加隧道粉尘、未添加待测试样时的校正值

C：添加隧道粉尘、添加待测试样时的校正值

将结果示于表4。

【表4】

如表4所示，已确认，作为对由环境污染物质导致的COX-2表达上升的抑制作用，阳桃果实提取物(试样1)具有优异的作用。

[试验例4]对由环境污染物质导致的MMP－9表达上升的抑制作用

对阳桃果实提取物(试样1)，按如下方式对由环境污染物质导致的MMP－9表达上升的抑制作用进行了试验。

使用正常人表皮角质细胞用增殖培养基(KGM)培养正常人新生儿表皮角质细胞(NHEK)后，通过胰蛋白酶处理并回收细胞。将回收到的细胞用KGM培养基稀释成细胞密度为20×10⁴cells/mL，然后接种于35mm的培养皿中，每皿接种2mL(40×10⁴cells/培养皿)，培养24小时。

培养后，将培养基更换为基础培养基(KBM)，培养24小时后，除去培养液，将溶解有待测试样(试样1，试样浓度参照下述表5)和多环芳香族烃类·有害元素分析用的隧道粉尘(产业技术综合研究所；认证标准物质NMIJCRM 7308-a，终浓度20μg/mL)的KBM培养基添加到各培养皿中，每皿添加2mL，培养24小时。需要说明的是，作为对照，使用未添加隧道粉尘的KBM培养基或未添加试样的KBM培养基同样地进行培养。培养后，除去培养基，用ISOGENII(NIPPONGENE公司制，Cat.No.311-07361)提取总RNA，用分光光度计测定各自的RNA量，以达到200ng/μL的方式制备总RNA。

将该总RNA作为模板，对MMP－9和作为内标的GAPDH，测定mRNA的表达量。检测是使用实时PCR装置Smart Cycler(Cepheid公司制)，并通过TaKaRa SYBR PrimeScript RT-PCRkit(Perfect Real Time)(TAKARA生物公司制，code No.RR063A)的实时两步RT-PCR反应进行的。MMP－9mRNA的表达量是以从分别在“未添加隧道粉尘、未添加待测试样”、“添加隧道粉尘、未添加待测试样”及“添加隧道粉尘、添加待测试样”中培养的细胞中制备的总RNA标准品为依据而用GAPDH的值求出校正值。由所得到的值通过下述式算出MMP－9mRNA表达上升抑制率(％)。

MMP－9mRNA表达上升抑制率(％)＝{(A-B)-(A-C)}/(A-B)×100

式中的各项分别表示以下各值：

A：未添加隧道粉尘、未添加待测试样时的校正值

B：添加隧道粉尘、未添加待测试样时的校正值

C：添加隧道粉尘、添加待测试样时的校正值

将结果示于表5。

【表5】

如表5所示，已确认，作为对由环境污染物质导致的MMP－9表达上升的抑制作用，阳桃果实提取物(试样1)具有优异的作用。

[配合例1]

按照下述组成，通过常规方法制造乳液。

〔配合例2〕

通过常规方法制造下述组成的乳霜。

〔配合例3〕

通过常规方法制造下述组成的美容液。

〔配合例4〕

通过常规方法制造下述组成的护发素。

〔配合例5〕

通过常规方法制造具有以下组成的片剂。

〔配合例6〕

通过常规方法制造具有以下组成的口服液体制剂。

<1安瓿(1只100mL)中的组成>

本发明所涉及的环境污染物质所致损伤的抑制剂、环境污染物质所致损伤的抑制用化妆品以及环境污染物质所致损伤的抑制用饮料食品能够对由环境污染物质导致的各种症状(例如支气管炎、哮喘、癌变、心脏病、骨或软骨破坏、发热、皮肤保水力降低、皮肤屏障功能降低、皮肤粗糙、炎症及毛发损伤等)的预防、治疗或改善有很大贡献。