一种阿加曲班中间体的制备方法
阅读说明：本技术 一种阿加曲班中间体的制备方法 (Preparation method of argatroban intermediate ) 是由 王伟强 李小鹏 邵建勇 栾义 黄英豪 杨宁 王慧斌 于 2021-01-07 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种阿加曲班中间体的制备方法,本发明涉及药物制备,具体涉及药物中间体的制备领域,尤其涉及一种阿加曲班重要中间体(2R,4R)-4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯-L-酒石酸盐的酶拆分制备方法。本发明的目的在于克服已有工艺结晶次数过多,收率偏低的不足之处,研究设计操作简单,选择性好,收率高,更加易于工业化生产的阿加曲班中间体(2R,4R)-4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯-L-酒石酸盐的制备方法,本发明是一种全新的制备方法。(The invention discloses a preparation method of an argatroban intermediate, relates to medicine preparation, particularly relates to the field of preparation of medicine intermediates, and particularly relates to an enzyme resolution preparation method of an argatroban important intermediate (2R,4R) -4-methylpiperidine-2-ethyl formate-L-tartrate. The invention aims to overcome the defects of excessive crystallization times and low yield of the prior art, has simple research and design operation, good selectivity and high yield, and is a preparation method of argatroban intermediate (2R,4R) -4-methylpiperidine-2-ethyl formate-L-tartrate which is easier for industrial production.)
技术领域
本发明涉及药物制备，具体涉及药物中间体的制备领域，尤其涉及一种阿加曲班重要中间体(2R,4R)-4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯-L-酒石酸盐的酶拆分制备方法。
背景技术
阿加曲班为左旋精氨酸的哌啶羧酸衍生物，属于抗凝药。为小分子物质，具有高选择性，能可逆性直接抑制凝血酶的活性，迅速和循环中游离的血凝块中的凝血酶结合，产生抗凝作用。用于与肝素引起血小板减少有关的血栓形成。
在阿加曲班的制备方法中，(2R,4R)-4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯-L-酒石酸盐是合成阿加曲班原料药的重要中间体。原料4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯（顺式：反式=5：95）总共有四个手性异构体，现有技术中多采用化学拆分法，经过至少三次重结晶得到合格的产品，操作繁琐，收率在10~30%。
发明内容
本发明要解决的技术问题
本发明的目的在于提供一种阿加曲班中间体的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题:现有技术中多采用化学拆分法，经过至少三次重结晶得到合格的产品，操作繁琐，收率在10~30%。
技术方案
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种阿加曲班中间体的制备方法，所述中间体为(2R,4R)-4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯-L-酒石酸盐，所述制备方法包括以下步骤：4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯溶解在有机溶剂，加入缓冲溶液，加热到25~60度，氢氧化钠水溶液调节pH=8~9，然后加入水解酶选择性水解2S构型（L-构型）的底物。
优选的，加水稀释，减压浓缩掉大部分有机溶剂，过滤掉不溶物，水层萃取，干燥浓缩后待用。
优选的，浓缩得到的油状物溶解在丙酮和水的混合溶剂中，加入L-酒石酸，加热到50度，然后降温到0~5度析晶，过滤得到产品。
优选的,所述有机溶剂为四氢呋喃，甲基叔丁基醚，丙酮，甲醇，乙醇，异丙醇，优选丙酮。
优选的，所述反应温度优选50~55度。
优选的，所述缓冲溶液为pH=8~9的缓冲体系，优选pH=8.5的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液。
优选的，所述水解酶为碱性蛋白酶。
优选的，所述混合溶剂为水和丙酮的混合溶剂，优选1：1（体积比）的水和丙酮的混合溶剂。
有益效果
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明采用全新的酶拆分方法，使用价廉易得的碱性蛋白酶在pH=8~9选择性水解2S异构体成酸进入水相，未水解的2R异构体保留在有机相，从而实现了2S和2R异构体的分离，有机相的2R异构体和L-酒石酸成盐结晶即得到高质量的产品，减少了结晶次数，提高了收率，降低了成本，简化了工艺过程，操作简单，适合工业化生产，有很高的应用价值。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。通常本发明实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。因此,以下提供的实施例详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明的实施例,本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1：
15公斤4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯（顺式：反式=5：95）溶解在60公斤丙酮中，搅拌下缓慢加入30公斤10%的磷酸二氢钠水溶液，加热到50-55度，滴加20%氢氧化钠水溶液调节pH到8.5，然后一次性加入210克碱性蛋白酶，保持反应温度在50~55度6小时，HPLC检测2s构型的异构体小于0.1%(使用2,3,4,6-O-四乙酰基-beta-D-吡喃葡萄糖基异硫氰酸酯柱前衍生化；色谱柱：EclipsePlus C18 Agilent column (5μm, 4.6×250 mm)；柱温：40度；流动相：乙腈：水=10%~90%，45分钟；检测波长：254,；流速：1mL/min)。加入30公斤水，浓缩掉大部分丙酮，降到室温，加入60公斤二氯甲烷，搅拌30分钟，过滤掉不溶物，分出有机层，水层用15公斤二氯甲烷萃取一次，有机层合并，5%的碳酸钠水溶液洗一次，水洗一次，浓缩得到黄褐色油状物.油状物中加入30升丙酮，搅拌溶清，再加入30升水，8公斤L-酒石酸，加热到回流保持2小时，混合物成为均相，缓慢降温到5度，保持12小时，过滤，烘干得到白色固体产品(2R,4R)-4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯-L-酒石酸盐10.8公斤，收率35%，手性纯度99.7%，化学纯度99.5%。
实施例2：
30克4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯（顺式：反式=5：95）溶解在150毫升乙醇中，搅拌下缓慢加入60克10%的磷酸二氢钠水溶液，加热到50-55度，滴加20%氢氧化钠水溶液调节pH到8.5，然后一次性加入1克碱性蛋白酶，保持反应温度在50~55度12小时，HPLC检测2s构型的异构体小于0.1%，加入30克水，浓缩掉大部分乙醇，降到室温，加入100毫升二氯甲烷，搅拌10分钟，过滤掉不溶物，分出有机层，水层用30毫升二氯甲烷萃取一次，有机层合并，5%的碳酸钠水溶液洗一次，水洗一次，浓缩干得到黄褐色油状物，油状物中加入60毫升丙酮，搅拌溶清，再加入60毫升水，16克L-酒石酸，加热到回流保持2小时，混合物成为均相，缓慢降温到5度，保持12小时，过滤得到白色固体产品22.2克，收率36%，手性纯度99.2%，化学纯度99.4%。
实施例3：
30克4-甲基哌啶-2-甲酸乙酯（顺式：反式=5：95）溶解在150毫升丙酮中，搅拌下缓慢加入60克10%的磷酸二氢钠水溶液，加热到50-55度，滴加20%氢氧化钠水溶液调节pH到8.0，然后一次性加入1克碱性蛋白酶，保持反应温度在50~55度12小时，HPLC检测2s构型的异构体2.7%，加入30克水，浓缩掉大部分乙醇，降到室温，加入100毫升二氯甲烷，搅拌10分钟，过滤掉不溶物，分出有机层，水层用30毫升二氯甲烷萃取一次，有机层合并，5%的碳酸钠水溶液洗一次，水洗一次，浓缩干得到黄褐色油状物，油状物中加入60毫升丙酮，搅拌溶清，再加入60毫升水，16克L-酒石酸，加热到回流保持2小时，混合物成为均相，缓慢降温到5度，保持12小时，过滤得到白色固体产品18.17克，收率30%，手性纯度99.1%，化学纯度99.3%。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应在本发明的保护范围之内。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：甲磺酸氨氯地平一水合物及其制备方法和用途