多聚体抗dr5结合分子与化学治疗剂联合用于治疗癌症的用途
阅读说明：本技术 多聚体抗dr5结合分子与化学治疗剂联合用于治疗癌症的用途 (Use of multimeric anti-DR 5 binding molecules in combination with chemotherapeutic agents for the treatment of cancer ) 是由 B·T-Y·王 B·A·基特 于 2019-02-25 设计创作，主要内容包括：本公开提供了用于治疗癌症的治疗方法,所述治疗方法包括使用多聚体抗DR5抗体和化学治疗剂的联合疗法,所述化学治疗剂例如I型拓扑异构酶抑制剂、核苷类似物或促凋亡剂,例如BCL-2抑制剂。(The present disclosure provides therapeutic methods for treating cancer comprising combination therapy using a multimeric anti-DR 5 antibody and a chemotherapeutic agent, e.g., a type I topoisomerase inhibitor, a nucleoside analog, or a pro-apoptotic agent, e.g., a BCL-2 inhibitor.)
相关申请的交叉引用
本申请要求2018年2月26日提交的美国临时专利申请序号62/635,033和2018年11月15日提交的美国临时专利申请序号62/767,900的权益，所述申请各自以引用的方式整体并入本文。
对电子提交的序列表的引用
随申请一起提交的ASCII文本文件(名称“09789-011WO1-Sequen ce-Listing；大小：151552字节；以及创建日期：2019年2月11日”)中电子提交的序列表的内容以引用的方式整体并入本文。
背景技术
可多聚的抗体和抗体样分子，诸如IgA和IgM抗体，已成为例如免疫肿瘤学和传染病的领域中有前途的候选药物，从而允许改善的特异性、改善的亲合力和结合能力多个结合靶的能力。参见，例如，PCT公布号WO 2015/153912、WO 2016/118641、WO 2016/141303、WO2016/154593、WO 2016/168758、WO 2017/059387、WO 2017059380、WO 2018/017888、WO2018/017763、WO 2018/017889和WO 2018/017761，其内容以引用的方式整体并入本文。
多聚体IgA或IgM抗体提供了应用于特定生物体系的有用工具，在所述体系中，多个组分必须同时结合以传输生物信号。例如，真核细胞表面上的许多受体蛋白需要同时激活多个单体或亚基，以实现生物信号的激活并将其跨细胞膜传输到细胞的细胞质。
一种此受体是诱导细胞凋亡的肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族蛋白DR5(也称为TRAILR2)。DR5激活需要例如通过TRAIL配体或激发型抗体，使至少三种非相互作用的受体单体交联以形成稳定的受体三聚体，从而导致跨细胞膜的信号转导。将DR5蛋白三聚体聚集成三聚体“筏”可导致更有效地激活信号级联。
对DR5的关注的增加是由于发现其在以下癌症中的表达：膀胱癌(Li等人,Urology,79(4):968.e7-15,(2012))、胃癌(Lim等人,Carcinogen.,32(5):723-732,(2011))、卵巢癌(Jiang等人,Mol.Med.Rep.,6(2):316-320,(2012))、胰腺导管腺癌(Rajeshkumar等人,Mol.Cancer Ther.,9(9):2583-92,(2010))、口腔鳞状细胞癌(Chen等人,Oncotarget4:206-217,(2013))和非小细胞肺癌(Reck等人,Lung Canc.,82(3):441-448,(2013))。这些癌症中某些癌症的当前护理标准包括例如通过阻断DNA合成、阻断细胞***或促进细胞凋亡来破坏细胞生长和代谢的化学治疗剂。
虽然已发现，在即使不添加另外的交联剂的情况下，诸如替加珠单抗(Tigatuzumab)(CS-1008,Daiichi Sankyo Co.Ltd.,公开于美国专利号7,244,429中)的某些抗DR5单克隆抗体在体外和体内有效，但是这些抗体并不导致显著的临床功效。(参见，Reck等人，2013)。然而，最近，几种不同的抗DR5 IgM抗体已示出在体外和体内均具有更高的功效。参见，例如，美国专利申请公布号2018-0009897，其以引用的方式整体并入本文。
对于难以治疗的肿瘤，需要更好的疗法和对现有疗法的增强，包括与抗DR5 IgM抗体的联合疗法。
发明内容
本公开提供了一种用于抑制、延迟或减少患有癌症的受试者中恶性细胞生长的方法，其中所述方法包括向需要治疗的受试者施用联合疗法，所述联合疗法包括特异性和激动性结合到DR5的有效量的二聚体IgA抗体或六聚体或五聚体IgM抗体或其多聚的抗原结合片段、变体或衍生物，其中IgA或IgM抗体或其片段的至少三个抗原结合结构域为DR5特异性和激动性的；以及有效量的化学治疗剂，例如，DNA拓扑异构酶I抑制剂、核苷类似物或促凋亡剂，例如，BCL-2抑制剂。
在某些方面，抗体或其片段、变体或衍生物的至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个或十二个抗原结合结构域可包括重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中VH和VL包含六个免疫球蛋白互补性决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3包括抗体的CDR，所述抗体分别包含VH和VL氨基酸序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；SEQ IDNO:3和SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；SEQ IDNO:9和SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14；SEQID NO:15和SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:25和SEQ IDNO:26；SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30；SEQ ID NO:31和SEQID NO:32；SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48；SEQ IDNO:49和SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52；SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54；SEQID NO:55和SEQ ID NO:56；SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85；SEQ ID NO:86和SEQ ID NO:87；或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或ScFv序列SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ IDNO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ IDNO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72或SEQ ID NO:73，或在一个或多个CDR中具有一个或两个氨基酸置换的六个CDR。
在某些方面，抗体或其片段、变体或衍生物的至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个或十二个抗原结合结构域可包括抗体VH和VL，其中VH和VL分别包含与以下至少90％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18；SEQ IDNO:19和SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24；SEQID NO:25和SEQ ID NO:26；SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30；SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35和SEQ IDNO:36；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41和SEQID NO:42；SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48；SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52；SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；SEQ IDNO:84和SEQ ID NO:85；SEQ ID NO:86和SEQ ID NO:87；或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或其中VH和VL包含在具有与以下至少90％同一性的氨基酸序列的ScFv中：SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ IDNO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72或SEQ ID NO:73。
在某些方面，抗体或其片段、变体或衍生物的至少四个、至少十个或十二个抗原结合结构域可包括抗体VH和VL区，所述抗体VH和VL区分别具有氨基酸序列SEQ ID NO:1和SEQID NO:2、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:84和SEQID NO:85、或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89。
在某些方面，化学治疗剂为DNA拓扑异构酶I抑制剂。在某些方面，DNA拓扑异构酶I抑制剂为喜树碱衍生物或其活性变体、异构体或盐。例如，拓扑异构酶I抑制剂可为伊立替康(Irinotecan)或拓扑替康(Topotecan)。
在某些方面，化学治疗剂为核苷类似物。在某些方面，核苷类似物为吉西他滨(Gemcitabine)。
在某些方面，化学治疗剂为促凋亡剂，例如，BCL-2抑制剂，例如，Venetoclax(ABT-199)。
在某些方面，相对于单独施用抗体或其片段、变体或衍生物或化学治疗剂(例如，DNA拓扑异构酶I抑制剂、核苷类似物或促凋亡剂，例如，BCL-2抑制剂)，施用联合疗法可导致增强的疗效，诸如，例如，肿瘤生长速率降低、肿瘤消退或存活率增加。在某些方面，待治疗的受试者为人受试者。
附图简述
图1A和图1B：抗DR5 IgM和伊立替康联合在体外诱导更完全的肿瘤细胞毒性。图1A：用抗DR5 IgM(实心正方形)或抗DR5 IgM加0.4μM伊立替康(空心正方形)治疗的HCT15肿瘤细胞。图1B：用伊立替康(实心圆)或伊立替康加1ng/mL抗DR5 IgM(空心圆)治疗的HCT15肿瘤细胞。
图2A和图2B：IgM在IgG耐药结肠肿瘤模型中的功效。图2A：无胸腺裸鼠的肿瘤体积，所述无胸腺裸鼠植入有IgG耐药HCT15肿瘤细胞，并且每天给药5次载体(叉)；每周3次3mg/kg抗DR5 IgG(圆形)；每天5次3mg/kg抗DR5 IgM(正方形)；或第一周内3次80mg/kg伊立替康(三角形)。图2B：无胸腺裸鼠的总存活率，所述无胸腺裸鼠植入有IgG耐药HCT15肿瘤细胞，并且每天给药5次载体(黑色实线)、每周3次3mg/kg抗DR5 IgG(黑色虚线)、每天5次3mg/kg抗DR5IgM(灰色虚线)、或第一周内3次80mg/kg伊立替康(黑色点线)。
图3A和图3B：将抗DR5 IgG与依立替康标准护理组合没有增强功效。图3A：无胸腺裸鼠的肿瘤体积，所述无胸腺裸鼠植入有IgG耐药HCT15肿瘤细胞，并且每天给药5次载体(叉)；每周3次3mg/kg抗DR5 IgG(实心圆)；第一周内3次80mg/kg伊立替康(实心三角形)；或联合的抗DR5 IgG和伊立替康给药方案(空心圆)。图3B：无胸腺裸鼠的总存活率，所述无胸腺裸鼠植入有IgG耐药HCT15肿瘤细胞，并且每天给药5次载体(黑色实线)、每周3次3mg/kg抗DR5 IgG(黑色虚线)、第一周内3次80mg/kg伊立替康(黑色点线)、或联合的抗DR5 IgG和伊立替康给药方案(灰色实线)。
图4A和图4B：将抗DR5 IgM与依立替康标准护理组合的功效显著增强。图4A：无胸腺裸鼠的肿瘤体积，所述无胸腺裸鼠植入有IgG耐药HCT15肿瘤细胞，并且每天给药5次载体(叉)；每天5次3mg/kg抗DR5 IgM(正方形)；第一周内3次80mg/kg伊立替康(实心三角形)；或联合的抗DR5 IgM和伊立替康给药方案(空心正方形)。图4B：无胸腺裸鼠的总存活率，所述无胸腺裸鼠植入有IgG耐药HCT15肿瘤细胞，并且每天给药5次载体(黑色实线)、每天5次3mg/kg抗DR5 IgM(灰色虚线)、第一周内3次80mg/kg伊立替康(黑色点线)、或联合的抗DR5IgM和伊立替康给药方案(灰色实线)。
图5A和图5B：抗DR5 IgM和吉西他滨联合在体外诱导更完全的肿瘤细胞毒性。图5A：用0.56μM吉西他滨(黑色条)、4ng/mL抗DR5 IgM Mab#5(灰色条)、或两种剂的组合(白色条)治疗BxPC3胰腺肿瘤细胞。图5B：用0.56μM吉西他滨(黑色条)、4ng/mL抗DR5 IgM Mab#5(灰色条)、或两种剂的组合(白色条)治疗Panc-1胰腺肿瘤细胞。
图6A和图6B：抗DR5 IgM和吉西他滨联合在体外诱导更完全的肿瘤细胞毒性。图6A：用单独的抗DR5 IgM Mab#5的系列稀释液(空心圆形)或与0.06μM吉西他滨(实心菱形)、0.19μM吉西他滨(倒置实心三角形)、0.56μM吉西他滨(直立实心三角形)、1.67μM吉西他滨(实心正方形)或5μM吉西他滨(实心圆形)联合治疗BxPC3胰腺肿瘤细胞。图6B：用单独的抗DR5 IgM Mab#5连续稀释液(空心圆形)或与0.06μM吉西他滨(实心菱形)、0.19μM吉西他滨(倒置实心三角形)、0.56μM吉西他滨(直立实心三角形)、1.67μM吉西他滨(实心正方形)或5μM吉西他滨(实心圆形)联合治疗Panc-1胰腺肿瘤细胞。
图7A和图7B：抗DR5 IgG与吉西他滨标准护理组合的功效增强较弱。图7A：裸鼠的肿瘤体积，所述裸鼠皮下植入有BxPC3胰腺肿瘤片段，并且每天给药7次载体(叉)；3mg/kg单次剂量的抗DR5 IgG Mab#2(实心圆形)；每3天120mg/kg吉西他滨，共4次剂量(实心三角形)；或联合的抗DR5 IgG和吉西他滨给药方案(空心圆形)。图7B：裸鼠的总存活率，所述裸鼠皮下植入有BxPC3胰腺肿瘤片段，并且每天给药7次载体(黑色实线)；3mg/kg单次剂量的抗DR5 IgG Mab#2(黑色虚线)；每3天120mg/kg吉西他滨，共4次剂量(黑色点线)；或联合的抗DR5 IgG和吉西他滨给药方案(灰色实线)。
图8A和图8B：抗DR5 IgM与吉西他滨标准护理组合的肿瘤功效增强。图8A：裸鼠的肿瘤体积，所述裸鼠皮下植入有BxPC3胰腺肿瘤片段，并且每天给药7次载体(叉)；每天7次3mg/kg抗DR5 IgG MaM#2(实心正方形)；每3天120mg/kg吉西他滨，共4次剂量(实心三角形)；或联合的抗DR5 IgM和吉西他滨给药方案(空心正方形)。图8B：裸鼠的总存活率，所述裸鼠皮下植入有BxPC3胰腺肿瘤片段，并且每天给药7次载体(黑色实线)；每天7次3mg/kg抗DR5 IgM Mab#2(灰色虚线)；每3天120mg/kg吉西他滨，共4次剂量(黑色点线)；或联合的抗DR5 IgM和吉西他滨给药方案(灰色实线)。
图9A和图9B：抗DR5 IgM和Venetoclax联合在体外诱导更完全的肿瘤细胞毒性。图9A：用1.2ng/mL抗DR5 IgM Mab#5(灰色条)、3.7nM Venetoclax(黑色条)、或两种剂的组合(白色条)治疗Molm-13AML肿瘤细胞。图9B：用37ng/mL抗DR5 IgM Mab#5(灰色条)、3.7nMVenetoclax(黑色条)、或两种剂的组合(白色条)治疗MV-4-11AML肿瘤细胞。
图10A和图10B：抗DR5 IgM和Venetoclax联合在体外诱导更完全的肿瘤细胞毒性。图10A：用单独的抗DR5 IgM Mab#5的系列稀释液(空心圆形)或与1.2nM Venetoclax(倒置实心三角形)、3.7nM Venetoclax(直立实心三角形)、11nM Venetoclax(实心正方形)或33nM Venetoclax(实心圆形)联合治疗Molm-13 AML肿瘤细胞。图10B：用单独的抗DR5 IgMMab#5的系列稀释液(空心圆形)或与1.2nM Venetoclax(倒置实心三角形)、3.7nMVenetoclax(直立实心三角形)、11nM Venetoclax(实心正方形)、33nM Venetoclax(实心圆形)或100nM Venetoclax(空心正方形)联合治疗MV-4-11AML肿瘤细胞。
具体实施方式
定义
应当注意的是，术语“一种/个(a)”或“一种/个(an)”实体是指该实体中的一个或多个；例如，“结合分子”应理解为代表一个或多个结合分子。因此，术语“一种/个(a)”(或“一种/个(an)”)、“一个或多个”和“至少一个”在本文可互换使用。
此外，当在本文使用时，“和/或”应当视为具体公开两种特定特征或组分的每一者，并且公开或未公开另一者。因此，本文在诸如“A和/或B”的短语中使用的术语“和/或”意欲包括：“A和B二者”；“A或B”；“A”(单独)；和“B”(单独)。类似地，在诸如“A、B和/或C”的短语中使用的术语“和/或”意欲涵盖以下实施方案的每一种：A、B和C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A和C；A和B；B和C；A(单独)；B(单独)；和C(单独)。
除非另有定义，否则本文使用的技术和科技术语具有与本发明相关领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。例如，Concise Dictionary of Biomedicine andMolecular Biology,Juo,Pei-Show,第2版,2002,CRC Press；Dictionary of Cell andMolecular Biology,第3版,1999,Academic Press；和Oxford Dictionary OfBiochemistry And Molecular Biology,修订版,2000,Oxford University Press，给普通技术人员提供本发明中使用的许多术语的通用字典。
单位、前缀和符号以其Système International de Unites(SI)可接受的形式表示。数值范围将限定范围的数量包括在内。除非另有说明，否则氨基酸序列以氨基到羧基的方向从左到右书写。本文提供的标题不限制各种方面或本公开的方面，其可通过整体参考本说明书而得。因此，如下直接定义的术语通过整体参考说明书被更详细地定义。
如本文所用，术语“多肽”意图涵盖单数“多肽”以及复数“多肽”，并且是指由通过酰胺键(也称为肽键)线性连接的单体(氨基酸)组成的分子。术语“多肽”是指两个或更多个氨基酸的任何一条或多条链，并且不是指产物的特定长度。因此，肽、二肽、三肽、寡肽、“蛋白质”、“氨基酸链”或用来指两个或更多个氨基酸的一条或多条链的任何其他术语包括在“多肽”的定义内，并且术语“多肽”可代替或与任何这些术语互换使用。术语“多肽”也指多肽的表达后修饰产物，包括但不限于糖基化、乙酰化、磷酸化、酰胺化以及通过已知保护/封闭基团的衍生化、蛋白水解切割或通过非天然存在的氨基酸的修饰。多肽可衍生自生物源或通过重组技术生产，但不需要从指定的核酸序列翻译。其可以任何方式产生，包括通过化学合成。
本文所公开的多肽可具有的大小为约3个或更多个、5个或更多个、10个或更多个、20个或更多个、25个或更多个、50个或更多个、75个或更多个、100个或更多个、200个或更多个、500个或更多个、1000个或更多个、或2000个或更多个氨基酸。多肽可具有定义的三维结构，尽管其不一定具有此种结构。具有定义的三维结构的多肽称为折叠的，并且不具有定义的三维结构但可采用大量不同构象的多肽称为未折叠的。如本文所用，术语糖蛋白是指与至少一个碳水化合物部分偶联的蛋白质，所述至少一个碳水化合物部分通过氨基酸(例如，丝氨酸或天冬酰胺)的含氧或含氮侧链连接到蛋白质。
“分离的”多肽或其片段、变体或衍生物意指不在其自然环境中的多肽。不需要特定的纯化水平。例如，分离的多肽可从其天然或自然环境中去除。与通过任何合适的技术来分离、分馏或部分或基本上被纯化的天然或重组多肽一样，在宿主细胞中表达的重组产生的多肽和蛋白质被认为是如本文所公开经分离的。
如本文所用，术语“非自然存在的多肽”或其任何语法变体是附带条件的定义，所述附带条件的定义明确排除但仅排除由或可能由法官或行政或司法机构确定或解释为“自然发生”的那些形式的多肽。
本文所公开的其他多肽为上述多肽的片段、衍生物、类似物或变体及其任何组合。本文所公开的术语“片段”、“变体”、“衍生物”和“类似物”包括保留对应的天然抗体或多肽的至少一些特性(例如，特异性结合抗原)的任何多肽。除了本文别处讨论的特异性抗体片段以外，多肽的片段包括例如蛋白水解片段以及缺失片段。例如，多肽的变体包括如上所述的片段，并且还包括由于氨基酸置换、缺失或***而具有改变的氨基酸序列的多肽。在某些方面，变体可为非自然存在的。非自然存在的变体可通过使用本领域已知的诱变技术而产生。变体多肽可包含保守或非保守的氨基酸置换、缺失或添加。衍生物是已被改变以表现出原始多肽上未发现的其他特征的多肽。实例包括融合蛋白。变体多肽在本文中也可称为“多肽类似物”。如本文所用，多肽的“衍生物”也可指具有通过功能性侧基反应化学衍生的一个或多个氨基酸的受试多肽。“衍生物”还包括含有20个标准氨基酸的一个或多个衍生物的那些肽。例如，4-羟基脯氨酸可取代脯氨酸；5-羟基赖氨酸可取代赖氨酸；3-甲基组氨酸可取代组氨酸；高丝氨酸可取代丝氨酸；并且鸟氨酸可取代赖氨酸。
“保守的氨基酸置换”是一个氨基酸被具有相似侧链的另一个氨基酸替代。本领域中已定义了具有相似侧链的氨基酸家族，包括碱性侧链(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如，天冬氨酸、谷氨酸)、不带电荷的极性侧链(例如，天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、非极性侧链(例如，甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸)、β支链侧链(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳香族侧链(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)。例如，用苯丙氨酸取代酪氨酸为保守置换。在某些实施方案中，本公开的多肽和抗体的序列中的保守置换并不取消含有氨基酸序列的多肽或抗体与抗体结合的抗原的结合。鉴定不消除抗原结合的核苷酸和氨基酸保守置换的方法在本领域中是众所周知的(参见，例如，Brummell等人,Biochem.32:1180-1187(1993)；Kobayashi等人,Protein Eng.12(10):879-884(1999)；和Burks等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94:.412-417(1997))。
术语“多核苷酸”意为涵盖单个核酸以及多个核酸，并且是指分离的核酸分子或构建体，例如，信使RNA(mRNA)、cDNA或质粒DNA(pDNA)。多核苷酸可包含常规的磷酸二酯键或非常规的键(例如，酰胺键，诸如在肽核酸(PNA)中发现的)。术语“核酸”或“核酸序列”是指存在于多核苷酸中的任何一个或多个核酸片段，例如，DNA或RNA片段。
“分离的”核酸或多核苷酸意指与其天然环境分离的任何形式的核酸或多核苷酸。例如，凝胶纯化的多核苷酸或包含在载体中的编码多肽的重组多核苷酸将被认为是“分离的”。此外，已被工程化以具有用于克隆的酶切位点的多核苷酸片段(例如，PCR产物)被认为是“分离的”。分离的多核苷酸的其他实例包括维持在异源宿主细胞中的重组多核苷酸或在非天然溶液(诸如缓冲液或盐水)中纯化(部分或基本上)的多核苷酸。分离的RNA分子包括多核苷酸的体内或体外RNA转录物，其中转录物不是可在自然界中发现的转录物。分离的多核苷酸或核酸还包括合成制备的此类分子。此外，多核苷酸或核酸可为调节元件或可包括调节元件，诸如启动子、核糖体结合位点或转录终止子。
如本文所用，术语“非自然存在的多核苷酸”或其任何语法变体是条件定义，所述条件定义明确排除但仅排除是或可能是由法官或行政或司法机构确定或解释为“自然发生”的那些形式的核酸或多核苷酸。
如本文所用，“编码区”是由翻译成氨基酸的密码子组成的核酸的一部分。尽管“终止密码子”(TAG、TGA或TAA)未翻译为氨基酸，但其可被认为是编码区的一部分，但是任何侧翼序列(例如启动子、核糖体结合位点、转录终止子、内含子等)不是编码区的一部分。两个或更多个编码区可存在于单个多核苷酸构建体中，例如，在单个载体上，或存在于单独的多核苷酸构建体中，例如，在单独的(不同的)载体上。此外，任何载体可含有单个编码区，或可包含两个或更多个编码区，例如，单个载体可分别编码免疫球蛋白重链可变区和免疫球蛋白轻链可变区。此外，载体、多核苷酸或核酸可包括与另一编码区融合或未融合的异源编码区。异源编码区包括但不限于编码特殊元件或基序的那些区域，诸如分泌信号肽或异源功能域。
在某些实施方案中，多核苷酸或核酸为DNA。在DNA的情况下，包含通常编码多肽的核酸的多核苷酸可包括启动子和/或与一个或多个编码区可操作地缔合的其他转录或翻译控制元件。可操作的缔合是基因产物(例如，多肽)的编码区与一个或多个调控序列缔合，从而将基因产物的表达置于一个或多个调控序列的影响或控制之下。如果启动子功能的诱导导致编码所需基因产物的mRNA转录，并且如果两个DNA片段之间的连接性质不干扰表达调控序列指导基因产物表达的能力或不干扰DNA模板被转录的能力，则两个DNA片段(诸如多肽编码区和与其缔合的启动子)是“可操作地缔合”。因此，如果启动子能够影响核酸的转录，则启动子区域将与编码多肽的该核酸可操作地缔合。启动子可为细胞特异性启动子，其指导DNA在预定细胞中的实质转录。除启动子外，其他转录控制元件，例如增强子、操纵子、阻遏子和转录终止信号，可与多核苷酸可操作地缔合以指导细胞特异性转录。
多种转录控制区是本领域技术人员已知的。这些包括但不限于在脊椎动物细胞中起作用的转录控制区，诸如但不限于来自巨细胞病毒的启动子和增强子片段(即刻早期启动子，与内含子-A结合)、猿猴病毒40(早期启动子)和逆转录病毒(诸如劳斯肉瘤病毒)。其他转录控制区包括衍生自脊椎动物基因的那些，诸如肌动蛋白、热休克蛋白、牛生长激素和兔β-珠蛋白、以及能够控制真核细胞中基因表达的其他序列。其他合适的转录控制区包括组织特异性启动子和增强子以及淋巴因子诱导的启动子(例如，可由干扰素或白介素诱导的启动子)。
类似地，多种翻译控制元件是本领域普通技术人员已知的。这些包括但不限于核糖体结合位点、翻译起始密码子和终止密码子、以及衍生自微小病毒的元件(特别是内部核糖体进入位点或IRES，也称为CITE序列)。
在其他实施方案中，多核苷酸可为RNA，例如呈信使RNA(mRNA)、转移RNA或核糖体RNA的形式。
多核苷酸和核酸编码区可与编码分泌肽或信号肽的其他编码区缔合，所述分泌肽或信号肽指导由本文所公开的多核苷酸编码的多肽的分泌。根据信号假说，哺乳动物细胞分泌的蛋白具有信号肽或分泌前导序列，一旦生长中的蛋白链开始通过粗面内质网输出，所述信号肽或分泌前导序列就从成熟蛋白上被切割下来。本领域普通技术人员意识到，脊椎动物细胞分泌的多肽可具有与多肽的N端融合的信号肽，所述信号肽可从完整或“全尺寸”多肽上切割下来以产生分泌的或“成熟”形式的多肽。在某些实施方案中，使用天然信号肽，例如，免疫球蛋白重链或轻链信号肽，或该序列的功能性衍生物，其保留指导与其可操作地缔合的多肽分泌的能力。另选地，可使用异源哺乳动物信号肽或其功能性衍生物。例如，野生型前导序列可被人组织纤溶酶原激活剂(TPA)或小鼠β-葡糖醛酸糖苷酶的前导序列置换。
如本文所用，术语“DR5”或“TRAILR2”是指在各种细胞和组织的表面上表达的肿瘤坏死因子跨膜受体蛋白家族的成员，其在激活后可诱导细胞的凋亡。
本文公开了与DR5结合从而引起细胞凋亡的某些结合分子或其抗原结合片段、变体或衍生物。除非特别提及全尺寸抗体，否则术语“结合分子”涵盖全尺寸抗体以及此类抗体的抗原结合亚基、片段、变体、类似物或衍生物，例如，以与抗体分子类似的方式结合抗原的工程抗体分子或片段，但其使用不同的支架。在结合分子为聚合物结合分子(例如，五聚体或六聚体IgM抗体或二聚体IgA抗体)的情况下，当提及多聚体片段、变体或衍生物时，应当理解片段、变体或衍生物继续为多聚体。
如本文所用，术语“结合分子”在最广泛的意义上是指特异性结合受体(例如，表位或抗原决定簇)的分子。如本文进一步描述的，结合分子可包含本文所述的多个“抗原结合结构域”中的一个。结合分子的非限制性实例为保留抗原特异性结合的抗体或其片段。
如本文所用，术语“结合结构域”或“抗原结合结构域”是指对于特异性结合表位是必要且充分的结合分子的区域。例如，“Fv”，例如，抗体的可变重链和可变轻链，作为两个单独的多肽亚基或作为单链，被认为是“结合结构域”。其他结合结构域包括但不限于衍生自骆驼科物种的抗体的可变重链(VHH)、或在纤连蛋白支架中表达的六个免疫球蛋白互补决定区(CDR)。如本文所述的“结合分子”可包括一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个或更多个“抗原结合结构域”。
术语“抗体”和“免疫球蛋白”在本文可互换使用。抗体(或本文所公开的其抗原结合片段、变体或衍生物或其多聚片段、变体或衍生物)包括至少重链的可变结构域(骆驼科物种)或至少重链和轻链的可变结构域，以及对于多聚体分子，至少Cμ4-tp或Cα3-tp恒定区结合结构域以允许多聚化。脊椎动物系统中的基本免疫球蛋白结构被相对较好地理解。参见，例如，Harlow等人,Antibodies:A Laboratory Manual,(Cold Spring HarborLaboratory Press,第2版,1988)。除非另有说明，否则术语“抗体”涵盖从抗体的小抗原结合片段到全尺寸抗体的任何事物，例如，包括两条完整重链和两条完整轻链的IgG抗体、包括四条完整重链和四条完整轻链并且包括J链和/或分泌组分的二聚体IgA抗体、或包括十条或十二条完整重链和十条或十二条完整轻链并且任选地包括J链的五聚体或六聚体IgM抗体。
如将在以下更详细讨论的，术语“免疫球蛋白”包含可在生化上区分的各种广泛的多肽类。本领域技术人员将理解，重链分类为伽马(gamma)、缪(mu)、阿尔法(alpha)、德尔塔(delta)或伊普西龙(epsilon)(γ、μ、α、δ、ε)，其中有一些亚类(例如，γ1至γ4或α1至α2))。此链的性质决定了抗体的“同种型”分别为IgG、IgM、IgA、IgG或IgE。免疫球蛋白亚类(亚型)，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2等已被很好地表征，并且已知具有功能专一性。鉴于本公开并因此在本公开的范围内，这些免疫球蛋白中的每种的修饰形式对于本领域技术人员是容易辨别的。
轻链分类为卡帕(kappa)或兰布达(lambda)(κ、λ)。每个重链类别可与卡帕(kappa)或兰布达(lambda)轻链结合。通常，轻链和重链彼此共价键合，并且当例如，通过杂交瘤、B细胞或基因工程宿主细胞来表达免疫球蛋白时，两条重链的“尾”部分通过共价二硫键或非共价键彼此键合。在重链中，氨基酸序列从Y构型的叉端的N端到每条链底部的C端。某些抗体(例如，IgG抗体)的基本结构包括通过二硫键共价连接的两个重链亚基和两个轻链亚基，以形成“Y”结构(在本文中也称为“H2L2”结构)或“结合单元”。
在本文中使用术语“结合单元”是指结合分子(例如，抗体或其抗原结合片段)的一部分，所述结合分子对应于标准的“H2L2”免疫球蛋白结构，即，两条重链或其片段和两条轻链或其片段。在某些方面，例如，在结合分子为二价IgG抗体或其抗原结合片段的情况下，术语“结合分子”和“结合单元”是等同的。在其他方面，例如，在结合分子为IgA二聚体、IgM五聚体或IgM六聚体的情况下，结合分子分别包含两个、五个或六个“结合单元”。结合单元不需要包括全长抗体的重链和轻链，但通常将是二价的，即，将包括两个如本文所定义的“结合结构域”。本公开中提供的某些结合分子为二聚体，并且包括两个包括IgA恒定区或其片段的二价结合单元。本公开中提供的某些结合分子为五聚体或六聚体，并且包括五个或六个包括IgM恒定区或其必要片段以允许多聚化的二价结合单元。包含两个或更多个例如两个、五个或六个结合单元的结合分子，在本文中称为“多聚体”。
术语“价”、“二价”、“多价”和语法等同物是指给定结合分子或结合单元中结合结构域的数量。因此，相对于给定结合分子，例如，IgM抗体或其片段，术语“二价”、“四价”和“六价”分别表示存在两个结合结构域、四个结合结构域和六个结合结构域。在每个结合单元为二价的情况下的典型的IgM衍生的结合分子中，结合分子本身可具有10或12个价。二价或多价结合分子可为单特异性的，即，所有结合结构域是相同的，或可为双特异性或多特异性的，例如，其中两个或更多个结合结构域是不同的，例如，结合同一抗原上的不同表位、或结合完全不同的抗原。
术语“表位”包括能够特异性结合抗体的任何分子决定簇。在某些方面，表位可包括分子的化学活性表面基团，诸如氨基酸、糖侧链、磷酰基或磺酰基，并且在某些方面，可具有三维结构特征和或比电荷特征。表位是由抗体结合的靶区域。
术语“靶标”在最广泛的意义上用于包括可由结合分子结合的物质。靶可为例如，多肽、核酸、碳水化合物、脂质或其他分子。此外，“靶”可为例如，细胞、器官或生物体，其包含可由结合分子结合的表位结合。
轻链和重链分为结构同源和功能同源的区域。术语“恒定”和“可变”在功能上使用。在这方面，应当理解，可变轻链(VL)和可变重链(VH)部分的可变结构域决定抗原识别和特异性。相反，轻链(CL)和重链的恒定结构域(例如，CH1、CH2、CH3或CH4(如果存在的话))赋予生物学特性，诸如分泌、经胎盘移动性、Fc受体结合、补体结合等。按照惯例，恒定区结构域的编号随其离抗体的抗原结合位点或氨基端越来越远而增加。N端部分是可变区，并且C端部分是恒定区；CH3(或在IgM的情况下为CH4-tp)和CL结构域实际上分别包含重链和轻链的羧基端。
“全长IgM抗体重链”是多肽，所述多肽在N端至C端方向上包括抗体重链可变结构域(VH)、抗体恒定重链恒定结构域1(CM1或Cμ1)、抗体重链恒定结构域2(CM2或Cμ2)、抗体重链恒定结构域3(CM3或Cμ3)和可包括尾部片段的抗体重链恒定结构域4(CM4或Cμ4)。
“全长IgA抗体重链”是多肽，所述多肽在N端至C端方向上包括抗体重链可变结构域(VH)、抗体恒定重链恒定结构域1(CA1或Cα1)、抗体重链恒定结构域2(CA2或Cα2)和可包括尾部片段的抗体重链恒定结构域3(CA3或Cα3)。
如上所指出的那样，可变区允许结合分子选择性地识别并特异性结合抗原上的表位。即，结合分子(例如，抗体)的VL结构域和VH结构域或互补决定区(CDR)的子集组合以形成抗原结合结构域。更具体地，抗原结合结构域可由每个VH和VL链上的三个CDR定义。某些抗体形成较大的结构。例如，IgA可形成分子，所述分子包括通过二硫键共价连接的两个H2L2结合单元和J链，所述J链还可与分泌组分缔合，并且IgM可形成五聚体或六聚体分子，所述五聚体或六聚体分子包括任选地通过二硫键共价连接的五个或六个H2L2结合单元和J链。
抗体抗原结合结构域中存在的六个“互补决定区”或“CDR”是短的非连续氨基酸序列，当抗体假定其在水性环境中呈三维构型时，所述氨基酸序列被特异性定位以形成抗原结合结构域。结合结构域中的其余氨基酸被称为“骨架”区，其示出较小的分子间变异性。骨架区主要采用β-片层构象，并且CDR形成环，所述环连接且在一些情形下形成β-片层结构的一部分。因此，骨架区起形成支架的作用，所述支架提供通过链间非共价相互作用将CDR定位在正确的方向上。由定位的CDR形成的结合结构域限定与免疫反应性抗原上的表位互补的表面。此互补表面促进抗体与其同源表位的非共价结合。对于任何给定的重链或轻链可变区，本领域普通技术人员可容易地识别分别组成CDR和骨架区的氨基酸，因为它们是以各种不同的方式定义的(参见，“Sequences of Proteins of Immunological Interest,”Kabat,E.,等人,U.S.Department of Health and Human Services,(1983)；和Chothiaand Lesk,J.Mol.Biol.,196:901-917(1987)，其以引用的方式整体并入本文)。
在本领域内使用和/或公认的术语存在两个或更多个定义的情况下，除非明确相反说明，否则本文所用的术语的定义意为包括所有此类含义。具体的实例是使用术语“互补决定区”(“CDR”)来描述在重链和轻链多肽的可变区内发现的非连续抗原结合位点。已例如由Kabat等人,U.S.Dept.of Health and Human Services,“Sequences of Proteins ofImmunological Interest”(1983)以及由Chothia等人,J.Mol.Biol.196:901-917(1987)描述了这些特定区域，其以引用的方式并入本文。Kabat和Chothia定义包括彼此比较时的氨基酸的重叠或子集。然而，除非另有指明，否则提及抗体或其变体的CDR的任一定义(或本领域普通技术人员已知的其他定义)的应用意为落入本文定义和使用的术语的范围内。下表1中列出了涵盖由以上引用的参考文献中的每个所定义的CDR的适当氨基酸，作为比较。涵盖特定CDR的确切氨基酸数将根据CDR的序列和大小而变化。给定抗体的可变区氨基酸序列，本领域技术人员可常规地确定哪些氨基酸包含特定的CDR。
表1CDR定义*
Kabat
Chothia
VH CDR1
31-35
26-32
VH CDR2
50-65
52-58
VH CDR3
95-102
95-102
VL CDR1
24-34
26-32
VL CDR2
50-56
50-52
VL CDR3
89-97
91-96
*表1中所有CDR定义的编号是根据Kabat等人提出的编号约定(见下文)。
例如，也可使用IMGT信息系统(www://imgt.cines.fr/)(
Kabat等人还定义了适用于任何抗体的可变结构域序列的编号系统。本领域普通技术人员可明确地将此“Kabat编号”系统分配给任何可变结构域序列，而不依赖于序列本身以外的任何实验数据。如本文所用，“Kabat编号”是指由以下提出的编号系统：Kabat等人,U.S.Dept.of Health and Human Services,“Sequence of Proteins ofImmunological Interest”(1983)。然而，除非明确指出使用Kabat编号系统，否则本公开中所有氨基酸序列使用连续编号。
结合分子，例如，抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物、或其多聚片段、变体或衍生物包括但不限于多克隆抗体、单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体、单链抗体、表位结合片段，例如，Fab、Fab’和F(ab’)2、Fd、Fv、单链Fv(scFv)、单链抗体、二硫键连接的Fv(sdFv)、包含VL或VH结构域的片段、由Fab表达文库产生的片段。ScFv分子在本领域中已知并且描述于例如，美国专利5,892,019中。
“特异性结合”通常是指结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)通过其抗原结合结构域结合表位，并且结合需要抗原结合结构域与表位之间的某种互补性。根据此定义，当与随机的无关表位结合相比，结合分子通过其抗原结合结构域更容易地结合一个表位时，可将其判定为“特异性结合”该表位。本文中使用术语“特异性”以限定某个结合分子与某个表位结合的相对亲和力。例如，可认为对于给定的表位，结合分子“A”比结合分子“B”具有更高的特异性，或可将结合分子“A”判定为与表位“C”结合的特异性比与相关表位“D”结合的特异性更高。
可将本文所公开的结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)判定为与靶抗原结合，其中解离率(k(off))小于或等于5X 10-2秒-1、10-2秒-1、5X 10-3秒-1、10-3秒-1、5X 10-4秒-1、10-4秒-1、5X 10-5秒-1或10-5秒-1、5X 10-6秒-1、10-6秒-1、5X 10-7秒-1或10-7秒-1。
可将本文所公开的结合分子(例如，抗体或抗原结合片段、变体或衍生物)判定为与靶抗原结合，其中结合率(k(on))大于或等于103M-1秒-1、5X 103M-1秒-1、104M-1秒-1、5X104M-1秒-1、105M-1秒-1、5X 105M-1秒-1、106M-1秒-1、或5X 106M-1秒-1或107M-1秒-1。
如果结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)优先结合表位至其在一定程度上阻断参考抗体或抗原结合片段与给定表位的结合，则可将其说成竞争性抑制参考抗体或抗原结合片段与该表位的结合。竞争抑制可通过本领域已知的任何方法，例如竞争ELISA测定来确定。可将结合分子判定为竞争性地抑制参考抗体或抗原结合片段与给定表位的结合至少90％、至少80％、至少70％、至少60％或至少50％。
如本文所用，术语“亲和力”是指单个表位与例如免疫球蛋白分子的一个或多个结合结构域结合强度的量度。参见，例如，Harlow等人,Antibodies:A Laboratory Manual,(Cold Spring Harbor Laboratory Press,第2版,1988)，第27至28页。如本文所用，术语“亲合力”是指结合结构域群与抗原之间的复合物的总体稳定性。参见，例如，Harlow，第29至34页。亲和力不仅与群体中单个结合结构域与特定表位的亲和力有关，并且还与免疫球蛋白和抗原的价有关。例如，二价单克隆抗体与具有诸如多聚体的高度重复的表位结构的抗原之间的相互作用将是高亲合力的相互作用。二价单克隆抗体与在细胞表面上以高密度存在的受体之间的相互作用也将具有高亲合力。
如本文所公开的结合分子或其抗原结合片段、变体或衍生物也可根据其交叉反应性来描述或指定。如本文所用，术语“交叉反应性”是指对一种抗原具有特异性的结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)与第二抗原反应的能力；两种不同抗原物质之间相关性的量度。因此，如果结合分子与诱导其形成的表位以外的表位结合，则其是交叉反应的。交叉反应性表位通常含有许多与诱导表位相同的互补结构特征，并且在一些情况下，可实际上比原始表位更适合。
结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)也可根据其与抗原的结合亲和力来描述或指定。例如，结合分子可与抗原结合，其中解离常数或KD不大于5x 10-2M、10-2M、5x10-3M、10-3M、5x 10-4M、10-4M、5x 10-5M、10-5M、5x 10-6M、10-6M、5x 10-7M、10-7M、5x 10-8M、10- 8M、5x 10-9M、10-9M、5x 10-10M、10-10M、5x 10-11M、10-11M、5x 10-12M、10-12M、5x 10-13M、10-13M、5x 10-14M、10-14M、5x 10-15M或10-15M。
包括单链抗体或其他结合结构域的抗体片段可单独存在或与以下中的一种或多种组合存在：铰链区、CH1、CH2、CH3或CH4-tp结构域、J链或分泌组分。还包括抗原结合片段，所述抗原结合片段可包括一个或多个可变区与以下中的一个或多个的任何组合：铰链区、CH1、CH2、CH3或CH4结构域、J链或分泌组分，以例如允许多聚化。结合分子，例如，抗体或其抗原结合片段，可来自任何动物来源，包括鸟类和哺乳动物。抗体可为人、鼠科动物、驴、兔、山羊、豚鼠、骆驼、美洲驼、马或鸡的抗体。在另一个实施方案中，可变区可为软骨鱼(condricthoid)来源(例如，来自鲨鱼)。如本文所用，“人”抗体包括具有人免疫球蛋白的氨基酸序列的抗体，并且包括从人免疫球蛋白文库或从针对一种或多种人免疫球蛋白转基因的动物分离的抗体，并且可在一些情况下表达内源性免疫球蛋白，而在一些情况下不表达，如描述于下文中，并且例如描述于Kucherlapati等人的美国专利号5,939,598中。
如本文所用，术语“亚基”是指与其他相同或异源多肽链组合以产生结合分子(例如，抗体或其抗原结合片段)的单个多肽链。
如本文所用，术语“重链亚基”包括衍生自免疫球蛋白重链的氨基酸序列，包含重链亚基的结合分子(例如，抗体)可包括以下中的至少一个：VH结构域、CH1结构域、铰链(例如，上、中和/或下铰链区)结构域、CH2结构域、CH3结构域、CH4-tp结构域或其变体或片段。例如，结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)可包括但不限于：除了VH结构域之外，CH1结构域；CH1结构域、铰链和CH2结构域；CH1结构域和CH3结构域；CH1结构域、铰链和CH3结构域；或CH1结构域、铰链结构域、CH2结构域和CH3结构域。在某些方面，结合分子(例如，抗体或其片段、变体或衍生物)可包括除了VH结构域之外，CH3结构域和CH4-tp结构域；或CH3结构域、CH4-tp结构域和J链。恒定区部分在一些情况下可来自相同的同种型，例如，全部为Cμ恒定结构域、或其可为混合物，例如，一些恒定结构域可为Cμ恒定结构域(例如，Cμ4-tp结构域)，而其他恒定结构域可来自另一个抗体同种型(例如，Cγ2和Cγ3恒定结构域)。此外，用于本公开的结合分子可缺乏某些恒定区部分，例如，CH2结构域的全部或部分。本领域普通技术人员将理解，可修饰这些结构域(例如，重链亚基)，使得其在氨基酸序列上与原始免疫球蛋白分子不同。
如本文所用，术语“轻链亚基”包括衍生自免疫球蛋白轻链的氨基酸序列。轻链亚基至少包括VL，并且还可包括CL(例如，Cκ或Cλ)结构域。
结合分子(例如，抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物)可根据其识别或特异性结合的抗原的一个或多个表位或部分来描述或指定。与抗体的抗原结合结构域特异性相互作用的靶抗原的部分为“表位”或“抗原决定簇”。靶抗原可包含单个表位或至少两个表位，并且可包括任意数量的表位，其取决于抗原的大小、构象和类型。
如前所述，各种免疫球蛋白类的恒定区的结构和三维构型是众所周知的。如本文所用，术语“VH结构域”包括免疫球蛋白重链的氨基端可变结构域，并且术语“CH1结构域”包括免疫球蛋白重链的第一(最氨基端)恒定区结构域。CH1结构域与VH结构域相邻，并且在典型的IgG重链分子的铰链区的氨基端。
如本文所用，术语“CH2结构域”包括重链分子的部分，所述重链分子的部分例如使用常规编号方案从IgG抗体的约氨基酸244延伸到氨基酸360(氨基酸244至360，Kabat编号系统；以及氨基酸231至340，EU编号系统；参见Kabat EA等人,op.cit)。CH3结构域从CH2结构域延伸至IgG分子的C端，并包含约108个氨基酸。某些免疫球蛋白类，例如，IgM，还包括CH4-tp区。
如本文所用，术语“铰链区”包括在IgG、IgA和IgD重链中将CH1结构域连接到CH2结构域的重链分子的部分。此铰链区包含约25个氨基酸并且是柔性的，从而允许两个N端抗原结合区独立移动。
如本文所用，术语“二硫键”包括在两个硫原子之间形成的共价键。氨基酸半胱氨酸包含可与第二硫醇基形成二硫键或桥的硫醇基。
如本文所用，术语“嵌合抗体”是指其中免疫反应性区域或位点获自或衍生自第一物种并且恒定区(其可为完整、部分或修饰的)获自第二物种的抗体。在一些实施方案中，靶结合区或位点将来自非人来源(例如，小鼠或灵长类)，并且恒定区为人。
术语“多特异性抗体”或“双特异性抗体”是指在单个抗体分子内具有针对两个或更多个不同表位的结合结构域的抗体。除标准抗体结构外，其他结合分子可以两种结合特异性构建。由双特异性或多特异性抗体结合的表位可为同时或顺序的。三源杂交瘤和杂化杂交瘤是可分泌双特异性抗体的细胞系的两个实例。双特异性抗体还可通过重组方式构建。(
如本文所用，术语“工程抗体”是指其中重链和轻链或两者中的可变结构域通过CDR或骨架区中的一个或多个氨基酸的至少部分置换而改变的抗体。在某些方面，可将来自已知特异性的抗体的整个CDR移植到异源抗体的骨架区中。尽管替代的CDR可衍生自与衍生骨架区的抗体相同类别或甚至亚类的抗体，但是CDR也可衍生自不同类别的抗体，例如，衍生自不同物种的抗体。其中将来自已知特异性的非人抗体的一个或多个“供体”CDR移植到人重链或轻链骨架区中的工程抗体在本文中称为“人源化抗体”。在某些方面，并不是所有的CDR被来自供体可变区的完整CDR取代，但是供体的抗原结合能力仍然可转移到受体可变结构域。根据例如美国专利号5,585,089、5,693,761、5,693,762和6,180,370中提出的解释，通过进行常规实验或通过反复试验来获得功能性工程抗体或人源化抗体，这将完全在本领域技术人员的能力范围内。
如本文所用，术语“工程化”包括通过合成方式(例如，通过重组技术、体外肽合成、通过肽的酶促或化学偶联或这些技术的某种组合)对核酸或多肽分子进行操纵。
如本文所用，术语“连接”、“融合”或其他语法等同物可互换使用。这些术语是指通过包括化学缀合或重组方式的任何方式将两个或更多个元件或组分连接在一起。“框内融合”是指将两个或更多个多核苷酸开放阅读框(ORF)连接以形成连续的更长的ORF，以保持原始ORF的翻译阅读框的方式进行。因此，重组融合蛋白是含有两个或更多个片段的单一蛋白质，所述两个或更多个片段对应于由原始ORF编码的多肽(其片段在自然界中通常不会如此连接)。尽管因此阅读框在整个融合片段中是连续的，但是片段可通过例如框内连接基序列在物理上或空间上分离。例如，编码免疫球蛋白可变区的CDR的多核苷酸可在框内融合，但是被编码至少一个免疫球蛋白骨架区或另外的CDR区的多核苷酸分离，只要“融合”CDR作为连续多肽的一部分共同翻译。
如本文所用，术语“交联”是指通过第三分子将两个或更多个分子连接在一起。例如，具有两个特异性结合相同抗原的结合结构域的二价抗体可“交联”该抗原的两个拷贝，例如当其在细胞上表达时。许多TNF超家族受体蛋白，包括DR5，需要细胞表面上三个或更多个受体的交联才能激活。DR5蛋白的交联意指，例如，使本文所公开的结合分子与细胞表面上表达的DR5接触，使得至少三个DR5单体同时被一个或多个结合分子结合在一起，从而激活受体。
在多肽的上下文中，“线性序列”或“序列”是氨基酸在多肽中从氨基端到羧基端方向的顺序，其中序列中彼此紧邻的氨基酸在多肽的初级结构中是连续的。在多肽另一部分“氨基端”或“N端”的多肽部分是在顺序多肽链中出现较早的那部分。类似地，在多肽另一部分“羧基端”或“C端”的多肽部分是在顺序多肽链中出现较迟的那部分。例如，在典型的抗体中，可变结构域在恒定区的“N端”，并且恒定区在可变结构域的“C端”。
如本文所用，术语“表达”是指基因产生生化物质例如多肽的过程。过程包括细胞内基因功能性存在的任何表现，包括但不限于基因敲低以及瞬时表达和稳定表达。其包括但不限于将基因转录成RNA，例如，信使RNA(mRNA)，以及将此种mRNA翻译成一个或多个多肽。如果最终所需的产品是生化物质，则表达包括创建该生化物质和任何前体。基因的表达产生“基因产物”。如本文所用，基因产物可为核酸，例如，通过基因转录产生的信使RNA，或可为从转录物翻译的多肽。本文所述的基因产物还包括具有转录后修饰(例如，聚腺苷酸化)的核酸，或具有翻译后修饰(例如，甲基化、糖基化、脂质的添加、与其他蛋白质亚基的缔合、蛋白水解切割等)的多肽。
如本文所用，术语“癌症”和“癌性”是指或描述哺乳动物的生理病状，其中细胞群的特征在于细胞生长不受调控。癌症可分类为例如，实体瘤或恶性肿瘤、或血液癌症或恶性肿瘤。两种类型都可作为转移迁移到远程位点。实体瘤可分类为例如，肉瘤、癌、黑素瘤或其转移。
术语“增殖性病症”和“增殖性疾病”是指与异常细胞增殖相关的疾病，诸如癌症。如本文所用，“肿瘤”和“赘生物”是指由过度的细胞生长或增殖导致的任何组织块，无论良性(非癌性)或恶性(癌性)，包括癌前病变。
如本文所用，术语“转移”、“转移性”和其他语法等同物是指癌细胞从原发部位(例如，原发肿瘤)扩散或转移到人体其他区域，其中在新位置发展出类似的癌性病变。“转移性”或“转移”细胞是失去与邻近细胞的粘附性接触并且通过血流或淋巴从疾病的原发部位迁移以侵入邻近人体结构的细胞。术语还指转移的过程，其包括但不限于癌细胞从原发肿瘤中分离、肿瘤细胞向循环的内渗、它们的存活和迁移到远处位点、从循环中附着和外渗到新的位点、远处位点的微群落形成、以及远处位点的肿瘤生长和发育。
此类实体瘤的实例可包括例如，鳞状细胞癌、腺癌、基底细胞癌、肾细胞癌、乳腺导管癌、软组织肉瘤、骨肉瘤、黑素瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胃癌、胰腺癌、神经内分泌癌、成胶质细胞瘤、子***、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、脑癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、食管癌、唾液腺癌、肾癌、***癌、外阴癌、甲状腺癌、头颈癌、其任何转移或其任何组合。
血液癌症或恶性肿瘤的实例包括但不限于白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、其任何转移或其任何组合。
在某些实施方案中，适于通过本文提供的方法治疗的癌症包括但不限于肉瘤、乳腺癌、卵巢癌、子***、头颈癌、NSCLC、食管癌、胃癌、肾癌、肝癌、膀胱癌、结直肠癌和胰腺癌。
术语“治疗有效量”是指有效“治疗”或在一些情况下，“预防”受试者(例如，人)中疾病或病症的抗体、多肽、多核苷酸、有机小分子或其他药物的量。在癌症的情况下，药物的治疗有效量可减少癌细胞的数量；延缓或停止癌细胞***，减少或延缓肿瘤大小的增加；抑制例如压制、延缓、阻止、停止、延迟或逆转癌细胞向外周器官的浸润，包括例如癌症向软组织和骨的扩散；抑制例如压制、延缓、阻止、缩小、停止、延迟或逆转肿瘤转移；抑制例如压制、延缓、阻止、停止、延迟或逆转肿瘤生长；在一定程度上缓解与癌症有关的一种或多种症状，降低发病率和死亡率；改善生活质量；或此类效果的组合。只要药物阻止了生长和/或杀死现有的癌细胞，其可称为细胞抑制剂和/或细胞毒性。
诸如“治疗”或“缓解”的术语是指1)治愈、减缓、减轻诊断的病理疾患或病症的症状、逆转和/或停止诊断的病理疾患或病症的进展的治疗性措施，以及2)预防和/或减慢目标病理疾患或病症的发展的预防性或预防措施。因此，需要治疗的那些包括已经患有病症的那些；易患病症的那些；以及将预防病症的那些。如果患者显示以下一种或多种情况，则根据本公开的方法成功地“治疗”了受试者：癌细胞数量的减少或完全不存在；减小肿瘤大小；或延缓或逆转肿瘤生长，抑制，例如压制、阻止、延缓、缩小、延迟或逆转例如癌细胞浸润到外周器官的转移，包括例如癌症扩散到软组织和骨；抑制例如压制、延缓、阻止、缩小、逆转、延迟或不存在肿瘤转移；抑制例如压制、延缓、阻止、缩小、逆转、延迟或不存在肿瘤生长；缓解与特定癌症相关的一种或多种症状；降低发病率和死亡率；改善生活质量；或效果的某种组合。有益的或期望的临床结果包括但不限于，症状的减轻、疾病范围的减小、稳定的(即，不恶化)疾病状态、疾病进展的延迟或减慢、疾病状态的改善或减轻以及缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可意指相比于不接受治疗时的预期生存，延长生存。需要治疗的那些包括已经患有疾患或病症的那些，以及易患疾患或病症的那些或将预防疾患或病症的那些。
“受试者”或“个体”或“动物”或“患者”或“哺乳动物”是指需要诊断、预后或治疗的任何受试者，特别是哺乳动物受试者。哺乳动物受试者包括人、家畜、农场动物以及动物园、运动场或宠物动物，诸如狗、猫、豚鼠、兔子、大鼠、小鼠、马、猪、牛、熊等。
如本文所用，诸如“将从治疗中受益的受试者”和“需要治疗的动物”的短语包括将受益于施用包含一个或多个抗原结合结构域的诸如抗体的结合分子的受试者，诸如哺乳动物受试者。此类结合分子，例如抗体，可例如用于诊断程序和/或用于治疗或预防疾病。
IgM结合分子
IgM是B细胞响应抗原刺激产生的第一免疫球蛋白，并且以约1.5mg/ml存在于血清中，其中半衰期为5天。IgM为五聚体或六聚体分子。IgM结合单元包括两条轻链和两条重链。虽然IgG含有三个重链恒定结构域(CH1、CH2和CH3)，但是IgM的重(μ)链还含有包括C端“尾部片段”(tp)的第四恒定结构域(CH4)。人IgM恒定区通常包含氨基酸序列SEQ ID NO:74。人Cμ1区的范围为SEQ ID NO:74的约氨基酸5至约氨基酸102；人Cμ2区的范围为SEQ ID NO:74的约氨基酸114至约氨基酸205、人Cμ3区的范围为SEQ ID NO:74的约氨基酸224至约氨基酸319、Cμ4区的范围为SEQ ID NO:74的约氨基酸329至约氨基酸430、并且尾部片段的范围为SEQ ID NO:74的约氨基酸431至约氨基酸453。SEQ ID NO:74如下所示：
GSASAPTLFPLVSCENSPSDTSSVAVGCLAQDFLPDSITLSWKYKNNSDISSTRGFPSVLRGGKYAATSQVLLPSKDVMQGTDEHVVCKVQHPNGNKEKNVPLPVIAELPPKVSVFVPPRDGFFGNPRKSKLICQATGFSPRQIQVSWLREGKQVGSGVTTDQVQAEAKESGPTTYKVTSTLTIKESDWLGQSMFTCRVDHRGLTFQQNASSMCVPDQDTAIRVFAIPPSFASIFLTKSTKLTCLVTDLTTYDSVTISWTRQNGEAVKTHTNISESHPNATFSAVGEASICEDDWNSGERFTCTVTHTDLPSPLKQTISRPKGVALHRPDVYLLPPAREQLNLRESATITCLVTGFSPADVFVQWMQRGQPLSPEKYVTSAPMPEPQAPGRYFAHSILTVSEEEWNTGETYTCVAHEALPNRVTERTVDKSTGKPTLYNVSLVMSDTAGTCY
五个IgM结合单元可与另一小多肽链(J链)形成复合物，以形成IgM抗体。成熟人J链包含氨基酸序列SEQ ID NO:76。在没有J链的情况下，IgM结合单元通常组装成六聚体。虽然不希望受到理论的约束，但认为将IgM结合单元组装成五聚体或六聚体结合分子涉及Cμ3和Cμ4结构域。因此，本公开中提供的五聚体或六聚体结合分子通常包括至少包括Cμ3和Cμ4结构域的IgM恒定区。SEQ ID NO:76如下所示：
QEDERIVLVDNKCKCARITSRIIRSSEDPNEDIVERNIRIIVPLNNRENISDPTSPLRTRFVYHLSDLCKKCDPTEVELDNQIVTATQSNICDEDSATETCYTYDRNKCYTAVVPLVYGGETKMVETALTPDACYPD
IgM重链恒定区还可包括Cμ2结构域或其片段、Cμ1结构域或其片段、和/或其他IgM重链结构域。在某些方面，本文提供的结合分子可包括完整的IgM重(μ)链恒定结构域，例如，SEQ ID NO:74、或其变体、衍生物或类似物。
五聚体或六聚体抗DR5结合分子
本公开提供了一种五聚体或六聚体结合分子，即，具有五个或六个如本文定义的“结合单元”的结合分子，其可特异性结合DR5。与由单个结合单元(例如，二价IgG抗体)组成的结合分子相比，本文提供的结合分子可具有改善的结合特征或生物学活性。例如，五聚体或六聚体结合分子可更有效地交联细胞(例如，肿瘤细胞)表面上的三个或更多个DR5分子，从而促进细胞凋亡。
与由合成或嵌合结构组成的多价结合分子相比，本文提供的结合分子同样可具有独特的特征。例如，相对于含有嵌合恒定区或合成结构的结合分子，使用人IgM恒定区可得到降低的免疫原性，并因此提高安全性。此外，基于IgM的结合分子可一致地形成六聚体或五聚体低聚物，从而产生更均匀的表达产物。优异的补体固定也可为基于IgM的结合分子的有利效应子功能。
在某些方面，本公开提供了一种分别包含五个或六个二价结合单元的五聚体或六聚体结合分子，其中每个结合单元包括两个IgM重链恒定区或其片段。在某些方面，两个IgM重链恒定区为人重链恒定区。
在本文提供的结合分子为五聚体的情况下，结合分子还可包含J链、或其片段、或其变体。
IgM重链恒定区可包括Cμ1结构域、Cμ2结构域、Cμ3结构域和/或Cμ4结构域中的一个或多个，前提条件是恒定区可在结合分子中起到期望的功能，例如，与第二IgM恒定区缔合以形成结合结构域、或与其他结合单元缔合以形成六聚体或五聚体。在某些方面，在单个结合单元内的两个IgM重链恒定区或其片段各自包含Cμ3结构域或其片段、Cμ4结构域或其片段、尾部片段(TP)或其片段、或Cμ3结构域Cμ结构域与TP或其片段的任何组合。在某些方面，在单个结合单元内的两个IgM重链恒定区或其片段各自还包含Cμ2结构域或其片段、Cμ1结构域或其片段、或Cμ1结构域或其片段和Cμ2结构域或其片段。
在某些方面，给定结合单元中的两个IgM重链恒定区的每个与抗原结合结构域缔合，例如抗体的Fv部分，例如，人或鼠抗体的VH和VL，其中VL可与轻链恒定区缔合。在本文提供的结合分子中，结合分子的至少三个抗原结合结构域是DR5结合结构域，即，可特异性结合DR5例如人DR5的结合结构域。
IgA结合分子
IgA在粘膜免疫中起关键作用，并且占产生的总免疫球蛋白的约15％。IgA为单体或二聚体分子。IgA结合单元包括两条轻链和两条重链。IgA包含三个重链恒定结构域(Cα1、Cα2和Cα3)，并且包括C端“尾部片段”。人IgA具有两个亚型，IgA1和IgA2。人IgA1恒定区通常包含氨基酸序列SEQ ID NO:78。人Cα1区的范围为SEQ ID NO:78的约氨基酸6至约氨基酸98；人Cα2区的范围为SEQ ID NO:78的约氨基酸125至约氨基酸220、人Cα3区的范围为SEQID NO:78的约氨基酸228至约氨基酸330，并且尾部片段的范围为SEQ ID NO:78的约氨基酸331至约氨基酸352。人IgA2恒定区通常包含氨基酸序列SEQ ID NO:79。人Cα1区的范围为SEQ ID NO:79的约氨基酸6至约氨基酸98；人Cα2区的范围为SEQ ID NO:79的约氨基酸112至约氨基酸207、人Cα3区的范围为SEQ ID NO:79的约氨基酸215至约氨基酸317，并且尾部片段的范围为SEQ ID NO:79的约氨基酸318至约氨基酸340。SEQ ID NOS:78和79如下所示：
SEQ ID NO:78
ASPTSPKVFPLSLCSTQPDGNVVIACLVQGFFPQEPLSVTWSESGQGVTARNFPPSQDASGDLYTTSSQLTLPATQCLAGKSVTCHVKHYTNPSQDVTVPCPVPSTPPTPSPSTPPTPSPSCCHPRLSLHRPALEDLLLGSEANLTCTLTGLRDASGVTFTWTPSSGKSAVQGPPERDLCGCYSVSSVLPGCAEPWNHGKTFTCTAAYPESKTPLTATLSKSGNTFRPEVHLLPPPSEELALNELVTLTCLARGFSPKDVLVRWLQGSQELPREKYLTWASRQEPSQGTTTFAVTSILRVAAEDWKKGDTFSCMVGHEALPLAFTQKTIDRLAGKPTHVNVSVVMAEVDGTCY
SEQ ID NO:79
ASPTSPKVFPLSLDSTPQDGNVVVACLVQGFFPQEPLSVTWSESGQNVTARNFPPSQDASGDLYTTSSQLTLPATQCPDGKSVTCHVKHYTNPSQDVTVPCPVPPPPPCCHPRLSLHRPALEDLLLGSEANLTCTLTGLRDASGATFTWTPSSGKSAVQGPPERDLCGCYSVSSVLPGCAQPWNHGETFTCTAAHPELKTPLTANITKSGNTFRPEVHLLPPPSEELALNELVTLTCLARGFSPKDVLVRWLQGSQELPREKYLTWASRQEPSQGTTTFAVTSILRVAAEDWKKGDTFSCMVGHEALPLAFTQKTIDRMAGKPTHVNVSVVMAEVDGTCY
两个IgA结合单元可与两条另外的多肽链J链(SEQ ID NO:76)和分泌组分(前体，SEQ ID NO:80，成熟，SEQ ID NO:81)形成复合物，以形成分泌IgA(sIgA)抗体。虽然不希望受到理论的约束，但认为将IgA结合单元组装成二聚体sIgA结合分子涉及Cα3和尾部片段结构域。因此，本公开中提供的二聚体sIgA结合分子通常包括至少包括Cα3和尾部片段结构域的IgA恒定区。SEQ ID NO:80和SEQ ID NO:81如下所示：
SEQ ID NO:80:
MLLFVLTCLLAVFPAISTKSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEVSQGPGLLNDTKVYTVDLGRTVTINCPFKTENAQKRKSLYKQIGLYPVLVIDSSGYVNPNYTGRIRLDIQGTGQLLFSVVINQLRLSDAGQYLCQAGDDSNSNKKNADLQVLKPEPELVYEDLRGSVTFHCALGPEVANVAKFLCRQSSGENCDVVVNTLGKRAPAFEGRILLNPQDKDGSFSVVITGLRKEDAGRYLCGAHSDGQLQEGSPIQAWQLFVNEESTIPRSPTVVKGVAGGSVAVLCPYNRKESKSIKYWCLWEGAQNGRCPLLVDSEGWVKAQYEGRLSLLEEPGNGTFTVILNQLTSRDAGFYWCLTNGDTLWRTTVEIKIIEGEPNLKVPGNVTAVLGETLKVPCHFPCKFSSYEKYWCKWNNTGCQALPSQDEGPSKAFVNCDENSRLVSLTLNLVTRADEGWYWCGVKQGHFYGETAAVYVAVEERKAAGSRDVSLAKADAAPDEKVLDSGFREIENKAIQDPRLFAEEKAVADTRDQADGSRASVDSGSSEEQGGSSRALVSTLVPLGLVLAVGAVAVGVARARHRKNVDRVSIRSYRTDISMSDFENSREFGANDNMGASSITQETSLGGKEEFVATTESTTETKEPKKAKRSSKEEAEMAYKDFLLQSSTVAAEAQDGPQEA
SEQ ID NO:81:
KSPIFGPEEVNSVEGNSVSITCYYPPTSVNRHTRKYWCRQGARGGCITLISSEGYVSSKYAGRANLTNFPENGTFVVNIAQLSQDDSGRYKCGLGINSRGLSFDVSLEVSQGPGLLNDTKVYTVDLGRTVTINCPFKTENAQKRKSLYKQIGLYPVLVIDSSGYVNPNYTGRIRLDIQGTGQLLFSVVINQLRLSDAGQYLCQAGDDSNSNKKNADLQVLKPEPELVYEDLRGSVTFHCALGPEVANVAKFLCRQSSGENCDVVVNTLGKRAPAFEGRILLNPQDKDGSFSVVITGLRKEDAGRYLCGAHSDGQLQEGSPIQAWQLFVNEESTIPRSPTVVKGVAGGSVAVLCPYNRKESKSIKYWCLWEGAQNGRCPLLVDSEGWVKAQYEGRLSLLEEPGNGTFTVILNQLTSRDAGFYWCLTNGDTLWRTTVEIKIIEGEPNLKVPGNVTAVLGETLKVPCHFPCKFSSYEKYWCKWNNTGCQALPSQDEGPSKAFVNCDENSRLVSLTLNLVTRADEGWYWCGVKQGHFYGETAAVYVAVEERKAAGSRDVSLAKADAAPDEKVLDSGFREIENKAIQDPR
IgA重链恒定区还可包括Cα2结构域或其片段、Cα1结构域或其片段、和/或其他IgA重链结构域。在某些方面，本文提供的结合分子可包括完整的IgA重(α)链恒定结构域(例如，SEQ ID NO:78或SEQ ID NO:79)或其变体、衍生物或类似物。
二聚体DR5结合分子
本公开提供了一种二聚体结合分子，例如，具有两个如本文定义的IgA“结合单元”或其片段、变体或衍生物的结合分子，其可特异性结合DR5。与由单个结合单元(例如，二价IgG抗体)组成的结合分子相比，本文提供的结合分子可具有改善的结合特征或生物学活性。例如，IgA结合分子可更有效地交联细胞(例如，肿瘤细胞)表面上的三个或更多个DR5单体，从而促进细胞凋亡。此外，IgA结合分子可到达粘膜位点，从而为本文提供的结合分子提供更大的组织分布。使用基于IgA的结合分子可允许例如本文提供的结合分子的更大的组织分布。粘膜分布对于某些癌症例如肺癌、胃癌、卵巢癌、结直肠癌或鳞状细胞癌可为有益的。同样，本文提供的二聚体结合分子可具有可与包含五个或六个结合单元的结合分子(例如，六聚体或五聚体IgM抗体)区分的结合特征或生物学活性。例如，二聚体结合分子将更小，并且可例如在实体瘤中实现更好的组织渗透。
在某些方面，本公开提供了一种包含两个二价结合单元的二聚体结合分子，其中每个结合单元包括两个IgA重链恒定区或其片段。在某些方面，两个IgA重链恒定区为人重链恒定区。
本文提供的二聚体IgA结合分子还可包含J链、或其片段、或其变体。本文提供的二聚体IgA结合分子还可包含分泌组分、或其片段、或其变体。
IgA重链恒定区可包括Cα1结构域、Cα2结构域和/或Cα3结构域中的一个或多个，前提条件是恒定区可在结合分子中起到期望的功能，例如，与轻链恒定区缔合以促进抗原结合结构域的形成、或与另一IgA结合单元缔合以形成二聚体结合分子。在某些方面，在单个结合单元内的两个IgA重链恒定区或其片段各自包含Cα3结构域或其片段、尾部片段(TP)或其片段、或Cα3结构域、TP或其片段的任何组合。在某些方面，在单个结合单元内的两个IgA重链恒定区或其片段各自还包含Cα2结构域或其片段、Cα1结构域或其片段、或Cα1结构域或其片段和Cα2结构域或其片段。
在某些方面，给定结合单元中的两个IgA重链恒定区的每个与抗原结合结构域缔合，例如抗体的Fv部分，例如，人或鼠抗体的VH和VL，其中VL可与轻链恒定区缔合。在本文提供的结合分子中，结合分子的至少三个抗原结合结构域是DR5结合结构域，即，可特异性结合DR5例如人DR5的结合结构域。
经修饰的J链
在某些方面，本文提供的二聚体或五聚体结合分子的J链可例如通过引入异源部分或两个或更多个异源部分来修饰，而不干扰IgM或IgA结合分子组装并结合到其结合靶的能力。参见PCT公布号WO2015/153912、PCT公布号WO 2017/059387和PCT公布号WO2017/059380，其各自以引用的方式整体并入本文。因此，本文提供的二聚体或五聚体结合分子，包括如本文别处所述的多特异性二聚体或五聚体结合分子，可包含经修饰的J链或其功能片段，所述经修饰的J链或其功能片段包含引入到J链或其片段中的异源部分。在某些方面，异源部分可为与J链框内融合或化学缀合到J链的肽或多肽序列。在某些方面，异源部分可为与J链缀合的化学部分。待附接到J链的异源部分可包括但不限于结合部分，例如，抗体或其抗原结合片段，例如，单链Fv(ScFv)分子、可增加二聚体或五聚体结合分子的半衰期的稳定肽、或化学部分，诸如聚合物或细胞毒素。
在一些实施方案中，经修饰的J链可包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域可包括但不限于能够特异性结合靶抗原的多肽(包括小肽)。在某些方面，如本文别处所述，与经修饰的J链相关的抗原结合结构域可为抗体或其抗原结合片段。在某些方面，抗原结合结构域可为例如衍生自骆驼科或软骨鱼抗体的scFv结合结构域或单链结合结构域。抗原结合结构域可在允许抗原结合结构域与其结合靶结合的任何位置引入J链中，而不干扰J链功能或相关IgM或IgA抗体的功能。***位置包括但不限于在C端处或其附近、在N端处或其附近、或基于J链的三维结构可接近的内部位置。在某些方面，可将抗原结合结构域引入到SEQ IDNO:76的半胱氨酸残基92与101之间的SEQ ID NO:76的人J链中。在另一方面，可将抗原结合结构域在糖基化位点处或其附近引入到SEQ ID NO:76的人J链中。在另一方面，可将抗原结合结构域在距C端约10个氨基酸残基内引入到SEQ ID NO:76的人J链中。
DR5结合结构域
本文提供的DR5结合分子，例如，抗DR5抗体或其片段、变体或衍生物可为分别包含两个、五个或六个二价结合单元的二聚体、五聚体或六聚体。结合单元可为全长或其保留结合功能的变体或片段。
每个结合单元包含两个IgA或IgM重链恒定区或其片段，其各自与抗原结合结构域缔合。如上面所提到的，抗原结合结构域是对于特异性结合表位是必要且充分的结合分子的区域。如本文所述的“结合分子”可包括一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个或更多个“抗原结合结构域”。
本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子可包括至少三个与DR5特异性和激动性结合的抗原结合结构域。如上面所提到的，DR5在激活后可诱导表达被结合的DR5蛋白的细胞凋亡。如目前所理解的，当多个受体蛋白结合在一起时，致使受体分子交联，使得信号穿过细胞膜传递到表达DR5的细胞的细胞质中，从而发生凋亡。
本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子可交联细胞表面上表达的至少三个DR5单体。由于本文提供的DR5结合分子的二聚体、五聚体或六聚体性质，分子可在细胞上交联多达三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个或十二个DR5单体。然后使受体蛋白在空间上彼此接近，从而有助于其交联和激活。当本文提供的所有五个或所有六个二价结合单元DR5结合分子与受体结合，分别在单个细胞上结合多达十个或十二个DR5单体时，可发生受体的交联和激活。
因为每个结合单元为二价的，所以每个结合分子可结合多达10个(对于五聚体结合分子)或12个(对于六聚体结合分子)DR5单体。
当通过本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子的结合激活受体时，细胞可如上所述经历凋亡。
在某些方面，如目前公开的二聚体、五聚体或六聚体结合分子可以比等效量的二价IgG抗体或其片段更高的效力诱导DR5表达细胞中DR5介导的凋亡，所述二价IgG抗体或其片段也特异性结合DR5并使其激动。不希望受到理论的约束，因为所提供的结合分子为二聚体、五聚体或六聚体，并且因为每个结合单元为二价的，所以此种结合分子可以比单独的任何单个结合单元(诸如等效的IgG结合单元)更高的效力诱导先前表征为DR5的受体介导的功能。IgG结合单元为二价的，其含有两个结合位点，但是如先前的临床研究所示出的，在不添加其他成分(诸如交联剂等)的情况下，两个DR5受体与单个IgG分子的结合可能无效。
“效力”或“改善的结合特征”意为实现给定生物学结果(例如，在给定测定(例如，ELISA或基于Western blot的半胱氨酸蛋白酶测定、由FACS分析所见的膜联蛋白-v染色或其他测定)中激活20％、50％或90％的DR5单体)所需的给定结合分子的最小量。或在体内肿瘤测定中降低的肿瘤生长速率或增加的存活率。
因为本文提供的结合分子为二聚体、五聚体或六聚体，所以其可分别含有多达4个、10个或12个抗原结合结构域。抗原结合结构域中的每个可特异性结合DR5并使其激动。此外，每个抗原结合结构域可对DR5的一个特定表位具有特异性。
因此，单个二聚体、五聚体或六聚体结合分子可：a)同时结合DR5上的单个表位，或b)结合DR5上的许多不同表位。
本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子的结合单元可为人、人源化或嵌合免疫球蛋白结合单元。使免疫球蛋白序列人源化的方法在本领域中众所周知。因此，编码二聚体五聚体或六聚体结合分子多肽的核苷酸序列可直接来自人序列、或可为人源化或嵌合的，即，由来自多个不同物种的序列编码。
表达DR5的细胞可为任何动物细胞。例如，在一个实施方案中，细胞为人细胞。例如，细胞可为灵长类、啮齿动物、犬、马等中的任何一种或多种的细胞。此外，表达DR5的细胞可为癌细胞。即，细胞可为恶性或良性的肿瘤细胞。
可对本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子进行基因工程化，使得其抗原结合结构域由已知特异性结合DR5的序列编码。许多组已发表了单克隆抗体可变区的序列，大多数抗体为被表征并且已知特异性结合DR5的IgG同种型。表2和表3提供了已知特异性结合DR5的非限制性免疫球蛋白可变结构域序列。本领域技术人员能够将这些公开的序列工程化为免疫球蛋白结构，诸如IgG、IgA、IgM结构，或生物活性或功能性多聚片段变体或其衍生物。公开了用于将克隆的可变区基因工程化为免疫球蛋白结构域，并表达和纯化此类构建体的方法，并且所述方法在本领域技术人员的能力范围内。
因此，在某些方面，本文提供的DR5结合结构域包含六个免疫球蛋白互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3、或在抗DR5 mAb的一个或多个CDR中具有一个、两个、三个、四个或五个单一氨基酸置换的六个免疫球蛋白互补决定区，所述抗DR5 mAb包含的VH和VL氨基酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15和SEQ IDNO:16；SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21和SEQID NO:22；SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26；SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30；SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ IDNO:39和SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44；SEQID NO:45和SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48；SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52；SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:55和SEQ IDNO:56；SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85；SEQ ID NO:86和SEQID NO:87；或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或ScFv氨基酸序列SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ IDNO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ IDNO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72或SEQ ID NO:73。
表3：抗DR5 ScFv序列
在某些方面，DR5结合结构域包含抗体VH和VL，其中VH和VL分别包含与以下至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16；SEQ IDNO:17和SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQID NO:23和SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26；SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30；SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33和SEQ IDNO:34；SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39和SEQID NO:40；SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48；SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52；SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；SEQ IDNO:82和SEQ ID NO:83；SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85；SEQ ID NO:86和SEQ ID NO:87；或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或其中VH和VL位于包含与以下至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％同一性的氨基酸序列的ScFv中：SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72或SEQ ID NO:73。
虽然本领域普通技术人员可基于本公开设想多种不同的二聚体、五聚体和六聚体结合分子，并且因此包括在本公开中，但是在某些方面，提供了如上所述的结合分子，其中每个结合单元包含两条IgA或IgM重链，所述IgA或IgM重链各自包含位于IgA或IgM恒定区或其片段氨基端的VH，以及两条免疫球蛋白轻链，所述免疫球蛋白轻链各自包含位于免疫球蛋白轻链恒定区氨基端的VL。
此外，在某些方面，结合分子的至少一个结合单元、或结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元，包含两个如上所述的DR5结合结构域。在某些方面，结合分子的至少一个结合单元、或结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元中的两个DR5结合结构域可彼此不同，或其可为相同的。
在某些方面，结合分子的至少一个结合单元、或结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元内的两条IgA或IgM重链相同。在某些方面，在结合分子的至少一个结合单元内、或至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元内的两条相同的IgA或IgM重链包含如表2和表3中公开的重链可变结构域氨基酸序列。
在某些方面，结合分子的至少一个结合单元、或结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元内的两条轻链相同。在某些方面，在结合分子的至少一个结合单元内、或至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元内的两条相同的轻链为卡帕(kappa)轻链，例如，人卡帕(kappa)轻链，或兰布达(lambda)轻链，例如，人兰布达(lambda)轻链。在某些方面，在结合分子的至少一个结合单元内、或至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元内的两条相同的轻链各自包含如表2和表3中公开的轻链可变结构域氨基酸序列。
在某些方面，本公开提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元包含或各自包含两条相同的IgA或IgM重链恒定区，所述IgA或IgM重链恒定区各自包含如表2和表3中公开的相同的重链可变结构域氨基酸序列；以及两条相同的轻链，所述轻链各自包含如表2和表3中公开的相同的重链可变结构域氨基酸序列。根据此方面，在结合分子的至少一个结合单元、或结合分子的至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元中的DR5结合结构域可为相同的。进一步根据此方面，本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子可包含如上所述的DR5结合结构域的至少一个、至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个或至少十二个拷贝。在某些方面，至少两个、至少三个、至少四个、至少五个或至少六个结合单元可为相同的，并且在某些方面，结合单元可包含相同的结合结构域，例如，至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个或至少十二个DR5结合结构域可为相同的。
在某些方面，与其他结合分子相比，本文提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子可具有有利的结构或功能性质。例如，相对于具有相同抗原结合结构域的相应二价结合分子的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合。生物学测定包括但不限于ELISA和Westernblot半胱氨酸蛋白酶测定，以及使用指示凋亡细胞死亡的染色剂诸如膜联蛋白-v的FACS分析。在某些方面，本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子可以比等效量的单特异性二价IgG1抗体或其片段更高的效力触发DR5表达细胞的凋亡，所述二价IgG1抗体或其片段结合到与DR5结合结构域相同的DR5表位。在某些方面，本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子可以比等效量的单特异性二价抗DR5单克隆抗体或其片段更高的效力触发DR5表达细胞的凋亡，所述二价抗DR5单克隆抗体或其片段结合到与DR5结合结构域相同的DR5表位。
多核苷酸、载体和宿主细胞
本公开还提供了多核苷酸，例如，分离的重组体和/或非自然存在的多核苷酸，其包含编码本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合分子的多肽亚基的核酸序列。“多肽亚基”意为可独立翻译的结合分子、结合单元或结合结构域的一部分。实例包括但不限于抗体VH、抗体VL、单链Fv、抗体重链、抗体轻链、抗体重链恒定区、抗体轻链恒定区和/或其任何片段。
本公开还提供了包含两个或更多个多核苷酸的组合物，其中两个或更多个多核苷酸共同可编码如上所述的二聚体、五聚体或六聚体结合分子。在某些方面，组合物可包括多核苷酸，所述多核苷酸编码IgA或IgM重链或其片段，例如，如上所述的人IgA或IgM重链，其中IgA或IgM重链至少包含DR5结合结构域的VH；以及多核苷酸，所述多核苷酸编码轻链或其片段，例如，至少包含DR5结合结构域的VL的人卡帕(kappa)或兰布达(lambda)轻链。所提供的多核苷酸组合物还可包括编码J链(例如，人J链或其片段或其变体)的多核苷酸。在某些方面，构成本文提供的组合物的多核苷酸可位于两个或三个单独的载体上，例如，表达载体上。此类载体由本公开提供。在某些方面，构成本文提供的组合物的两个或更多个多核苷酸可位于单个载体上，例如，表达载体上。此种载体由本公开提供。
本公开还提供了宿主细胞，例如，原核或真核宿主细胞，所述宿主细胞包含编码本文提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的多核苷酸或两个或更多个多核苷酸或其任何亚基、本文提供的多核苷酸组合物、或共同编码本文提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的载体或两个、三个或更多个载体或其任何亚基。在某些方面，本公开所提供的宿主细胞可表达本公开所提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子或其亚基。
在相关方面，本公开提供了一种制备如本公开所提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的方法，其中方法包括培养如上所述的宿主细胞并回收结合分子。
使用方法
本公开提供了一种用于通过向受试者施用联合疗法来抑制、延迟或减少患有癌症的受试者中恶性细胞生长的方法，所述联合疗法包含特异性和激动性结合到DR5的有效量的二聚体IgA抗体或六聚体或五聚体IgM抗体或其多聚的抗原结合片段，其中IgA或IgM抗体或其片段的至少三个抗原结合结构域为DR5特异性和激动性的，其与有效量的以下化学治疗剂联合：例如，DNA拓扑异构酶I抑制剂，例如，伊立替康或拓扑替康和/或其组合；核苷类似物，例如，吉西他滨、阿糖胞苷(ara-C)或氟尿嘧啶(5-FU)。在本文别处详细描述了示例性抗DR5 IgA和IgM抗体以及示例性化学治疗剂。在某些方面，施用本文提供的联合疗法可部分或完全抑制肿瘤或恶性细胞的生长、可延迟受试者中肿瘤和恶性细胞生长的进展、可防止转移在受试者中扩散、可减小受试者的肿瘤大小，以例如允许更成功的手术切除，或可导致受试者中阳性治疗反应的任何组合。本文描述了可实现的示例性治疗反应。
在某些方面，相对于单独施用抗DR5 IgA和IgM抗体或化学治疗剂(例如，DNA拓扑异构酶I抑制剂、核苷类似物或促凋亡剂，例如，BCL-2抑制剂)，施用联合治疗可导致增强的疗效。在某些方面，改善的疗效可大于每种单独剂的累加功效。在某些方面，相对于单独施用的任一种剂，例如，以增加的肿瘤生长延迟(TGD)、增加的肿瘤消退频率(例如，完全肿瘤消退)或增加的存活率进行测量的改善的疗效为至少5％、至少10％、至少20％、至少5％、至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少100％、至少150％、至少200％、至少250％、至少300％、至少350％、至少400％、至少450％、至少500％、至少550％、至少600％、至少650％、至少700％、至少750％、至少800％、至少850％、至少900％、至少950％或至少1000％。在某些方面，相对于分别施用的两种剂的累加功效，例如，以增加的肿瘤生长延迟(TGD)、增加的肿瘤消退频率(例如，完全肿瘤消退)或增加的存活率进行测量的改善的疗效为至少5％、至少10％、至少20％、至少5％、至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少100％、至少150％、至少200％、至少250％、至少300％、至少350％、至少400％、至少450％、至少500％、至少550％、至少600％、至少650％、至少700％、至少750％、至少800％、至少850％、至少900％、至少950％或至少1000％。在某些方面，改善可为完全肿瘤消退和完全存活。改善的活性可例如允许使用减少的剂量，或可导致更有效地杀伤对通过标准治疗杀伤具有抗性的细胞。“抗性”意为对于给定肿瘤或癌症类型的“护理标准”的任何程度的降低的活性。
在某些方面，当以有效剂量施用给需要癌症治疗的受试者时，本文提供的联合治疗方法可例如通过减慢肿瘤生长、停止肿瘤生长或减小现有肿瘤的大小来促进癌症治疗。
在某些方面，DR5表达细胞为永生化细胞系，例如，癌细胞。术语“癌症”、“肿瘤”、“癌性”和“恶性”是指或描述哺乳动物的特征通常在于细胞生长不受调控的生理病状。癌症的实例包括但不限于癌，包括腺癌、淋巴瘤、母细胞瘤、黑素瘤、肉瘤和白血病。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胃肠癌、霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤、胰腺癌、成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、子***、卵巢癌、肝癌(诸如肝癌(hepatic carcinoma)和肝癌(hepatoma))、膀胱癌、乳腺癌(包括激素介导的乳腺癌)，参见，例如，Innes等人,(2006)Br.J.Cancer 94:1057-1065)、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌、骨髓瘤(诸如多发性骨髓瘤)、唾液腺癌、肾癌(诸如肾细胞癌和韦尔姆斯氏瘤(Wilms’tumor))、基底细胞癌、黑素瘤、***癌、外阴癌、甲状腺癌、睾丸癌、食管癌、各种类型的头颈癌，包括但不限于鳞状细胞癌和粘液源性癌，诸如粘液性卵巢癌、胆管癌(肝)和肾***状癌。例如由本文提供的基于IgA的结合分子的粘膜分布对于某些癌症例如肺癌、卵巢癌、结直肠癌或鳞状细胞癌可为有益的。
用于治疗癌症的组合物的有效剂量根据许多不同的因素而变化，所述许多不同因素包括施用方式、靶位点、患者的生理状态、患者是人还是动物、所施用的其他药物以及治疗是预防性还是治疗性的。在某些方面，本文提供的治疗方法可提供增加的安全性，因为组合物对癌细胞比对非癌细胞(例如正常人肝细胞)表现出更大的细胞毒性(例如，更大程度地诱导凋亡)。通常，患者为人，但是也可治疗非人哺乳动物，包括转基因哺乳动物。可使用本领域技术人员已知的常规方法滴定治疗剂量，以优化安全性和功效。
本公开的组合物可通过任何合适的方法施用，例如，经胃肠外、脑室内、经口、通过雾化吸入、局部地、经直肠、经鼻、经颊、***或经由植入的贮库施用。如本文中所用的术语“肠胃外”包括皮下、静脉内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内及颅内注射或输注技术。
待治疗的受试者可为需要治疗的任何动物，例如，哺乳动物，在某些方面，受试者为人受试者。
以其最简单的形式，待施用给受试者的制剂是以常规剂型与化学治疗剂(例如，伊立替康)联合施用的本文提供的二聚体、五聚体或六聚体结合抗DR5抗体、或其抗原结合的多聚片段、变体或衍生物，其中所述剂可与本文别处所述的药物赋形剂、载剂或稀释剂组合。
本文提供的DR5结合分子或其抗原结合的多聚片段、变体或衍生物可通过本文其他各处所述的任何合适的方法来施用，例如通过IV输注来施用。在某些方面，可将本文提供的DR5结合分子或其抗原结合的多聚片段、变体或衍生物引入肿瘤或肿瘤细胞附近。
所有类型的肿瘤可能适合通过此种方法进行治疗，所述肿瘤包括但不限于乳腺癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、肾癌、结肠癌和膀胱癌、以及黑素瘤、肉瘤和淋巴瘤。粘膜分布对于某些癌症例如肺癌、卵巢癌、结直肠癌或鳞状细胞癌可为有益的。
拓扑异构酶I抑制剂
拓扑异构酶是癌症化疗的流行靶，并且已经或正在开发各种抑制剂。抑制I型拓扑异构酶的化合物目前正在使用或正在被开发为癌症化学治疗剂。特别地，天然I型拓扑异构酶抑制剂喜树碱的两种衍生物伊立替康(7-乙基-10-[4-(1-哌啶基)-1-哌啶基]羰基喜树碱，也称为CPT-11)和拓扑替康(9-[(二甲胺基)甲基]-10-羟基-(4S)-喜树碱)目前在市场上可购得用于治疗各种癌症。伊立替康是广泛用于治疗晚期和转移性结直肠癌的甲酰四氢叶酸钙(亚叶酸钙)、5-氟尿嘧啶和伊立替康的“FOLFIRI”方案的一部分。
伊立替康具有下式：
拓扑替康具有下式：
化学治疗的核苷类似物
吉西他滨(2’，2’-二氟-2’脱氧胞苷或dFdC)是用作化疗的核苷类似物。其为FDA批准的用于治疗例如，乳腺癌、胰腺癌、肺癌和卵巢癌。所述吉西他滨具有下式：
作为嘧啶类似物，药物在DNA复制期间取代快速生长的肿瘤细胞中核酸的组成部分中的一种(在此情况下为胞苷)。过程阻止了肿瘤的生长，因为新的核苷不能附接到“有缺陷的”核苷，从而导致凋亡(细胞“***”)。吉西他滨用于多种癌症：非小细胞肺癌、胰腺癌、膀胱癌和乳腺癌。吉西他滨是许多胰腺癌的护理标准。
其他FDA批准的用于癌症治疗的核苷类似物包括胞嘧啶***糖苷(ara-C或阿糖胞苷)，用于治疗急性骨髓性白血病(AML)，急性淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性粒细胞性白血病(CML)和非霍奇金淋巴瘤(www_dot_drugs_dot_com/monograph/cytarabine.html(访问于2018年11月14日)；以及氟尿嘧啶(5-FU)，用于治疗结肠癌、食管癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、基底细胞癌和子***(www_dot_drugs_dot_com/monograph/fluorouracil.html(访问于2018年11月14日)。Ara-C具有下式：
5-FU具有下式：
B细胞淋巴瘤2(BCL-2)抑制剂
BCL-2蛋白家族与细胞凋亡的调控有关。与增加细胞存活相关的此家族中的蛋白包括BCL-2、BCL-XL、BCL-2样2(BCL-W)、髓样细胞白血病序列1(MCL-1)和BCL-2相关蛋白A1(BFL-1)。已经研究了许多这些抗凋亡蛋白的小分子抑制剂作为血液癌症的潜在治疗方法，所述血液癌症诸如复发或难治性慢性淋巴白血病(CLL)和急性粒细胞性白血病(AML)。参见，例如，Cang,S.等人,J.Hematol.Oncol.8:129-136(2015)。一些最早开发的小分子BCL-2抑制剂是广谱的。同上。例如，ABT-737和ABT-263(Navitoclax)抑制BCL-2、BCL-XL和BCL-w的活性。由于前者的溶解度和生物利用度较低以及后者的剂量限制性副作用，这些药物在临床开发中没有进展。ABT-737(4-{4-[(4’-氯-2-联苯基)甲基]-1-哌嗪基}-N-[(4-{[(2R)-4-(二甲氨基)-1-(苯基磺胺基)-2-丁基]氨基}-3-硝基苯基)磺酰基]苯甲酰胺)具有以下结构：
ABT-263(Navitoclax；4-(4-{[2-(4-氯苯基)-5,5-二甲基-1-环己烯-1-基]甲基}-1-哌嗪基)-N-[(4-{[(2R)-4-(4-吗啉基)-1-(苯基磺胺基)-2-丁基]氨基}-3-[(三氟甲基)苯基)磺酰基]苯甲酰胺)具有以下结构：
在另一方面，Venetoclax(ABT-199；4-{4-[(4’-氯-5,5-二甲基[3,4,5,6-四氢[1,1’-联苯]]-2-基)甲基]哌嗪-1-基}-N-(3-硝基-4-{[(氧代-4-基)甲基]氨基}苯-1-磺酰基)-2-[(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-5-基)氧基]苯甲酰胺)仅选择性地抑制BCL-2蛋白，并且目前被指示用于治疗CLL。Venetoclax具有以下结构：
这些药物起促进癌细胞(例如血液系统恶性肿瘤)凋亡的作用。同上。
药物组合物和施用方法
鉴于本公开，本领域技术人员众所周知或容易地确定将本文提供的二聚体、五聚体或六聚体TNF受体结合分子制备并施用于对其有需要的受试者的方法。TNF受体结合分子的施用途径可为例如经口、经肠胃外、通过吸入或局部地。如本文所用的术语“肠胃外”包括例如静脉内、动脉内、腹腔内、肌肉内、皮下、直肠或***施用。尽管这些施用形式被认为是合适的形式，但是施用形式的另一个实例是注射用溶液，特别是用于静脉内或动脉内注射或滴注的溶液。合适的药物组合物可包含缓冲液(例如，乙酸盐、磷酸盐或柠檬酸盐缓冲剂)、表面活性剂(例如，聚山梨酯)、任选的稳定剂(例如，人白蛋白)等。
如本文所讨论的，本文提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子可以体内治疗表达DR5的癌症的药学上有效量施用。就这一点而言，应当理解，可配制所公开的结合分子，以有助于施用和促进活性剂的稳定性。因此，药物组合物可包含药学上可接受的无毒无菌载剂，诸如生理盐水、无毒缓冲液、防腐剂等。本文提供的二聚体、五聚体或六聚体TNF受体结合分子的药学上有效量是指足以实现与靶的有效结合并获得治疗益处的量。合适的制剂描述于Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.)第16版,(1980)。
某些药物组合物可以可接受的剂型经口施用，所述剂型包括例如，胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液。某些药物组合物也可通过鼻喷雾或吸入施用。采用苄醇或其他合适的防腐剂、增强生物利用率的吸收促进剂和/或其他常规增溶或分散剂将此类组合物制备成在生理盐水中的溶液。
可与载剂物质组合以产生单剂型的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的量将根据例如治疗受试者和特定施用模式而变化。组合物可以单剂量、多剂量或在输注的确定时间段内施用。也可调整剂量方案，以提供最佳的期望反应(例如，治疗或预防性反应)。
在本公开的范围内，本文提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子可以足以产生治疗效果的量施用于需要治疗的受试者。本文提供的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子可以常规剂型施用于受试者，所述常规剂型通过根据已知的技术将本公开的抗体或其抗原结合片段、变体或衍生物与常规药学上可接受的载剂或稀释剂组合来制备。药学上可接受的载剂或稀释剂的形式和特征可由与其组合的活性成分的量、施用途径和其他众所周知的变量来决定。
“治疗有效剂量或量”或“有效量”意指二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的量，在施用时，所述量相对于患有表达DR5的癌症的受试者的治疗产生阳性治疗反应。
用于治疗癌症的本文所公开的组合物的治疗有效剂量可根据许多不同的因素而变化，所述许多不同因素包括施用方式、靶位点、患者的生理状态、患者是人还是动物、所施用的其他药物以及治疗是预防性还是治疗性的。在某些方面，受试者或患者为人，但是也可治疗非人哺乳动物，包括转基因哺乳动物。可使用本领域技术人员已知的常规方法滴定治疗剂量，以优化安全性和功效。
在给出本公开的情况下，无需过度实验，本领域普通技术人员可容易地确定要施用的二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的量。影响施用模式和二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子的各自量的因素包括但不限于疾病的严重程度、疾病的病史、以及接受治疗的个体的年龄、身高、体重、健康和身体状况。类似地，要施用的二聚体、五聚体或六聚体TNF受体结合分子的量将取决于施用模式以及受试者将接受单剂量还是多剂量的此剂。
本公开还提供了二聚体、五聚体或六聚体DR5结合分子在制造用于治疗、预防或防治癌症的药物中的用途，其中癌症表达DR5。
除非另外指示，否则本公开采用本领域技术范围内的细胞生物学、细胞培养、分子生物学、转基因生物学、微生物学、重组DNA和免疫学的常规技术。文献中充分说明了此类技术。参见，例如，Green和Sambrook,编(2012)Molecular Cloning A Laboratory Manual(第4版；Cold Spring Harbor Laboratory Press)；Sambrook等人,编(1992)MolecularCloning:A Laboratory Manual,(Cold Springs Harbor Laboratory,NY)；D.N.Glover和B.D.Hames,编,(1995)DNA Cloning第2版(IRL Press),第1-4卷；Gait,编(1990)Oligonucleotide Synthesis(IRL Press)；Mullis等人,美国专利号4,683,195；Hames和Higgins,编(1985)Nucleic Acid Hybridization(IRL Press)；Hames和Higgins,编(1984)Transcription And Translation(IRL Press)；Freshney(2016)Culture Of AnimalCells,第7版(Wiley-Blackwell)；Woodward,J.,Immobilized Cells And Enzymes(IRLPress)(1985)；Perbal(1988)A Practical Guide To Molecular Cloning；第2版(Wiley-Interscience)；Miller和Calos编(1987)Gene Transfer Vectors For Mammalian Cells,(Cold Spring Harbor Laboratory)；S.C.Makrides(2003)Gene Transfer andExpression in Mammalian Cells(Elsevier Science)；Methods in Enzymology,第151-155卷(Academic Press,Inc.,N.Y.)；Mayer和Walker,编(1987)Immunochemical Methodsin Cell and Molecular Biology(Academic Press,London)；Weir和Blackwell,编；以及Ausubel等人,(1995)Current Protocols in Molecular Biology(John Wiley andSons)。
抗体工程的一般原理提出于例如，Strohl、W.R.和L.M.Strohl(2012),Therapeutic Antibody Engineering(Woodhead Publishing)中。蛋白质工程的一般原理提出于例如，Park和Cochran,编(2009),Protein Engineering and Design(CDC Press)中。免疫学的一般原理提出于例如：Abbas和Lichtman(2017)Cellular and MolecularImmunology第9版(Elsevier)中。此外，可遵循本领域已知的免疫学标准方法，例如，Current Protocols in Immunology(Wiley Online Library)；Wild,D.(2013),TheImmunoassay Handbook第4版(Elsevier Science)；Greenfield,编(2013),Antibodies,aLaboratory Manual,第2版(Cold Spring Harbor Press)；和Ossipow和Fischer,编(2014),Monoclonal Antibodies:Methods and Protocols(Humana Press)中的方法。
以上引用的所有参考文献以及本文引用的所有参考文献以引用的方式整体并入本文。
提供以下实施例以作说明而非限制。
实施例
在以下实施例中，使用了抗DR5 IgM Mab#2，如美国专利申请公布号2018-0009897中所述构建的并且包含如表2中提供的VH和VL氨基酸SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；以及抗DR5 IgM Mab#5，如美国专利申请公布号2018-0009897中所述构建的并且包含如表2中提供的VH和VL氨基酸SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8。在以下实施例中使用的抗DR5 IgG同样包含如表2中提供的VH和VL氨基酸序列SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。
实施例1：抗DR5 IgM和伊立替康联合在体外诱导更完全的肿瘤细胞毒性
抗DR5 IgM和伊立替康联合疗法的体外功效评估如下。接种HCT15肿瘤细胞(2×103个细胞)并允许其附着过夜。在第一实验中，用抗DR5 IgM Mab#2或抗DR5 IgM Mab#2加0.4μM伊立替康(Sigma I1406)在37℃下治疗细胞72小时。添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图1A中示出。在第二实验中，用伊立替康或伊立替康加1ng/mL抗DR5 IgM Mab#2在37℃下治疗细胞72小时。添加Cell TiterGlo试剂并在光度计上读取活力。结果在图1B中示出。
实施例2：抗DR5 IgM和伊立替康联合提供显著增强的体内功效
如下在HCT15肿瘤模型中评估了使用抗DR5 IgM抗体和护理标准依立替康的联合疗法。
在第一实验中，比较了抗DR5 IgG、抗DR5 IgM和伊立替康的单一治疗。无胸腺裸鼠皮下植入有1x 107个HCT15肿瘤细胞。当肿瘤达到150-200mm3时，向动物静脉给药每天5次载体、每周3次3mg/kg抗DR5 IgG、每天5次3mg/kg抗DR5 IgM Mab#2、或第一周内3次80mg/kg伊立替康(Sigma I1406)。图2A示出肿瘤体积(n＝10只动物/组)，并且图2B示出总存活率。抗DR5 IgM Mab#2单一治疗是最有效的。
第二实验证明，抗DR5 IgG和伊立替康的联合疗法几乎不提供增强的功效。无胸腺裸鼠皮下植入有1x 107个HCT15肿瘤细胞。当肿瘤达到150-200mm3时，向动物静脉给药每天5次载体、每周3次3mg/kg抗DR5 IgG、第一周内3次80mg/kg伊立替康(Sigma I1406)、或联合的抗DR5 IgG和伊立替康给药方案。图3A示出肿瘤体积(n＝10只动物/组)，并且图3B示出总存活率。联合疗法仅比单独的伊立替康疗法提供略微的增强。
第三实验证明，相对于护理标准，抗DR5 IgM和伊立替康的联合疗法可提供显著的增强。无胸腺裸鼠皮下植入有1x 107个HCT15肿瘤细胞。当肿瘤达到150-200mm3时，向动物静脉给药每天5次载体、每天5次3mg/kg抗DR5 IgM、第一周内3次80mg/kg伊立替康(SigmaI1406)、或联合的抗DR5 IgM和伊立替康给药方案。图4A示出肿瘤体积(n＝10只动物/组)，并且图4B示出总存活率。联合疗法导致肿瘤消退以及长达70天的完全存活。
实施例3：与单独的吉西他滨相比，抗DR5 IgM和吉西他滨联合在体外诱导更完全的胰腺肿瘤细胞毒性
如下评估抗DR5 IgM和吉西他滨联合疗法在胰腺肿瘤细胞系中的体外效力。在第一实验中，接种6x103个BxPC3肿瘤细胞(ATCC CRL-1687)并允许其附着过夜。用4ng/mL抗DR5 IgM Mab#5(VH：SEQ ID NO:7，VL SEQ ID NO:8)、0.56μM吉西他滨或两种剂的组合在37℃下治疗细胞72小时。添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图5A中示出。在第二实验中，接种3x103个Panc-1肿瘤细胞(ATCC CRL-1469)并允许其附着过夜。用4ng/mL抗DR5 IgM Mab#5、0.56μM吉西他滨或两种剂的组合在37℃下治疗细胞72小时。添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图5B中示出。在第三实验中，接种6x103个BxPC3肿瘤细胞，并且第二天用系列稀释的抗DR5 IgM Mab#5和吉西他滨联合治疗细胞。在37℃下72小时后，添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图6A中示出。在第四实验中，接种3x103个Panc-1肿瘤细胞，并且第二天用系列稀释的抗DR5 IgM Mab#5和吉西他滨联合治疗细胞。在37℃下72小时后，添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图6B中示出。
实施例4：抗DR5 IgM和吉西他滨联合在体内胰腺肿瘤异种移植模型中提供了比单独的剂或与抗DR5 IgG联合疗法增强的功效
如下在BxPC3胰腺肿瘤模型中评估了使用抗DR5 IgM抗体和护理标准吉西他滨的联合疗法。
在第一实验中，裸鼠皮下植入有BxPC3胰腺肿瘤片段。当肿瘤达到100-150mm3时，向动物给药静脉注射每天7次载体、静脉注射单次3mg/kg剂量的DR5 IgG Mab#2、腹腔内注射每3天120mg/kg吉西他滨总共4次剂量、或联合抗DR5 IgG和吉西他滨给药方案。图7A示出肿瘤体积(n＝9至10只动物/组)，并且图7B示出总存活率。在第二实验中，裸鼠皮下植入有BxPC3胰腺肿瘤片段。当肿瘤达到100-150mm3时，向动物给药静脉注射每天7次载体、静脉注射每天7次3mg/kg的DR5 IgM Mab#2、腹腔内注射每3天120mg/kg吉西他滨总共4次剂量、或联合抗DR5 IgM和吉西他滨给药方案。图8A示出肿瘤体积(n＝9至10只动物/组)，并且图8B示出总存活率。相对于IgG联合疗法和相对单独的任何治疗，IgM和吉西他滨的联合疗法提供减少的肿瘤体积。
实施例5：抗DR5 IgM和Venetoclax(ABT-199)联合治疗比单独的Venetoclax诱导体外更完整的细胞毒性
如下评估抗DR5 IgM和Venetoclax联合治疗AML细胞系的体外效力。在第一实验中，接种3x103个Molm-13肿瘤细胞(DSMZ ACC554)，并且第二天用1.2ng/mL抗DR5 IgM Mab#5、3.7nM的Venetoclax、或两种剂的组合治疗细胞。在37℃下72小时后，添加Cell TiterGlo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图9A中示出。在第二实验中，接种3x103个MV-4-11肿瘤细胞(ATCC CRL-9591)，并且第二天用37ng/mL抗DR5 IgM Mab#5、3.7nM的Venetoclax、或两种剂的组合治疗细胞。在37℃下72小时后，添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图9B中示出。在第三实验中，接种3x103个Molm-13肿瘤细胞，并且第二天用系列稀释的抗DR5 IgM Mab#5和Venetoclax联合治疗细胞。在37℃下72小时后，添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图10A中示出。在第四实验中，接种3x103个MV-4-11肿瘤细胞，并且第二天用系列稀释的抗DR5 IgM Mab#5和Venetoclax联合治疗细胞。在37℃下72小时后，添加Cell Titer Glo试剂(Promega G7572)并在光度计上读取细胞活力。结果在图10B中示出。联合治疗示出在抗体和药物浓度的一定范围内，两种细胞系的杀伤增加。
序列表
<110> IGM生物科学股份有限公司(IGM BIOSCIENCES, INC.)
<120> 多聚体抗DR5结合分子与化学治疗剂联合用于治疗癌症的用途
<130> 09789.011WO1
<140>
<141>
<150> 62/767,900
<151> 2018-11-15
<150> 62/635,033
<151> 2018-02-26
<160> 89
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Glu Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Leu Gly Ala Gly Arg Gly Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 2
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 2
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 3
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 3
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Glu Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Asn Trp Gln Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Leu Gly Ala Gly Arg Gly Trp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Lys Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 4
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 4
Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr
1 5 10 15
Val Arg Ile Thr Cys Ser Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala Ser
20 25 30
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly
35 40 45
Ala Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser
50 55 60
Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp
65 70 75 80
Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Ala Asp Ser Ser Gly Asn His Val
85 90 95
Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 5
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 5
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Asp Tyr Phe Trp Ser Trp Ile Arg Gln Leu Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Cys Ile Gly His Ile His Asn Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Lys Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Arg Gly Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 6
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 6
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Arg Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Ser Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Gly Ser Ser Pro
85 90 95
Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 7
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Val Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Gly Asp Ser Met Ile Thr Thr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe
115 120 125
Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu
130 135 140
Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp
145 150 155 160
Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu
165 170 175
Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser
180 185 190
Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro
195 200 205
Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys
210 215 220
Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro
225 230 235 240
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
245 250 255
Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp
260 265 270
Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
275 280 285
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val
290 295 300
Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu
305 310 315 320
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
325 330 335
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
340 345 350
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr
355 360 365
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
370 375 380
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu
385 390 395 400
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
405 410 415
Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
420 425 430
Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445
Lys
<210> 8
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 8
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Arg Thr
85 90 95
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro
100 105 110
Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr
115 120 125
Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys
130 135 140
Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu
145 150 155 160
Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser
165 170 175
Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala
180 185 190
Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe
195 200 205
Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 9
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 9
Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Leu Ser Met Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys
85 90 95
Val Arg Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 10
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 10
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Phe Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro His Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
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Arg
<210> 11
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 11
Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Ser
1 5 10 15
Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Asn Tyr Lys Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Trp Met Asn Pro Asp Thr Asp Ser Thr Gly Tyr Pro
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Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asn Thr Ser Ile Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Tyr Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Arg Asp Tyr
115 120 125
Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
130 135 140
Ser
145
<210> 12
<211> 128
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 12
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
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Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
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Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
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Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
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Asn Trp Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
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<210> 13
<211> 471
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 13
Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp
1 5 10 15
Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
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35 40 45
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50 55 60
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Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr
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Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser
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Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys
210 215 220
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu
225 230 235 240
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
260 265 270
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
275 280 285
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
290 295 300
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
305 310 315 320
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
325 330 335
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
340 345 350
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
355 360 365
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys
370 375 380
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
385 390 395 400
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
405 410 415
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
420 425 430
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
435 440 445
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
450 455 460
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210> 14
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 14
Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser
1 5 10 15
Gly Ala Tyr Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro
20 25 30
Val Ser Leu Gly Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser
35 40 45
Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys
50 55 60
Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe
65 70 75 80
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
85 90 95
Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Phe
100 105 110
Cys Ser Gln Ser Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
115 120 125
Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro
130 135 140
Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu
145 150 155 160
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp
165 170 175
Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp
180 185 190
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys
195 200 205
Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln
210 215 220
Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210> 15
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 15
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Phe
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Glu Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 16
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 16
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Ser
85 90 95
Thr His Val Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210> 17
<211> 470
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> 任何氨基酸
<400> 17
Met Gly Xaa Leu Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Val Ile Leu Glu
1 5 10 15
Gly Val Gln Cys Glu Val His Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val
20 25 30
Arg Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ala
35 40 45
Phe Ser Ser Tyr Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg
50 55 60
Leu Glu Trp Val Ala Tyr Ile Ser Asp Gly Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr
65 70 75 80
Pro Asp Thr Met Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
85 90 95
Asn Thr Leu Ser Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala
100 105 110
Met Tyr Tyr Cys Ala Arg His Ile Thr Met Val Val Gly Pro Phe Ala
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys
130 135 140
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Gly
145 150 155 160
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
165 170 175
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
180 185 190
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
195 200 205
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
210 215 220
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro
225 230 235 240
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
245 250 255
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
260 265 270
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
290 295 300
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
305 310 315 320
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
325 330 335
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
370 375 380
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
385 390 395 400
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Thr Met Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
435 440 445
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
450 455 460
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210> 18
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 18
Met Arg Leu Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp Val Ser
1 5 10 15
Gly Ser Ser Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Ser Ser Ser Phe Ser
20 25 30
Val Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Glu Asp
35 40 45
Ile Tyr Asn Arg Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile Ser Gly Ala Thr Ser Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Lys Asp Tyr Thr Leu Ser Ile Thr
85 90 95
Ser Leu Gln Thr Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Trp
100 105 110
Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
115 120 125
Ala Val Ala Ala Pro Ser Val Asp Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
130 135 140
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
165 170 175
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
195 200 205
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
210 215 220
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230
<210> 19
<211> 466
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 19
Met Glu Leu Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Val Ile Leu Glu Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Arg Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Tyr Phe Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Lys Tyr Ser
65 70 75 80
Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Gln Phe Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Glu Ala Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
130 135 140
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
145 150 155 160
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
165 170 175
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
180 185 190
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
195 200 205
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
210 215 220
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
225 230 235 240
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
245 250 255
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
260 265 270
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
275 280 285
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
290 295 300
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
305 310 315 320
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
325 330 335
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu
340 345 350
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
355 360 365
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
370 375 380
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
385 390 395 400
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
405 410 415
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Met Asp
420 425 430
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
435 440 445
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
450 455 460
Gly Lys
465
<210> 20
<211> 234
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 20
Met Arg Leu Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp Val Ser
1 5 10 15
Gly Ser Ser Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser
20 25 30
Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Val Ser Thr Ala Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Val Gln Ala Glu Asp Gln Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr
100 105 110
Arg Thr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Ala Val Ala Ala Pro Ser Val Asp Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
130 135 140
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
145 150 155 160
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
165 170 175
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
180 185 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
195 200 205
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
210 215 220
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230
<210> 21
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 21
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Met Asn Pro Asn Ser Asp Asn Thr Gly Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asn Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Asn His Tyr Gly Ser Gly Ser His Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 22
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 22
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ile Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Leu Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Lys Thr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 23
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 23
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly His Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Asp Ser Ser Gly Trp Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 24
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 24
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Leu Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Thr Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Tyr Ser Phe Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 25
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 25
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly His Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ala Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Asp Ser Ser Gly Trp Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 26
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 26
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Leu Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Thr Thr Tyr Phe Cys Leu Gln His Asn Ser Phe Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 27
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 27
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly His Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Ala Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Asp Ser Ser Gly Trp Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 28
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 28
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Leu Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Thr Thr Tyr Phe Cys Leu Gln His Asn Ser Phe Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 29
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 29
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Asn Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser His Ile Ser Ser Ser Gly Ser Ile Leu Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Ala Ala Ala Gly Thr Asp Ala Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 30
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 30
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile
35 40 45
His Asp Val Ser Ser Phe Gln Ser Ala Val Pro Ser Arg Phe Ser Arg
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Val Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Thr Tyr Ile Thr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 31
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 31
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Tyr Tyr
20 25 30
Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Arg Tyr Ser Ser Ser Ser Trp Trp Tyr Phe Asp Leu Trp
100 105 110
Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 32
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 32
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 33
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 33
Gln Val Gln Ala Glu Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Thr Ser Val Thr Thr Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Asp Ser Pro Arg Gly Phe Ser Gly Tyr Glu Ala Phe Asp Ser Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 34
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 34
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Arg
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Ile Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Leu Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Thr Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile
100 105 110
Lys
<210> 35
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 35
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Asp
20 25 30
Asn Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Gly Val Asn Trp Asn Phe Leu Phe Asp Ile Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
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<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 36
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu Arg Arg
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 37
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 37
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Arg Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Leu Gly Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 38
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 38
Asp Ile Val Met Thr Gln Phe Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu His Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Leu Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln
85 90 95
Tyr Tyr Ser Thr Pro Ser Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile
100 105 110
Lys
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<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 39
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Asp Arg Thr Val Tyr Ser Asn Ser Ser Pro Phe Tyr Tyr Tyr
100 105 110
Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120 125
Ser
<210> 40
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 40
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Thr Ser Gln Ser Ile Ser Thr Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Ser Ala Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 41
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 41
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
Ala Arg Asp Arg Thr Val Tyr Ser Ser Ser Ser Pro Phe Tyr Tyr Tyr
100 105 110
Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120 125
Ser
<210> 42
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 42
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
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Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 43
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 43
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Arg Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn His Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
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85 90 95
Arg Gly Gly Ser Ser Gly Tyr Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly
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Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 44
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 44
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu His Ser
20 25 30
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35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
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65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
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100 105 110
Lys
<210> 45
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 45
Glu Val Gln Val Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Ser Ser Ser Ser Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
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65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Gly Gly Ser Ser Trp Tyr Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 46
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 46
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
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Leu Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 47
<211> 126
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 47
Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu
1 5 10 15
Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met
20 25 30
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100 105 110
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 48
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 48
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Lys Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 49
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 49
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Cys Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Asn Gly Ser Gly Ser Tyr Asp Trp Phe Asp Pro Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 50
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 50
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Phe Leu Ile
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Phe Val Ala Ser Ser Phe Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ser Phe Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 51
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 51
Gln Val Gln Met Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Asp Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Asn Leu Glu
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Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
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Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
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Cys Ala Arg Asp Asn Gly Ser Gly Ser Tyr Asp Trp Phe Asp Pro Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 52
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 52
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Phe Leu Ile
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<210> 53
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 53
Lys Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
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35 40 45
Gly Trp Phe Tyr Pro Gly Gly Gly Tyr Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
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100 105 110
Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 54
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 54
Asp Ile Ala Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Leu Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
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85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala
100 105
<210> 55
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 55
Lys Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Thr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Ser Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Phe Tyr Pro Gly Gly Gly Tyr Ile Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
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65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
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100 105 110
Thr Leu Thr Val Ser Ser
115
<210> 56
<211> 104
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 56
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
20 25 30
Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
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65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu
100
<210> 57
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 57
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Glu Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Asn Trp Asn Gly Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ile Leu Gly Ala Gly Arg Gly Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly
100 105 110
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115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala
130 135 140
Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp
145 150 155 160
Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
165 170 175
Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile
180 185 190
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195 200 205
Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser
210 215 220
Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu
225 230 235 240
Thr Val Leu Gly
<210> 58
<211> 245
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 58
Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
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65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr His Cys
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100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro
130 135 140
Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly
145 150 155 160
Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly
165 170 175
Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly
180 185 190
Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu
195 200 205
Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn
210 215 220
Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Leu Thr Val Leu Gly
245
<210> 59
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 59
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Glu Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Asn Ser Tyr
20 25 30
Thr Leu His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asn Ala Gly Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ser Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Ala Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Val Phe Thr Tyr Ser Phe Gly Met Asp Val Trp Gly Arg Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
115 120 125
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser
130 135 140
Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Gly
145 150 155 160
Gly Ser Asn Ile Gly Arg Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro
165 170 175
Gly Thr Ala Pro Lys Leu Ile Leu Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser
180 185 190
Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser
195 200 205
Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Leu Tyr Tyr Cys
210 215 220
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr
225 230 235 240
Lys Leu Thr Val Leu Gly
245
<210> 60
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 60
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Val His Arg Pro Gly Arg Ser Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala
130 135 140
Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp
145 150 155 160
Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
165 170 175
Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile
180 185 190
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr
195 200 205
Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser
210 215 220
Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu
225 230 235 240
Thr Val Leu Gly
<210> 61
<211> 235
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 61
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Arg Val Ser Cys Gln Ala Ser Gly Tyr Ser Leu Ser Glu Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Leu Asn Pro Asn Ser Gly Val Thr Asp Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Ser Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Phe Asn Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Asn Gly Asp Tyr Trp Gly Lys Gly Thr Leu Val Thr Val
100 105 110
Ser Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
115 120 125
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
130 135 140
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Thr
145 150 155 160
Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Leu Leu Val Val Tyr
165 170 175
Ala Lys Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
180 185 190
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
195 200 205
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys His Ser Arg Asp Ser Ser Gly Trp Val
210 215 220
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
225 230 235
<210> 62
<211> 245
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 62
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Asp
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Ser Phe Asp Gly Ser Gln Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Gln Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Pro Ala Arg Phe Phe Pro Leu His Phe Asp Ile Trp Gly
100 105 110
Arg Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Ser Ser Glu Leu Thr Gln
130 135 140
Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val Arg Ile Thr Cys
145 150 155 160
Gln Gly Asp Ser Leu Arg Thr His Tyr Ala Ser Trp Tyr His Gln Arg
165 170 175
Pro Gly Arg Ala Pro Val Leu Val Asn Tyr Pro Lys Asp Ser Arg Pro
180 185 190
Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala
195 200 205
Ser Leu Thr Ile Ile Gly Ala Gln Ala Ala Asp Glu Gly Asp Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Ser Arg Asp Ser Ser Gly Val Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Val Thr Val Leu Gly
245
<210> 63
<211> 247
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 63
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Phe Ser Gly Tyr Gly Asp Tyr Leu Asp Tyr Trp Gly Lys
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Pro
130 135 140
Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly
145 150 155 160
Thr Ser Ser Asp Ile Gly Asn Tyr Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln
165 170 175
His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Val Asn Glu Arg
180 185 190
Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr
195 200 205
Ala Ser Leu Thr Val Ser Gly Leu Arg Pro Glu Asp Glu Ala Asp Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Asn Asn Ala Val Ile Phe Gly Gly Gly
225 230 235 240
Thr Gln Leu Thr Val Leu Gly
245
<210> 64
<211> 255
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 64
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr His
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Ser Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Thr Gly Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ser Gln Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Ala Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Ser Arg Asp Ser Ser Gly Tyr Tyr Tyr Val Pro Pro Gly
100 105 110
Asp Phe Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala
130 135 140
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
145 150 155 160
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Arg Ser Asp Ile Gly Gly Tyr
165 170 175
Asn Phe Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
180 185 190
Leu Ile Tyr Asp Val Tyr Asn Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asp His Phe
195 200 205
Ser Gly Ser Lys Ser Asp Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
210 215 220
Gln Ser Glu Asp Asp Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Tyr
225 230 235 240
His Thr Trp Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
245 250 255
<210> 65
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 65
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Leu Val Asn Tyr
20 25 30
Phe Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Met Ile Asn Pro Ser Gly Gly Thr Thr Lys Asn Arg Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Arg Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Gly Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asp Phe Lys Gly Thr Asp Ile Leu Phe Arg Asp Trp Gly Arg
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro
130 135 140
Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Ser Ile Ser Cys Ser Gly
145 150 155 160
Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Ile Trp Tyr Gln Gln Leu
165 170 175
Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Met Tyr Ser Asn Asp Arg Arg Pro
180 185 190
Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala
195 200 205
Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
210 215 220
Cys Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly His Tyr Val Phe Gly Thr
225 230 235 240
Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
245
<210> 66
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 66
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ser Thr Phe Asp Ile Trp Gly Arg Gly Thr Met Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Ala Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly
130 135 140
Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Asn Ser Asn
145 150 155 160
Ile Gly Ser Arg Pro Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala
165 170 175
Pro Lys Leu Leu Ile Gln Gly Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro
180 185 190
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile
195 200 205
Ser Gly Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp
210 215 220
Asp Asp Ser Leu Thr Gly Tyr Val Phe Gly Pro Gly Thr Lys Leu Thr
225 230 235 240
Val Leu Gly
<210> 67
<211> 240
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 67
Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Ala Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Ile Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Leu Arg Gly Leu Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Met
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala
130 135 140
Leu Gly Gln Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser
145 150 155 160
Tyr Tyr Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu
165 170 175
Val Ile Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe
180 185 190
Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala
195 200 205
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser
210 215 220
Gly Asn His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
225 230 235 240
<210> 68
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 68
Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Pro Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ala Ser Gly Pro Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Met Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala
130 135 140
Ala Pro Gly Gln Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Thr Ser Asn
145 150 155 160
Ile Gly Asn Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Val Pro Gly Thr Ala
165 170 175
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro
180 185 190
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile
195 200 205
Thr Gly Leu Gln Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp
210 215 220
Asp Ser Ser Leu Ser Ala Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr
225 230 235 240
Val Leu Gly
<210> 69
<211> 253
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 69
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Thr Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Arg Asn Asn
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Phe Ile Pro Lys Phe Gly Thr Thr Asn His Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Asp Ser Thr Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly Ala Tyr Cys Gly Gly Gly Arg Cys Tyr Leu Tyr Gly
100 105 110
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gln Ala
130 135 140
Val Val Ile Gln Glu Pro Ser Leu Thr Val Ser Pro Gly Gly Thr Val
145 150 155 160
Thr Leu Thr Cys Gly Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Ser Gly His Tyr
165 170 175
Pro Tyr Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Thr Leu Ile
180 185 190
Tyr Asp Thr Ser Asn Lys Arg Ser Trp Thr Pro Ala Arg Phe Ser Gly
195 200 205
Ser Leu Leu Gly Gly Lys Ala Ala Leu Thr Leu Ser Gly Ala Gln Pro
210 215 220
Glu Asp Glu Ala Glu Tyr Tyr Cys Leu Val Ser Tyr Ser Gly Ser Leu
225 230 235 240
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
245 250
<210> 70
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 70
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Gly Ala Trp Leu Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Met Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Ala Leu Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu
130 135 140
Ser Pro Gly Lys Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Gly Ser
145 150 155 160
Val Ala Arg Asn Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ala
165 170 175
Pro Thr Ile Val Ile Tyr Glu Asp Asn Arg Arg Pro Ser Gly Val Pro
180 185 190
Gly Arg Phe Ser Gly Ser Ile Asp Arg Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu
195 200 205
Thr Ile Ser Gly Leu Gln Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln
210 215 220
Ser Tyr Asn Tyr Asn Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr
225 230 235 240
Val Leu Gly
<210> 71
<211> 247
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 71
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Gly Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Lys Thr Asn Tyr Val Gln Glu Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Thr Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Gly Asn Asn Tyr Arg Phe Gly Tyr Phe Asp Phe Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Glu Thr Thr Leu Thr Gln
130 135 140
Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser
145 150 155 160
Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln
165 170 175
Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser
180 185 190
Arg Ala Ile Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
195 200 205
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val
210 215 220
Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly
225 230 235 240
Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg
245
<210> 72
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 72
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Thr
20 25 30
Thr Val Ala Trp Asp Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Glu Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Val Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Ile Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Pro Asp Ala Gly Arg Gly Ala Phe Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Ser Pro Leu Arg Trp Gly Arg Phe
115 120 125
Gly Trp Arg Gly Leu Gly Arg Gly Trp Leu Arg Ser Pro Val Thr Gln
130 135 140
Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser
145 150 155 160
Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser His Leu Ala Trp Tyr Gln
165 170 175
Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser
180 185 190
Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
195 200 205
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val
210 215 220
Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser Asn Trp Pro Pro Arg Ala Val Phe Gly
225 230 235 240
Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
245
<210> 73
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 73
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Arg Val Gln Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Asn Asn
20 25 30
Asn Ala Ala Trp Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Ser Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gly Asp Gly Asn Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ile Leu Arg Trp Gly
115 120 125
Arg Phe Gly Trp Arg Gly Leu Gly Arg Gly Trp Leu Glu Ile Val Leu
130 135 140
Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr
145 150 155 160
Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Gly Tyr Val Ser Trp
165 170 175
Tyr Arg Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala
180 185 190
Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
195 200 205
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe
210 215 220
Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Asn Thr Tyr Gly
225 230 235 240
Gln Gly Thr Lys Val Gly Ile Lys
245
<210> 74
<211> 452
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 74
Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Phe Pro Leu Val Ser Cys Glu Asn
1 5 10 15
Ser Pro Ser Asp Thr Ser Ser Val Ala Val Gly Cys Leu Ala Gln Asp
20 25 30
Phe Leu Pro Asp Ser Ile Thr Leu Ser Trp Lys Tyr Lys Asn Asn Ser
35 40 45
Asp Ile Ser Ser Thr Arg Gly Phe Pro Ser Val Leu Arg Gly Gly Lys
50 55 60
Tyr Ala Ala Thr Ser Gln Val Leu Leu Pro Ser Lys Asp Val Met Gln
65 70 75 80
Gly Thr Asp Glu His Val Val Cys Lys Val Gln His Pro Asn Gly Asn
85 90 95
Lys Glu Lys Asn Val Pro Leu Pro Val Ile Ala Glu Leu Pro Pro Lys
100 105 110
Val Ser Val Phe Val Pro Pro Arg Asp Gly Phe Phe Gly Asn Pro Arg
115 120 125
Lys Ser Lys Leu Ile Cys Gln Ala Thr Gly Phe Ser Pro Arg Gln Ile
130 135 140
Gln Val Ser Trp Leu Arg Glu Gly Lys Gln Val Gly Ser Gly Val Thr
145 150 155 160
Thr Asp Gln Val Gln Ala Glu Ala Lys Glu Ser Gly Pro Thr Thr Tyr
165 170 175
Lys Val Thr Ser Thr Leu Thr Ile Lys Glu Ser Asp Trp Leu Gly Gln
180 185 190
Ser Met Phe Thr Cys Arg Val Asp His Arg Gly Leu Thr Phe Gln Gln
195 200 205
Asn Ala Ser Ser Met Cys Val Pro Asp Gln Asp Thr Ala Ile Arg Val
210 215 220
Phe Ala Ile Pro Pro Ser Phe Ala Ser Ile Phe Leu Thr Lys Ser Thr
225 230 235 240
Lys Leu Thr Cys Leu Val Thr Asp Leu Thr Thr Tyr Asp Ser Val Thr
245 250 255
Ile Ser Trp Thr Arg Gln Asn Gly Glu Ala Val Lys Thr His Thr Asn
260 265 270
Ile Ser Glu Ser His Pro Asn Ala Thr Phe Ser Ala Val Gly Glu Ala
275 280 285
Ser Ile Cys Glu Asp Asp Trp Asn Ser Gly Glu Arg Phe Thr Cys Thr
290 295 300
Val Thr His Thr Asp Leu Pro Ser Pro Leu Lys Gln Thr Ile Ser Arg
305 310 315 320
Pro Lys Gly Val Ala Leu His Arg Pro Asp Val Tyr Leu Leu Pro Pro
325 330 335
Ala Arg Glu Gln Leu Asn Leu Arg Glu Ser Ala Thr Ile Thr Cys Leu
340 345 350
Val Thr Gly Phe Ser Pro Ala Asp Val Phe Val Gln Trp Met Gln Arg
355 360 365
Gly Gln Pro Leu Ser Pro Glu Lys Tyr Val Thr Ser Ala Pro Met Pro
370 375 380
Glu Pro Gln Ala Pro Gly Arg Tyr Phe Ala His Ser Ile Leu Thr Val
385 390 395 400
Ser Glu Glu Glu Trp Asn Thr Gly Glu Thr Tyr Thr Cys Val Ala His
405 410 415
Glu Ala Leu Pro Asn Arg Val Thr Glu Arg Thr Val Asp Lys Ser Thr
420 425 430
Gly Lys Pro Thr Leu Tyr Asn Val Ser Leu Val Met Ser Asp Thr Ala
435 440 445
Gly Thr Cys Tyr
450
<210> 75
<400> 75
000
<210> 76
<211> 137
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 76
Gln Glu Asp Glu Arg Ile Val Leu Val Asp Asn Lys Cys Lys Cys Ala
1 5 10 15
Arg Ile Thr Ser Arg Ile Ile Arg Ser Ser Glu Asp Pro Asn Glu Asp
20 25 30
Ile Val Glu Arg Asn Ile Arg Ile Ile Val Pro Leu Asn Asn Arg Glu
35 40 45
Asn Ile Ser Asp Pro Thr Ser Pro Leu Arg Thr Arg Phe Val Tyr His
50 55 60
Leu Ser Asp Leu Cys Lys Lys Cys Asp Pro Thr Glu Val Glu Leu Asp
65 70 75 80
Asn Gln Ile Val Thr Ala Thr Gln Ser Asn Ile Cys Asp Glu Asp Ser
85 90 95
Ala Thr Glu Thr Cys Tyr Thr Tyr Asp Arg Asn Lys Cys Tyr Thr Ala
100 105 110
Val Val Pro Leu Val Tyr Gly Gly Glu Thr Lys Met Val Glu Thr Ala
115 120 125
Leu Thr Pro Asp Ala Cys Tyr Pro Asp
130 135
<210> 77
<400> 77
000
<210> 78
<211> 353
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 78
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Cys Ser Thr
1 5 10 15
Gln Pro Asp Gly Asn Val Val Ile Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
20 25 30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Gly Val
35 40 45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
50 55 60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Leu Ala Gly
65 70 75 80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
85 90 95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro
100 105 110
Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro Ser Cys Cys His Pro Arg Leu Ser
115 120 125
Leu His Arg Pro Ala Leu Glu Asp Leu Leu Leu Gly Ser Glu Ala Asn
130 135 140
Leu Thr Cys Thr Leu Thr Gly Leu Arg Asp Ala Ser Gly Val Thr Phe
145 150 155 160
Thr Trp Thr Pro Ser Ser Gly Lys Ser Ala Val Gln Gly Pro Pro Glu
165 170 175
Arg Asp Leu Cys Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu Pro Gly Cys
180 185 190
Ala Glu Pro Trp Asn His Gly Lys Thr Phe Thr Cys Thr Ala Ala Tyr
195 200 205
Pro Glu Ser Lys Thr Pro Leu Thr Ala Thr Leu Ser Lys Ser Gly Asn
210 215 220
Thr Phe Arg Pro Glu Val His Leu Leu Pro Pro Pro Ser Glu Glu Leu
225 230 235 240
Ala Leu Asn Glu Leu Val Thr Leu Thr Cys Leu Ala Arg Gly Phe Ser
245 250 255
Pro Lys Asp Val Leu Val Arg Trp Leu Gln Gly Ser Gln Glu Leu Pro
260 265 270
Arg Glu Lys Tyr Leu Thr Trp Ala Ser Arg Gln Glu Pro Ser Gln Gly
275 280 285
Thr Thr Thr Phe Ala Val Thr Ser Ile Leu Arg Val Ala Ala Glu Asp
290 295 300
Trp Lys Lys Gly Asp Thr Phe Ser Cys Met Val Gly His Glu Ala Leu
305 310 315 320
Pro Leu Ala Phe Thr Gln Lys Thr Ile Asp Arg Leu Ala Gly Lys Pro
325 330 335
Thr His Val Asn Val Ser Val Val Met Ala Glu Val Asp Gly Thr Cys
340 345 350
Tyr
<210> 79
<211> 340
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 79
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Asp Ser Thr
1 5 10 15
Pro Gln Asp Gly Asn Val Val Val Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
20 25 30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Asn Val
35 40 45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
50 55 60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Pro Asp Gly
65 70 75 80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
85 90 95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Pro Pro Pro Pro Cys Cys His Pro
100 105 110
Arg Leu Ser Leu His Arg Pro Ala Leu Glu Asp Leu Leu Leu Gly Ser
115 120 125
Glu Ala Asn Leu Thr Cys Thr Leu Thr Gly Leu Arg Asp Ala Ser Gly
130 135 140
Ala Thr Phe Thr Trp Thr Pro Ser Ser Gly Lys Ser Ala Val Gln Gly
145 150 155 160
Pro Pro Glu Arg Asp Leu Cys Gly Cys Tyr Ser Val Ser Ser Val Leu
165 170 175
Pro Gly Cys Ala Gln Pro Trp Asn His Gly Glu Thr Phe Thr Cys Thr
180 185 190
Ala Ala His Pro Glu Leu Lys Thr Pro Leu Thr Ala Asn Ile Thr Lys
195 200 205
Ser Gly Asn Thr Phe Arg Pro Glu Val His Leu Leu Pro Pro Pro Ser
210 215 220
Glu Glu Leu Ala Leu Asn Glu Leu Val Thr Leu Thr Cys Leu Ala Arg
225 230 235 240
Gly Phe Ser Pro Lys Asp Val Leu Val Arg Trp Leu Gln Gly Ser Gln
245 250 255
Glu Leu Pro Arg Glu Lys Tyr Leu Thr Trp Ala Ser Arg Gln Glu Pro
260 265 270
Ser Gln Gly Thr Thr Thr Phe Ala Val Thr Ser Ile Leu Arg Val Ala
275 280 285
Ala Glu Asp Trp Lys Lys Gly Asp Thr Phe Ser Cys Met Val Gly His
290 295 300
Glu Ala Leu Pro Leu Ala Phe Thr Gln Lys Thr Ile Asp Arg Met Ala
305 310 315 320
Gly Lys Pro Thr His Val Asn Val Ser Val Val Met Ala Glu Val Asp
325 330 335
Gly Thr Cys Tyr
340
<210> 80
<211> 764
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 80
Met Leu Leu Phe Val Leu Thr Cys Leu Leu Ala Val Phe Pro Ala Ile
1 5 10 15
Ser Thr Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu
20 25 30
Gly Asn Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn
35 40 45
Arg His Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys
50 55 60
Ile Thr Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly
65 70 75 80
Arg Ala Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn
85 90 95
Ile Ala Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu
100 105 110
Gly Ile Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser
115 120 125
Gln Gly Pro Gly Leu Leu Asn Asp Thr Lys Val Tyr Thr Val Asp Leu
130 135 140
Gly Arg Thr Val Thr Ile Asn Cys Pro Phe Lys Thr Glu Asn Ala Gln
145 150 155 160
Lys Arg Lys Ser Leu Tyr Lys Gln Ile Gly Leu Tyr Pro Val Leu Val
165 170 175
Ile Asp Ser Ser Gly Tyr Val Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Arg Ile Arg
180 185 190
Leu Asp Ile Gln Gly Thr Gly Gln Leu Leu Phe Ser Val Val Ile Asn
195 200 205
Gln Leu Arg Leu Ser Asp Ala Gly Gln Tyr Leu Cys Gln Ala Gly Asp
210 215 220
Asp Ser Asn Ser Asn Lys Lys Asn Ala Asp Leu Gln Val Leu Lys Pro
225 230 235 240
Glu Pro Glu Leu Val Tyr Glu Asp Leu Arg Gly Ser Val Thr Phe His
245 250 255
Cys Ala Leu Gly Pro Glu Val Ala Asn Val Ala Lys Phe Leu Cys Arg
260 265 270
Gln Ser Ser Gly Glu Asn Cys Asp Val Val Val Asn Thr Leu Gly Lys
275 280 285
Arg Ala Pro Ala Phe Glu Gly Arg Ile Leu Leu Asn Pro Gln Asp Lys
290 295 300
Asp Gly Ser Phe Ser Val Val Ile Thr Gly Leu Arg Lys Glu Asp Ala
305 310 315 320
Gly Arg Tyr Leu Cys Gly Ala His Ser Asp Gly Gln Leu Gln Glu Gly
325 330 335
Ser Pro Ile Gln Ala Trp Gln Leu Phe Val Asn Glu Glu Ser Thr Ile
340 345 350
Pro Arg Ser Pro Thr Val Val Lys Gly Val Ala Gly Gly Ser Val Ala
355 360 365
Val Leu Cys Pro Tyr Asn Arg Lys Glu Ser Lys Ser Ile Lys Tyr Trp
370 375 380
Cys Leu Trp Glu Gly Ala Gln Asn Gly Arg Cys Pro Leu Leu Val Asp
385 390 395 400
Ser Glu Gly Trp Val Lys Ala Gln Tyr Glu Gly Arg Leu Ser Leu Leu
405 410 415
Glu Glu Pro Gly Asn Gly Thr Phe Thr Val Ile Leu Asn Gln Leu Thr
420 425 430
Ser Arg Asp Ala Gly Phe Tyr Trp Cys Leu Thr Asn Gly Asp Thr Leu
435 440 445
Trp Arg Thr Thr Val Glu Ile Lys Ile Ile Glu Gly Glu Pro Asn Leu
450 455 460
Lys Val Pro Gly Asn Val Thr Ala Val Leu Gly Glu Thr Leu Lys Val
465 470 475 480
Pro Cys His Phe Pro Cys Lys Phe Ser Ser Tyr Glu Lys Tyr Trp Cys
485 490 495
Lys Trp Asn Asn Thr Gly Cys Gln Ala Leu Pro Ser Gln Asp Glu Gly
500 505 510
Pro Ser Lys Ala Phe Val Asn Cys Asp Glu Asn Ser Arg Leu Val Ser
515 520 525
Leu Thr Leu Asn Leu Val Thr Arg Ala Asp Glu Gly Trp Tyr Trp Cys
530 535 540
Gly Val Lys Gln Gly His Phe Tyr Gly Glu Thr Ala Ala Val Tyr Val
545 550 555 560
Ala Val Glu Glu Arg Lys Ala Ala Gly Ser Arg Asp Val Ser Leu Ala
565 570 575
Lys Ala Asp Ala Ala Pro Asp Glu Lys Val Leu Asp Ser Gly Phe Arg
580 585 590
Glu Ile Glu Asn Lys Ala Ile Gln Asp Pro Arg Leu Phe Ala Glu Glu
595 600 605
Lys Ala Val Ala Asp Thr Arg Asp Gln Ala Asp Gly Ser Arg Ala Ser
610 615 620
Val Asp Ser Gly Ser Ser Glu Glu Gln Gly Gly Ser Ser Arg Ala Leu
625 630 635 640
Val Ser Thr Leu Val Pro Leu Gly Leu Val Leu Ala Val Gly Ala Val
645 650 655
Ala Val Gly Val Ala Arg Ala Arg His Arg Lys Asn Val Asp Arg Val
660 665 670
Ser Ile Arg Ser Tyr Arg Thr Asp Ile Ser Met Ser Asp Phe Glu Asn
675 680 685
Ser Arg Glu Phe Gly Ala Asn Asp Asn Met Gly Ala Ser Ser Ile Thr
690 695 700
Gln Glu Thr Ser Leu Gly Gly Lys Glu Glu Phe Val Ala Thr Thr Glu
705 710 715 720
Ser Thr Thr Glu Thr Lys Glu Pro Lys Lys Ala Lys Arg Ser Ser Lys
725 730 735
Glu Glu Ala Glu Met Ala Tyr Lys Asp Phe Leu Leu Gln Ser Ser Thr
740 745 750
Val Ala Ala Glu Ala Gln Asp Gly Pro Gln Glu Ala
755 760
<210> 81
<211> 585
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 81
Lys Ser Pro Ile Phe Gly Pro Glu Glu Val Asn Ser Val Glu Gly Asn
1 5 10 15
Ser Val Ser Ile Thr Cys Tyr Tyr Pro Pro Thr Ser Val Asn Arg His
20 25 30
Thr Arg Lys Tyr Trp Cys Arg Gln Gly Ala Arg Gly Gly Cys Ile Thr
35 40 45
Leu Ile Ser Ser Glu Gly Tyr Val Ser Ser Lys Tyr Ala Gly Arg Ala
50 55 60
Asn Leu Thr Asn Phe Pro Glu Asn Gly Thr Phe Val Val Asn Ile Ala
65 70 75 80
Gln Leu Ser Gln Asp Asp Ser Gly Arg Tyr Lys Cys Gly Leu Gly Ile
85 90 95
Asn Ser Arg Gly Leu Ser Phe Asp Val Ser Leu Glu Val Ser Gln Gly
100 105 110
Pro Gly Leu Leu Asn Asp Thr Lys Val Tyr Thr Val Asp Leu Gly Arg
115 120 125
Thr Val Thr Ile Asn Cys Pro Phe Lys Thr Glu Asn Ala Gln Lys Arg
130 135 140
Lys Ser Leu Tyr Lys Gln Ile Gly Leu Tyr Pro Val Leu Val Ile Asp
145 150 155 160
Ser Ser Gly Tyr Val Asn Pro Asn Tyr Thr Gly Arg Ile Arg Leu Asp
165 170 175
Ile Gln Gly Thr Gly Gln Leu Leu Phe Ser Val Val Ile Asn Gln Leu
180 185 190
Arg Leu Ser Asp Ala Gly Gln Tyr Leu Cys Gln Ala Gly Asp Asp Ser
195 200 205
Asn Ser Asn Lys Lys Asn Ala Asp Leu Gln Val Leu Lys Pro Glu Pro
210 215 220
Glu Leu Val Tyr Glu Asp Leu Arg Gly Ser Val Thr Phe His Cys Ala
225 230 235 240
Leu Gly Pro Glu Val Ala Asn Val Ala Lys Phe Leu Cys Arg Gln Ser
245 250 255
Ser Gly Glu Asn Cys Asp Val Val Val Asn Thr Leu Gly Lys Arg Ala
260 265 270
Pro Ala Phe Glu Gly Arg Ile Leu Leu Asn Pro Gln Asp Lys Asp Gly
275 280 285
Ser Phe Ser Val Val Ile Thr Gly Leu Arg Lys Glu Asp Ala Gly Arg
290 295 300
Tyr Leu Cys Gly Ala His Ser Asp Gly Gln Leu Gln Glu Gly Ser Pro
305 310 315 320
Ile Gln Ala Trp Gln Leu Phe Val Asn Glu Glu Ser Thr Ile Pro Arg
325 330 335
Ser Pro Thr Val Val Lys Gly Val Ala Gly Gly Ser Val Ala Val Leu
340 345 350
Cys Pro Tyr Asn Arg Lys Glu Ser Lys Ser Ile Lys Tyr Trp Cys Leu
355 360 365
Trp Glu Gly Ala Gln Asn Gly Arg Cys Pro Leu Leu Val Asp Ser Glu
370 375 380
Gly Trp Val Lys Ala Gln Tyr Glu Gly Arg Leu Ser Leu Leu Glu Glu
385 390 395 400
Pro Gly Asn Gly Thr Phe Thr Val Ile Leu Asn Gln Leu Thr Ser Arg
405 410 415
Asp Ala Gly Phe Tyr Trp Cys Leu Thr Asn Gly Asp Thr Leu Trp Arg
420 425 430
Thr Thr Val Glu Ile Lys Ile Ile Glu Gly Glu Pro Asn Leu Lys Val
435 440 445
Pro Gly Asn Val Thr Ala Val Leu Gly Glu Thr Leu Lys Val Pro Cys
450 455 460
His Phe Pro Cys Lys Phe Ser Ser Tyr Glu Lys Tyr Trp Cys Lys Trp
465 470 475 480
Asn Asn Thr Gly Cys Gln Ala Leu Pro Ser Gln Asp Glu Gly Pro Ser
485 490 495
Lys Ala Phe Val Asn Cys Asp Glu Asn Ser Arg Leu Val Ser Leu Thr
500 505 510
Leu Asn Leu Val Thr Arg Ala Asp Glu Gly Trp Tyr Trp Cys Gly Val
515 520 525
Lys Gln Gly His Phe Tyr Gly Glu Thr Ala Ala Val Tyr Val Ala Val
530 535 540
Glu Glu Arg Lys Ala Ala Gly Ser Arg Asp Val Ser Leu Ala Lys Ala
545 550 555 560
Asp Ala Ala Pro Asp Glu Lys Val Leu Asp Ser Gly Phe Arg Glu Ile
565 570 575
Glu Asn Lys Ala Ile Gln Asp Pro Arg
580 585
<210> 82
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 82
Met Asp Leu Met Cys Lys Lys Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu
1 5 10 15
Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser Gln Leu Gln Leu Gln Glu
20 25 30
Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys
35 40 45
Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ile Ser Lys Ser Ser Tyr Trp Gly Trp
50 55 60
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ser Ile Tyr
65 70 75 80
Tyr Ser Gly Ser Thr Phe Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr
85 90 95
Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser
100 105 110
Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Thr Val
115 120 125
Ala Glu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Ser
145
<210> 83
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 83
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
20 25 30
Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Ser Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser
100 105 110
Asn Trp Pro Leu Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg
115 120 125
Thr
<210> 84
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 84
Met Asp Leu Met Cys Lys Lys Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu
1 5 10 15
Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser Gln Leu Gln Leu Gln Glu
20 25 30
Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys
35 40 45
Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Arg Ser Asn Tyr Trp Gly Trp
50 55 60
Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Asn Val Tyr
65 70 75 80
Tyr Arg Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Ser Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr
85 90 95
Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser
100 105 110
Val Thr Val Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Ser Val
115 120 125
Ala Glu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Ser
145
<210> 85
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 85
Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
20 25 30
Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Ser Phe Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ser Pro Ala
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ser
100 105 110
Asp Trp Pro Leu Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg
115 120 125
Thr
<210> 86
<211> 154
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 86
Met Asp Leu Met Cys Lys Lys Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu
1 5 10 15
Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp Val Leu Ser Gln Leu Gln Leu Gln Glu
20 25 30
Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys
35 40 45
Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp
50 55 60
Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ser Ile His
65 70 75 80
Tyr Ser Gly Ser Thr Phe Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr
85 90 95
Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser
100 105 110
Val Thr Ala Ala Asp Thr Thr Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Gly Ser
115 120 125
Thr Val Val Arg Gly Val Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln
130 135 140
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser
145 150
<210> 87
<211> 131
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 87
Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser
20 25 30
Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Gly Ser Ser Pro Leu Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile
115 120 125
Lys Arg Thr
130
<210> 88
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 88
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Arg Tyr Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
85 90 95
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Glu Ser Ser Gly Trp Phe Gly Ala Phe Asp Tyr
115 120 125
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 89
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
多肽
<400> 89
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val
20 25 30
Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Ser
100 105 110
Leu Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg
115 120 125
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种用于抑制、延迟或减少患有癌症的受试者中恶性细胞生长的方法，所述方法包括向需要治疗的受试者施用联合疗法，所述联合疗法包含：
(a)有效量的特异性和激动性结合到DR5的二聚体IgA抗体或六聚体或五聚体IgM抗体或其多聚的抗原结合片段、变体或衍生物，其中所述IgA或IgM抗体或其片段的至少三个抗原结合结构域为DR5特异性和激动性的；以及
(b)有效量的化学治疗剂。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述化学治疗剂为DNA拓扑异构酶I抑制剂。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述DNA拓扑异构酶I抑制剂为喜树碱衍生物或其活性变体、异构体或盐。
4.如权利要求2所述的方法，其中所述拓扑异构酶I抑制剂包含伊立替康或拓扑替康。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述拓扑异构酶I抑制剂包含伊立替康。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述化学治疗剂包含核苷类似物或其活性变体、异构体或盐。
7.如权利要求6所述的方法，其中所述核苷类似物为吉西他滨。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述化学治疗剂为促凋亡剂。
9.如权利要求8所述的方法，其中所述促凋亡剂为BCL-2抑制剂或其活性变体、异构体或盐。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述BCL-2抑制剂为Venetoclax。
11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述抗体或其片段、变体或衍生物的至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个或十二个抗原结合结构域包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中所述VH和VL包含六个免疫球蛋白互补性决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3，其中所述HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3包含抗体的CDR，所述抗体分别包含VH和VL氨基酸序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5和SEQ IDNO:6；SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:15和SEQID NO:16；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26；SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30；SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:36；SEQ IDNO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42；SEQID NO:43和SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48；SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52；SEQ ID NO:53和SEQ IDNO:54；SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；SEQ ID NO:84和SEQID NO:85；SEQ ID NO:86和SEQ ID NO:87；或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；分别包含于SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18；或SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20中的VH和VL氨基酸序列；或ScFv序列SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ IDNO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72或SEQ ID NO:73，或在一个或多个所述CDR中具有一个或两个氨基酸置换的六个CDR。
12.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述抗体或其片段、变体或衍生物的至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个、至少九个、至少十个、至少十一个或十二个抗原结合结构域包含抗体VH和VL，其中所述VH和VL分别包含与以下至少90％同一性的氨基酸序列：SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；SEQID NO:5和SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；SEQID NO:15和SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26；SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29和SEQ IDNO:30；SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35和SEQID NO:36；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39和SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48；SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52；SEQ IDNO:53和SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；SEQID NO:84和SEQ ID NO:85；SEQ ID NO:86和SEQ ID NO:87；或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；其中VH和VL包含氨基酸序列，所述氨基酸序列与分别包含于SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18；或SEQ ID NO:19和SEQID NO:20中的VH及VL氨基酸序列至少90％同一性；或其中所述VH和VL包含在具有与以下至少90％同一性的氨基酸序列的ScFv中：SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQID NO:72或SEQ ID NO:73。
13.如权利要求12所述的方法，其中所述抗体或其片段、变体或衍生物的至少四个、至少十个或十二个抗原结合结构域包含抗体VH和VL区，所述抗体VH和VL区分别包含氨基酸序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85、或SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89，或分别包含于SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8中的VH和VL氨基酸序列。
14.如权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述抗体或其片段、变体或衍生物为二聚体IgA抗体，所述二聚体IgA抗体包含两个二价IgA结合单元或其片段以及J链或其片段或变体，其中每个结合单元包含两个IgA重链恒定区或其片段，所述IgA重链恒定区或其片段各自与抗原结合结构域缔合。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述IgA抗体或其片段还包含分泌组分、或其片段或变体。
16.如权利要求14或权利要求15所述的方法，其中所述IgA重链恒定区或其片段各自包含Cα1结构域、Cα2结构域和Cα3-tp结构域。
17.如权利要求14至16中任一项所述的方法，其中所述IgA重链恒定区为人IgA恒定区。
18.如权利要求14至17中任一项所述的方法，其中每个结合单元包含：两个IgA重链，所述IgA重链各自包含位于IgA恒定区或其片段的氨基端的VH；以及两个免疫球蛋白轻链，所述免疫球蛋白轻链各自包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基端的VL。
19.如权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述抗体或其片段、变体或衍生物为五聚体或六聚体IgM抗体，所述五聚体或六聚体IgM抗体分别包含五个或六个二价IgM结合单元，其中每个结合单元包含两个IgM重链恒定区或其片段，所述IgM重链恒定区或其片段各自与抗原结合结构域缔合，并且其中所述IgM重链恒定区或其片段各自包含Cμ1结构域、Cμ2结构域、Cμ3结构域和Cμ4-tp结构域。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述抗体或其片段、变体或衍生物为五聚体，并且还包含J链或其片段或其变体。
21.如权利要求19或权利要求20所述的方法，其中所述IgM重链恒定区为人IgM恒定区。
22.如权利要求19至21中任一项所述的方法，其中每个结合单元包含：两个IgM重链，所述IgM重链各自包含位于IgM恒定区或其片段的氨基端的VH；以及两个免疫球蛋白轻链，所述免疫球蛋白轻链各自包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基端的VL。
23.如权利要求1至22中任一项所述的方法，其中相对于单独施用所述抗体或其片段或化学治疗剂，施用所述联合疗法导致增强的疗效。
24.如权利要求23所述的方法，其中所述增强的疗效包含肿瘤生长速率降低、肿瘤消退或存活率增加。
25.如权利要求1至24中任一项所述的方法，其中所述受试者为人。
说明或声明(按照条约第19条的修改)
权利要求的修正根据专利合作条约第19款提交。
本文提供所提交的权利要求和所修正的权利要求之间的差异。
权利要求11-13由带有相同编号的修正权利要求来替换。
上述修正不超出所提交的国际申请的公开内容，并且相应地请求这些修正的条目。
实现上述修正的替换页随同提交。