阅读说明：本技术 对隐形眼镜不适易感的隐形眼镜佩戴者的识别 (Identification of contact lens wearer for susceptibility to contact lens discomfort ) 是由 劳拉·伊丽莎白·唐尼 大卫·查尔斯·杰克逊 阿尔吉斯·约纳斯·维恩格里斯 南希·J·基尔 茵 于 2019-03-06 设计创作，主要内容包括：描述用以识别对隐形眼镜不适易感的隐形眼镜佩戴者的方法和装置。所述方法和装置涉及自人获得泪膜样本和测定存在于所述泪膜样本中的白介素-17A的量。(Methods and devices are described to identify contact lens wearers who are not comfortable with contact lenses. The methods and devices involve obtaining a tear film sample from a human and determining the amount of interleukin-17A present in the tear film sample.)

对隐形眼镜不适易感的隐形眼镜佩戴者的识别

技术领域

本发明领域涉及用于识别易感染隐形眼镜不适的隐形眼镜佩戴者的方法和装置。

背景技术

发炎为通过曝露于潜在有害的刺激而引发的复杂的非特异性组织反应，且为若干包括干眼病^1,2、结膜松弛症³、眼敏感^4,5和睑炎⁴的眼表面病状的特征。在此等临床表现中，前眼反应典型地特征在于发炎的典型症状，包括发红、疼痛、肿胀、发热和正常功能的损失。此等临床症状伴随着眼表面细胞上诸如人白血球抗原(HLA-DR)⁶和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)⁷的发炎性生物标记的表达的变化。此外，存在泪膜组成的变化，包括促发炎细胞介素的上调^1,8,9，泪液脂质介体的变化¹⁰和增加的泪液蛋白酶活性(例如金属蛋白酶、MMP-9^3,4,11，和MMP-2¹²)。

尽管不复杂的隐形眼镜佩戴并不伴随有此等典型发炎症状，然而部分隐形眼镜佩戴者所经历的发炎会引起不适反应仍然存在争论。隐形眼镜不适为“特征在于与隐形眼镜佩戴相关的间歇性或持久的不利眼部感觉”的多因子病况²³。在美国，大致三百万人或每六个隐形眼镜佩戴者中有一个每年放弃隐形眼镜；不适为停止的主要原因²⁴。目前，此不适反应的病源学不明确。值得注意的是，由经历有症状的眼镜佩戴的患者报告的症状(例如眼刺激、燃烧、刺痛和疼痛)与和干眼病相关的症候学非常类似，认为其涉及发炎性覆盖²⁵。

部分临床资料支持在隐形眼镜佩戴期间存在低级亚临床前眼部发炎反应，所述反应可能被经历不适的人所夸大²⁶。隐形眼镜佩戴改变一系列泪膜介体的相对含量^27-31。然而，与其中泪液促发炎细胞介素含量提高以及牵涉到疾病过程的干眼病形成对比^1,2，尚未清楚地表明眼部不适与特异性炎性介体上调之间的关系^32,33。包括补体级联、激肽级联和组胺的主要泪膜介体的变化似乎并不与舒适程度相关联³⁴。已经提出神经激肽生长因子的作用³⁵，其可能诱发痛觉过敏和肥大细胞去颗粒³⁶，和促乳素诱导蛋白的作用，其调节泪腺中水的运输³⁷。其它潜在的分子候选物包含分解的脂质、白三烯-B4和过氧化产物，和酶，也就是分泌磷脂酶-A2³⁴。

将希望识别可能倾向于产生隐形眼镜不适的隐形眼镜佩戴者或预期的隐形眼镜佩戴者从而使得可采取主动的步骤改善此等患者的隐形眼镜佩戴体验。

背景技术参考文献引用随附在本发明的末尾。额外现有技术参考文献包含美国公开案第2014/0314798号、美国专利案第7,723,124号和WO 2017/116826。

发明内容

如本文所揭示，本发明是基于如下发现：隐形眼镜佩戴者或预期的隐形眼镜佩戴者可以根据存在于佩戴者泪膜中的白介素-17A(IL-17A)的量加以区别。使用此发现和本文揭示的本发明方法和装置，有可能通过赋予适于有症状隐形眼镜佩戴者或无症状隐形眼镜佩戴者的视力矫正解决方案来改进隐形眼镜产品。

在一个方面中，本发明提供一种确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的方法。所述方法包括将刺激传递至患者角膜感觉神经元以在患者中产生受刺激的泪液样本。在所述方法中，测定受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度。方法亦可包含可选的测定患者不受刺激的泪液样本IL-17A中基线浓度的步骤。若(i)受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，和/或(ii)受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度高于IL-17A基线浓度，则将患者归类为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。

在另一方面中，本发明提供一种确定患者倾向于无症状隐形眼镜佩戴者的方法。此方法包括确定患者不受刺激的泪液样本中IL-17A基线浓度的步骤。所述方法包括将刺激传递至患者角膜感觉神经元以在患者中产生受刺激的泪液样本和确定受刺激的泪液样本中IL-17A浓度的额外步骤。若受刺激的泪液样本中IL-17A浓度少于IL-17A基线浓度的150％，则患者归类为易感染为无症状隐形眼镜佩戴者。

在本发明的另一方面中，本发明提供一种试剂盒。

举例而言，确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的试剂盒包含特异性结合于IL-17A的抗体。使用所述试剂盒，若患者受刺激的泪液样本中IL-17A浓度高于预先确定与有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，则使用试剂盒确定高风险的有症状的隐形眼镜佩戴。

作为另一实例，确定患者倾向于无症状的隐形眼镜佩戴的试剂盒包含特异性结合于IL-17A的抗体。使用此试剂盒，若患者受刺激的泪液样本中IL-17A浓度低于患者不受刺激的泪液样本中IL-17A浓度，则使用试剂盒确定倾向于无症状隐形眼镜佩戴。

在另一方面中，本发明提供特异性结合IL-17A的抗体的用途，其用于制造用以诊断患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的装置。

本发明方法和装置的额外方面和实施例将自后继描述、实例、图式和权利要求书显而易见。如可自前述和以下描述了解，本文描述的每一个特征，和此类特征中的两者或更多者中的每一个包括于本发明的范畴内，其条件是包括在此组合中的特征彼此不会不相容。此外，任何特征或特征的组合可能特定地自本发明的任何实施例排除。

附图说明

图1描绘用以检测泪液样本中IL-17A的例示性免疫测定装置。

具体实施方式

进行有症状的软性隐形眼镜佩戴者中与无症状佩戴者相比的眼部发炎反应的免疫和临床表征以致力于洞察经历隐形眼镜不适的人中发生的发炎反应的性质。此工作产生有关解决以下所存在需求的方法、装置和试剂盒的本发明：改善可能易感染隐形眼镜不适的患者的隐形眼镜佩戴体验。本文揭示用以确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的方法、装置和试剂盒。有症状的隐形眼镜佩戴一般特征在于眼镜佩戴者已经在连续佩戴眼镜3小时或更长时间时经历不适。在一个方法中，自患者采集泪液样本，在采集所述样本之前其角膜和/或结膜尚未经历任何显著机械刺激持续诸如至少30分钟、1小时、2小时或4小时的时段。在一些方法中，在采集所述样本之前患者尚未佩戴隐形眼镜或尚未经历任何其它显著机械刺激至少12小时或16小时。在整个本发明中，当在第一值之前具有限定词来提供一连串数值时，除非上下文另外规定，否则限定词意欲隐含地在连续数值中的每一个值之前。由此举例而言，在上述时间表中，限定词“至少”隐含地先于各指定时段。为简单起见，如本文所使用，除非另外规定，否则提及“眼”是指角膜和/或结膜。所采集的泪液样本在本文中称作“不受刺激的泪液样本”。在采集不受刺激的泪液样本之前或之后，将显著机械刺激传递至患者的眼且采集“受刺激的泪液样本”。测定泪液样品中的每一者中的白介素-17A(IL-17A)的浓度，且若受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度高于不受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度(其在本文中称为IL-17A的“基线浓度”)，则将患者识别为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。

在对上述方法的修改中，收集不受刺激的泪液样本是可选的。若受刺激的泪液样本IL-17A的浓度处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，则将患者识别为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。此等用以确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的方法更详细地描述于下文中。在一些实例中，采集不受刺激的泪液样本，且若受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度是：1)处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，和2)高于IL-17A的基线浓度，则将患者识别为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。

本文亦揭示一种确定患者倾向于无症状隐形眼镜佩戴的方法。无症状隐形眼镜佩戴一般特征在于眼镜佩戴者在连续佩戴隐形眼镜至少8小时之后经历极少不适至无不适。所述方法包含如上文所描述和如下文更详细地描述自患者收集受刺激的泪液样品和不受刺激的泪液样品。测定各泪液样品中的IL-17A的浓度，且若受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度低于IL-17A的基线浓度或低于IL-17A的基线浓度特定百分比，则将患者识别为倾向于无症状隐形眼镜佩戴。举例而言，若受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度低于IL-17A的基线浓度200％或低于150％，则患者可能识别为倾向于无症状隐形眼镜佩戴。

本文进一步揭示一种对需要视力矫正的患者选择治疗的方法，其中所述方法包括可选地测定患者不受刺激的泪液样本中白介素-17A(IL-17A)的基线浓度；将刺激传递至患者角膜的感觉神经元以在患者中产生受刺激的泪液样本；收集受刺激的泪液样本；测定受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度；和当受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值和/或受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度高于IL-17A的基线浓度时，对患者开处治疗以预防或减少与隐形眼镜佩戴相关的不适。

本文还揭示一种用以治疗需要视力矫正的患者的方法，其中所述方法包括可选地测定患者不受刺激的泪液样本中白介素-17A(IL-17A)的基线浓度；将刺激传递至患者角膜的感觉神经元以在患者中产生受刺激的泪液样本；收集受刺激的泪液样本；测定受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度和浓度是否处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值和/或受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度是否高于IL-17A的基线浓度，且若如此，随后提供开处的隐形眼镜给患者用以视力矫正和投予神经性药剂、消炎剂、润湿滴眼剂或其任何组合或提供开处的眼镜片给患者用以视力矫正。

本文进一步揭示一种治疗需要视力矫正的患者的方法，其中所述方法包括可选地测定患者不受刺激的泪液样本中白介素-17A(IL-17A)的基线浓度；将刺激传递至患者角膜的感觉神经元以在患者中产生受刺激的泪液样本；收集受刺激的泪液样本；测定受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度；和当受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度处于或高于预先确定与对有症状的隐形眼镜佩戴的易感性相关的截止值和/或受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度高于IL-17A的基线浓度时，向患者提供治疗处方用以预防或减少与隐形眼镜佩戴相关的不适。

在本发明的任何方法中，受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度可以通过使受刺激的泪液样本与特异性结合IL-17A的抗体接触且检测已结合至IL-17A的抗体来测定。作为一选项，特异性结合IL-17A的抗体可以为免疫色谱测定的组分。

在本发明的任何方法中，可为患者开处或提供隐形眼镜用于视力矫正，和/或用于减少与隐形眼镜佩戴相关的不适的治疗可选自投予神经性药剂、消炎剂、润湿滴眼剂或其任何组合。

在本发明的任何方法中，用于预防或减少与隐形眼镜佩戴相关的治疗可以或包含对患者开处眼镜片以用于视力矫正。

在本发明的任何方法中，处方可以为用于视力矫正的隐形眼镜和/或投予神经性药剂、消炎剂、润湿滴眼剂或其任何组合。

在本发明的任何方法中，处方可以为用于视力矫正的眼镜片。

除非上下文另外规定，否则下列细节适用于以上所概括的方法。除非特征的特定组合为彼此独占式的或若上下文另外指明，否则在整个本发明中，提及“实例”或“具体实例”或类似片语意欲引入所述方法、装置等的特征(取决于上下文)，所述或所述特征可与此前描述或随后描述的实例(也就是特征)组合。如本文所使用，若患者的眼睛在收集泪液样本之前未经历显著机械刺激，则自患者所收集的泪液视为“不受刺激的”。如本文所使用，显著机械刺激是指对于眼睛的机械力，其可潜在地导致膜变形至活化多模式和/或机械感受器。在一些实例中，患者在收集不受刺激的泪液样本之前未经历显著机械刺激持续至少30分钟、1小时、2小时或4小时。显著机械刺激的实例包含隐形眼镜佩戴、曝露于有风的条件、摩擦眼睛、曝露于显著污染、化学品曝露和其它可能活化一或多个感觉神经元的刺激。此外，诸如过敏和结膜炎的病状亦可活化感受器，且由此较佳延迟收集不受刺激的泪液样本直至此等病状已清除之后。在一个实例中，患者在收集不受刺激的泪液样本之前未佩戴隐形眼镜持续至少12小时、16小时、24小时或48小时。

可使用任何适合的准许测量所收集样本中的IL-17A的方法收集泪液样本。在一个实例中，通过微毛细管收集泪液样本。在另一实例中，使用吸收剂材料条带收集泪液样本。用于收集泪液样品的合适的材料是此项技术中已知的(参见例如希雅(Sia)等人,《国际眼科临床研究期刊(Int J Opthalmol Clin Res)》(2016)3:048)。便利地，泪液收集装置可为如下文更详细地描述的用于测量泪液样本中IL-17A的测试试剂盒的一部分。在收集泪液样本期间，注意避开任何对于眼睛的刺激以避免反射流泪从而使得仅收集基础泪。可收集一只或两只眼睛的泪液。当收集来自两只眼睛的泪液时，可合并所收集的泪液产生单一样本。或者，可以测量两份收集到的泪液样品中的IL-17A浓度(也就是来自左眼的样本和来自右眼的样本)。在一个实例中，将通常为不受刺激的泪液样本的所收集到的第一泪液样本存储于冰箱中直至收集第二泪液样本(通常受刺激的泪液样本)从而使得可同时测试两份泪液样品中的IL-17A浓度。在另一实例中，所收集的第一泪液样本中的IL-17A浓度可在收集之后即刻加以测试，诸如60分钟内、30分钟内或10分钟内。

如本文所使用，“受刺激的泪液样本”是指自在收集泪液样本之前眼睛已经历显著机械刺激的患者收集的基础泪。通常，两只眼睛会经历相同机械刺激。受刺激的泪液样本可自一只眼睛或两只眼睛收集。若自两只眼睛收集，则可合并来自每只眼睛的泪液以产生单一受刺激的泪液样本，或其可单独地测试IL-17A浓度。在一个实例中，当单独地测试来自每只眼睛的泪液样本时，所测量的两个IL-17A浓度中的较高者可用于将患者归类为有症状的或无症状的。如同不受刺激的泪液样本一样，在泪液收集期间注意避免反射流泪。在一个实例中，隐形眼镜佩戴对眼睛提供显著机械刺激。在各个实例中，隐形眼镜在泪液样本收集之前佩戴至少2小时、4小时或6小时。在一些实例中，隐形眼镜自患者的眼睛移除且即刻地自移去的隐形眼镜收集受刺激的泪液样本。

在一些实例中，当刺激为隐形眼镜佩戴时，可在不同天收集不受刺激的泪液样本和受刺激的泪液样本。在此实例中，可在白天大致相同的时间收集两个样品。举例而言，可在距收集第一样本的当日时间±120分钟、±90分钟或±60分钟内收集第二样本。在一些实例中，在患者已苏醒大约2至6小时之后收集样品。在另一实例中，可在同一天收集不受刺激的泪液样本与受刺激的泪液样本两者。举例而言，可自患者收集不受刺激的泪液样本，随后使患者的眼睛经历显著机械刺激，诸如隐形眼镜佩戴至少2、4或6小时，随后收集受刺激的泪液样本。

除隐形眼镜佩戴外的刺激可用作用于产生受刺激的泪液样本的机械刺激，其限制条件为当在诸如以下实例1中所描述的临床研究中测试时，刺激在IL-17A浓度和CLDEQ-8得分之间产生显著相关性。

泪液样本中IL-17A的浓度可使用任何适合的方法来测定。例示性方法为此项技术中所熟知，包括细胞学珠粒数组、ELISA测定、诸如免疫色谱测定的侧流免疫测定、微流体(例如“芯片上的实验室”)免疫测定，等。细胞学珠粒数组的使用详述于以下实例1中。用于确定易感染有症状的隐形眼镜佩戴的试剂盒进一步在下文加以描述。词组“测定IL-17A的浓度”包含定量和/或定性测定两者。因此，在一个实例中，可测量泪液样本中IL-17A的浓度，通常以pg/ml为单位。在另一实例中，受刺激的泪液样本中IL-17A的量可能经测定高于或低于基线IL-17A浓度。在另一实例中，受刺激的泪液样本中IL-17A的量可能经测定高于或低于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值。

与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值可在诸如描述于下文实例1中的临床研究中预先确定。用于产生受刺激的泪液样本的通用方法中的变化可测定所选择的特定截止值。举例而言，用于生成受刺激的泪液样本的刺激类型和刺激的持续时间为可能影响受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度的因素。此外，如医疗诊断学领域中所理解，测试的所要特异性和灵敏度亦会考虑对所述方法的截止值的选择。在各个实例中，预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值为至少70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145或150pg/ml IL-17A。在一些实例中，预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值为至少75pg/ml、100pg/ml或125pg/ml，至多约350pg/ml或400pg/ml。在整个本发明中，除非上下文另外规定，否则当一系列数值中最后一个值之后为测量单位时，测量单位意欲隐含地跟随所述系列中的各值。因此，在上文列表中，单位pg/ml意欲跟随所列的各值(也就是70pg/ml、75pg/ml)等。

在测定患者的不受刺激的泪液样本中IL-17A的基线浓度的方法中，若受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度高于IL-17A的基线浓度，则患者可归类为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。在其它实例中，若受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度为基线浓度的至少125％、150％、175％、200％、225％、250％、275％或300％，则患者可归类为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。选择作为有症状的隐形眼镜佩戴的预测因子的IL-17A浓度的升高的量可能取决于用于产生受刺激的泪液样本的方法和方法所希望的特异性和灵敏度的程度。在另一实例中，若受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度为1)高于IL-17A的基线浓度和2)处于或高于与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值则患者可归类为易感染有症状的隐形眼镜佩戴。

本文所描述的方法有利地使眼睛护理专业人员能提供较好患者护理和管理，此举会引起较高的患者满意度和保持力。相比于确定为倾向于无症状隐形眼镜佩戴的患者，眼睛护理专业人员可能对确定为易感染有症状隐形眼镜佩戴的患者提供不同的愈后护理安排或建议。举例而言，可对确定为易感染有症状的隐形眼镜佩戴的患者开处更舒适、质优价高眼镜和/或眼睛治疗，诸如增进眼部舒适的润湿滴眼剂、诸如皮质类固醇的抗炎剂或其它可能减弱隐形眼镜不适的其它治疗。

如上所述，任何习知方法且特别地任何习知免疫测定方法可用于测定泪液样本中IL-17A的浓度。已发现受刺激的泪液样本中的IL-17A浓度与易感染有症状的隐形眼镜佩戴之间的关联使得能够设计具体地适于测试泪液样品用以识别倾向于无症状或有症状的隐形眼镜佩戴的患者的免疫测定试剂盒和装置。

在一个实例中，一种用于确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的试剂盒包含特异性结合于IL-17A的抗体，其中若患者受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度高于预先确定与有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，则使用所述试剂盒确定高风险的有症状的隐形眼镜佩戴。在各个实例中，截止值为至少70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145或150pg/ml IL-17A。用以确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的例示性试剂盒包含侧流色谱测试条带装置。参看图1，将泪液样本11涂覆至样本涂覆区域12，所述区域通常包含吸收材料。如图1中所描绘，样本涂覆区域可靠近试剂区域13且与试剂区域13流体连通。在其它实例中，样本可即刻地涂覆至试剂区域，也就是样本涂覆区域和试剂区域在测试装置的相同位置。两个此类实例在本文中视为样本涂覆区域与试剂区域流体连通。

在一个实例中，试剂区域13包含吸收材料，其中抗体结合物可释放地与其结合。抗体结合物包含与第一捕捉抗体15结合的可检测标记14，所述第一捕捉抗体特异性结合IL-17A。如本文所使用，术语“抗体”包含任何合适的抗体或抗体片段(例如多株、单株、Fab等)。当试剂区域由样本润湿时，抗体结合物自试剂区域释放且吸入测试条带16中且贯穿测试条带16，所述测试条带包含含有第二捕捉抗体18的测试区域17、所述第二捕捉抗体特异性结合存在于样本中的IL-17A。第二捕捉抗体通常在不同于第一捕捉抗体的抗原决定基处结合IL-17A。在一些实例中，第一捕捉抗体为单株抗体且第二捕捉抗体为多株抗体。若存在足够高浓度的IL-17A，则标记14会充分集中于测试区域17从而使得其可得以检测。

在样本和捕获抗体到达测试区域之后，剩余样本和抗体结合物会继续芯吸穿过测试条带到达对照区域20，在一个实例中，所述对照区域可包含结合至抗体结合物的对照抗体21。在此实例中，对照区域处标记14的检测指示测试装置正常运作。在其它实例中，对照区域可包含诸如酶或抗体的试剂，其与通常存在于泪液中的组分反应以提供指示测试正常运作的信号。在一些实例中，侧流色谱测试条带装置还可包括吸收垫22以吸收残余样本和/或液体不可渗透背衬或壳体23。

图1描绘泪液样本11中存在IL-17A 19。在足够高浓度的IL-17下，测试区域17处的标记将是可检测的。在一个实例中，存在于测试区域中的第一捕捉抗体的量可经选择从而使得仅当泪液样本中IL-17A的浓度等于或高于预先确定与有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值时，标记为可检测的。在此类实例中，存在于对照区域20中的对照抗体21的量可经选择以捕获一定量的结合物抗体，以提供表示预先确定与有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值的可检测信号的水平。在此类实例中，若结合至测试区域的标记的浓度等于或高于结合至对照区域的标记的浓度，则患者识别为对有症状的隐形眼镜佩戴易感。

适用于侧流色谱测试条带装置的多种可检测标记已为此项技术熟知。在一个实例中，可检测标记14当足够集中时为可视觉检测的。因为并不需要用以标记检测的特殊设备，所以诸如胶态金的可视觉检测标记特别地方便地用以在眼保健医师办公室中测试样本。在其它实例中，标记可为当酶的底物添加至测试条带时产生颜色的酶。在此类实例中，试剂盒可能另外包含含有底物的试剂。在已添加样本之后将试剂涂覆至测试条带，且使底物与酶标记反应充足时间量，然后读取测试结果。

应了解，通过图1所例示的免疫测定装置的替代物可用于本发明的实务中。作为替代实例，第一捕捉抗体与第二捕捉抗体两者可存在于试剂区域中。IL-17A，若存在于泪液样本中，则会与第一与第二捕获抗体两者形成免疫复合物。在此实例中，第一捕捉抗体可包含可检测标记，且测试区域可包含特异性结合第二捕捉抗体的分子。举例而言，第二捕捉抗体可经生物素标记且测试区域可包含抗生素蛋白、抗生蛋白链菌素、或另一生物素结合分子。在上文描述的实例中，且在本文未具体描述的其它实例中，统一特征为特异性结合IL-17A的抗体的用途，其用于制造用以诊断患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的装置。

用以确定易感染有症状或无症状的隐形眼镜佩戴的试剂盒将通常包含泪液收集装置，诸如微毛细管或吸收剂材料条带。在一些实例中，侧流色谱测试条带装置可经组态以在样本涂覆区域处容纳泪液收集装置。此类组态先前已经在此项技术中描述(例如参见美国专利案第7,723,124号，亦参见Quidel公司的)。

本发明亦提供用以确定患者倾向于无症状隐形眼镜佩戴的试剂盒，其中若患者受刺激的泪液样本IL-17A的浓度低于患者不受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度，则使用试剂盒确定倾向于无症状隐形眼镜佩戴。在一个实例中，试剂盒可包含含有两个侧流色谱测试条的装置，测试条为彼此平行的且包含于单一壳体内。将不受刺激的泪液样本涂覆至条带中的一者，且将受刺激的泪液样本涂覆至另一条带。壳体可在两个条带之间包含液体不可渗透间隔物以避免样本的交叉污染。测试条带中的每一者可含有如上文所描述的相同组成部分，例如样本涂覆区域、测试区域、和对照区域等。然而，在此实例中，若集中在用于受刺激的泪液样本的测试条带的测试区域的标记的量低于用于不受刺激的泪液样本的测试区域的量，则确定倾向于无症状隐形眼镜佩戴。

上述试剂盒或其部件中的任何一或多者可用于本文所描述的任一方法中。

本发明的附加方面

本发明亦涵盖本发明的以下方面。

一种确定患者易感染有症状的隐形眼镜佩戴的方法，所述方法包含：

a)可选地测定先前自所述患者获得的患者不受刺激的泪液样本中白介素-17A(IL-17A)的基线浓度；

b)在刺激所述患者角膜的感觉神经元之后测定先前自所述患者获得的受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度；和

c)若如下情况则将所述患者归类为易感染有症状的隐形眼镜佩戴

i)所述受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，和/或

ii)所述受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度高于IL-17A的所述基线浓度。

一种确定患者倾向于无症状的隐形眼镜佩戴者的方法，所述方法包含：

a)测定先前自所述患者获得的患者不受刺激的泪液样本中IL-17A的基线浓度；

b)在刺激所述患者角膜的感觉神经元之后测定先前自所述患者获得的受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度；和

c)若所述受刺激的泪液样本中IL-17A浓度少于IL-17A基线浓度的150％，则将所述患者归类为倾向于为无症状隐形眼镜佩戴者。

一种选择治疗有视力矫正需要的患者的方法，所述方法包含：

a)可选地测定先前自所述患者获得的患者不受刺激的泪液样本中白介素-17A(IL-17A)的基线浓度；

b)在刺激所述患者角膜的感觉神经元之后测定先前自所述患者获得的受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度；和；

c)在如下情况时向所述患者提供治疗处方以预防或减少与隐形眼镜佩戴相关的不适

i)所述受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度处于或高于预先确定与易感染有症状的隐形眼镜佩戴相关的截止值，和/或

ii)所述受刺激的泪液样本中IL-17A的浓度高于IL-17A的基线浓度。

此等附加方面中的任一者可选地包含参考本发明的其它方面并且具体而言参考本发明的其它方法揭示的一或多个附加特征，如在泪液样本的角膜刺激和/或收集为本发明的一部分的情况下。

下列实例阐明本发明的某些方面和优势，其应理解为未被限制。

实例1：

此项目是根据赫尔辛基宣言(Declaration of Helsinki)的原则进行，且经墨尔本人类研究伦理委员会(Melbourne Human Research Ethics Committee)(健康科学小组委员会(Health Sciences subcommittee),HREC#1443431)批准。所有参与者提供参与的书面知情同意。

目标：为进一步理解眼部发炎反应，在经历隐形眼镜不适的人中使用临床和免疫技术来测定。

设计：前瞻性、横截面临床研究。

参与者：此研究涉及38名全部时间、聚硅氧-水凝胶软性隐形眼镜佩戴者的成人参与者。参与者根据经验证的隐形眼镜干眼调查表(CLDEQ-8)²²评分(n＝17‘无症状的’，CLDEQ-8得分<9；n＝21‘有症状的’，CLDEQ-8得分≥13)分成小组。

方法：在相隔一周的两次研究访视时进行全面前眼检查(一次佩戴隐形眼镜且一次不佩戴隐形眼镜)。在第1次访视时，参与者现场没戴隐形眼镜参加，未佩戴至少24小时。得到书面知情同意，随后采取：全面眼科和医疗史、干眼症状评估(眼表面疾病指数，OSDI³⁸，和干眼中的症状评估，SANDE³⁹，调查表)和一系列临床方法。测试包含评估泪液容积渗透浓度、眼部发红、泪液稳定性、眼表面染色、睑板腺红外线成像、泪液产生和基础泪收集。如先前描述，使用玻璃微毛细管(Drummond Scientific 20μl MicroCap)自参与者眼睛的下颞盲路(cul de sac)收集基础泪样本(约5μl/眼睛)¹。监测泪液流动速率以排除由反射流泪引起的稀释效果。仅使用流动速率1至3μl/min的样本(也就是排除不到60秒内收集的任何3μl样本)。在收集之后，离心样本且存储于-80℃直至需要用以细胞介素分析。细胞介素的浓度是使用多重细胞学珠粒数组自基础泪测定。此方法涉及用以定量分析：IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α和IFN-γ(人Th1/Th2/Th17试剂盒，美国圣迭戈BD生物科学公司(BDBiosciences,San Diego,USA))的多重细胞学珠粒数组(CBA)。在Becton Dickinson FACSCanto II流式细胞仪(美国新泽西州富兰克林湖(Franklin Lakes,NJ,USA))上获得样本且使用美国BD公司(Becton Dickinson)FCAP阵列软件分析数据。在具有各细胞介素在基线处的可检测含量的个体中以相对于基线的百分比变化的形式测量泪液细胞介素含量的变化。

第2次访视，参与者佩戴其惯常的隐形眼镜。为将日变化的任何潜在的作用降至最低，第2次访视的访视时间是在第1次访视的近似相同日时间(±1小时)。要求参与者的第2次访视保证隐形眼镜佩戴几个小时(平均时段：6.6小时)。在两次访视进行类似评估。此外，第2次访视参与者回答调查表以定量眼镜不适的严重程度(经验证的隐形眼镜干眼调查表-8，CLDEQ-8和常规经设计‘带回家的调查表’(THQ)，包含100mm视觉仿真评分法以测量同时的‘隐形眼镜舒适’和‘隐形眼镜干燥’)。在两个时间点使用THQ记录隐形眼镜舒适测量值：(i)当早晨(AM)即将戴眼镜时，和(ii)在下午(PM)研究访视时。

统计分析：因为认为眼睛之间的共同属性为发炎反应，所以将来自单独参与者右眼和左眼的资料取平均值，得到各参数的单一值。使用GraphPad Prism 5软件包(美国圣迭戈GraphPad软件公司(GraphPad Software,San Diego,USA))分析资料。描述性统计概括为参数资料的平均值±SEM。数据常态性是使用达戈斯蒂诺(D'Agostino)和皮尔森(Pearson)公共汽车测试进行评估。各组之间的比较是按需要使用史都登氏(Student's)t检定、变异数分析(ANOVA)或曼惠特尼(Mann-Whitney)U检定进行。卡方检定是用于比较离散变量。使用斯皮尔曼(Spearman)(r_s)相关系数研究成对相关性。统计显著性采用0.05的α值。

结果：在基线处，无症状与有症状的隐形眼镜佩戴者之间不存在主要临床征象的显著差异(p>0.05)且不存在指示干眼病的征象。经历隐形眼镜不适的人具有较高含量的IL-17A(122.6±23.7相对于44.0±10.0pg/mL，p＝0.02)和在眼镜佩戴几个小时之后的减少的泪液稳定性(6.3±1.1相对于10.4±1.6秒，p＝0.03)。泪液IL-17A含量与I-SOD(r＝0.43，p＝0.01)和CLDEQ-8得分(r＝0.40，p＝0.01)相关。

结论：隐形眼镜佩戴不适在具有正常泪膜容积渗透浓度且无干眼病的临床征象的人中产生，且与泪膜中较高含量的促发炎细胞介素IL-17A相关联。此研究结果提供不适反应与低级眼表面发炎之间关联的证据。

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