安乃近杂质的分离方法
阅读说明：本技术 安乃近杂质的分离方法 (Method for separating analgin impurity ) 是由 张富强 吴辉 常森 易晓清 于 2020-06-24 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种安乃近杂质的分离方法,其特征是包括如下几个步骤：(1)将安乃近与配量溶剂混合均匀,然后升温溶解,加入配量活性炭,然后热滤,最后滤液浓缩；(2)用甲醇溶解步骤(1)中的浓缩滤液,用硅胶板分离,选取目标层刮板,用配量甲醇溶解,过滤,浓缩得到目标物粗品；(3)目标物粗品用制备液相分离收集最大极性组分流动相,浓缩得到目标杂质；通过对未知杂质进行定性,因而可以追溯其产生的原因,通过进一步优化工艺避免此杂质的产生,最终进一步提高了产品质量。(The invention provides a separation method of analgin impurities, which is characterized by comprising the following steps: (1) uniformly mixing analgin and a proportioning solvent, heating to dissolve, adding a proportioning activated carbon, performing heat filtration, and finally concentrating a filtrate; (2) dissolving the concentrated filtrate obtained in the step (1) by using methanol, separating by using a silica gel plate, selecting a target layer scraper, dissolving by using proportioning methanol, filtering, and concentrating to obtain a target crude product; (3) separating the crude product of the target product by using a prepared liquid phase, collecting a mobile phase with the maximum polar component, and concentrating to obtain target impurities; by carrying out qualitative analysis on unknown impurities, the generation reason can be traced, the generation of the impurities can be avoided by further optimizing the process, and the product quality is finally further improved.)
技术领域
本发明为安乃近杂质的分离方法，属于药物合成技术领域。
背景技术
安乃近为常见处方医保药品。为氨基比林和亚硫酸钠相结合的化合物，易溶于水，解热、镇痛作用较氨基比林快而强。一般不作首选用药，仅在急性高热、病情急重，又无其他有效解热药可用的情况下用于紧急退热。
安乃近是20世纪初发展起来的解热镇痛药，1950年我国上海五洲制药厂首先开始生产,在国内有60年的生产历史,是我国医药行业重要的出口创汇产品。
随着国内对原料药一致性评价的严格要求，我们必须对每一种原料药的有关物质进行研究，当我们用所有有关物质对照品对安乃近进行定位时，发现成品中时常会有几个极性非常大的未知杂质，当FDA对我公司安乃近产品进行审计时也提出了疑问，所以我们有必要对此未知杂质进行定性，本发明就是通过分离手段，制备得到其中一个杂质，并进行了结构确证。
只有对未知杂质进行定性后才能去追溯其产生的原因，通过进一步优化工艺避免此杂质的产生，最终进一步提高产品质量。所以对未知杂质的定性研究对提高产品质量的稳定性是非常有必要的，所以如何将安乃近中的杂质进行有效的分离，成为我们研究的课题。
发明内容
本发明提供了一种安乃近杂质的分离方法，其特征是包括如下几个步骤：
(1)将安乃近与配量溶剂混合均匀，然后升温溶解，加入配量活性炭，然后热滤，最后滤液浓缩；
(2)用甲醇溶解步骤(1)中的浓缩滤液，用硅胶板分离，选取目标层刮板，用配量甲醇溶解，过滤，浓缩得到目标物粗品；
(3)目标物粗品用制备液相分离收集最大极性组分流动相，浓缩得到目标杂质；
所述的步骤(1)中所选的溶剂为二氯甲烷，甲醇，乙醇中的一种，优选为甲醇；
所述的步骤(2)中所选的硅胶板厚度为0.5～1.5mm，展开剂采用乙酸乙酯和石油醚，乙酸乙酯和石油醚的体积比为1：3～10；
所述的硅胶板厚度为1mm，展开剂乙酸乙酯和石油醚的体积比为1：5；
所述的步骤(1)中所选的脱色温度为40～60℃；脱色时间为0.5～1.5h；活性炭用量与溶剂的重量比为0.1-0.5％；
步骤(3)中所选的制备液相流动相为甲醇，甲醇和水，乙腈中的一种；
所述的安乃近杂质的分离方法步骤(1)中所选的脱色温度为50℃；脱色时间为1h；活性炭用量与溶剂的重量比为0.3％；
步骤(3)中所选的制备液相流动相为甲醇和水；甲醇和水的体积比为98：2，95：5，90：10中的一种；
所述的制备液相流动相甲醇和水的体积比为95：5。
按照本发明提供的方法得到的安乃近杂质进行结构确证：
核磁共振谱
仪器型号：BrukerAVIII400M核磁共振仪
测试条件：溶剂DMSO；298K
测试项目：1H、13C、DEPT135、COSY、HSQC、HMBC
图谱见结构确证附图1～6，测试结果见下表1，2所示。
表1核磁共振1H、COSY谱数据列表
1H-NMR给出6组峰，其积分比(由低场至高场)为2：2：1：2：3：3。由化学位移、耦合常数和及COSY相关可知：
a.δ7.46(2H,m)为2，2’位质子信号峰,cosy谱显示δ7.46与δ7.38,7.24存在直接相关。
b.δ7.38(2H,m)为3,3’位质子信号峰,cosy谱显示δ7.38与δ7.46存在直接相关。
c.δ7.24(1H,m)为1位质子信号峰,cosy谱显示δ7.24与δ7.46存在直接相关。
d.δ3.82(2H,s)为8位质子信号峰。
e.δ2.87(3H,s)为9位质子信号峰。
f.δ2.74(3H,s)为10位质子信号峰。
表2核磁共振13C、HSQC、HMBC谱数据列表
13C-NMR给出10组峰。由化学位移和相应氢谱可知，本品结构中含2种伯碳、1种仲碳、3种叔碳和4种季碳。δ30～50为饱和碳信号，δ120～165为不饱和碳信号。
a.δ162.00为5位碳信号峰，季碳。
b.δ137.40为7位碳信号峰，季碳，HMBC表明δ137.40与δ3.82,2.87存在远程相关。
c.δ135.84为4位碳信号峰，季碳，HMBC表明δ135.84与δ7.46,7.38存在远程相关。
d.δ129.30为2,2’位碳信号峰，叔碳，HSQC表明δ129.30与δ7.46存在直接相关,HMBC表明δ129.30与δ7.46,7.24存在远程相关。
e.δ129.30为2,2’位碳信号峰，叔碳，HSQC表明δ129.30与δ7.46存在直接相关,HMBC表明δ129.30与δ7.46,7.24存在远程相关。
f.δ125.86为1位碳信号峰，叔碳，HSQC表明δ125.86与δ7.24存在直接相关，HMBC表明δ125.86与δ7.38质子存在远程相关。
g.δ123.58为6位碳信号峰，季碳，HMBC表明δ123.58与δ3.82,2.74存在远程相关。
h.δ123.10为3,3’位碳信号峰，叔碳，HSQC表明δ123.10与δ7.38存在直接相关，HMBC表明δ123.10与δ7.38,7.24质子存在远程相关。
i.δ47.99为8位碳信号峰，仲碳，HSQC表明δ47.99与δ3.82存在直接相关。
j.δ38.16为9位碳信号峰，伯碳，HSQC表明δ38.16与δ2.87存在直接相关。
k.δ33.03为10位碳信号峰，伯碳，HSQC表明δ33.03与δ2.74存在直接相关。
由NMR谱可知，本品的NMR数据与结构相符。
质谱
仪器：Waters，液相：AcquityArc；质谱：AcquityQDa
溶剂：甲醇
离子化方式：ESI(-)
表3质谱测定结果
由附图7可知，本品电离物的[M-H]-峰的质荷比为296.07。本品游离物的分子量为297.08，与推测结构的分子量相同。
综合解析
结合核磁及质谱分析，本化合物含有15个氢，12个碳，其中伯碳2个，仲碳1个，叔碳5个，季碳4个；质谱正离子模式显示本化合物准分子离子峰[M-H]峰的质荷比为296.07，综合分析，推测本化合物结构式为：
附图说明
附图1核磁氢谱谱图；
附图2核磁碳谱谱图；
附图3 Dept135谱谱图；
附图4 COSY谱谱图；
附图5 HSQC谱谱图；
附图6 HMBC谱谱图；
附图7高分辨质谱谱图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
将1g安乃近加至二氯甲烷(50mL)中，搅拌均匀，加入活性炭(0.04g,0.1％)，40℃保温搅拌0.5h。热滤，滤液浓缩得到粗品。
将残留物用10ml甲醇溶解，然后用1:3(体积比)乙酸乙酯和石油醚作为展开剂，将样品分散到10张厚度为0.5mm的20cm*20cmGF254硅胶板上进行爬板分离。最后收集最下面一层，用20ml甲醇搅拌萃取，过滤，浓缩后，待用。
用纯甲醇作为制备液相流动相，用流动相溶解上述浓缩后残留物，然后上样进行制备，收集目标物流动相，浓缩，TLC分析，杂质点非常多。
实施例2
将1g安乃近加至甲醇(50mL)中，搅拌均匀，加入活性炭(0.12g,0.3％)，50℃保温搅拌1h。热滤，滤液浓缩得到粗品。
将残留物用10ml甲醇溶解，然后用1:5(体积比)乙酸乙酯和石油醚作为展开剂，将样品分散到10张厚度为1mm的20cm*20cmGF254硅胶板上进行爬板分离。最后收集最下面一层，用20ml甲醇搅拌萃取，过滤，浓缩后，待用。
用甲醇和水＝98:2(体积比)作为制备液相流动相，用流动相溶解上述浓缩后残留物，然后上样进行制备，收集目标物流动相，浓缩得到8.7mg浅黄色固体，TLC分仍有明显杂质点。
实施例3
将1g安乃近加至甲醇(50mL)中，搅拌均匀，加入活性炭(0.12g,0.3％)，50℃保温搅拌1h。热滤，滤液浓缩得到粗品。
将残留物用10ml甲醇溶解，然后用1:5(体积比)乙酸乙酯和石油醚作为展开剂，将样品分散到10张厚度为1mm的20cm*20cmGF254硅胶板上进行爬板分离。最后收集最下面一层，用20ml甲醇搅拌萃取，过滤，浓缩后，待用。
用甲醇和水＝95:5(体积比)作为制备液相流动相，用流动相溶解上述浓缩后残留物，然后上样进行制备，收集目标物流动相，TLC分析比较纯，浓缩得到10.5mg类白色固体，进行结构确证，谱图见附图1～7。
实施例4
将1g安乃近加至甲醇(50mL)中，搅拌均匀，加入活性炭(0.12g,0.3％)，50℃保温搅拌1h。热滤，滤液浓缩得到粗品。
将残留物用10ml甲醇溶解，然后用1:5(体积比)乙酸乙酯和石油醚作为展开剂，将样品分散到10张厚度为1mm的20cm*20cmGF254硅胶板上进行爬板分离。最后收集最下面一层，用20ml甲醇搅拌萃取，过滤，浓缩后，待用。
用甲醇和水＝90:10(体积比)作为制备液相流动相，用流动相溶解上述浓缩后残留物，然后上样进行制备，收集目标物流动相，浓缩得到12.5mg黄色油状物，TLC分析杂质点较多。
实施例5
将1g安乃近加至乙醇(50mL)中，搅拌均匀，加入活性炭(0.2g,0.5％)，60℃保温搅拌1.5h。热滤，滤液浓缩得到粗品。
将残留物用10ml甲醇溶解，然后用1:10(体积比)乙酸乙酯和石油醚作为展开剂，将样品分散到10张厚度为1.5mm的20cm*20cmGF254硅胶板上进行爬板分离。最后收集最下面一层，用20ml甲醇搅拌萃取，过滤，浓缩后，待用。
用纯乙腈作为制备液相流动相，用流动相溶解上述浓缩后残留物，然后上样进行制备，收集目标物流动相，浓缩，TLC分析杂质较多。