一种抑制铁死亡的小分子化合物及其制备方法与应用
阅读说明：本技术 一种抑制铁死亡的小分子化合物及其制备方法与应用 (Micromolecular compound for inhibiting iron death and preparation method and application thereof ) 是由 杨胜勇 李琳丽 于 2020-02-18 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种抑制铁死亡的小分子化合物及其制备方法与应用,属于化学合成药物技术领域。该小分子化合物为式I所示的化合物、或其盐、或水合物、或其药物组合物。本发明化合物对铁死亡具有良好的抑制作用,同时,本发明化合物对于脑梗塞具有良好的抑制作用,特别是化合物49,抑制脑梗塞的效果显著。本发明化合物能够作为制备铁死亡抑制剂、治疗与铁死亡相关疾病药物和防治脑梗塞药物的主要活性成分,具有良好的药用潜力。同时,本发明提供的新化合物的制备方法简便,反应条件温和,便于操作和控制,能耗小,产率高,成本低,可适合产业化生产,制备得到的化合物生物活性较高,选择性强,类药性显著,具有广阔的市场前景。<Image he="403" wi="700" file="DDA0002386332080000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The invention provides a micromolecule compound for inhibiting iron death and a preparation method and application thereof, belonging to the technical field of chemical synthetic drugs. The small molecule compound is a compound shown in a formula I, or a salt or hydrate thereof, or a pharmaceutical composition thereof. The compound of the present invention has a good inhibitory effect on iron death, and at the same time, the compound of the present invention has a good inhibitory effect on cerebral infarction, and particularly compound 49 has a significant effect on the inhibition of cerebral infarction. The inventionThe compound can be used as a main active ingredient for preparing iron death inhibitors, medicaments for treating diseases related to iron death and medicaments for preventing and treating cerebral infarction, and has good medicinal potential. Meanwhile, the preparation method of the novel compound provided by the invention is simple and convenient, the reaction condition is mild, the operation and control are convenient, the energy consumption is low, the yield is high, the cost is low, the preparation method is suitable for industrial production, and the prepared compound has the advantages of high bioactivity, strong selectivity, remarkable drug-like property and wide market prospect.)
技术领域
本发明涉及化学合成药物技术领域，具体涉及一种抑制铁死亡的小分子化合物及其制备方法与应用。
背景技术
细胞铁死亡(Ferroptosis)是近年来才被发现的一种新的由铁依赖的氧化损伤引起的细胞死亡模式，与传统的凋亡、坏死和自噬死亡模式不同，这种死亡模式的典型特征为细胞质和脂质活性氧自由基增多、线粒体变小以及线粒体双层膜的密度增加。鉴于这种细胞死亡方式依赖于铁的存在，Dixon等人在2012年将其命名为“Ferroptosis”，即铁死亡。
细胞铁死亡与神经退行性、组织缺血再灌注损伤、脑卒中、心血管、肾衰竭以及糖尿病并发症等疾病的发生和发展密切相关，铁死亡抑制剂被认为可能是治疗这些疾病的潜在药物。
目前，Ferroptosis小分子抑制剂大多数是抗氧化剂或铁螯合剂。在这里，主要介绍三种具有特定抗铁死亡活性的化合物：
Ferrostatin：第一代Ferrostatin被称为Ferrostatin-1，在HT1080细胞中起抑制Erastin-和RSL3诱导的铁离子形成的作用。Ferrostain-1的活性主要取决于芳香胺，其特异性抑制脂质氧化引起的ROS的积累。与Ferrostatin-1相比，第二代(称为SRS11-92)和第三代Ferrostatins(称为SRS16-86)具有更好的血浆稳定性和代谢稳定性，并且，在体内能够显著防止组织损伤(例如急性肾损伤和缺血再灌注损伤)。
Liproxstatin-1：Liproxstatin-1可以阻止GPX4细胞中的ROS积累和细胞死亡。此外，Liproxstatin-1抑制FINs(例如，Erastin、RSL3和BSO)诱导的铁死亡。在诱导型GPX4小鼠中，腹腔给药Liproxstatin-1(10mg/kg)可延长动物对肾脏损伤的存活率。Liproxstatin-1也能保护小鼠免受缺血再灌注引起的肝损伤。
Zileuton：Zileuton是5-LOX的口服活性特异性抑制剂，但不是12/15-LOX的抑制剂。Zileuton通过抑制细胞溶质ROS的产生，在HT22细胞(小鼠海马细胞系)中提供了显著的保护免受谷氨酸盐和麦角菌素诱导的铁离子增多。
以上现有的铁死亡抑制剂其活性针对性较强，但活性并不高，还未见有针对脑卒中疾病的应用，因此，如何制备得到一种活性较高，且能够作为制备治疗脑卒中药物的铁死亡抑制剂，是亟待解决的难题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种抑制铁死亡的小分子化合物及其制备方法与应用。
本发明提供了一种式I所示的化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物：
其中，
R1独立为氢、酯基、-CF3、乙基、-OCF3、甲基、正丁基、异丙基、肽键、六元环、异丁基、羰基、氰基、硝基、醚键、氨基、
R2独立为氢、氨基或甲基；
R3独立为氢、氨基、羟基、硝基、醚键、-OCF3、甲基、新丁基、异丙基、苯基、-CF3、酯基、氰基、氟、
R4独立为氢、氨基、羟基、硝基、醚键、-OCF3、甲基、新丁基、异丙基、苯基、-CF3、酯基、氰基、 氟、
进一步地，
当R2为氨基时，R1、R3、R4均为氢；
或者，当R2为甲基时，R1为R3、R4均为氢；
或者，当R2、R3、R4均为氢时，R1任选自氢、酯基、-CF3、乙基、-OCF3、甲基、正丁基、异丙基、肽键、六元环、异丁基、羰基、
或者，当R2、R3、R4均为氢时，R1任选自其中Rx任选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6烯烃基、C2-C6炔烃基、氨基、氨基-C1-3烷基、-N-(C1-C3烷基)2、羟基、羟基-C1-C3烷基或羟基-C3-C6环烷基；Ry任选自氢、C2-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烯烃基或C1-C6炔烃基；
或者，当R1、R2、R3均为氢时，R4任选自氨基、羟基、硝基、醚键、-OCF3、甲基、新丁基、异丙基、苯基、-CF3、酯基、氰基、
或者，当R2为氢时，R1任选自氢、氰基、硝基、醚键，R3任选自氢、甲基、醚键、氟、新丁基，R4任选自氢、甲基、醚键、氟、新丁基；
或者，当R1和R2均为氢时，R3与R4均为新丁基；
或者，当R2为氢，R1为氰基时，R3为氢，R4为甲基或氟原子；
或者，当R2为氢，R1为硝基时，R3为氢，R4为甲基；
或者，当R2为氢，R1为醚键时，R3为氢或醚键，R4为醚键。
进一步地，所述化合物的结构为如下化合物之一：
本发明还提供了一种式II所示的化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物：
其中，
R5任选自
或者R5任选自
Ry任选自氢、C2-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烯烃基、C1-C6炔烃基。
进一步地，所述化合物的结构为如下化合物之一：
本发明还提供了一种式III所示的化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物：
其中，
R6任选自肽键、氨基或
或者R6为Rx任选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C2-C6烯烃基、C2-C6炔烃基、氨基、氨基-C1-3烷基、-N-(C1-C3烷基)2、羟基、羟基-C1-C3烷基或羟基-C3-C6环烷基。
进一步地，所述化合物的结构为如下化合物之一：
本发明还提供了一种前述的化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1：
以2-乙酰基吩噻嗪和4-甲基苯磺酰肼为原料，用MeOH溶解，加入催化剂HOAc，移至60℃反应，监控反应进程，待反应完毕后，冷却至室温，减压抽滤，漂洗至滤液无色，真空干燥即得中间体I；
步骤2：
将中间体I、原料A、三(二亚苄-BASE丙酮)二钯、三(二亚苄-BASE丙酮)二钯、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯和无水t-BuOLi用1,4-二氧六环溶解，置换氩气3次，移至70℃反应，监控反应进程，待反应完毕后，冷却至室温，过滤减压浓缩，萃取残余物，有机层浓缩后经柱层析分离得到目标产物化合物；
其中，R1、R2、R3、R4与前述的R1、R2、R3、R4相同；
优选地，所述步骤2中原料A为取代的溴化物，任选自包括以下结构化合物：
更优选地，
所述步骤1中，反应完成后的漂洗过程中，使用MeOH和乙醚漂洗；
和/或，所述步骤2中，反应完成后的萃取过程，使用饱和NaHCO3水溶液和DCM萃取；
和/或，所述监控反应进程通过TLC进行监控。
本发明提供了一种前述的化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤(1)：
以2-乙酰基吩噻嗪和4-甲基苯磺酰肼为原料，用MeOH溶解，加入催化剂HOAc，移至60℃反应，监控反应进程，待反应完毕后，冷却至室温，减压抽滤，漂洗至滤液无色，真空干燥即得中间体I；
步骤(2)：
将中间体I、原料A、三(二亚苄-BASE丙酮)二钯、三(二亚苄-BASE丙酮)二钯、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯和无水t-BuOLi用1,4-二氧六环溶解，置换氩气3次，移至70℃反应，监控反应进程，待反应完毕后，冷却至室温，过滤减压浓缩，萃取残余物，有机层浓缩后经柱层析分离得到目标产物化合物；
其中，R5与前述R5相同；
优选地，所述步骤(2)中原料A为取代的溴化物，任选自包括以下结构化合物：
更优选地，
所述步骤(1)中，反应完成后的漂洗过程中，使用MeOH和乙醚漂洗；
和/或，所述步骤(2)中，反应完成后的萃取过程，使用饱和NaHCO3水溶液和DCM萃取；
和/或，所述监控反应进程通过TLC进行监控。
本发明还提供了一种前述的化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤A：
以2-乙酰基吩噻嗪和4-甲基苯磺酰肼为原料，用MeOH溶解，加入催化剂HOAc，移至60℃反应，监控反应进程，待反应完毕后，冷却至室温，减压抽滤，漂洗至滤液无色，真空干燥即得中间体I；
步骤B：
将中间体I、原料A、三(二亚苄-BASE丙酮)二钯、三(二亚苄-BASE丙酮)二钯、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯和无水t-BuOLi用1,4-二氧六环溶解，置换氩气3次，移至70℃反应，监控反应进程，待反应完毕后，冷却至室温，过滤减压浓缩，萃取残余物，有机层浓缩后经柱层析分离得到目标产物化合物；
其中，R6与前述R6相同；
优选地，所述步骤B中原料A为取代的溴化物，任选自包括以下结构化合物：
更优选地，
所述步骤A中，反应完成后的漂洗过程中，使用MeOH和乙醚漂洗；
和/或，所述步骤B中，反应完成后的萃取过程，使用饱和NaHCO3水溶液和DCM萃取；
和/或，所述监控反应进程通过TLC进行监控。
本发明还提供了前述化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物在制备抑制细胞铁死亡的靶向药物中的用途；
优选的，所述药物是治疗神经退行性疾病、脑卒中、心血管疾病、帕金森综合征、肾衰竭、糖尿病并发症和/或癌症的药物；
更优选地，所述脑卒中为脑梗塞、出血性脑卒中、脑缺血再灌注损伤。
本发明还提供了前述的化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物在制备口服或静脉注射制剂中的用途，所述口服或静脉注射制剂包含至少一种前述的化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物，以及药物可接受的赋形剂和/或佐剂。
本发明还提供了一种铁死亡抑制剂，它是以前述的化合物、或其盐、或其水合物、或其溶剂化物、或其药物组合物为活性成分制备而成。
本发明中提供的化合物和衍生物可以根据IUPAC(国际纯粹与应用化学联合会)或CAS(化学文摘服务社，Columbus，OH)命名系统命名。
关于本发明的使用术语的定义：除非另有说明，本文中基团或者术语提供的初始定义适用于整篇说明书的该基团或者术语；对于本文没有具体定义的术语，应该根据公开内容和上下文，给出本领域技术人员能够给予它们的含义。
“取代”是指分子中的氢原子被其它不同的原子或分子所替换。
本发明中所述化合物的结构均是指能够稳定存在的结构。
本发明中碳氢基团中碳原子含量的最小值和最大值通过前缀表示，例如，前缀(Ca～Cb)烷基表明任何含“a”至“b”个碳原子的烷基。因此，例如，C1～C6烷基是指包含1～6个碳原子的直链或支链烷基；C2～C6烯烃基是指包含2～6个碳原子的直链或支链烯烃基；C2～C6炔烃基是指包含2～6个碳原子的直链或支链炔烃基；C3～C6环烷基是指由3～6个碳原子组成的单环或多环环烷基，其中该环烷基中无双键。
本发明中“氨基-C1-3烷基”为-NHRz，其中Rz为C1～C3烷基；“-N-(C1～C3烷基)2”为-NRz1Rz2，其中Rz1和Rz2均为C1～C3烷基；“羟基-C1-C3烷基”、“羟基-C3-C6环烷基”为-ORa，其中Ra为C1～C3烷基或C3～C6环烷基。
本发明中“新丁基”是指“叔丁基”。
本发明合成了一类新的能够抑制铁死亡的化合物，这些化合物对铁死亡具有良好的抑制作用，特别是化合物9、43、49、50和59对于铁死亡的抑制作用效果显著。同时，本发明化合物对于脑梗塞具有良好的抑制作用，特别是化合物49，抑制脑梗塞的效果显著。本发明化合物能够作为制备铁死亡抑制剂、治疗与铁死亡相关疾病药物和防治脑梗塞药物的主要活性成分，具有良好的药用潜力。同时，本发明提供的新化合物的制备方法简便，反应条件温和，便于操作和控制，能耗小，产率高，成本低，可适合产业化生产，制备得到的化合物生物活性较高，选择性强，类药性显著，具有广阔的市场前景。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的
具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为本发明中化合物9、49、50、59与阳性对照组抑制Ferroptosis的曲线图。
图2为本发明第49号化合物、CN201810393712.2第38号化合物、阳性药物(Liproxstatin-1和Butyphthalide)对脑卒中治疗的脑梗塞范围统计图；图中，Control为模型对照组，No.1为阳性药物一组Liproxstain-1，No.2为阳性药物二组Butyphthalide，No.3为CN201810393712.2第38号化合物组，No.4为本发明第49号化合物组。
图3为本发明第49号化合物、CN201810393712.2第38号化合物、阳性药物(Liproxstatin-1和Butyphthalide)对脑卒中治疗的脑梗塞抑制率统计图；图中，Control为模型对照组，No.1为阳性药物一组Liproxstain-1，No.2为阳性药物二组Butyphthalide，No.3为CN201810393712.2第38号化合物组，No.4为本发明第49号化合物组。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
实施例1、(E)-N'-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)亚乙基)-4-甲基苯磺酰肼(中间体I)的合成
2-乙酰基吩噻嗪(10.0g，41.44mmol，1.0eq)和4-甲基苯磺酰肼(7.72g，41.44mmol，1.0eq)用100mLMeOH溶解，加入1mLHOAc，移至60℃反应，TLC监控反应，约4h后反应完毕。冷却至室温，黄色固体出现，减压抽滤，用MeOH和乙醚洗至滤液无色，真空干燥即得中间体I(15g)，产率为88.4％。中间体I的1HNMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),8.70(s,1H),7.82(d,J＝8.3Hz,2H),7.40(d,J＝8.1Hz,2H),7.06(d,J＝1.7Hz,1H),6.98(dd,J＝8.0,1.7Hz,2H),6.89(dd,J＝7.2,3.0Hz,2H),6.75(dd,J＝7.5,0.9Hz,1H),6.72–6.62(m,1H),2.37(s,3H),2.08(s,3H)。
MS m/z(ESI)：410.1[M+H]+。
实施例2、2-(1-苯基乙基)-10H-吩噻嗪(化合物1)的制备
合成路线如下：
中间体I(120mg，0.293mmol，1.2eq)，溴苯(38mg，0.244mmol，1.0eq),三(二亚苄-BASE丙酮)二钯(0)Pd2(dpa)3(24mg，0.03mmol，0.1eq)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯X-phos(25mg，0.03mmol，0.2eq)和无水t-BuOLi(43mg，0.537mmol，2.2eq)用10mL1,4-二氧六环溶解，置换氩气3次，移至70℃反应，TLC监控反应，约4h后反应完毕。冷却至室温，用硅藻土过滤，反应液减压浓缩，残余物用饱和NaHCO3水溶液/DCM萃取(体积比1：1)，有机层浓缩后经柱层析分离得到目标产物化合物1(58mg)，收率为74.8％。
化合物1的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(s,1H),7.29(t,J＝7.4Hz,2H),7.22(d,J＝7.1Hz,2H),7.18(d,J＝7.1Hz,1H),6.95(dd,J＝10.9,4.4Hz,1H),6.91–6.85(m,1H),6.82(d,J＝7.9Hz,1H),6.73(td,J＝7.6,1.0Hz,1H),6.71–6.62(m,2H),6.54(d,J＝1.4Hz,1H),4.00(q,J＝7.1Hz,1H),1.50(d,J＝7.2Hz,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C20H17NS[M+H]+303.1082found:403.1085。
实施例3、甲基4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯甲酸(化合物2)的制备
合成线路如下：
化合物2的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.97(d,＝8.J 0Hz,2H),7.46(d,J＝7.8Hz,2H),7.02–6.95(m,1H),6.93(dd,J＝13.6,6.1Hz,2H),6.75(t,J＝6.6Hz,2H),6.63(d,J＝7.7Hz,1H),6.55(s,1H),5.54(d,J＝14.4Hz,2H),3.87(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H17NO2S[M+H]+360.1058found:360.1062。
具体制备方法与化合物1相同，收率为84.1％。
实施例4、2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物3)的制备
合成线路如下：
化合物3的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.75(d,J＝8.2Hz,2H),7.53(d,J＝8.0Hz,2H),7.01–6.88(m,3H),6.81–6.72(m,2H),6.62(dd,J＝7.9,0.9Hz,1H),6.54(d,J＝1.7Hz,1H),5.59(s,1H),5.51(s,1H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H14F3NS[M+H]+370.0877found:370.0875。
具体制备方法与化合物1相同，收率为73.1％。
实施例5、2-(1-(4-乙基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物4)的制备
合成线路如下：
化合物4的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.22(s,4H),6.96(dd,J＝7.6,1.3Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.75(dd,J＝7.6,1.4Hz,2H),6.63(dd,J＝7.9,1.0Hz,1H),6.58(d,J＝1.8Hz,1H),5.37(dd,J＝11.5,0.9Hz,2H),2.62(q,J＝7.6Hz,2H),1.20(t,J＝7.6Hz,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H19NS[M+H]+330.1316found:330.1318。
具体制备方法与化合物1相同。收率为72.8％。
实施例6、2-(1-(4-三氟甲氧基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物5)的制备
合成线路如下：
化合物5的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,2H),7.37(d,J＝8.4Hz,2H),6.98(dd,J＝11.3,3.9Hz,1H),6.96–6.88(m,2H),6.81–6.70(m,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.56(d,J＝1.6Hz,1H),5.47(d,J＝20.6Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H19NS[M+H]+386.4122found:386.4125。
具体制备方法与化合物1相同。收率为63.4％。
实施例7、2-(1-(对甲苯)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物6)的制备
合成线路如下：
化合物6的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(s,1H),7.19(s,4H),6.97(dd,J＝11.3,3.9Hz,1H),6.95–6.88(m,2H),6.81–6.70(m,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.57(d,J＝1.6Hz,1H),5.36(d,J＝13.4Hz,2H),2.32(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H17NS[M+H]+316.1160found:316.1163。
具体制备方法与化合物1相同。收率为83.5％。
实施例8、2-(1-(4-丁基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物7)的制备
合成线路如下：
化合物7的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.27–7.15(m,4H),7.05–6.94(m,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.83–6.71(m,2H),6.63(d,J＝7.9Hz,1H),6.58(d,J＝1.6Hz,1H),5.37(d,J＝4.9Hz,2H),2.64–2.55(m,2H),1.56(dd,J＝15.2,7.8Hz,2H),1.33(dd,J＝14.8,7.4Hz,2H),0.91(t,J＝7.3Hz,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H23NS[M+H]+358.1629found:358.1630。
具体制备方法与化合物1相同。收率为68.5％。
实施例9、2-(1-(4-异丙基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物8)的制备
合成线路如下：
化合物8的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.34–7.16(m,4H),6.97(td,J＝7.9,1.3Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.75(dd,J＝10.8,4.4Hz,2H),6.63(d,J＝7.9Hz,1H),6.59(d,J＝1.7Hz,1H),5.37(d,J＝8.4Hz,2H),3.00–2.81(m,1H),1.22(d,J＝6.9Hz,6H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H21NS[M+H]+344.1473found:344.1476。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.2％。
实施例10、N-(4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)乙酰胺(化合物9)的制备
合成线路如下：
化合物9的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),8.56(s,1H),7.58(d,J＝8.5Hz,2H),7.24(d,J＝8.5Hz,2H),7.01–6.94(m,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.75(dd,J＝7.8,1.9Hz,2H),6.63(d,J＝7.4Hz,1H),6.58(d,J＝1.6Hz,1H),5.35(s,2H),2.05(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H18N2OS[M+H]+359.1218found:359.1220。
具体制备方法与化合物1相同。收率为75.7％。
实施例11、N-(4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)脲(化合物10)的制备
合成线路如下：
化合物10的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H),8.55(s,1H),7.40(d,J＝8.6Hz,2H),7.17(d,J＝8.6Hz,2H),7.05–6.94(m,1H),6.94–6.87(m,2H),6.78–6.71(m,2H),6.66–6.61(m,1H),6.59(d,J＝1.7Hz,1H),5.85(s,2H),5.31(d,J＝5.7Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H17N3OS[M+H]+360.1171found:360.1174。
具体制备方法与化合物1相同。收率为84.8％。
实施例12、2-(1-(4-环己基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物11)的制备
合成线路如下：
化合物11的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.22(s,4H),6.97(t,J＝7.6Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.79–6.70(m,2H),6.62(d,J＝7.8Hz,1H),6.58(d,J＝1.6Hz,1H),5.36(d,J＝2.6Hz,2H),1.80(d,J＝9.5Hz,4H),1.70(d,J＝12.7Hz,1H),1.39(d,J＝8.5Hz,4H),1.29–1.18(m,1H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C26H25NS[M+H]+384.1786found:384.1788。
具体制备方法与化合物1相同。收率为62.8％。
实施例13、2-(1-(4-异丁基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物12)的制备
合成线路如下：
化合物12的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.22(d,J＝8.1Hz,2H),7.16(d,J＝8.1Hz,2H),6.96(dd,J＝10.8,4.5Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.74(dd,J＝12.2,4.2Hz,2H),6.70–6.61(m,1H),6.59(d,J＝1.7Hz,1H),5.37(s,2H),2.46(d,J＝7.1Hz,2H),1.85(dt,J＝13.5,6.8Hz,1H),0.88(d,J＝6.6Hz,6H).
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H23NS[M+H]+358.1629found:358.1633。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.4％。
实施例14、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯甲醛(化合物13)的制备
合成线路如下：
化合物13的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.22(d,J＝8.1Hz,2H),7.16(d,J＝8.1Hz,2H),6.96(dd,J＝10.8,4.5Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.74(dd,J＝12.2,4.2Hz,2H),6.70–6.61(m,1H),6.59(d,J＝1.7Hz,1H),5.37(s,2H),2.46(d,J＝7.1Hz,2H),1.85(dt,J＝13.5,6.8Hz,1H),0.88(d,J＝6.6Hz,6H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H15NOS[M+H]+330.0953found:330.0955。
具体制备方法与化合物1相同。收率为79.8％。
实施例15、4-(4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)吗啉(化合物14)的制备
合成线路如下：
化合物14的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(s,1H),7.17(d,J＝8.7Hz,2H),7.00–6.87(m,5H),6.78–6.71(m,2H),6.63(d,J＝7.1Hz,1H),6.59(d,J＝1.6Hz,1H),5.27(d,J＝18.8Hz,2H),3.80–3.65(m,4H),3.21–3.10(m,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H22N2OS[M+H]+387.1531found:387.1533。
具体制备方法与化合物1相同。收率为74.2％。
实施例16、4-(4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)吗啉(化合物15)的制备
合成线路如下：
化合物15的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,1H),8.26(d,J＝7.7Hz,2H),7.64(dd,J＝19.7,8.5Hz,4H),7.46(d,J＝3.6Hz,4H),7.31(dt,J＝7.9,4.1Hz,2H),6.98(d,J＝7.9Hz,2H),6.93(d,J＝7.6Hz,1H),6.85(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),6.76(s,1H),6.71(d,J＝1.6Hz,1H),6.66(d,J＝7.9Hz,1H),5.56(d,J＝16.8Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C32H22N2S[M+H]+467.1582found:467.1583。
具体制备方法与化合物1相同。收率为79.8％。
实施例17、2-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯胺(化合物16)的制备
合成线路如下：
化合物16的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.09–7.02(m,1H),6.99–6.91(m,2H),6.91–6.85(m,2H),6.81(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),6.73(td,J＝7.6,1.1Hz,1H),6.69(d,J＝8.0Hz,1H),6.66–6.57(m,2H),6.55(d,J＝1.7Hz,1H),5.69(d,J＝1.2Hz,1H),5.17(d,J＝1.1Hz,1H),4.48(s,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C20H16N2S[M+H]+317.1112found:317.1114。
具体制备方法与化合物1相同。收率为86.9％。
实施例18、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯胺(化合物17)的制备
合成线路如下：
化合物17的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),6.98(dd,J＝18.2,8.0Hz,2H),6.91(d,J＝2.8Hz,1H),6.90(d,J＝3.9Hz,1H),6.79–6.76(m,1H),6.75(d,J＝3.0Hz,1H),6.64(d,J＝7.8Hz,1H),6.59(d,J＝1.4Hz,1H),6.53(d,J＝7.9Hz,1H),6.47(d,J＝1.6Hz,2H),5.30(d,J＝14.9Hz,2H),5.08(s,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C20H16N2S[M+H]+317.1112found:317.1115。
具体制备方法与化合物1相同。收率为67.4％。
实施例19、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯酚(化合物18)的制备
合成线路如下：
化合物18的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.99(s,1H),7.89(d,J＝8.3Hz,2H),7.37(d,J＝8.3Hz,3H),6.95(ddd,J＝18.4,10.9,3.3Hz,3H),6.84–6.70(m,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.56(d,J＝1.7Hz,1H),5.49(d,J＝16.9Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C20H15NOS[M+H]+318.0953found:318.0955。
具体制备方法与化合物1相同。收率为83.4％。
实施例20、2-(1-(3-硝基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物19)的制备
合成线路如下：
化合物19的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),8.23(d,J＝7.1Hz,1H),8.07(s,1H),7.78(d,J＝7.7Hz,1H),7.71(d,J＝7.9Hz,1H),7.06–6.87(m,3H),6.76(t,J＝7.0Hz,2H),6.63(d,J＝7.8Hz,1H),6.59(s,1H),5.60(d,J＝11.2Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C20H14N2O2S[M+H]+347.0854found:347.0824。
具体制备方法与化合物1相同。收率为64.1％。
实施例21、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯磺酰胺(化合物20)的制备
合成线路如下：
化合物20的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.74(s,1H),7.64–7.50(m,2H),7.39(s,2H),7.05–6.87(m,3H),6.74(dd,J＝10.9,4.4Hz,2H),6.63(d,J＝7.8Hz,1H),6.56(d,J＝1.6Hz,1H),5.55(s,1H),5.46(s,1H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C20H16N2O2S2[M+H]+381.0731found:381.0733。
具体制备方法与化合物1相同。收率为87.5％。
实施例22、2-(1-(3-甲氧基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物21)的制备
合成线路如下：
化合物21的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.30(t,J＝7.9Hz,1H),6.95(dd,J＝7.6,4.5Hz,2H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.84(dd,J＝8.3,4.9Hz,2H),6.75(dd,J＝7.8,1.4Hz,2H),6.62(d,J＝7.1Hz,1H),6.58(d,J＝1.7Hz,1H),5.42(d,J＝16.3Hz,2H),3.75(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H17NOS[M+H]+332.1109found:332.1105。
具体制备方法与化合物1相同。收率为65.8％。
实施例23、2-(1-(3-三氟甲氧基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物22)的制备
合成线路如下：
化合物22的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,1H),7.48–7.31(m,2H),7.26(s,1H),6.95(dt,J＝14.3,6.9Hz,3H),6.75(t,J＝7.2Hz,2H),6.64(d,J＝7.8Hz,1H),6.58(s,1H),5.52(d,J＝13.2Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H14F3NOS[M+H]+386.0826found:386.0829。
具体制备方法与化合物1相同。收率为75.8％。
实施例24、2-(1-(3-异丙氧基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物23)的制备
合成线路如下：
化合物23的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),7.27(t,J＝7.9Hz,1H),6.97(t,J＝7.6Hz,1H),6.90(t,J＝6.6Hz,3H),6.85(d,J＝7.6Hz,1H),6.76(dd,J＝15.9,8.1Hz,3H),6.65(d,J＝7.9Hz,1H),6.62(d,J＝1.1Hz,1H),5.41(d,J＝11.3Hz,2H),4.58(dd,J＝12.0,6.0Hz,1H),1.25(d,J＝6.0Hz,7H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H21NOS[M+H]+360.1422found:360.1425。
具体制备方法与化合物1相同。收率为62.2％。
实施例25、2-(1-(间甲苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物24)的制备
合成线路如下：
化合物24的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),7.14–7.03(m,2H),7.01–6.94(m,1H),6.93(dd,J＝16.7,4.6Hz,2H),6.82–6.71(m,2H),6.63(d,J＝7.9Hz,1H),6.57(d,J＝1.6Hz,1H),5.41(s,1H),5.36(s,1H),2.31(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H17NS[M+H]+316.1160found:316.1165。
具体制备方法与化合物1相同。收率为73.8％。
实施例26、2-(1-(3-叔丁基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物25)的制备
合成线路如下：
化合物25的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.39(d,J＝7.9Hz,1H),7.31(dd,J＝13.9,6.2Hz,2H),7.07(d,J＝7.6Hz,1H),6.96(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.75(dd,J＝7.6,1.3Hz,2H),6.62(dd,J＝11.6,4.8Hz,2H),5.44(s,1H),5.38(s,1H),1.28(s,9H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H23NS[M+H]+358.1629found:358.1625。
具体制备方法与化合物1相同。收率为69.5％。
实施例27、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯甲酰胺(化合物26)的制备
合成线路如下：
化合物26的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),8.03(s,1H),7.86(d,J＝7.2Hz,1H),7.83(s,1H),7.50–7.41(m,2H),7.38(s,1H),6.95(ddd,J＝18.0,11.0,3.4Hz,3H),6.75(dd,J＝12.2,4.3Hz,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.56(d,J＝1.6Hz,1H),5.48(d,J＝20.9Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H16N2OS[M+H]+345.1062found:345.1064。
具体制备方法与化合物1相同。收率为69.5％。
实施例28、2-(1-(3-异丙基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物27)的制备
合成线路如下：
化合物27的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.29(d,J＝7.5Hz,1H),7.23(d,J＝7.8Hz,1H),7.18(s,1H),7.08(d,J＝7.5Hz,1H),6.96(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.95–6.88(m,2H),6.75(dd,J＝7.8,1.8Hz,2H),6.63(dd,J＝7.9,0.9Hz,1H),6.59(d,J＝1.7Hz,1H),5.49–5.31(m,2H),3.01–2.81(m,1H),1.22(dd,J＝16.0,8.7Hz,6H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H21NS[M+H]+344.1473found:344.1475。
具体制备方法与化合物1相同。收率为75.4％。
实施例29、乙基3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯甲酸(化合物28)的制备
合成线路如下：
化合物28的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.96(d,J＝7.4Hz,1H),7.84(s,1H),7.57(dt,J＝15.1,7.7Hz,2H),7.01–6.95(m,1H),6.92(t,J＝7.0Hz,2H),6.75(t,J＝7.5Hz,2H),6.63(d,J＝7.8Hz,1H),6.56(d,J＝1.5Hz,1H),5.54(s,1H),5.45(s,1H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(dt,J＝8.0,6.2Hz,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H19NO2S[M+H]+374.1215found:374.1212。
具体制备方法与化合物1相同。收率为68.2％。
实施例30、2-(1-([1,1'-二苯基]-3-基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物29)的制备
合成线路如下：
化合物29的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.65(dd,J＝9.4,2.2Hz,3H),7.55(s,1H),7.48(dd,J＝16.8,7.8Hz,3H),7.38(d,J＝7.3Hz,1H),7.29(d,J＝7.8Hz,1H),6.94(dt,J＝15.3,4.2Hz,3H),6.81(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),6.75(dd,J＝7.5,1.0Hz,1H),6.62(dd,J＝8.6,1.2Hz,2H),5.50(d,J＝3.1Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C26H19NS[M+H]+378.1316found:378.1318。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.8％。
实施例31、2-(1-(3-(三氟甲基)苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物30)的制备
合成线路如下：
化合物30的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.74(d,J＝7.5Hz,1H),7.62(dd,J＝10.9,7.1Hz,3H),7.03–6.87(m,3H),6.82–6.71(m,2H),6.66–6.59(m,1H),6.55(d,J＝1.7Hz,1H),5.54(d,J＝20.9Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H15F3NS[M+H]+370.0877found:370.0879。
具体制备方法与化合物1相同。收率为67.8％。
实施例32、甲基3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯甲酸(化合物31)的制备
合成线路如下：
化合物31的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),8.01–7.90(m,1H),7.83(d,J＝1.5Hz,1H),7.67–7.60(m,1H),7.56(t,J＝7.7Hz,1H),6.97(td,J＝7.8,1.4Hz,1H),6.92(t,J＝7.3Hz,2H),6.75(td,J＝7.5,1.4Hz,2H),6.62(dd,J＝7.9,0.9Hz,1H),6.56(d,J＝1.8Hz,1H),5.49(d,J＝26.7Hz,2H),3.85(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H17NO2S[M+H]+360.1058found:360.1055。
具体制备方法与化合物1相同。收率为61.9％。
实施例33、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯甲腈(化合物32)的制备合成线路如下：
化合物32的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.87–7.81(m,1H),7.78(s,1H),7.64–7.58(m,2H),7.03–6.95(m,1H),6.92(t,J＝7.6Hz,2H),6.79–6.70(m,2H),6.67–6.59(m,1H),6.54(d,J＝1.7Hz,1H),5.55(d,J＝17.8Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H14N2S[M+H]+327.0956found:327.0959。
具体制备方法与化合物1相同。收率为73.2％。
实施例34、(3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)苯甲酮(化合物33)的制备
合成线路如下：
化合物33的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),7.76(t,J＝6.8Hz,3H),7.70–7.64(m,2H),7.62(d,J＝7.7Hz,1H),7.59(s,1H),7.54(t,J＝7.6Hz,2H),6.98(dd,J＝10.8,4.4Hz,1H),6.92(dd,J＝7.3,4.4Hz,2H),6.84–6.72(m,2H),6.65(dd,J＝10.6,4.8Hz,2H),5.52(d,J＝17.4Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C27H19NOS[M+H]+406.1266found:406.1261。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.4％。
实施例35、2-(1-(3-(二氟甲基)苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物34)的制备
合成线路如下：
化合物34的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),7.57(s,1H),7.47(d,J＝6.5Hz,3H),6.95(dt,J＝15.3,7.2Hz,3H),6.76(d,J＝5.9Hz,2H),6.63(d,J＝7.8Hz,1H),6.57(s,1H),5.49(d,J＝25.2Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H15F2NS[M+H]+352.0972found:352.0975。
具体制备方法与化合物1相同。收率为83.8％。
实施例36、2-(1-(3-(苄氧基)苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物35)的制备
合成线路如下：
化合物35的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.23(t,J＝7.9Hz,1H),7.02–6.87(m,4H),6.83(s,1H),6.80–6.68(m,3H),6.61(dd,J＝14.3,4.7Hz,2H),5.39(d,J＝23.4Hz,2H),3.84–3.63(m,4H),3.18–2.98(m,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C27H21NOS[M+H]+408.1422found:408.1425。
具体制备方法与化合物1相同。收率为68.9％。
实施例37、4-(3-(1-(10H-吩噻实施例嗪-2-基)乙烯基)苯基)吗啉(化合物36)的制备
合成线路如下：
化合物36的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.23(t,J＝7.9Hz,1H),7.02–6.87(m,4H),6.83(s,1H),6.80–6.68(m,3H),6.61(dd,J＝14.3,4.7Hz,2H),5.39(d,J＝23.4Hz,2H),3.84–3.63(m,4H),3.18–2.98(m,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H22N2OS[M+H]+387.1531found:387.1533。
具体制备方法与化合物1相同。收率为83.3％。
实施例38、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-2-甲基苯甲腈(化合物37)的制备
合成线路如下：
化合物37的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(s,1H),7.29(d,J＝8.0Hz,1H),6.97(dd,J＝10.9,4.4Hz,1H),6.92(t,J＝7.1Hz,2H),6.79–6.70(m,2H),6.65–6.59(m,1H),6.53(d,J＝1.7Hz,1H),5.58(s,1H),5.51(s,1H),2.49(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H16N2S[M+H]+341.1112found:341.1115。
具体制备方法与化合物1相同。收率为75.8％。
实施例39、2-(1-(3-甲基-4-硝基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物38)的制备
合成线路如下：
化合物38的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.45(s,1H),7.35(dd,J＝8.4,1.5Hz,1H),6.95(ddd,J＝20.0,13.2,5.4Hz,3H),6.76(d,J＝8.0Hz,2H),6.62(dd,J＝7.9,0.8Hz,1H),6.54(d,J＝1.7Hz,1H),5.61(s,1H),5.54(s,1H),2.54(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H16N2O2S[M+H]+361.1011found:361.1015。
具体制备方法与化合物1相同。收率为73.7％。
实施例40、2-(1-(3,4-二甲氧基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物39)的制备
合成线路如下：
化合物39的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),6.93(ddd,J＝20.3,8.4,3.1Hz,5H),6.78(ddd,J＝13.3,8.1,1.9Hz,3H),6.62(t,J＝5.3Hz,2H),5.35(d,J＝5.9Hz,2H),3.76(d,J＝13.3Hz,6H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H19NO2S[M+H]+362.1215found:361.1218。
具体制备方法与化合物1相同。收率为54.4％。
实施例41、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-2-氟苯腈(化合物40)的制备
合成线路如下：
化合物40的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.93(t,J＝7.5Hz,1H),7.49(d,J＝10.6Hz,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),6.95(dt,J＝17.1,8.2Hz,3H),6.75(dd,J＝15.3,7.7Hz,2H),6.63(d,J＝7.8Hz,1H),6.55(s,1H),5.65(d,J＝1.9Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H13FN2S[M+H]+345.0862found:345.0866。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.5％。
实施例42、2-(1-(3,5-二叔丁基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物41)的制备
合成线路如下：
化合物41的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.40(t,J＝1.7Hz,1H),7.10(d,J＝1.8Hz,2H),6.96(td,J＝7.8,1.4Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.80–6.70(m,2H),6.62(dd,J＝8.0,1.2Hz,2H),5.47–5.31(m,2H),1.25(d,J＝22.6Hz,18H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C28H31NS[M+H]+414.2255found:414.2259。
具体制备方法与化合物1相同。收率为75.6％。
实施例43、2-(1-(3,4,5-三甲氧基苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物42)的制备
合成线路如下：
化合物42的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),6.97(t,J＝7.6Hz,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.85–6.71(m,2H),6.63(d,J＝6.1Hz,2H),6.56(s,2H),5.41(d,J＝10.9Hz,2H),3.72(d,J＝21.8Hz,9H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H21NO3S[M+H]+392.1320found:392.1321。
具体制备方法与化合物1相同。收率为72.7％。
实施例44、N-(5-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物43)的制备
合成线路如下：
化合物43的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.59(s,1H),8.57(s,1H),8.24(d,J＝2.2Hz,1H),8.08(d,J＝8.6Hz,1H),7.69(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),6.96(d,J＝7.8Hz,1H),6.92(t,J＝6.7Hz,2H),6.82–6.70(m,2H),6.65–6.60(m,1H),6.58(d,J＝1.7Hz,1H),5.46(d,J＝11.9Hz,2H),2.11(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C21H17N3OS[M+H]+360.1171found:360.1175。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.3％。
实施例45、5-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)吡啶-2-胺(化合物44)的制备
合成线路如下：
化合物44的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),7.86(d,J＝2.2Hz,1H),7.30(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),6.96(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.94–6.87(m,2H),6.79–6.70(m,2H),6.67–6.58(m,2H),6.44(d,J＝8.6Hz,1H),6.08(s,2H),5.42–5.14(m,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C19H15N3S[M+H]+318.1065found:318.1069。
具体制备方法与化合物1相同。收率为68.9％。
实施例46、4-(5-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)吡啶-2-基)吗啉(化合物45)的制备
合成线路如下：
化合物45的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(s,1H),8.09(d,J＝2.2Hz,1H),7.46(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.03–6.95(m,1H),6.91(d,J＝7.9Hz,2H),6.84(d,J＝8.8Hz,1H),6.75(dd,J＝12.5,4.7Hz,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.59(d,J＝1.7Hz,1H),5.33(d,J＝5.6Hz,2H),3.81–3.65(m,4H),3.51–3.40(m,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H21N3OS[M+H]+388.1484found:388.1487。
具体制备方法与化合物1相同。收率为68.1％。
实施例47、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-3-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺(化合物46)的制备
合成线路如下：
化合物46的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.45(s,1H),8.55(s,1H),8.20(d,J＝1.9Hz,1H),8.14–8.03(m,1H),7.94(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.84(d,J＝1.7Hz,1H),7.70(d,J＝8.5Hz,1H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),6.95(td,J＝7.9,1.3Hz,1H),6.90(t,J＝6.7Hz,2H),6.79(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),6.73(td,J＝7.6,1.1Hz,1H),6.65–6.58(m,1H),6.48(d,J＝1.7Hz,1H),5.84(s,1H),5.21(s,1H),3.56(s,2H),2.41(d,J＝15.1Hz,8H),2.17(s,3H),2.11(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C35H33F3N4OS[M+H]+615.2405found:615.2407。
具体制备方法与化合物1相同。收率为57.1％。
实施例48、(4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)(吗啉)甲酮(化合物47)的制备
合成线路如下：
化合物47的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.40(dd,J＝21.0,8.1Hz,4H),6.94(dt,J＝14.2,6.8Hz,3H),6.76(dd,J＝13.0,4.8Hz,2H),6.62(d,J＝7.8Hz,1H),6.57(d,J＝1.3Hz,1H),5.48(d,J＝14.7Hz,2H),3.61(s,8H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C25H22N2O2S[M+H]+415.1480found:415.1486。
具体制备方法与化合物1相同。收率为64.9％。
实施例49、(4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(化合物48)的制备
合成线路如下：
化合物48的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.46–7.31(m,4H),6.96(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),6.92(t,J＝7.1Hz,2H),6.76(ddd,J＝7.4,3.8,1.4Hz,2H),6.68–6.60(m,1H),6.57(d,J＝1.7Hz,1H),5.48(d,J＝13.0Hz,2H),3.48(d,J＝91.0Hz,4H),2.32(s,4H),2.20(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C26H25N3OS[M+H]+428.1797found:428.1795。
具体制备方法与化合物1相同。收率为76.9％。
实施例50、2-(1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物49)的制备
合成线路如下：
化合物49的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),8.30(s,2H),6.98(td,J＝7.8,1.4Hz,1H),6.94–6.91(m,1H),6.90(d,J＝1.9Hz,1H),6.84–6.70(m,2H),6.62(dd,J＝9.1,1.3Hz,2H),5.38(d,J＝2.8Hz,2H),3.93–3.65(m,4H),2.47–2.30(m,4H),2.22(s,3H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C23H23N5S[M+H]+402.1752found:402.1756。
具体制备方法与化合物1相同。收率为64.9％。
实施例51、2-(1-(2-(4-甲基-1,4-高哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物50)的制备
合成线路如下：
化合物50的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),8.28(s,2H),6.98(t,J＝7.6Hz,1H),6.95–6.88(m,2H),6.82–6.71(m,2H),6.63(d,J＝7.0Hz,2H),5.35(d,J＝6.1Hz,2H),3.97–3.81(m,2H),3.76(t,J＝6.1Hz,2H),2.75–2.57(m,2H),2.28(s,3H),1.97–1.80(m,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H25N5S[M+H]+416.1909found:416.1913。
具体制备方法与化合物1相同。收率为69.0％。
实施例52、4-(5-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)嘧啶-2-基)吗啉(化合物51)的制备
合成线路如下：
化合物51的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,1H),8.33(s,2H),6.98(t,J＝7.6Hz,1H),6.92(dd,J＝7.5,3.2Hz,2H),6.85–6.71(m,2H),6.62(d,J＝8.6Hz,2H),5.39(d,J＝5.6Hz,2H),3.84–3.71(m,4H),3.71–3.60(m,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C22H20N4OS[M+H]+389.1436found:389.14367。
具体制备方法与化合物1相同。收率为64.8％。
实施例53、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯磺酰胺(化合物52)的制备
合成线路如下：
化合物52的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.94–7.76(m,3H),7.51(d,J＝8.4Hz,2H),7.03–6.88(m,3H),6.81–6.70(m,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.55(d,J＝1.6Hz,1H),5.55(d,J＝7.7Hz,2H),3.86–3.62(m,2H),3.24(dd,J＝11.2,9.7Hz,3H),1.53(t,J＝18.7Hz,2H),1.48–1.32(m,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C25H24N2O3S2[M+H]+465.1307found:465.1309。
具体制备方法与化合物1相同。收率为78.8％。
实施例54、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-N-(叔丁基)苯磺酰胺(化合物53)的制备
合成线路如下：
化合物53的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,1H),7.89–7.77(m,1H),7.70(s,1H),7.58(dd,J＝14.3,8.0Hz,3H),7.06–6.86(m,3H),6.75(t,J＝7.5Hz,1H),6.70(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),6.63(d,J＝7.9Hz,1H),6.58(d,J＝1.4Hz,1H),5.51(d,J＝23.4Hz,2H),1.08(s,9H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H24N2O2S2[M+H]+437.1357found:437.1356。
具体制备方法与化合物1相同。收率为75.3％。
实施例55、2-(1-(4-(吡咯啉-1-基磺酰基)苯基)乙烯基)-10H-吩噻嗪(化合物54)的制备
合成线路如下：
化合物54的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.55(d,J＝8.4Hz,2H),7.07–6.88(m,3H),6.83–6.71(m,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.55(d,J＝1.7Hz,1H),5.57(d,J＝11.8Hz,2H),3.17(s,4H),1.68(d,J＝2.8Hz,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H22N2O2S2[M+H]+435.1201found:435.1205。
具体制备方法与化合物1相同。收率为67.2％。
实施例56、3-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯磺酰胺(化合物55)的制备
合成线路如下：
化合物55的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.81(ddd,J＝6.3,5.6,4.5Hz,2H),7.68(s,1H),7.66–7.54(m,2H),6.96(ddd,J＝19.4,11.9,4.1Hz,3H),6.81–6.67(m,2H),6.67–6.60(m,1H),6.56(d,J＝1.7Hz,1H),5.51(d,J＝26.3Hz,2H),3.71(dd,J＝8.3,3.3Hz,2H),3.22(td,J＝11.5,2.2Hz,3H),1.50(d,J＝10.4Hz,2H),1.43–1.27(m,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C25H24N2O3S2[M+H]+465.1307found:465.1303。
具体制备方法与化合物1相同。收率为81.8％。
实施例57、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-N-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)苯磺酰胺(化合物56)的制备
合成线路如下：
化合物56的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.79(d,J＝8.3Hz,2H),7.70(t,J＝6.1Hz,1H),7.52(d,J＝8.3Hz,2H),6.96(ddd,J＝18.9,12.3,4.6Hz,3H),6.75(t,J＝7.3Hz,2H),6.62(d,J＝7.8Hz,1H),6.55(d,J＝1.6Hz,1H),5.54(d,J＝19.5Hz,2H),3.81(dd,J＝11.2,3.1Hz,2H),3.21(t,J＝10.9Hz,2H),2.66(t,J＝6.3Hz,2H),1.55(d,J＝13.3Hz,3H),1.09(dd,J＝11.9,3.7Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C26H26N2O3S2[M+H]+479.1463found:479.1466。
具体制备方法与化合物1相同。收率为79.8％。
实施例58、4-((4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)苯基)磺酰基)吗啉(化合物57)的制备
合成线路如下：
化合物57的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.09–6.87(m,3H),6.76(d,J＝8.1Hz,2H),6.69–6.60(m,1H),6.55(d,J＝1.7Hz,1H),5.59(d,J＝15.1Hz,2H),3.79–3.54(m,4H),3.03–2.83(m,4H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H22N2O3S2[M+H]+451.1150found:451.1154。
具体制备方法与化合物1相同。收率为69.8％。
实施例59、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-N-环丁基苯磺酰胺(化合物58)的制备
合成线路如下：
化合物58的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),8.00(d,J＝8.5Hz,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.06–6.86(m,3H),6.74(ddd,J＝9.7,7.8,1.4Hz,2H),6.69–6.57(m,1H),6.55(d,J＝1.7Hz,1H),5.54(d,J＝12.7Hz,2H),3.72–3.53(m,1H),2.02–1.87(m,2H),1.77(dd,J＝15.4,6.3Hz,2H),1.50(td,J＝10.3,5.8Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C24H22N2O2S2[M+H]+435.1201found:435.1203。
具体制备方法与化合物1相同。收率为67.4％。
实施例60、4-(1-(10H-吩噻嗪-2-基)乙烯基)-N-(1-甲基哌啶-4-基)苯磺酰胺(化合物59)的制备
合成线路如下：
化合物59的1H NMR和HRMS数据如下：
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,2H),7.74(d,J＝7.1Hz,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,2H),6.96(ddd,J＝18.8,12.4,4.7Hz,3H),6.84–6.70(m,2H),6.62(d,J＝7.9Hz,1H),6.55(d,J＝1.6Hz,1H),5.55(d,J＝7.4Hz,2H),2.94(dd,J＝10.6,4.1Hz,1H),2.61(d,J＝11.7Hz,2H),2.08(s,3H),1.83(t,J＝10.7Hz,2H),1.56(d,J＝10.0Hz,2H),1.42(dd,J＝17.2,6.5Hz,2H)。
HRMS m/z(ESI)calcd for C26H27N3O2S2[M+H]+478.1623found:478.1624。
具体制备方法与化合物1相同。收率为79.8％。
实施例61、本发明化合物对Ferroptosis的抑制率的研究
本实施例为了研究铁死亡的抑制剂，自主构建了铁死亡的筛选模型，具体如下：
Ferroptosis筛选模型主要是采用MTT细胞活力检测法。首先在皿中培养纤维肉瘤细胞株，将处于对数生长期的细胞按特定数量接种于96孔板中(3000-10000个/孔)，每孔100μL，然后放入37℃、5％CO2环境的孵箱中培养，让细胞贴壁。24h后，加入100μL使用指定的培养基配制好的一定浓度的本发明化合物和10μL Ferroptosis诱导剂Erastin(终浓度10μM)，每个化合物设置3个复孔，保证结果的准确性。并设置阳性对照组(按照上述加入100μL相同培养基配制好的一定浓度的化合物Ferrostain-1和10μL Ferroptosis诱导剂Erastin)、空白对照组(加入上述指定的等体积培养基以及和培养基等体积DMSO，不含细胞)和溶剂对照组(加入上述指定的等体积培养基以及和培养基等体积的DMSO，含细胞)，每组同样设置3个复孔，保证结果的准确性。加药之后放入孵箱，培养72h。并在MTT实验当天预先配好MTT测试液(溶于生理盐水的5mg/mLMTT溶液，4℃避光保存)，每孔加入20μLMTT溶液，放入孵箱继续培养2-4h，然后，每孔加入50μL20％SDS溶液(溶于MiliiQ水，加入1％的浓盐酸)，放入孵箱中过夜，第二天用酶标仪检测570nm处吸光度值，以计算药物对Ferroptosis的抑制率。一般对照组的吸光度值应在0.8-1.2之间为正常值。取得吸光度值数据之后，计算3个复孔的平均值，采用如下公式计算抑制率：
抑制率％(inhibitionrate，IR)＝[1-(A实验组-A空白)/(A溶剂-A空白)]*100％
使用GraphPadPrism5软件拟合抑制率变化曲线并算出EC50。
对上述的59个化合物进行EC50的测试(EC50的测试取得是三次测试的平均值，Fer-1为阳性对照组)，结果如下表1所示：
表1.本发明化合物的EC50值
Compound
EC<sub>50</sub>(μM)
Compound
EC<sub>50</sub>(μM)
Compound
EC<sub>50</sub>(μM)
Fer-1
0.060
20
0.010
40
0.041
1
0.010
21
0.011
41
0.905
2
0.032
22
0.030
42
0.045
3
0.011
23
0.048
43
0.004
4
0.023
24
0.031
44
0.011
5
0.080
25
0.016
45
0.013
6
0.045
26
0.016
46
0.010
7
0.029
27
0.038
47
0.024
8
0.040
28
0.027
48
0.013
9
0.003
29
0.041
49
0.002
10
0.010
30
0.045
50
0.004
11
0.039
31
0.051
51
0.010
12
0.040
32
0.089
52
0.011
13
0.030
33
0.111
53
0.148
14
0.039
34
0.011
54
0.032
15
0.680
35
0.053
55
0.012
16
0.029
36
0.030
56
0.022
17
0.017
37
0.014
57
0.034
18
0.040
38
0.035
58
0.066
19
0.013
39
0.023
59
0.0002
由表1所示的试验结果可知：本发明化合物对于Ferroptosis均有抑制作用，其中化合物9、43、49、50和59的抑制活性与阳性对照组相比显著更优。由表1和图1可知：化合物9的EC50＝0.003μM，抑制活性是阳性对照Fer-1的20倍左右，化合物49的EC50＝0.002μM，抑制活性是阳性对照Fer-1的30倍左右，化合物50的EC50＝0.004μM，抑制活性是阳性对照Fer-1的15倍左右，化合物59的EC50＝0.0002μM，抑制活性是阳性对照Fer-1的300倍左右。其EC50值越小，说明其活性越好，由上述结果可知，本发明化合物对于Ferroptosis均有抑制作用，而化合物9、43、49、50和59的抑制活性显著优于阳性对照组，具有更好的Ferroptosis抑制作用，其中化合物59的抑制效果最优。这些化合物可以用于制备铁死亡抑制剂，也可以用于制备治疗与铁死亡有关的多种疾病，如神经退行性疾病、帕金森综合征、脑卒中、心血管疾病、肾衰竭、糖尿病并发症、癌症等的药物。
实施例62、本发明化合物对于脑卒中的治疗效果
1、试验方法
选择50只雄性SD大鼠，通过线栓法构建大鼠缺血再灌注模型，试验分5个组(每个随机分得10只SD大鼠)：分别为模型对照组(Control)、本发明第49号化合物给药组、CN201810393712.2第38号化合物给药组、阳性药物一组(给药Liproxstain-1)和阳性药物二组(给药Butyphthalide)。
各组动物均用线栓堵塞大脑中动脉1.5h后拉出线栓进行再灌注，并于再灌注24h后对动物进行解剖。各组在用线栓堵塞大脑中动脉30min内和再灌注2h后分别进行1次静脉注射给药，共给药2次；各组给药剂量如下：本发明第49号化合物给药组的给药剂量为2.5mg/kg、CN201810393712.2第38号化合物给药组的给药剂量为5mg/kg、阳性药物一组和阳性药物二组给药剂量均为10mg/kg。
试验中观察指标包括：一般状态观察、体重，术后1天解剖后TTC染色计算各组脑梗塞范围和脑梗塞抑制率。脑梗塞范围计算公式为：脑梗塞区重量/脑重量×100％；脑梗塞抑制率计算公式为：(给药组脑梗塞范围-模型对照组脑梗塞范围)/模型对照组脑梗塞范围×100％。
阳性药物一Liproxstain-1的结构式为
阳性药物二Butyphthalide的结构式为
CN201810393712.2第38号化合物的结构式为
本发明第49号化合物的结构式为
2、试验结果
(1)一般状态观察：手术当天，各组动物均出现步态不稳、转圈、竖毛等异常症状，术后24h各组均有动物出现消瘦、萎靡、鼻周、口周和眼周污秽等症状，各组间以上症状严重程度等未见明显差异。
(2)脑梗死范围比率和脑梗死抑制率结果
脑梗塞范围统计图(图2)结果显示：本发明第49号化合物给药剂量为2.5mg/kg时就能显著减小实验鼠脑梗塞范围，其脑梗塞范围显著小于给药剂量为10mg/kg的阳性药物Liproxstain-1和Butyphthalide，也小于给药剂量为5mg/kg的CN201810393712.2第38号化合物。说明本发明第49号化合物减小脑梗塞范围的效果优于两个阳性药物和CN201810393712.2第38号化合物。
脑梗塞抑制率结果图(图3)结果显示：(1)本发明第49号化合物给药剂量为2.5mg/kg时就能显著抑制脑梗塞，抑制效果优于给药剂量为10mg/kg的阳性药物Liproxstain-1和Butyphthalide；(2)本发明第49号化合物在给药剂量为2.5mg/kg(低剂量)时的抑制效果(抑制率为33％)优于CN201810393712.2第38号化合物在给药剂量为5mg/kg(高剂量)时的抑制效果(抑制率为27％)。
以上实验结果说明本发明第49化合物在更低的给药剂量下，其对脑梗塞的抑制效果显著优于阳性药Liproxstain-1和Butyphthalide，并且优于CN201810393712.2第38号化合物高剂量给药的效果。进一步说明本发明化合物49对脑梗塞具有优异的抑制效果。
实验参照CFDA和Stroke Therapy Academic Industry Roundtable(STAIR)委员会有关脑卒中药物研发相关技术标准，选择最为经典的线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注脑卒中模型，对模型大鼠的一般状态、体重和脑梗死面积等指标进行观察研究，可以有效评估药物对脑卒中的治疗效果。评估实验结果表明，本发明第49号化合物具有抑制缺血再灌注大鼠的脑梗死的效果，与阳性药Liproxstain-1和Butyphthalide相比，抑制效果显著更优，与CN201810393712.2第38号化合物相比，本发明第49号化合物可在更低给药剂量下，显著减小大鼠脑梗塞范围，增大脑梗死抑制率，抑制效果也明显更优。
综上，本发明合成了一类新的能够抑制铁死亡的化合物，这些化合物对铁死亡具有良好的抑制作用，特别是化合物9、43、49、50和59对于铁死亡的抑制作用效果显著。同时，本发明化合物对于脑梗塞具有良好的抑制作用，特别是化合物49，抑制脑梗塞的效果显著。本发明化合物能够作为制备铁死亡抑制剂、治疗与铁死亡相关疾病药物和防治脑梗塞药物的主要活性成分，具有良好的药用潜力。同时，本发明提供的新化合物的制备方法简便，反应条件温和，便于操作和控制，能耗小，产率高，成本低，可适合产业化生产，制备得到的化合物生物活性较高，选择性强，类药性显著，具有广阔的市场前景。