抗体的Fc区变异体
阅读说明：本技术 抗体的Fc区变异体 (Fc region variants of antibodies ) 是由 仓持太一 川添明里 味元风太 前田敦彦 井川智之 于 2013-02-08 设计创作，主要内容包括：通过使抗体Fc区环部位的至少一个氨基酸变异,与亲本多肽比较,成功地取得了稳定性提高的多肽。进一步将环部位的氨基酸变异多个组合,与亲本多肽比较,成功地得到了热稳定性提高、同时与FcγR的结合活性得以保持或增强的多肽；以及热稳定性提高、同时与FcγR的结合活性减少的多肽；还成功地得到了不仅热稳定性提高、同时调节了与FcγR的结合活性,而且使缔合物含量减少的多肽。(By mutating at least one amino acid in the loop portion of the Fc region of the antibody, a polypeptide having improved stability as compared with the parent polypeptide is successfully obtained. Further combining a plurality of variations of amino acids in the loop portion, and compared with the parent polypeptide, successfully obtaining a polypeptide with improved thermostability and maintained or enhanced binding activity with Fc gamma R; and a polypeptide having improved thermostability and reduced binding activity to Fc γ R; also successfully obtained was a polypeptide having a reduced association content, while having improved thermostability and regulated binding activity to Fc.gamma.R.)
本申请是国际申请日为2013年2月8日、国际申请号为PCT/JP2013/053011于2014年10月8日进入中国国家阶段、申请号201380018995.8、发明名称“抗体的Fc区变异体”的申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及来自天然的抗体Fc区的氨基酸序列发生变异得到的抗体Fc区、含有该Fc区的抗体、含有该抗体的药物组合物、以及它们的制造方法。
背景技术
抗体在血浆中的稳定性高，副作用也少，因此作为药物受到关注。其中有很多IgG型的抗体药物上市，目前也正在开发很多抗体药物(非专利文献1、非专利文献2)。
近年来，对抗体的Fc区导入人工氨基酸变异、增强抗体功能的研究活跃。具体来说，人们正对于提高药物动力学的Fc区、使发挥效应子功能的ADCC活性增强的Fc区、以及在中和抗体中使ADCC活性降低的Fc区进行研究(非专利文献3-6)。但是，已知这样的Fc区的变异对抗体的物性产生不良影响。例如有报道称：使ADCC活性增强的变异型Fc区中，热变性中点降低约20℃(非专利文献6)。还有报道指出：使ADCC活性降低的变异型Fc区的热变性中点降低约5℃，容易发生水解酶分解，容易在酸性条件下分解(非专利文献7-9)。还进一步报道：在使血中滞留性提高的变异型Fc区中，热稳定性或保存稳定性降低(专利文献1)。
总之，目前发现的变异型Fc区大多数伴随着功能的增强而丧失了作为抗体优点之一的良好稳定性。
作为提高稳定性的尝试，有人报道了实施CH2结构域的氨基酸变异、导入半胱氨酸的方法(非专利文献10)。通过半胱氨酸的导入形成新的二硫键，由此使热稳定性升高约10℃-20℃。但是该报告只对CH2结构域评价热稳定性，IgG形式下的热稳定性尚不明确。另外，随着新二硫键的形成，可以预想到异质性的增加。
如上所述，目前尚未报道有在活性和稳定性两方面均优异的Fc区。
以下给出与本申请的发明相关的现有技术文献信息。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：WO2007/092772
专利文献2：WO2010/085682
非专利文献
非专利文献1：Monoclonal antibody successes in the clinic,Janice MReichert,Clark JRosensweig,Laura B Faden&Matthew C Dewitz,NatureBiotechnology 23,1073-1078(2005)非专利文献2：Pavlou AK,Belsey MJ.,Thetherapeutic antibodies market to 2008.,Eur J Pharm Biopharm.2005Apr；59(3):389-96.非专利文献3：Hinton PR,Xiong JM,Johlfs MG,Tang MT,Keller S,TsurushitaN.,An engineered human IgG1 antibody with longer serum half-life.,JImmunol.2006Jan 1；176(1):346-56非专利文献4：Ghetie V,Popov S,Borvak J,Radu C,Matesoi D,Medesan C,Ober RJ,Ward ES.,Increasing the serum persistence of anIgG fragment by random mutagenesis.,Nat Biotechnol.1997Jul；15(7):637-40非专利文献5：Oganesyan V,Damschroder MM,Leach W,Wu H,Dall'Acqua WF.,Structuralcharacterization of a mutated,ADCC-enhanced human Fc fragment.,MolImmunol.2008Apr；45(7):1872-82非专利文献6：Oganesyan V,Gao C,Shirinian L,Wu H,Dall'Acqua WF.,Structural characterization of a human Fc fragment engineeredfor lack of effector functions.,Biol Crystallogr.2008Jun；64(Pt 6):700-4非专利文献7：Liu H,Bulseco GG,Sun J.,Effect of posttranslational modifications onthe thermal stability of a recombinant monoclonal antibody.,ImmunolLett.2006Aug；106(2):144-53非专利文献8：Gaza-Bulseco G,Liu H.,Fragmentation ofa recombinant monoclonal antibody at various pH.,Pharm Res.2008Aug；25(8):1881-90非专利文献9：Raju TS,Scallon BJ.,Glycosylation in the Fc domain of IgGincreases resistance to proteolytic cleavage by papain.,Biochem Biophys ResCommun.2006Mar；341(3):797-803非专利文献10：Gong R,Vu BK,Feng Y,Prieto DA,DybaMA,Walsh JD,Prabakaran P,Veenstra TD,Tarasov SG,Ishima R,Dimitrov DS.,Engineered human antibody constant domains with increased stability.,J BiolChem.2009Mar；284(21):14203-14210非专利文献11：Remmele RL Jr,Callahan WJ,Krishnan S,Zhou L,Bondarenko PV,Nichols AC,Kleemann GR,Pipes GD,Park S,FodorS,Kras E,Brems DN.,Active dimer of Epratuzumab provides insight into thecomplex nature of an antibody aggregate.,J Pharm Sci.2006Jan；95(1):126-45.非专利文献12：Rosenberg AS,Effects of Protein Aggregates:An ImmunologicPerspective.,AAPS J.2006Aug；8(3)；E501-E507。
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