阅读说明：本技术 一种缓释外泌体的复合材料及其制备方法与应用 (Composite material for slowly releasing exosome and preparation method and application thereof ) 是由 王淑芳 齐春晓 刘语菲 李承乾 王彪 祁玉婷 于 2020-05-26 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种缓释外泌体的复合材料及其制备方法和应用,其特点在于利用天然存在的酶促反应(谷氨酰胺转氨酶TG2催化的蛋白连接)将外泌体化学连接在生物支架材料上起到长期稳定缓慢释放的目的。制备方法包括支架材料的制备,外泌体悬液的获取,以及外泌体的负载。该复合支架避免化学交联剂残留对机体的损伤,负载过程不会对外泌体生物活性产生影响,不破坏外泌体膜结构完整性,对于外泌体治疗效果的保证奠定基础,可缓释外泌体,延长体内的作用时间,对于不能反复手术移植病例提供了长期有效的治疗方法。(The invention discloses a composite material for slowly releasing exosomes and a preparation method and application thereof, which are characterized in that a naturally-existing enzymatic reaction (protein connection catalyzed by glutamine transaminase TG2) is utilized to chemically connect exosomes to a biological scaffold material to achieve the purpose of long-term stable slow release. The preparation method comprises the steps of preparing a scaffold material, obtaining an exosome suspension and loading exosomes. The composite stent avoids the damage of chemical cross-linking agent residue to the body, the loading process can not influence the bioactivity of exosome, the structural integrity of exosome membrane can not be damaged, the foundation is laid for the guarantee of the treatment effect of exosome, exosome can be slowly released, the action time in vivo is prolonged, and a long-term effective treatment method is provided for transplantation cases which can not be operated repeatedly.)

技术领域

本发明涉及一种缓释外泌体的方法，具体说是利用谷氨酰胺转氨酶2(TG2)将细胞分泌的外泌体与材料中的蛋白质进行交联，从而达到缓释外泌体的目的，属于生物材料及生物医学工程领域。

背景技术

外泌体是一种可被多种细胞分泌的小囊泡，内含大量的生物活性因子，如核酸、蛋白质等，在细胞交流中扮演重要角色，并在生理和病理过程中发挥作用。将外泌体负载到生物支架材料中移植到损伤性、缺损性疾病部位表现出很好地促进组织再生、调控宿主免疫环境能力。但是外泌体产量较低，因此能够使外泌体在支架材料中缓释的技术至关主要。TG2是一种人体细胞普遍存在的具有催化作用的蛋白质分子，通过催化谷氨酰胺残基和赖氨酸残基形成共价键将含有两种氨基酸残基的蛋白、多肽进行连接。TG2介导的蛋白连接使一种天然存在的酶促反应，不对蛋白活性产生影响，形成的共价键能够被细胞分泌的金属蛋白酶(MMPs)降解从而使连接的蛋白分离。本发明利用TG2催化蛋白连接的活性，将外泌体连接到含有谷氨酰胺残基和/或赖氨酸残基的生物支架材料中以实现外泌体的化学负载，进而实现外泌体的缓释。