阅读说明：本技术 一种创面修复制剂及其用途和使用方法 (Wound repair preparation and application and use method thereof ) 是由 杨光 于 2021-05-25 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种创面修复制剂,为纳米酶制剂,所述纳米酶制剂为Fe-3O-4纳米酶颗粒和PBS的混合物制剂或者Fe-3O-4纳米酶颗粒制剂；并公开了其用途,其用途表现在下述方面：1)所述纳米酶制剂用于促进创面愈合；2)所述纳米酶制剂用于调控巨噬细胞的表型；3)所述纳米酶制剂用于促进创面细胞增殖；同时,同开了其使用方法,可选用下述方式中的一种或两种方式配合使用：1)所述纳米酶制剂制备成液体,直接喷涂于创面；2)所述纳米酶制剂制备成辅料,配合绷带、敷料贴一起使用。本发明属于纳米材料医学应用技术领域,具体指一种创面修复制剂及其用途和使用方法。(The invention discloses a wound repair preparation, which is a nano enzyme preparation, wherein the nano enzyme preparation is Fe 3 O 4 Preparation of mixture of Nanolase particles and PBS or Fe 3 O 4 A nano-enzyme particle preparation; and its use is disclosed, which is characterized in the following aspects: 1) the nano enzyme preparation is used for promoting wound healing; 2) the nano enzyme preparation is used for regulating and controlling the phenotype of macrophage; 3) the nano enzyme preparation is used for promoting the proliferation of cells on the surface of a wound; meanwhile, the use method is also disclosed, and one or two of the following modes can be selected for use in a matching way: 1) the nano enzyme preparation is prepared into liquid and is directly sprayed on the wound surface; 2) the nano enzyme preparation is prepared into auxiliary materials and is matched with bandages and dressing pastes for use. The invention belongs to the technical field of medical application of nano materials, and particularly relates to a wound repairReplicating agents and uses and methods of use thereof.)

一种创面修复制剂及其用途和使用方法

技术领域

本发明属于纳米材料医学应用

技术领域

，具体涉及纳米生物医学、纳米技术和生物医药器械的交叉领域，具体的说，提供了一种创面修复制剂及其用途和使用方法。

背景技术

创面是正常皮肤在外界因素(如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温)或机体内部因素(如局部血液供应障碍)作用下所导致的损害，常伴有组织完整性破坏、正常组织丢失和正常功能受损。创面久不愈合会增加创面感染的机率，创面感染是最严重的并发症之一，会造成创面的愈合及修复困难，乃至无法修复，甚至截肢。提高创面愈合速度是急性创面和慢性创面治疗领域所亟需解决的一个难题。

创面愈合是人或动物中重要但复杂的过程，这些过程由止血/炎症阶段、增殖阶段和重塑阶段等连续但重叠的阶段控制。皮肤受伤后，裸露于内皮下层的胶原蛋白和组织因子将激活血小板，促使其聚集，进而诱导释放趋化因子和生长因子，以形成血凝块，实现止血。中性粒细胞是第一个在受伤部位出现的细胞，主要功能是清理碎屑和细菌，为伤口愈合提供良好的环境。接下来，巨噬细胞积累，促进细菌的吞噬作用并破坏组织。止血和发炎阶段通常需要72小时才能完成。随后的增殖期以大量细胞和大量结缔组织积聚集为特征，包括成纤维细胞、角质形成细胞和内皮细胞。细胞外基质(包括蛋白多糖、透明质酸、胶原和弹性蛋白)再生形成肉芽组织，以取代最初形成的血凝块。这个阶段持续几天到几周。创面愈合的最后一步是重塑阶段，现有细胞凋亡和新生细胞之间产生一个平衡。大量细胞外基质和未成熟的Ⅲ型胶原蛋白逐渐降解，Ⅰ型胶原逐渐成熟，这个阶段通常持续数月甚至数年。此阶段的任何异常都可能导致创面增生或形成慢性创面。

临床上常用生长因子和干细胞来促进创面愈合。这些材料存在以下几个问题：(a)法律对生长因子和干细胞的使用有严格限制；(b)生产成本高；(c)保存方法困难；(d)遇消毒剂会变形造成功效降低；(e)癌性创面不宜使用。目前，国内外用于促进创面愈合产品较少，主要产品还是生长因子，但该类产品品类较多，适用情况不同。

据市场调查，创伤修复产品有着巨大的临床需求。2018年，全球医用敷料市场规模增长至121.58亿美元。2019年，中国医用敷料市场规模达到73.12亿人民币，且市场份额主要被海外敷料巨头所占据。我国每年因创伤就医患者数高达6200万人次，其中致死人数达70～80万。面对世界70多亿人口的民用市场，促进创面愈合的制剂具有巨大的经济效益。因此，开发出成本低廉、易于储存且效果良好的促创面愈合制剂，将具有巨大的社会效益和经济效益，并且具有良好的应用前景。

发明内容

针对上述情况，为弥补上述现有缺陷，本发明提供了一种创面修复制剂及其用途和使用方法。

本发明提供如下的技术方案：本发明一种创面修复制剂，为纳米酶制剂，所述纳米酶制剂为Fe₃O₄纳米酶颗粒和PBS的混合物制剂或者Fe₃O₄纳米酶颗粒制剂。

一种创面修复制剂的用途，表现在下述方面：

1)所述纳米酶制剂用于促进创面愈合；

2)所述纳米酶制剂用于调控巨噬细胞的表型；

3)所述纳米酶制剂用于促进创面细胞增殖。

作为优选地，所述纳米酶制剂用于促进皮肤急性创面愈合。

作为优选地，所述纳米酶制剂用于促进糖尿病慢性创面的愈合。

一种创面修复制剂的使用方法，选用下述方式中的一种或两种方式配合使用：

1)所述纳米酶制剂制备成液体，直接喷涂于创面；

2)所述纳米酶制剂制备成辅料，配合绷带、敷料贴一起使用，本发明的创面制剂制备方法简单，具有促进创面快速愈合的功效，不会引起创面处放热而造成二次损伤，因此可以用于制备促进创面愈合的敷料型药物。

采用上述结构本发明取得的有益效果如下：本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法，提供了一种具有促进急性创面和慢性创面愈合功能的纳米酶制剂，本发明提供的纳米酶颗粒具有调控创面巨噬细胞功能、产生促进创面修复的效果，基于上述原理，可实现促进创面愈合和组织再生的效果。本发明提供的促进创面修复功能的纳米酶能够实现大批量生产、成本低；且本发明的纳米酶制剂作为新型创面修复材料的应用，具有巨大的社会效益和经济效益，也具有良好的应用前景。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的Fe₃O₄纳米酶颗粒在透射电子显微镜的扫描图；

图2为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的实施例1的治疗效果图；

图3为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的实施例1的创面愈合表征图；

图4为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的实施例2的治疗效果图；

图5为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的实施例2的创面愈合表征图；

图6为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的巨噬细胞M1的表型对比图；

图7为本发明一种创面修复制剂及其用途和使用方法的巨噬细胞M2的表型对比图。

具体实施方式

下面将结合本发明的实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Fe₃O₄纳米酶颗粒的合成及表征

通过共沉淀技术合成Fe₃O₄纳米酶颗粒，具体合成步骤如下：在室温下将8mmol的FeSO₄·7H₂O和8mmol的FeCl₃·6H₂O溶解在30mL的0.01M的HCl中；当溶液澄清后，将混合物滴加到40mL的1.5M的NH₄OH中，并将反应混合物在80℃下剧烈搅拌180分钟；然后冷却至室温，分离，洗涤，并在80℃下在空气中干燥，获得Fe₃O₄纳米酶颗粒。

采用透射电子显微镜(TEM)拍摄的Fe₃O₄纳米酶颗粒的形态如图1所示。

实施例1：Fe₃O₄纳米酶颗粒加速急性创面愈合的作用

急性创面是指突然形成且愈合较快的伤口。此类创面愈合方式通常为I期愈合，如择期手术切口、II度烧伤烫伤伤口、浅层皮外伤、皮肤急性放射性I度损伤、II度压疮等创面。

在本实施例中，以小鼠为实验对象，7周龄时，在背部制造1cm直径的圆形急性创面。将Fe₃O₄纳米酶颗粒稀释在PBS溶液中，按照每个创面3微克的剂量，直接喷涂到创面。实验结果如图2-3所示，实现结果表明Fe₃O₄纳米酶可以显著促进急性创面愈合。

实施例2：Fe₃O₄纳米酶颗粒加速慢性创面愈合的作用

慢性创面是指无法通过正常有序而及时的修复过程达到解剖和功能上的完整状态的伤口。临床上常指创面未依预期时间愈合，或停留在某一个愈合阶段，过程超过四至六周以上。

在本实施例中，以小鼠为实验对象，7周龄时用链脲霉素(STZ，剂量为120mg/kg)诱导为糖尿病模型，8周龄时在背部制造1cm直径的圆形急性创面。将Fe₃O₄纳米酶稀释在PBS溶液中，按照每个创面3微克的剂量，直接喷涂到创面，每周一次。实验结果如图4-5所示，实现结果表明Fe₃O₄纳米酶可以显著促进慢性创面愈合。

实施例3：Fe₃O₄纳米酶在调控巨噬细胞表型功能中的作用

巨噬细胞是调控创面修复的关键细胞，巨噬细胞功能异常会影响创面愈合，形成慢性创面或创面组织增生。一般情况下，单核细胞随着循环到达损伤部位，分化为巨噬细胞M0；损伤初期，巨噬细胞M0在环境刺激下分化为M1型巨噬细胞，清除外来微生物和损伤细胞；之后进入修复期，M2型巨噬细胞比例逐渐升高，促进组织修复。

在本实施例中，发明人以巨噬细胞为实验对象。从小鼠胫骨中提取骨髓，体外诱导为巨噬细胞M1和M2型。在细胞培养的同时，加入Fe3O4纳米酶。实验结果如图6-7所示，实现结果表明Fe₃O₄纳米酶可以显著调控巨噬细胞的表型变化，促进巨噬细胞分泌更多促进创面修复的细胞因子。

要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物料或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物料或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。