阅读说明：本技术 一种小球藻油脂的提取方法 (Extraction method of chlorella oil ) 是由 唐旭 董云龙 吴鹏 林凌 刘源森 徐长安 于 2019-09-30 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种小球藻油脂的提取方法,该方法包括：将小球藻干粉与石英砂按照体积比为5:1混匀,获得混合物；在超临界二氧化碳萃取釜中依次叠加一层滤片、一层石英棉、0.9～1.1cm厚度的石英砂、所述混合物、0.9～1.1cm厚度的石英砂、一层石英棉以及一层滤片,旋紧超临界二氧化碳萃取釜,静态萃取1.5～2.5h；萃取过程中,采用分段取样的方式进行取样,每萃取30～45min后,打开取样阀取样5min,重复三次,获得小球藻油脂。该方法全程不使用任何有机试剂,提取溶剂仅为超临界CO<Sub>2</Sub>,不会对提取后的藻油造成污染,且取样时溶剂自然变为气态挥发,不必进行溶剂分离步骤,操作简洁、减少能耗,绿色环保。(The invention relates to a method for extracting chlorella oil, which comprises the following steps: uniformly mixing the chlorella dry powder and quartz sand according to the volume ratio of 5:1 to obtain a mixture; sequentially superposing a layer of filter disc, a layer of quartz cotton, quartz sand with the thickness of 0.9-1.1 cm, the mixture, the quartz sand with the thickness of 0.9-1.1 cm, a layer of quartz cotton and a layer of filter disc in a supercritical carbon dioxide extraction kettle, screwing the supercritical carbon dioxide extraction kettle, and carrying out static extraction for 1.5-2.5 hours; sampling is carried out in a sectional sampling mode in the extraction process, after 30-45 min of extraction, a sampling valve is opened for sampling for 5min, and the sampling is repeated for three times to obtain the chlorella oil. The method does not use any organic reagent in the whole process, and the extraction solvent is only supercritical CO 2 The algae oil after extraction cannot be polluted, the solvent naturally becomes gaseous state to volatilize during sampling, the solvent separation step is not needed, the operation is simple, the energy consumption is reduced, and the method is green and environment-friendly.)

一种小球藻油脂的提取方法

技术领域

本发明涉及天然产物提取技术领域，具体涉及一种小球藻油脂的提取方法。

背景技术

小球藻(chlorella sp)是一种普生性单细胞绿藻，属于绿藻门绿藻纲卵囊藻科，现已被广泛养殖。在良好条件下生长的小球藻，其藻粉具有很高的应用价值，蛋白质含量可达63.60％，同时还含有二十二碳六烯酸(DHA)。在美国和日本，小球藻作为优良食品和动物饲料添加剂已有30多年的历史。近年来，我国也开始重视小球藻的开发利用。其中，从藻细胞中提取藻油一直是利用微藻生产高附加值脂肪酸的研究领域中的热点。

对于从藻细胞中提取藻油，通常是通过加入萃取液萃取、分离有机相，再蒸发溶剂后即得到油脂。但是，这种方法操作繁琐，步骤多，提取成本较高；并且由于在萃取过程中加入了有机溶剂，还要考虑到提取的油脂中的有机溶剂残留，对小球藻油脂的食品和饲料开发等产生不利影响。

因此，目前的提取小球藻油脂的方法仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提供一种小球藻油脂的提取方法。该方法的萃取和分离一步完成，操作简便，减少能耗，且提取过程中不使用任何有机溶剂，成本低，绿色环保。

为此，在本发明的一方面，本发明提出了一种小球藻油脂的提取方法，包括以下步骤：

(1)将小球藻干粉与石英砂按照体积比为5:1混匀，获得混合物；

(2)在超临界二氧化碳萃取釜中依次叠加一层滤片、一层石英棉、0.9～1.1cm厚度的石英砂、所述混合物、0.9～1.1cm厚度的石英砂、一层石英棉以及一层滤片，旋紧超临界二氧化碳萃取釜，静态萃取1.5～2.5h；萃取过程中，采用分段取样的方式进行取样，每萃取30～45min后，打开取样阀取样5min，重复三次，获得小球藻油脂。

根据本发明的一种小球藻油脂的提取方法，通过在超临界二氧化碳萃取釜中设置滤片、石英棉、石英砂、小球藻干粉与石英砂的混合物、石英砂、石英棉和滤片的复合层结构，使得在萃取小球藻油脂的过程中，将萃取与分离一步完成，并且在提取的过程中，不适应任何其他有机试剂，提取溶剂仅为超临界二氧化碳，其不会对提取后的藻油造成污染，且取样时溶剂自然变为气态挥发，操作简便，成本低，绿色环保。

另外，根据本发明上述实施例提出的一种小球藻油脂的提取方法，还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的实施例，在步骤(2)中，旋紧超临界二氧化碳萃取釜后，设定萃取压力150～200bar，萃取温度：萃取室温度40～50℃、萃取阀温度45～50℃、萃取釜温度36～40℃。

根据本发明的实施例，在步骤(2)中，取样期间维持萃取压力不变。

根据本发明的实施例，在步骤(2)中，石英砂的厚度为1cm。

根据本发明的实施例，在步骤(1)中，所述小球藻干粉是经破壁处理后的小球藻粉碎制得的。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

具体实施方式

以下通过特定的具体实例说明本发明的技术方案。应理解，本发明提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以***其他方法步骤；还应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本发明可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更技术内容的情况下，当亦视为本发明可实施的范畴。

为了更好的理解上述技术方案，下面更详细地描述本发明的示例性实施例。虽然显示了本发明的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本发明，并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。

本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。

本发明提出了一种小球藻油脂的提取方法，包括以下步骤：

(1)将小球藻干粉与石英砂按照体积比为5:1混匀，获得混合物，其中，所述小球藻干粉是经破壁处理后的小球藻粉碎制得的。

(2)在超临界二氧化碳萃取釜中依次叠加一层滤片、一层石英棉、0.9～1.1cm厚度的石英砂、所述混合物、0.9～1.1cm厚度的石英砂、一层石英棉以及一层滤片，旋紧超临界二氧化碳萃取釜，设定萃取压力150～200bar，萃取温度：萃取室温度40～50℃、萃取阀温度45～50℃、萃取釜温度36～40℃，然后静态萃取1.5～2.5h；萃取过程中，采用分段取样的方式进行取样，每萃取30～45min后，打开取样阀取样5min，取样期间维持萃取压力不变或者适当提高萃取压力，重复三次，获得小球藻油脂。

根据本发明的一种小球藻油脂的提取方法，通过在超临界二氧化碳萃取釜中设置滤片、石英棉、石英砂、小球藻干粉与石英砂的混合物、石英砂、石英棉和滤片的复合层结构，使得在萃取小球藻油脂的过程中，将萃取与分离一步完成，并且在提取的过程中，不适应任何其他有机试剂，提取溶剂仅为超临界二氧化碳，其不会对提取后的藻油造成污染，且取样时溶剂自然变为气态挥发，操作简便，成本低，绿色环保。

下面参考具体实施例，对本发明进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本发明。

实施例1

一种小球藻油脂的提取方法，包括：

(1)取一定量破壁小球藻干粉，加入石英砂作为分散剂，混匀，获得混合物，小球藻干粉与石英砂体积比5:1。

(2)在超临界二氧化碳萃取釜中加入一层滤片、一层石英棉、1cm厚度的石英砂、步骤(1)获得的混合物、再铺上一层1cm厚度的石英砂、一层石英棉以及一层滤片，之后旋紧超临界二氧化碳萃取釜，设定萃取压力180bar，萃取温度：萃取室温度40℃、萃取釜温度45℃、萃取釜温度36℃，然后静态萃取2h；萃取过程中，采用分段取样的方式进行取样，每萃取30～45min后，打开取样阀取样5min，取样期间维持萃取压力不变或者适当提高萃取压力，之后关闭取样阀继续静态萃取并维持萃取釜压力，重复三次，获得小球藻油脂。

该实施例通过在取样前后的取样瓶称重，通过差量法计算得知，小球藻油脂的萃取率为4.7％。

实施例2

一种小球藻油脂的提取方法，包括：

(1)取一定量破壁小球藻干粉，加入石英砂作为分散剂，混匀，获得混合物，小球藻干粉与石英砂体积比5:1。

(2)在超临界二氧化碳萃取釜中加入一层滤片、一层石英棉、1cm厚度的石英砂、步骤(1)获得的混合物、再铺上一层1cm厚度的石英砂、一层石英棉以及一层滤片，之后旋紧超临界二氧化碳萃取釜，设定萃取压力200bar，萃取温度：萃取室温度45℃、萃取釜温度50℃、萃取釜温度40℃，然后静态萃取2h；萃取过程中，采用分段取样的方式进行取样，每萃取30～45min后，打开取样阀取样5min，取样期间维持萃取压力不变或者适当提高萃取压力，之后关闭取样阀继续静态萃取并维持萃取釜压力，重复三次，获得小球藻油脂。

该实施例通过在取样前后的取样瓶称重，通过差量法计算得知，小球藻油脂的萃取率为5.1％。

实施例3

一种小球藻油脂的提取方法，包括：

(1)取一定量破壁小球藻干粉，加入石英砂作为分散剂，混匀，获得混合物，小球藻干粉与石英砂体积比5:1。

(2)在超临界二氧化碳萃取釜中加入一层滤片、一层石英棉、1cm厚度的石英砂、步骤(1)获得的混合物、再铺上一层1cm厚度的石英砂、一层石英棉以及一层滤片，之后旋紧超临界二氧化碳萃取釜，设定萃取压力150bar，萃取温度：萃取室温度50℃、萃取釜温度48℃、萃取釜温度38℃，然后静态萃取2.5h；萃取过程中，采用分段取样的方式进行取样，每萃取30～45min后，打开取样阀取样5min，取样期间维持萃取压力不变或者适当提高萃取压力，之后关闭取样阀继续静态萃取并维持萃取釜压力，重复三次，获得小球藻油脂。

该实施例通过在取样前后的取样瓶称重，通过差量法计算得知，小球藻油脂的萃取率为3.8％。

实施例4

一种小球藻油脂的提取方法，包括：

(1)取一定量破壁小球藻干粉，加入石英砂作为分散剂，混匀，获得混合物，小球藻干粉与石英砂体积比5:1。

(2)在超临界二氧化碳萃取釜中加入一层滤片、一层石英棉、1cm厚度的石英砂、步骤(1)获得的混合物、再铺上一层滤片，之后旋紧超临界二氧化碳萃取釜，设定萃取压力180bar，萃取温度：萃取室温度40℃、萃取釜温度45℃、萃取釜温度36℃，然后静态萃取2h；萃取过程中，采用分段取样的方式进行取样，每萃取30～45min后，打开取样阀取样5min，取样期间维持萃取压力不变或者适当提高萃取压力，之后关闭取样阀继续静态萃取并维持萃取釜压力，重复三次，获得小球藻油脂。

该实施例通过在取样前后的取样瓶称重，通过差量法计算得知，小球藻油脂的萃取率为4.6％。

综上，根据本发明的一种小球藻油脂的提取方法，通过在超临界二氧化碳萃取釜中设置滤片、石英棉、石英砂、小球藻干粉与石英砂的混合物、石英砂、石英棉和滤片的复合层结构，使得在小球藻油脂提取方法全程不使用任何有机试剂，提取溶剂仅为超临界CO₂，不会对提取后的藻油造成污染，且取样时溶剂自然变为气态挥发，不必进行溶剂分离步骤，操作简洁、减少能耗，萃取率最高可达到5.1％。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不应理解为必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例进行接合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。