用于治疗视网膜疾病的组合物
阅读说明：本技术 用于治疗视网膜疾病的组合物 (Composition for treating retinal diseases ) 是由 马尔切洛·桑托科诺 曼努埃拉·桑托诺奇托 克里斯蒂纳·扎普拉 卢卡·罗萨里奥·拉·罗萨 弗兰 于 2017-06-19 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种组合物,包含：虾青素、胡椒碱、乳香酸、辅酶Q10、姜黄、黄体素、玉米黄质、藏红花粉、铜以及可选的白藜芦醇、菠萝蛋白酶、锌、水杨苷和其他天然来源的抗氧化剂。本发明进一步涉及所述组合物用于治疗性质上是缺血性和/或退行性的视网膜疾病。(The present invention relates to a composition comprising astaxanthin, piperine, boswellic acid, coenzyme Q10, turmeric, lutein, zeaxanthin, saffron powder, copper and optionally resveratrol, bromelain, zinc, salicin and other antioxidants of natural origin the present invention further relates to the use of said composition for the treatment of retinal diseases which are ischemic and/or degenerative in nature.)
技术领域
本文描述了一种组合物，包含：虾青素、胡椒碱、乳香酸(boswellic acid)、辅酶Q10、姜黄素(curcuminoids)、黄体素、玉米黄质、藏红花粉(saffron)、铜以及可选的白藜芦醇、菠萝蛋白酶、锌、水杨苷和其他天然来源的抗氧化剂。本发明进一步涉及用于治疗性质上是缺血性和/或退行性的视网膜疾病的组合物。
背景技术
视网膜是构成眼球的壁的3层被膜(tunic)中最里面和最分化的，从视神经延伸到虹膜的瞳孔边缘。其具有接收光刺激并将其转换为传输至大脑结构的神经信号的功能。
从组织学的角度而言，视网膜由两层组成：
1.视网膜色素上皮或外叶(outer leaflet)
2.神经层或内叶或专指的视网膜。
视网膜由几个细胞层组成并分为两个区域：中央区域，称为黄斑，富含视锥细胞；和中部和***区域，其中视杆细胞占主导。眼睛的脉管系统由两个结构和功能上独立的系统，视网膜系统和睫状系统确保。损害这些通路的正常结构或功能的损伤和疾病是视力障碍和失明的主要原因。例如，糖尿病性视网膜病是影响视网膜脉管系统的最常见疾病，并且是劳动年龄人群视力丧失的主要原因。
虾青素是一种类胡萝卜素，其可以从包括红球藻属(Haematococcussp.)(一种具有高抗氧化能力的绿藻)的各种来源中提取。
胡椒碱是存在于胡椒(Piper nigrum)中的生物碱。
乳香酸获自齿叶乳香树(Boswellia serrata)。
菠萝蛋白酶存在于凤梨(Ananas comosus)的提取物中，并且包含两种蛋白水解酶。
辅酶Q10是强力的抗氧化剂。
姜黄素存在于姜黄(Curcuma longa)的提取物中。
黄体素属于叶黄素类，可以从包括万寿菊(Tagetes erecta)的花的各种来源中提取。
白藜芦醇是在葡萄的皮中发现的多酚，并成功地从包括虎杖(Polygonumcuspidatum)的根的各种来源中提取。
水杨苷发现于杨柳科中，是具有抗Cox活性的β-葡萄糖苷。
藏红花粉提取自番红花(Crocus sativus)的柱头。
玉米黄质是黄体素类的类胡萝卜素，可以从包括万寿菊的花的各种来源中提取。
对于针对视网膜疾病的补充治疗方法和组合物仍存在未满足的需求。本发明满足这一需求。
发明内容
描述了一种包含天然提取物、类胡萝卜素和矿物质的组合物。证明这种组合物出乎意料地可以通过促进缺血后应激条件下的功能恢复而保护视网膜。
附图说明
图1：每日一次通过管饲根据本发明的组合物C或VHC(载体)口服预处理5天，1h之后IR诱导并随后处理7天的大鼠中，T3和T7处的波a(A)和波b(B)相对于基线的ERG记录的比较。数据代表每个治疗组至少4只动物的平均值和范围。*p≤0.05；**p≤0.01；***p≤0001；治疗相对基准。相对于VHC，§p≤0.05。单向ANOVA之后后进行Holm-Amshid事后检验。
图2：每日一次通过管饲根据本发明的组合物C或VHC(载体)预处理5天，1h之后IR诱导并在缺血事件后6h处死的大鼠的视网膜中的TNFα的基因表达。数据表示相对于校准物
具体实施方式
在一个实施方式中，根据本发明的组合物包含虾青素、胡椒碱、乳香酸、辅酶Q10、姜黄素、黄体素、铜、藏红花粉、玉米黄质。
在进一步的实施方式中，所述组合物还包含：白藜芦醇，菠萝蛋白酶，锌，水杨苷。
在进一步的实施方式中，所述组合物包含来自天然来源的其他抗氧化剂。
更优选地，所述其他天然抗氧化剂是衍生自黑醋栗的聚合花青素。
在一个实施方式中，所述组合物包含：0.1至200mg的含有不少于2.0％虾青素的红球藻属的浓缩提取物，0.01至15mg的胡椒碱滴定度95％的获自胡椒的果实的干提取物，10至2000mg的乳香酸总滴定度70％和β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的树胶脂的提取物，0至500mg的含有相当于1至1000明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物，0.5至100mg的辅酶Q10，1至500mg的总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物，0.1至250mg的黄体素滴定度20％的万寿菊的花的提取物，0至500mg的具有不低于2mmol水溶性维生素E(trolox)当量/克提取物的氧自由基吸收容量(ORAC)的黑醋栗(Ribes nigrum)的干提取物，0.25至0.75mg铜(来自微胶囊化的硫酸铜)，0至150mg的由虎杖的根纯化的白藜芦醇，0至200mg的水杨苷滴定度25％的白柳(Salix alba)树皮的干提取物，1至100mg的藏花醛(safranal)滴定度2％的番红花的柱头的干提取物，0.1至30mg的玉米黄质滴定度为5％的万寿菊的花的提取物，0至10mg的锌(来自氧化锌)。
在进一步的实施方式中，所述组合物包含：0.5至150mg的含有不少于2.0％虾青素的红球藻属的浓缩提取物，0.1至10mg的胡椒碱滴定度95％的获自胡椒的果实的干提取物，20至1500mg的总乳香酸滴定度70％和β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的树胶脂的提取物，2至400mg的含有相当于1至1000明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物，1至80mg辅酶Q10，5至400mg的总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物，0.1至200mg的黄体素滴定度20％的万寿菊的花的提取物，0至250mg的具有不低于2mmol水溶性维生素E当量/克提取物的氧自由基吸收容量(ORAC)的黑醋栗的干提取物，0.25至0.75mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)，1.5至100mg由虎杖的根纯化的白藜芦醇，10至150mg的水杨苷滴定度25％的白柳的树皮的干提取物，2至50mg的藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物，0.2至20mg的玉米黄质滴定度5％的万寿菊的花的提取物，2.5至7.5mg的锌(来自氧化锌)。
在另一个实施方式中，所述组合物包含：1至100mg的含有不少于2.0％虾青素的红球藻属的浓缩提取物，0.2至8mg的胡椒碱滴定度95％的获自胡椒的果实的干提取物，25至1000mg的总乳香酸滴定度70％和β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的树胶脂的提取物，5至300mg的含有相当于8至480的明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实提取物，3至75mg辅酶Q10，10至250mg的总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物，1至150mg的黄体素滴定度20％的万寿菊的花的提取物，0至125mg的具有不低于2mmol水溶性维生素E当量/克提取物的氧自由基吸收容量(ORAC)的黑醋栗的干提取物，0.3至0.75mg铜(来自微囊化硫酸铜)，3至75mg由虎杖根纯化的白藜芦醇，30至100mg的水杨苷滴定度25％的白柳的树皮的干提取物，4至40mg的藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物，0.5至18mg的玉米黄质滴定度为5％的万寿菊的花的提取物，3至7.5mg的锌(来自氧化锌)。
在进一步的实施方式中，所述组合物包含：1至80mg的含有不少于2.0％虾青素的红球藻属的浓缩提取物，0.5至5mg的胡椒碱滴定度95％的获自胡椒的果实的干提取物，40至800mg的总乳香酸滴定度70％和β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的树胶脂的提取物，10至250mg含有相当于8至480的明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物，3.5至50mg辅酶Q10，15至200mg的总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物，3至100mg的黄体素滴定度20％的万寿菊的花的提取物，16至100mg的具有不低于2mmol水溶性维生素E当量/克提取物的氧自由基吸收容量(ORAC)的黑醋栗的干提取物，0.3至0.65mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)，6至50mg由虎杖根纯化的白藜芦醇，35至95mg的水杨苷滴定度25％的白柳的树皮的干提取物，5至25mg的藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物，1至17mg的玉米黄质滴定度为5％的万寿菊的花的提取物，3至7mg的锌(来自氧化锌)。
在进一步的实施方式中，所述组合物包含：5至50mg的含有不少于2.0％虾青素的红球藻属的浓缩提取物，0.75至4mg的胡椒碱滴定度95％的获自胡椒的果实的干提取物，50至600mg的总乳香酸滴定度70％和β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的树胶脂的提取物，20至200mg的含有相当于15至370的明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物，3至25mg辅酶Q10，30至100mg的总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物，10至50mg的黄体素滴定度20％的万寿菊的花的提取物，20至60mg的具有不低于2mmol水溶性维生素E当量/克提取物的氧自由基吸收容量(ORAC)的黑醋栗干提取物，0.35至0.65mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)，8至25mg的由虎杖根纯化的白藜芦醇，35至95mg的水杨苷滴定度25％的白柳的树皮的干提取物，6至20mg的藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物，2至15mg的玉米黄质滴定度为5％的万寿菊的花的提取物，4至7mg的锌(来自氧化锌)。
在进一步的实施方式中，所述组合物包含：10至30mg含有不少于2.0％虾青素的红球藻属的浓缩提取物，1至3mg的胡椒碱滴定度95％的获自胡椒的果实的干提取物，60至200mg的总乳香酸滴定度70％和β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的树胶脂的提取物，3至100mg的含有相当于50至200的明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物，4至12mg辅酶Q10，30至70mg的总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物，15至35mg的黄体素滴定度20％的万寿菊的花的提取物，20至40mg的具有不低于2mmol水溶性维生素E当量/克提取物的氧自由基吸收容量(ORAC)的黑醋栗的干提取物，0.4至0.6mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)，10至20mg由虎杖根纯化的白藜芦醇，40至90mg的水杨苷滴定度25％的白柳的树皮的干提取物，7至15mg藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物，5至15mg的玉米黄质滴定度为5％的万寿菊的花的提取物，5至7mg的锌(来自氧化锌)。
在体内实验模型中，证明根据本发明的组合物出乎意料地有效抑制TNFα的表达并促进视网膜功能恢复。
该活性特别地是通过本发明的组合物获得的。当单独测试时，不同的组分不能提供采用组合物获得的效果，证实测试的组分之间具有明显的协同作用。
根据本发明的组合物包含天然提取物，并且在视网膜疾病的治疗中提供了有价值的补充。
本发明进一步涉及将权利要求1至6中描述的根据本发明的组合物与本领域已知的药用赋形剂组合的口服制剂。这些赋形剂允许将本发明的组合物配制成散剂、片剂、丸剂、胶囊剂、液体剂、凝胶剂、糖浆剂、半液体混合物、混悬剂等，用于个体口服消化。口服使用的药物制剂可以可选地通过将得到的混合物研磨，并在需要时加入合适的佐剂后处理颗粒混合物以获得片剂或药丸芯，而作为固体赋形剂获得。具体地，合适的赋形剂是填充剂，如糖，包括乳糖或蔗糖；纤维素制剂，如玉米淀粉，小麦淀粉，大米淀粉，马铃薯淀粉，明胶，黄芪胶，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；以及本领域已知的各种调味剂，如可可。如果需要，可以加入崩解剂，如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或藻酸或其盐，如藻酸钠。所述制剂可以以可咀嚼的片剂或在口腔中崩解的片剂、液体、粉末、装于小袋中的粉末、丸剂、软明胶胶囊或硬明胶胶囊的形式基于。在一些实施方式中，本发明的组合物作为药物组合物以液体组合物的形式提供。合适的液体赋形剂在本领域内是已知的；参见，例如Remington's Pharmaceutical Sciences。
还描述了治疗视网膜疾病的辅助的方法，包括向对其有需要的人给予权利要求1至6描述的根据本发明的组合物。所述组合物以50mg/天至5g/天，优选100mg/天至2.5g/天，或200mg/天至1.5g/天，更加优选300mg/天至800mg/天的剂量给予。
实施例
实施例1：组合物
根据本发明的组合物制备如下。
组合物A
20mg含有不少于2.0％的虾青素的红球藻属的浓缩提取物
2.5mg胡椒碱滴定度为95％的获自胡椒的果实的干提取物
100mg总乳香酸滴定度70％且β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的胶树脂的提取物
5mg辅酶Q10
50mg总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物
25mg黄体素滴定20％的万寿菊的花的提取物
0.5mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)
10mg藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物
10mg玉米黄质滴定度5％的万寿菊的花的提取物
组合物B
20mg的含有不少于2.0％的虾青素的红球藻属的浓缩提取物
2.5mg胡椒碱滴定度为95％的获自胡椒的果实的干提取物
100mg总乳香酸滴定度70％且β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的胶树脂的提取物
81mg含有相当于1至1000明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物
5mg辅酶Q10
50mg总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物
25mg黄体素滴定20％的万寿菊的花的提取物
0.5mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)
15mg由虎杖根纯化的白藜芦醇
75mg水杨苷滴定度25％的白柳树的树皮的干提取物
10mg藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物
10mg玉米黄质滴定度5％的万寿菊的花的提取物
6.25mg锌(来自氧化锌)。
组合物C
20mg含有不少于2.0％的虾青素的红球藻属的浓缩提取物
2.5mg胡椒碱滴定度为95％的获自胡椒的果实的干提取物
100mg总乳香酸滴定度70％且β乳香酸滴定度20％的齿叶乳香树的胶树脂的提取物
81mg含有相当于1至1000明胶消化单位(GDU)的菠萝蛋白酶的凤梨的茎和果实的提取物
5mg辅酶Q10
50mg从总姜黄素滴定度95％的姜黄的根的干提取物
25mg黄体素滴定20％的万寿菊的花的提取物
0.5mg铜(来自微胶囊化硫酸铜)
15mg由虎杖根纯化的白藜芦醇
75mg水杨苷滴定度25％的白柳树的树皮的干提取物
10mg藏花醛滴定度2％的番红花的柱头的干提取物
10mg玉米黄质滴定度5％的万寿菊的花的提取物
6.25mg锌(来自氧化锌)
30mg具有不少于2mmol水溶性维生素E当量/克提取物的氧自由基吸收能力(ORAC)的黑醋栗的干提取物
实施例2：大鼠的视网膜缺血-再灌注损伤模型
使用了大鼠的视网膜缺血-再灌注(IR)模型，其在现有技术中被广泛用作急性高血压诱导的视网膜变性的模型。每天一次通过管饲喂实施例1的组合物C(30mg/天)或载体(HCV；Nutilis，4.25％)对体重约200g的成年雄性Brown-Norway大鼠进行口服预处理。预处理进行5天，在诱导IR之前约一个小时进行进一步的处理，并在接下来的7天内继续处理。预处理五天后，动物用Zoletil(420μ/Kg)和Atila(37μL/Kg)溶液腹膜内麻醉，并在滴注0.5％托吡卡胺引起的瞳孔散大后，通过将连接到盐水容器的30口径针头***眼前房内诱发IR。将储备的盐溶液置于距手术台一定高度的位置，例如以确保针处的静水压力为约130mmHg。通过眼底的“变白”确证眼内压升高至诱导局部缺血的水平。60分钟后，去除针头以使视网膜血流恢复。为了评价IR引起的损伤，使用Phoenix Research Laboratories的Ganzfeld视网膜电图仪，通过视网膜电图(ERG)分析，以突出视网膜细胞功能的任何变化。在适应黑暗的动物中至少记录12h的视网膜电图，并在麻醉和瞳孔散大后，分别将两个电极***颅位和尾位，且第三个电极***Ganzfeld室内。ERG记录为以每秒80坎德拉/平方米(cd·s/m2)的强度发射1毫秒(ms)的十次绿光闪烁的平均值。使用LabScribe软件进行的ERG的记录和分析在诱导前(基线)、IR后3天(T3)和7(T7)天时进行。为了评价视网膜功能，考虑了a波(视锥细胞和视杆细胞感光体的功能)和b波(穆勒(Müller)细胞和双极细胞功能)的振幅。
在进行的实验中，第3天时在用VHC或组合物C处理的动物中，观察到了a波(图1A)和b波(图1B)的振幅相对于基线在统计学上的显著降低，证实了功能受损的发作由缺血事件引起。相反，在诱导IR后7天，VHC中的a波和b波的振幅相对于基线保持统计学上显著性的降低，但在用组合物C处理的动物中失去了显著性，表明处理能够将视网膜功能恢复到与基线相当的值(图1A和B，浅色圆圈)。
在IR诱导后T7，在用组合物C处理的动物中，相对于用载体处理的动物，还观察到了a波和b波的视网膜功能的显著改善。
为了评价本发明的组合物对TNFα基因表达的可能作用，在诱导视网膜IR的前五天和前一小时，体重约200g的成年雄性Brown-Norway大鼠每天一次口服处理VHC(Nutilis，4.25％)或组合物C(30mg/天)。缺血事件后6h，处死动物，并随后取出视网膜并保存于50μLRNA later中。使用TRIzol对视网膜样品进行RNA提取。β-肌动蛋白用作内源性对照，原生对照
