阅读说明：本技术 一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法 (Method for establishing improved rat allogenic vein transplantation model ) 是由 孔令泽 唐梅 李慧 贺永胜 于 2019-11-05 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法,所述方法包括以下步骤：现配麻醉剂,大鼠称重,并依据大鼠重量给予一定量的麻醉剂腹腔注射,使得大鼠麻醉；把大鼠置于温控毯并固定于手术台上,保证大鼠的躯体平直无张力,用理发器刮掉大鼠胸部毛发,通过安尔碘局部消毒；取大鼠右侧胸锁乳突肌前切口,长约3cm,切开皮肤及皮下组织,分离出大鼠上腔静脉,然后截断静脉远心端,用5000U/L肝素生理盐水冲洗静脉管腔。本发明的建立方法使得动静脉血管内壁直接接触,吻合面积较大,血管不会坏死,血管套不会和血液接触,血管桥完全是移植后的静脉血管,没有血管堵塞的风险,提高大鼠异体静脉移植成功率,更加符合临床血管移植机制。(The invention discloses a method for establishing an improved rat allogenic vein transplantation model, which comprises the following steps: the anesthetic is prepared in situ, the rat is weighed, and a certain amount of anesthetic is given for intraperitoneal injection according to the weight of the rat, so that the rat is anesthetized; placing the rat on a temperature control blanket and fixing the rat on an operating table to ensure that the body of the rat is straight and tension-free, scraping the hair of the chest of the rat by using a hair cutter, and locally sterilizing the hair by using iodine; an incision of the right sternocleidomastoid muscle of the rat is taken, the length of the incision is about 3cm, skin and subcutaneous tissues are cut, the superior vena cava of the rat is separated, the distal end of the vein is cut off, and the lumen of the vein is flushed by 5000U/L heparin normal saline. The establishing method of the invention ensures that the inner walls of arteriovenous vessels are directly contacted, the anastomotic area is larger, the vessels are not necrotic, the vascular sleeve is not contacted with blood, the vascular bridge is completely the transplanted venous vessel, the risk of vessel blockage is avoided, the success rate of rat allogeneic vein transplantation is improved, and the establishing method is more in line with the clinical blood vessel transplantation mechanism.)

一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法

技术领域

本发明涉及动物模型建立技术领域，具体为一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法。

背景技术

血管移植术就是当血管有缺损，不能直接缝合时，常用的手术方法，包括将移植血管嵌于血管缺损处，先缝合一端血管剪去多余血管，再缝合另一端血管，移植的血管可选用自体动脉、静脉，或同种异体动、静脉，或人造血管，但在显微血管手术中，仍以自体动、静脉移植最常用，大鼠由于其心率快、血流速度快，不易形成血栓栓塞等特点，常被用来建立模拟人体冠状动脉旁路移植术的病理生理模型，既往的动静脉短路端侧吻合法、静脉游离后端端吻合法及续贯法等，因手术创伤较大，移植后动静脉血管之间的血管套形成一段血管桥，不符合研究机制，同时容易堵塞，且动脉血管壁和血管套接触的位置以及静脉血管壁和血管套接触的位置血管容易坏死，因此有必要对现有技术进行改进，以解决上述问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法，以解决上述背景技术中提出的现有的静脉移植模型移植后动静脉血管之间的血管套形成一段血管桥，不符合研究机制，同时容易堵塞，且动脉血管壁和血管套接触的位置以及静脉血管壁和血管套接触的位置血管容易坏死的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法，所述方法包括以下步骤：

S1：现配麻醉剂，大鼠称重，并依据大鼠重量给予一定量的麻醉剂腹腔注射，使得大鼠麻醉；

S2：把大鼠置于温控毯并固定于手术台上，保证大鼠的躯体平直无张力，用理发器刮掉大鼠胸部毛发，通过安尔碘局部消毒；

S3：取大鼠右侧胸锁乳突肌前切口，长约3cm，切开皮肤及皮下组织，分离出大鼠上腔静脉，然后截断静脉远心端，用5000U/L肝素生理盐水冲洗静脉管腔，并浸入肝素溶液中漂洗备用；

S4：用硬膜外麻醉导管制备血管套，在距末端约1mm处刻画凹槽以待结扎固定，在血管套另一端留下1/5管壁，以备套管时微型血管钳夹持；

S5：分离出2cm左右受体腹主动脉并阻断血流，在血管两侧断端各缝1根7/0牵引线辅助套管；

S6：确定移植静脉血管被牢固结扎套定后，缓慢松开无创血管夹恢复血管桥血流，静脉桥的颜色变红，说明血流通畅、充盈明显并有搏动提示模型成功；

S7：术后当天肌肉注射青霉素40万U，常规饲养；

S8：术后10天，采用血管超声方法，检测血管的通畅性。

优选的，所述S1中大鼠设置为SD雄性大鼠，8-10周龄，体重150-250g。

优选的，所述S1中麻醉剂设置为0.3 %戊巴比妥2ml/100g体重或***10mg/10Og体重或已醚吸入麻醉均可。

优选的，所述S2中温控毯的温度设置为37摄氏度。

优选的，所述S4中血管套的长度设置为4mm-5mm。

与现有技术相比，本发明的有益效果是。

（1）本发明方法使得动静脉血管内壁直接接触，吻合面积较大，血管不会坏死，提高大鼠异体静脉移植成功率。

（2）本发明的血管套不会和血液接触，血管桥完全是移植后的静脉血管，没有血管堵塞的风险，同时更加符合临床血管移植机制，高生物模型的研究价值，且手术不需显微外科缝合，操作简单，手术时间短，创伤小。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供的以下实施例。

实施例1

一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法，包括以下步骤：

S1：现配麻醉剂，大鼠称重，并依据大鼠重量给予一定量的麻醉剂腹腔注射，使得大鼠麻醉；

S2：把大鼠置于温控毯并固定于手术台上，保证大鼠的躯体平直无张力，用理发器刮掉大鼠胸部毛发，通过安尔碘局部消毒；

S3：取大鼠右侧胸锁乳突肌前切口，长约3cm，切开皮肤及皮下组织，分离出大鼠上腔静脉，然后截断静脉远心端，用5000U/L肝素生理盐水冲洗静脉管腔，并浸入肝素溶液中漂洗备用；

S4：用硬膜外麻醉导管制备血管套，在距末端约1mm处刻画凹槽以待结扎固定，在血管套另一端留下1/5管壁，以备套管时微型血管钳夹持；

S5：分离出2cm左右受体腹主动脉并阻断血流，在血管两侧断端各缝1根7/0牵引线辅助套管；

S6：确定移植静脉血管被牢固结扎套定后，缓慢松开无创血管夹恢复血管桥血流，静脉桥的颜色变红，说明血流通畅、充盈明显并有搏动提示模型成功；

S7：术后当天肌肉注射青霉素40万U，常规饲养，避免大鼠遭遇感染死亡；

S8：术后5天，采用血管超声方法，检测血管的通畅性。

进一步，S1中大鼠设置为SD雄性大鼠，8-10周龄，体重150-250g。

进一步，S1中麻醉剂设置为0.3 %戊巴比妥2ml/100g体重或***10mg/10Og体重或已醚吸入麻醉均可。

进一步，S2中温控毯的温度设置为37摄氏度，提高手术成功率，避免大鼠死亡。

进一步，S4中血管套的长度设置为4mm-5mm。

实施例2

一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法，包括以下步骤：

S1：现配麻醉剂，大鼠称重，并依据大鼠重量给予一定量的麻醉剂腹腔注射，使得大鼠麻醉；

S2：把大鼠置于温控毯并固定于手术台上，保证大鼠的躯体平直无张力，用理发器刮掉大鼠胸部毛发，通过安尔碘局部消毒；

S3：取大鼠右侧胸锁乳突肌前切口，长约3cm，切开皮肤及皮下组织，分离出大鼠上腔静脉，然后截断静脉远心端，用5000U/L肝素生理盐水冲洗静脉管腔，并浸入肝素溶液中漂洗备用；

S4：用硬膜外麻醉导管制备血管套，在距末端约1mm处刻画凹槽以待结扎固定，在血管套另一端留下1/5管壁，以备套管时微型血管钳夹持；

S5：分离出2cm左右受体腹主动脉并阻断血流，在血管两侧断端各缝1根7/0牵引线辅助套管；

S6：确定移植静脉血管被牢固结扎套定后，缓慢松开无创血管夹恢复血管桥血流，静脉桥的颜色变红，说明血流通畅、充盈明显并有搏动提示模型成功；

S7：术后当天肌肉注射青霉素40万U，常规饲养；

S8：术后10天，采用血管超声方法，检测血管的通畅性。

进一步，S1中大鼠设置为SD雄性大鼠，8-10周龄，体重150-250g。

进一步，S1中麻醉剂设置为0.3 %戊巴比妥2ml/100g体重或***10mg/10Og体重或已醚吸入麻醉均可。

进一步，S2中温控毯的温度设置为37摄氏度。

进一步，S4中血管套的长度设置为4mm-5mm。

实施例3

一种改良的大鼠异体静脉移植模型的建立方法，包括以下步骤：

S1：现配麻醉剂，大鼠称重，并依据大鼠重量给予一定量的麻醉剂腹腔注射，使得大鼠麻醉；

S2：把大鼠置于温控毯并固定于手术台上，保证大鼠的躯体平直无张力，用理发器刮掉大鼠胸部毛发，通过安尔碘局部消毒；

S3：取大鼠右侧胸锁乳突肌前切口，长约3cm，切开皮肤及皮下组织，分离出大鼠上腔静脉，然后截断静脉远心端，用5000U/L肝素生理盐水冲洗静脉管腔，并浸入肝素溶液中漂洗备用；

S4：用硬膜外麻醉导管制备血管套，在距末端约1mm处刻画凹槽以待结扎固定，在血管套另一端留下1/5管壁，以备套管时微型血管钳夹持；

S5：分离出2cm左右受体腹主动脉并阻断血流，在血管两侧断端各缝1根7/0牵引线辅助套管；

S6：确定移植静脉血管被牢固结扎套定后，缓慢松开无创血管夹恢复血管桥血流，静脉桥的颜色变红，说明血流通畅、充盈明显并有搏动提示模型成功；

S7：术后当天肌肉注射青霉素40万U，常规饲养；

S8：术后15天，采用血管超声方法，检测血管的通畅性。

进一步，S1中大鼠设置为SD雄性大鼠，8-10周龄，体重150-250g。

进一步，S1中麻醉剂设置为0.3 %戊巴比妥2ml/100g体重或***10mg/10Og体重或已醚吸入麻醉均可。

进一步，S2中温控毯的温度设置为37摄氏度。

进一步，S4中血管套的长度设置为4mm-5mm。

实施例1、实施例2和实施例3均为实验组，另设置对照组大鼠，对照组大鼠不作任何处理，实验组大鼠每组20只，术后第5天、第10天和第15天，采用血管超声方法，观察静脉桥堵塞情况，得到手术后血管的通畅率，对照组大鼠共30只，分三组，分别于实验组大鼠术后第5天、第10天和第15天相对应，比对术后与非术后血管的通畅率情况，实验结果显示对照组共60只大鼠，手术存活60只，且采用血管超声方法探测的血管的通畅率高，极少出现堵塞情况，采用本发明方法使得动静脉血管内壁直接接触，吻合面积较大，故血管不会坏死，且血管套不会和血液接触，血管桥完全是移植后的静脉血管，没有血管堵塞的风险，提高大鼠异体静脉移植成功率，同时更加符合临床血管移植机制，提高生物模型的研究价值。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。