阅读说明：本技术 一种快速提取甜茶苷的方法 (Method for rapidly extracting rubusoside ) 是由 尹成男 于 2019-10-10 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种快速提取甜茶苷的方法,包括粉碎、过筛——提取——脱色——脱涩、脱苦——结晶、重结晶等步骤,本发明的提取方法能够快速的将甜茶中的甜茶苷提出取来,且甜茶苷提取率高,成本低,能够满足大规模的低成本的提取。(The invention discloses a method for rapidly extracting rubusoside, which comprises the steps of crushing, sieving, extracting, decoloring, deastringency, debitterizing, crystallizing, recrystallizing and the like.)

一种快速提取甜茶苷的方法

技术领域

本发明涉及一种快速提取甜茶苷的方法，属于生物化学领域。

背景技术

甜茶是蔷薇科多年生藤木，为广西特有的一种无毒、低热能、高甜度和具有保健功能的野生珍稀甜味植物，主产于广西的瑶山、金秀、永福和岑溪等县市。由于其味甜，故名甜茶。与罗汉果、甜叶菊并称为广西三大甜味植物，在广西民间具有悠久的应用历史，长期以来当地人民一直当茶饮用，亦用来代糖加工食品，还可入药。

甜茶叶的主要成分有甜茶苷、生物类黄酮、茶多酚、氨基酸、无机盐等。甜茶叶的主要甜味成分是甜茶苷，为斯替维醇和葡萄糖结合而成的四环二萜苷，分子式C20H50O13,在化学结构上与甜叶菊苷(斯替维苷)相似。甜茶苷的甜度约为蔗糖甜度的300倍，而热值仅是蔗糖的5％。经药理实验，甜茶苷具有降血糖、降血压、促进新陈代谢、抑制胃酸过多，清热润肺、生生津解渴、并有高甜度，低热值的特性，不但可作为药用，还是一种品质优良的食品添加剂，可代替蔗糖用于高血压、糖尿病、肥胖症等患者以及老年人和儿童的食品、保健品和药品中。

随着对甜味苷的应用越来越广，从甜茶中提出甜味苷的方法也越来越多，这些方法中有些注重提取率，有的注重提取效率，有的注重提取成本等等，总之现有的提取方法中还没有一种提取方法能够兼顾上述的几个方面，严重制约了甜茶苷的提取。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速提取甜茶苷的方法，能够快速的将甜茶中的甜茶苷提出取来，同时能够满足大规模的低成本的提取。

本发明技术方案一种快速提取甜茶苷的方法，包括以下步骤，

1)粉碎、过筛：将干燥甜茶叶进行粉碎，并过40目筛，得到粉末A；

2)提取：将粉末A置于连接超声波发生器的水箱中，超声10～15分钟，滤膜过滤，得滤液和滤渣，将滤渣进行两次蒸馏水洗并滤膜过滤，得两次的水洗滤液，将滤液和两次水洗滤液混合得到滤液B；

3)脱色：将滤液B经过大孔吸附树脂柱脱色吸附，得到脱色液，后用蒸馏水对大孔吸附树脂柱进行清洗，直至水洗无甜味，得到脱色清洗液，将脱色液和脱色清洗液混合，得到混合液C；对清洗无甜味后的大孔吸附树脂柱进行再生；

4)脱涩、脱苦：向混合液C中加入活性炭，搅拌，过滤，减压浓缩，喷雾干燥，得甜茶苷粗品；

5)结晶、重结晶：向甜茶苷粗品中加入溶媒，置于75～85℃水浴中加热至全部溶解，趁热过滤，放置析出，过滤，再重结晶，喷雾干燥，得到甜茶苷精品。

优选地，所述超声水箱中灌入温度在85～90℃的蒸馏水，且水粉比为20～30:1。

优选地，所述溶媒为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿或石油醚中的一种或几种的混合液。

本发明技术方案的一种快速提取甜茶苷的方法有益效果是：

1、利用超声波提取，提取速度快，效率高，适合大规模生产。

2、提取过程中不采用化学药剂，成本低，适合大规模工业生产。

3、提取步骤少，提取效率高，对操作人员技术要求低，可快速推广应用。

具体实施方式

为便于本领域技术人员理解本发明技术方案，现结合说明书具体实施例对本发明技术方案做进一步的说明。

具体实施例1

一种快速提取甜茶苷的方法，按照以下步骤进行。

第一步，粉碎、过筛：首先选取优质干燥甜茶叶称重并记录，然后进行粉碎，并过40目筛，再后对未过筛部分再次进行粉碎，再次过筛，直至全部甜茶也粉末过筛，得到粉末A。

第二步，提取：首先准备一装有85～90℃的蒸馏水的超声波水箱，蒸馏水与粉末A比为20～30:1。然后将粉末A全部倒入连接超声波发生器的水箱中，并搅拌至水粉完全混合，超声10～15分钟。再打开水箱排水口将水粉混合物经滤膜过滤，得滤液和滤渣。最后将滤渣进行两次蒸馏水洗并滤膜过滤，得两次的水洗滤液，将滤液和两次水洗滤液混合得到滤液B。滤膜过滤参数为：进溶液压力0.9Mpa，出溶液压力0.45Mpa。

第三步，脱色：首先对大孔吸附树脂柱进行预处理，按照以下步骤进行：

(1)树脂装入交换柱后，用蒸留水反洗树脂层，展开率为50—70％，直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止，再用50％—100％乙醇10—15倍体积慢速淋洗。

(2)用约2倍体积的4—5％HCl溶液，以2m/h流速通过树脂层。全部通入后，浸泡4—8小时，排去酸液，用洁净水冲洗至出水呈中性。冲洗流速为10—20m/h。

(3)用约2倍树脂体积的2—5％NaOH溶液，按上面进HCl溶液的方法通入和浸泡。排去碱液，用洁净水冲洗至出水呈中性。流速同上。

在大孔吸附树脂柱预处理结束后将前步得到的滤液B经过大孔吸附树脂柱脱色吸附，得到脱色液。再用蒸馏水对大孔吸附树脂柱进行清洗，直至水洗无甜味，得到脱色清洗液。再后脱色液和脱色清洗液混合，得到混合液C。最后利用对清洗无甜味后的大孔吸附树脂柱进行再生。

大孔吸附树脂柱进行再生步骤为：配制碱性盐水(含8％NaCl，2％NaOH)，以用2.5倍树脂体积60—80min通完，然后浸泡2—4小时，以纯水淋洗至出水PH呈中性即完成再生。

第四步，脱涩、脱苦：向混合液C中加入混合液C体积的1/5的活性炭，用于脱去甜茶苷中的苦味和涩味。充分搅拌搅拌，滤膜过滤，减压浓缩，喷雾干燥，得甜茶苷粗品。

第五步，结晶、重结晶：向甜茶苷粗品中加入溶媒，置于75～85℃水浴中加热至全部溶解，趁热过滤，放置析出，过滤，再重结晶，喷雾干燥，得到甜茶苷精品。溶媒选用甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿或石油醚中的一种或几种的混合液均可，这里选用甲醇和乙醇的混合液。

在甜茶苷的提取中，在第三步中需要对含有甜茶苷的滤液B的脱色率进行测定。具体的操作方式是：

将滤液B于200～760nm波长范闱内进行扫描，发现溶液在可见光区没有最大吸收波长，在400～760nm波长范闱内递减趋势。且在400～500nm内没有较大差异。滤液B为棕黄色，波长应在425nm左右吸附，故这里选定420nm波长作为色素检测波长。在该条件下，分别测定滤液B脱色前(A1)后(A2)吸光度并按下式(I)计算树脂对含有甜茶苷的滤液B的脱色率(X)。

X＝(A1-A2)/A1 (I)

在甜茶苷的提取中，在第三步中需要对含有甜茶苷的滤液B的保留率进行测定。具体的操作方式是：

甜茶苷采用高效液相色谱法(HPLC)检测，大孔吸附树脂柱温度为30℃，在此条件下，分别测定滤液B脱色前(C1)后(C2)的甜茶苷的含量，并按照下式(II)计算树脂柱对甜茶苷的保留率(Y)。

Y＝C2/C1 (II)

最后，对甜茶苷精品进行称重并记录(M2)，并将甜茶苷精品重量与原干甜茶叶重量(M1)进行比较，得到甜茶干回收率(P)，甜茶苷回收率按照下式(III)进行计算。

P＝M2/M1 (III)

经计算得：

X＝20.2％

Y＝90.6％

P＝78.4％。

本发明技术方案在上面结合实施例对发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性改进，或未经改进将发明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。