阅读说明：本技术 焦山楂碳量子点（纳米颗粒/纳米粒子）的制备及其应用 (Preparation and application of coke hawthorn carbon quantum dots (nano particles/nano particles) ) 是由 屈会化 赵琰 王庆国 孔慧 鲁放 孙紫薇 熊威 宋兴兴 曹鹏 成金俊 张美龄 于 2018-06-22 设计创作，主要内容包括：本发明涉及从焦山楂中提取分离纯化出的量子点(纳米颗粒/纳米粒子)的方法,该方法包括：焦山楂,经溶剂萃取或者提取,再用分子量大于1000Da的透析袋透析,或者超滤,得到焦山楂碳量子点,该碳量子点在紫外灯365nm下呈蓝色荧光、透射电镜测量粒径＜100nm,主要由C、H、O和N等元素构成；本发明还涉及此量子点在医药领域的应用,通过注射、口服或外用等途径给药后产生的降血糖、止血、镇痛、镇静、抗炎、抗过敏、抗氧化、解热、解痉、降糖、降压、对抗肿瘤化疗药物的副反应等。(The invention relates to a method for extracting, separating and purifying quantum dots (nano particles/nano particles) from scorched hawthorn, which comprises the following steps: extracting fructus crataegi with solvent, dialyzing with dialysis bag with molecular weight greater than 1000Da, or ultrafiltering to obtain fructus crataegi preparata carbon quantum dots which exhibit blue fluorescence under ultraviolet lamp 365nm and have particle diameter less than 100nm measured by transmission electron microscope and mainly comprise C, H, O and N; the invention also relates to the application of the quantum dot in the field of medicine, and the quantum dot is used for reducing blood sugar, stopping bleeding, easing pain, calming, resisting inflammation, resisting allergy, resisting oxidation, relieving fever, relieving spasm, reducing blood sugar, reducing blood pressure, resisting side reaction of tumor chemotherapy drugs and the like after being administrated by injection, oral administration or external application and other ways.)

焦山楂碳量子点(纳米颗粒/纳米粒子)的制备及其应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及焦山楂碳量子点的制备及在医药领域的应用。

背景技术

山楂始载于唐《新修本草》，是一味传统的消食药，有一千多年的使用历史，其炮制方法为历代医药典籍所收载，资源丰富。

山楂的炮灸方法主要有清炒(即炒黄)、炒焦、制炭、加辅料炒以及蒸制等。清炒法始见于元代《丹溪心法》“山楂：炒”，其后明代《医学纲目》、清代《良朋汇集》、《温病条辩》等书中均有炒山楂或山楂肉的记载。在《滇南本草》中有“山楂核：炒黄色”的记载，在清代的《医宗说约》、《温病条辩》中有炒黑的记载，“捣末用，炒黑，能治血积”(《医宗说约》)，主要是为了改变药性和便于调剂。山楂炭的记载出现在清代《吴魏通医案》等文献中。蒸法始见于元代《丹溪心法》“山楂：蒸熟，晒干”。从明代开始，出现了加辅料炮制山楂的文献历代文献记载有四种辅料，五种制法。明代《证治准绳》载有“醋炒”。清代《医宗金鉴》载有“酒炒”，“温热署疫”载有“姜汁炒”，清代《本经逢源》有去核童便浸”。山楂的现代炮制品主要为：净制山楂、炒山楂、焦山楂。目前对炒焦的研宄主要集中在化学成分变化方面，然而对于其炒焦的药效作用物质基础和原理还尚无明确答案。

发明内容

本发明首次从焦山楂中提取分离出碳量子点(纳米颗粒/纳米粒子)，并首次发现了焦山楂碳量子点具有很强的抑制肠道二糖酶和体外抑制蔗糖酶和麦芽糖酶等生物效应。

技术方案：本发明提供了从焦山楂中提取分离出碳量子点的方法。本发明还提供了焦山楂炭碳量子点的生物活性及其在医药领域中的应用。

所述制备方法，具体包括以下步骤：烘法制备焦山楂，用溶剂从焦山楂中提取出碳量子点，进一步分离纯化包括透析、超滤、层析等技术方法，得到高纯度的碳量子点。

附图说明

图1.焦山楂碳量子点紫外、荧光、X射线衍射和红外光谱图

图2.焦山楂碳量子点X射线光电子能谱

具体实施方式

实施例1：焦山楂碳量子点的制备

取山楂药材饮片置坩埚内，加盖，置马弗炉中，升温至260℃，保持恒温1h，待自然降温至室温，打开马弗炉取出，即为焦山楂。

用纯水提取焦山楂3次，合并水溶液，浓缩，用1KD透析袋透析，透析袋内的部分即为高纯度焦山楂碳量子点的溶液。

实施例2：焦山楂碳量子点的制备

取山楂药材饮片置坩埚内，置坩埚内，加盖，置马弗炉中，升温至350℃，保持恒温1h，待自然降温至室温，打开马弗炉取出，吸出焦黑色液体，即为焦山楂。用纯水提取焦山楂3次，合并水溶液，浓缩，用10KD超滤管超滤，滤液即为高纯度焦山楂炭碳量子点的溶液。

实施例3.焦山楂碳碳量子点的抑制二糖酶活性：

1.实验的前一晚小鼠禁食12小时，正常给水。

2.将小鼠脱颈处死迅速沿腹中线剪开腹部皮肤，选取小肠剪下，弃去肠两端1cm处肠，取中段小肠。挤出肠道内容物，生理盐水漂洗干净后吸干称重。小肠样品加入冷生理盐水(1∶10，W/V)后，用匀浆器匀浆，冷藏备用。

3.麦芽糖酶和蔗糖酶活性的测定：将实验样品分为对照组和实验组(碳量子点高中低浓度组)，实验组取0.1ml匀浆液加入焦三仙碳量子点(高、中、低浓度) 后，再0.1ml0.056mol/L底物(麦芽糖和蔗糖)，在37℃水浴中准确反应30min，立即入沸水浴终止反应，用血糖试纸和血糖仪测定溶液中葡萄糖浓度。对照组取0.1ml匀浆液不加碳量子点，后操作方法与实验组相同。

酶活力单位定义：每克粘膜每分钟分解1.0μmol/L底物为一个酶活力单位U。二糖酶活力(U/g)＝xn/30a

式中，x为反应所释放的葡萄糖(μmol/L)；a为二糖葡萄糖释放量，麦芽糖为2，蔗糖为1；n为样品稀释倍数；30为反应时间(min)。

以不加焦山楂碳量子点的酶活性为100％，计算加入焦三仙碳量子点后酶活性大小和碳量子点对于酶活性的抑制率。抑制率＝(1-加焦三仙碳量子点后酶活性) *100％

统计分析

所有试验数据利用SPSS软件处理，用单因素方差分析(One-way ANOVA， LSD)进行差异显著性检验，数据均以“均值±标准差”表示。

表1.焦三仙碳量子点抑制蔗糖酶活性实验结果

组别	相对酶活力(％)	P值	抑制率(％)
				H	62.7±13	0.000	37.3
M	41.1±17	0.000	58.8
				L	85.0±9	0.085	15.0
PBS	100.0±18

注：与对照组相比较，*P＜0.05；**P＜0.01.

表2.焦三仙碳量子点抑制麦芽糖酶活性实验结果

组别	相对酶活力(％)	P值	抑制率(％)
				H	43.7±11.8	0.598	28.1
M	98.1±2.8	0.599	1.0
				L	94.3±2.5	0.134	2.8
PBS	100.0±1.3