阅读说明：本技术 一种氮杂环卡宾催化的含吲哚骨架手性螺环化合物的制备方法及用途 (preparation method and application of chiral spiro compound containing indole skeleton and catalyzed by N-heterocyclic carbene ) 是由 池永贵 刘雍贵 蒋仕春 金智超 于 2019-09-16 设计创作，主要内容包括：本发明涉及氮杂环卡宾有极小分子催化高对映选择性合成含吲哚骨架螺环化合物(R)-1-芳基-1’H-螺[二氢吲哚-3,3’-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1’,2二酮衍生物的制备方法及良好的生物活性用途。结构通式如下：<Image he="292" wi="405" file="DDA0002202821980000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>其中R<Sup>1</Sup>是吲哚-2-甲醛的取代基,R<Sup>2</Sup>是吲哚-2,3-二酮的取代基,R<Sup>3</Sup>是吲哚-2,3-二酮的不同保护基,甲基,苄基,三苯基甲基。本发明公开的吲哚-2-甲醛和吲哚-2,3-二酮的不对称环化反应制备吲哚骨架手性螺环化合物(R)-1-芳基-1’H-螺[二氢吲哚-3,3’-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1’,2二酮衍生物,其衍生物普适性好,具有优异的产率高达98％、对映选择性高达99％和良好的生物活性。(The invention relates to a preparation method of azacyclo-carbene which has a very small molecular catalysis and high enantioselectivity for synthesizing spiro compound (R) -1-aryl-1 ' H-spiro [ indoline-3, 3' -oxazolo [3, 4-alpha ] indole ] -1',2 dione derivatives containing indole skeleton and good bioactivity application, wherein the structural general formula is as follows: , wherein R 1 is a substituent of indole-2-formaldehyde, R 2 is a substituent of indole-2, 3-dione, R 3 is different protecting groups of indole-2, 3-dione, methyl, benzyl and triphenylmethyl.)

一种氮杂环卡宾催化的含吲哚骨架手性螺环化合物的制备方 法及用途

技术领域

本发明涉及一种氮杂环卡宾有机小分子催化合成含吲哚骨架手性螺环化合物的制备方法及用途

背景技术

有机杂环分子广泛存在于医药，农药，配体，天然产物和其他功能分子中，杂环化合物吲哚分子的氮原子可以与活性酮进行加成反应，形成N，O-缩醛产物，即吲哚骨架手性螺环化合物，对产物的转换和对映选择性控制存在巨大挑战。在大量的有机合成实例(ACSCatal.2016,6,5747-5763)和药物试验中(J.Am.Chem.Soc.,1995,117,552-553,J.Am.Chem.Soc.,1996,118,2825-2842,Chem.Rev.,2016,116,287-322)得到证实,N，O-缩醛是广泛存在于功能性分子的结构单元(Angew.Chem.Int.Ed.,2013,52,3250-3254,Org.Lett.,2019,21,2795-2799)。由Antilla(J.Am.Chem.Soc.,2008,130,12216-12217),List(Angew.Chem.Int.Ed.,2010,49,9749-9752)和其他研究人员所引领的在过渡金属和手性磷酸催化领域已经取得突破性进展，但是在氮杂环卡宾催化领域还鲜有研究，通过使用氮杂环卡宾活化吲哚的氮原子与活性酮进行加成反应，以优异的产率和高对映选择性合成N,O-缩醛吲哚骨架手性螺环化合物一直研究的难题所在。

本发明的目的是为了设计合成出一类结构新颖、底物普适性好和高对映选择性的吲哚骨架手性螺环化合物，并进一步发掘其在生物活性方面的用途。

本发明的一类性吲哚骨架螺环化合物(R)-1-芳基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮衍生物由下述通式(1)表示：

其中标有*的碳原子为手性碳原子，R¹为卤原子，甲基，甲氧基或5，7-二氯)，R²为卤原子，甲基，甲氧基，硝基，三氟甲基，三氟甲氧基，4-溴-5甲基，4,7-二氯，4，6-二氟或5,6-二氟)，R³为甲基，苄基或三苯基甲基。

所述卤原子为氟、氯、溴、或碘；。

本发明的具体制备方法说明如下：

(1)1.5摩尔当量的吲哚-2-甲醛与0.05摩尔当量手性卡宾催化剂反应，得到Breslow中间体Ⅰ，其中间体在1.7摩尔当量氧化剂的存在下被氧化为酰基唑鎓中间体，反应温度为10℃，反应溶剂为四氢呋喃；

(2)由步骤(1)所得的中间体分子中N-H在碱1.5摩尔当量N,N-二异丙基乙胺DIEA的条件下去质子化，失去一个质子H生成中间体Ⅱ，形成氮杂富烯中间体Ⅲ，具备亲核性，反应温度为10℃，反应溶剂为四氢呋喃；

(3)步骤(2)亲核性氮杂富烯中间体接着与1.0摩尔当量亲电体吲哚-2,3-二酮进行[3+2]环化反应，卡宾催化剂离去，参与下一循环过程，不断催化生成手性螺环结构化合物(R)-1-芳基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮衍生物，反应温度为10℃，反应溶剂为四氢呋喃；

反应通式及过程如下：

反应底物取代吲哚-2-甲醛的合成路线如下：将取代的吲哚-2-甲酸乙酯S1溶解于四氢呋喃中，在冰水浴中缓慢加入氢化铝锂粉末，监测反应，TLC监测反应完毕后，缓慢加入乙酸乙酯和冰水淬灭反应，抽滤，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干得到产物S2直接进行下一步；将S2溶解于适量二氯甲烷中，加入二氧化锰，加热回流，监测反应情况，反应完毕后，抽滤，滤液旋干石油醚和乙酸乙酯(10:1)过柱纯化即得S3；

将取代的吲哚-2,3-二酮S4溶解在适量N,N-二甲基甲酰胺中，在冰水浴条件下加入60％氢化钠，搅拌20分钟后加入卤代烃，监测反应，反应完毕后，加入冰水淬灭反应，缓慢析出固体，二氯甲烷萃取，干燥，旋干，无水乙醇重结晶，抽滤得到产物S5；

本发明的积极效果是：具有简单结构单元的反应物分子取代吲哚-2-甲醛和取代吲哚-2,3-二酮能有效在氮杂环卡宾的催化作用下，高效的制备了(R)-1-芳基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮衍生物，并具有衍生物普适性好、优异的产率和高对映选择性等优点。

具体制备实施方式

以下介绍本发明的实施例，介绍36个制备实施例及抑菌活性测试。

总实施例

反应底物取代吲哚-2-甲醛的合成路线如下：将取代的吲哚-2-甲酸乙酯S1溶解于四氢呋喃中，在冰水浴中缓慢加入氢化铝锂粉末，监测反应，反应完毕后，缓慢加入乙酸乙酯和冰水淬灭反应，抽滤，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，旋干得到产物S2直接进行下一步；将S2溶解于适量二氯甲烷中，加入二氧化锰，加热回流，监测反应情况，反应完毕后，抽滤，滤液旋干过柱纯化即得S3；

反应底物取代吲哚-2,3-二酮的合成路线如下：将取代的吲哚-2,3-二酮S4溶解在适量N,N-二甲基甲酰胺中，在冰水浴条件下加入氢化钠，20分钟后加入卤代烃，TLC监测反应，反应完毕后，加入水淬灭反应，析出固体，二氯甲烷萃取，干燥，旋干，无水乙醇重结晶，抽滤得到产物S5；

制备(R)-1-芳基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮衍生物的合成路线(I)：

制备实施方法和条件如下：

分别称取0.15mmol取代吲哚-2-甲醛1、0.1mmol取代吲哚-2,3-二酮2、0.05mmol(2.1mg)的氮杂环卡宾催化剂E和0.17mmol(69.5mg)氧化剂DQ加入配有磁力搅拌子的10mLSchlenk反应管中，加入1mL溶剂四氢呋喃THF，接着加入0.15mmol(25μL)N,N-二异丙基乙胺DIEA，轻轻晃动反应壁，使其充分混匀。盖上瓶盖，置于10℃异丙醇水浴中充分搅拌反应24h。TLC监测反应完毕后，往反应管中加入1N盐酸1mL，室温下搅拌5分钟，乙酸乙酯萃取有机层，旋干，少量二氯甲烷充分溶解后湿法上样，通过柱层析分离，洗脱剂极性石油醚:乙酸乙酯＝10:1得到目标化合物I，称量后计算相应的产率，化合物通过熔点仪，旋光仪，核磁共振仪NMR，高分辨质谱仪HRMS和高效液相色谱仪HPLC予以表征。

制备实施例1

取代基R¹为H,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

分别称取0.15mmol(23.73mg)吲哚-2-甲醛1、0.1mmol(21.86mg)吲哚-2,3-二酮2、0.05mmol(2.1mg)的氮杂环卡宾催化剂E和0.17mmol(69.5mg)氧化剂DQ加入配有磁力搅拌子的10mL Schlenk反应管中，加入1mL溶剂四氢呋喃THF，接着加入0.15mmol(25μL)碱N,N-二异丙基乙胺DIEA，轻轻晃动反应壁，使其充分混匀。盖上瓶盖，置于10℃异丙醇水浴中充分搅拌反应24h。TLC监测反应完毕后，往反应管中加入1N盐酸1mL，室温下搅拌5分钟，乙酸乙酯萃取有机层，旋干，少量二氯甲烷充分溶解后湿法上样，通过柱层析分离，洗脱剂极性石油醚:乙酸乙酯＝10:1得到目标化合物I₁，称量后计算相应的产率，表征方法同总实施例I。

(R)-1-苄基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁)

(dddd,J＝21.4,15.3,7.4,0.9Hz,3H),6.98(d,J＝8.0Hz,1H),6.51(dd,J＝8.3,0.9Hz,1H),5.12(d,J＝15.4Hz,1H),4.83(d,J＝15.4Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.9,159.0,143.4,134.1,133.1,132.8,131.9,128.7,128.0,127.3,125.8,125.6,124.4,124.0,123.9,122.1,120.2,110.4,109.8,102.8,87.8,44.3；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₆O₃N₂ H⁺:381.1233,found:318.1225；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(OD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝85/15,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝30.9min,Rt(major)＝34.6min.

制备实施例2

取代基R¹为4-Br,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-8'-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂)

7.07–6.92(m,2H),6.44(d,J＝8.4Hz,1H),5.11(d,J＝15.4Hz,1H),4.83(d,J＝15.4Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ166.9,157.7,142.7,133.3,132.8,132.6,131.1,128.0,127.3,126.6,125.6,125.1,124.3,124.0,123.3,119.1,116.7,109.7,108.2,102.4,87.1,43.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃Br H⁺:459.0338,found:459.0332；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝17.3min,Rt(major)＝14.3min.

制备实施例3

取代基R¹为4-OCH₃,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-8'-甲氧基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃)

1H),5.11(d,J＝15.5Hz,1H),4.82(d,J＝15.5Hz,1H),3.95(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.9,158.9,155.2,143.4,134.1,133.0,128.7,127.9,127.3,126.9,125.7,124.3,123.9,122.9,120.3,110.3,102.5,101.0,100.8,87.6,55.1,44.3；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₄ H⁺:411.1339,found:411.1329；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝41.9min,Rt(major)＝32.9min.

制备实施例4

取代基R¹为5-F,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7'-氟-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₄)

J＝9.0,2.5Hz,1H),6.42(dd,J＝9.1,4.3Hz,1H),5.12(d,J＝15.4Hz,1H),4.82(d,J＝15.4Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.1(s),158.9(s),158.8(d,J＝241.3Hz),143.7(s),134.5(s),133.62(d,J＝8.0Hz),129.1(s),128.9(s),128.4(s),127.7(s),126.4(s),126.1(s),124.4(s),120.3(s),115.3(d,J＝27.3Hz),111.2(d,J＝10.1Hz),110.8(s),108.8(d,J＝23.2Hz),102.9(d,J＝5.5Hz),88.1(s),44.7(s).

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-119.6；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃FH⁺:399.1139,found:399.1134；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(U-IB柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝95/5,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝23.2min,Rt(major)＝25.4min.

制备实施例5

取代基R¹为5-Cl,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7'-氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₅)

(m,2H),6.93(d,J＝8.0Hz,1H),6.33(d,J＝8.8Hz,1H),5.05(d,J＝15.4Hz,1H),4.74(d,J＝15.4Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.7,158.6,143.5,134.2,133.4,130.2,129.1,128.9,128.2,128.1,127.4,127.2,126.3,125.9,124.2,123.3,119.9,111.0,110.6,102.2,87.9,44.5；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃ClH⁺:415.0844,found:415.0839；

手性分析通过HPLC，具体条件为:99:1er(IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝85/15,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝41.7min,Rt(major)＝53.1min.

制备实施例6

取代基R¹为5-Br,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7'-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₆)

J＝7.6,0.8Hz,1H),7.00(d,J＝8.0Hz,1H),6.36(d,J＝8.8Hz,1H),5.12(d,J＝15.4Hz,1H),4.82(d,J＝15.4Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ165.6,156.4,141.3,132.2,132.0,131.3,128.3,126.8,126.6,126.1,125.3,124.4,123.7,123.5,122.0,117.8,113.4,109.2,108.5,99.9,85.8,42.4；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃BrH⁺:459.0338,found:459.0335；

手性分析通过HPLC，具体条件为:>99:1er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝21.9min,Rt(major)＝16.7min.

制备实施例7

取代基R¹为5-OH₃,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7'-甲氧基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₇)

(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),6.39(d,J＝9.0Hz,1H),5.12(d,J＝15.4Hz,1H),4.81(d,J＝15.4Hz,1H),3.83(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.3,159.3,155.7,143.7,134.5,133.9,133.4,129.1,128.3,127.7,126.1,125.2,124.3,120.6,117.9,111.1,110.7,103.9,102.6,88.1,55.6,44.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₄ H⁺:411.1339,found:411.1334；

手性分析通过HPLC，具体条件为:91:9er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝38.0min,Rt(major)＝41.2min.

制备实施例8

取代基R¹为6-Cl,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6'-氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₈)

(td,J＝7.6,0.7Hz,1H),6.99(d,J＝8.0Hz,1H),6.62–6.43(m,1H),5.17(d,J＝15.5Hz,1H),4.80(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.0,158.8,143.7,134.3,133.8,132.2,132.2,131.7,129.3,128.4,127.5,126.1,125.5,125.3,124.5,123.6,120.1,111.0,110.1,103.2,88.1,44.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃Cl H⁺:415.0844,found:415.0841；

手性分析通过HPLC，具体条件为:87:13er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝17.5min,Rt(major)＝19.9min.

制备实施例9

取代基R¹为6-Br,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6'-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₉)

6.84–6.60(m,1H),5.18(d,J＝15.5Hz,1H),4.78(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.0,158.8,143.7,134.3,133.8,132.6,132.0,129.3,128.4,127.4,126.2,126.1,125.5,125.4,124.5,120.0,113.1,111.0,103.3,88.2,44.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃BrH⁺:459.0338,found:459.0332；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝18.7min,Rt(major)＝14.9min.

制备实施例10

取代基R¹为6-CH₃,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6'-甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₀)

(dd,J＝8.4,1.0Hz,1H),6.99(d,J＝8.0Hz,1H),6.28(s,1H),5.19(d,J＝15.5Hz,1H),4.77(d,J＝15.5Hz,1H),2.25(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.4,159.4,143.6,136.6,134.6,133.3,132.7,131.1,129.0,128.3,127.7,126.1,124.6,124.3,124.1,123.9,120.7,110.7,109.7,103.2,88.0,44.6,21.9；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₃H⁺:395.1390,found:395.1383；

手性分析通过HPLC，具体条件为:95:5er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝95/5,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝20.9min,Rt(major)＝23.7min.

制备实施例11

取代基R¹为6-OCH₃,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6'-甲氧基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₁)

(d,J＝7.9Hz,1H),6.85(dt,J＝13.2,6.6Hz,1H),5.85(d,J＝2.1Hz,1H),5.19(d,J＝15.5Hz,1H),4.77(d,J＝15.5Hz,1H),3.46(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.4,159.3,159.1,143.7,134.7,133.4,133.2,129.1,128.3,127.7,127.4,126.2,125.1,124.3,123.4,120.5,113.4,110.5,103.7,92.3,55.2,44.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₄H⁺:411.1339,found:411.1336；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝33.1min,Rt(major)＝27.0min.

制备实施例12

取代基R¹为5,7-二Cl,R²为H，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5',7'-二氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₂)

4.86(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.3,158.0,144.2,135.4,134.1,133.3,129.3,129.0,128.4,128.3,,127.9,126.5,125.0,124.1,123.2,122.0,117.5,110.6,103.1,90.0,45.0；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₄N₂O₃Cl₂H⁺:449.0454,found:449.0442；

手性分析通过HPLC，具体条件为:99:1er(IB柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝28.6min,Rt(major)＝31.0min.

制备实施例13

取代基R¹为H,R²为4-Cl，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-4-氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₃)

6.53(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),5.13(d,J＝15.5Hz,1H),4.86(d,J＝15.4Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.6,159.1,145.2,134.3,134.2,133.7,133.0,132.0,129.2,129.1,128.5,127.7,126.0,125.1,124.8,124.5,122.4,117.5,109.7,109.0,103.4,44.9；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃ClH⁺:415.0844,found:415.0840；

手性分析通过HPLC，具体条件为:98:2er(U-IB柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝12.4min,Rt(major)＝15.6min.

制备实施例14

取代基R¹为H,R²为4-Br，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-4-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₄)

＝15.5Hz,1H),4.86(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.6,159.2,145.5,134.4,134.1,132.9,132.0,129.2,128.5,128.1,127.6,126.0,125.0,124.5,122.4,121.4,119.1,109.7,109.5,103.4,88.2,44.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃BrH⁺:459.0338,found:459.0333；

手性分析通过HPLC，具体条件为:99:1er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝38.9min,Rt(major)＝23.9min.

制备实施例15

取代基R¹为H,R²为5-F，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-氟-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₅)

(m,1H),5.10(t,J＝11.9Hz,1H),4.81(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.2(s),159.6(d,J＝247.4Hz),159.0(s),139.6(d,J＝3.0Hz),134.2(s),133.2(s),132.2(s),129.20(s),128.5(s),127.7(s),126.2(s),124.5(s),124.4(s),122.6(s),122.1(d,J＝8.0Hz),120.1(d,J＝23.2Hz),114.1(d,J＝25.2Hz),111.8(d,J＝7.0Hz),110.1(s),103.6(s),87.8(s),44.9(s).

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-116.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃FH⁺:399.1139,found:399.1133；

手性分析通过HPLC，具体条件为:99:1er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝22.3min,Rt(major)＝27.4min.

制备实施例16

取代基R¹为H,R²为5-Cl，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₆)

Hz,1H),5.11(d,J＝15.5Hz,1H),4.81(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.9,158.9,142.2,134.1,133.3,132.2,129.9,129.6,129.4,129.2,128.5,127.7,126.4,126.2,124.5,122.6,122.2,111.9,110.1,103.7,87.6,44.9；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃ClH⁺:415.0844,found:415.0839；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝43.8min,Rt(major)＝50.3min.

制备实施例17

取代基R¹为H,R²为5-Br，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₇)

6.86(d,J＝8.4Hz,1H),6.53(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),5.11(d,J＝15.5Hz,1H),4.81(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.8,158.8,142.7,136.3,134.0,133.2,132.1,129.2,128.5,127.6,126.2,124.5,124.4,122.6,122.5,117.0,112.2,110.1,103.7,87.52,44.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃BrH⁺:459.0338,found:459.0331；

手性分析通过HPLC，具体条件为:95:5er(IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝44.4min,Rt(major)＝53.3min.

制备实施例18

取代基R¹为H,R²为5-I，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-碘-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₈)

0.9Hz,1H),5.11(d,J＝15.5Hz,1H),4.80(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.6,158.8,143.4,142.2,134.7,134.0,133.2,132.1,129.2,128.5,127.6,126.2,124.5,124.4,122.7,122.6,112.7,110.1,103.6,86.5,44.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃IH⁺:507.0200,found:507.0195；

手性分析通过HPLC，具体条件为:94:6er(AD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝85/15,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝46.2min,Rt(major)＝56.2min.

制备实施例19

取代基R¹为H,R²为5-OCH₃，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-甲氧基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₁₉)

6.55(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),5.09(d,J＝15.4Hz,1H),4.80(d,J＝15.4Hz,1H),3.69(s,3H)；

^{1 3}C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.1,159.3,157.0,136.7,134.6,133.2,132.2,129.0,128.3,127.7,125.9,124.7,124.4,122.4,121.6,118.7,112.0,111.5,110.3,103.21,8.43,55.8,44.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₄H⁺:411.1339,found:411.1335；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝80/20,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝15.9min,Rt(major)＝13.0min.

制备实施例20

取代基R¹为H,R²为5-OCF₃，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-三氟甲氧基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₀)

Hz,1H),4.83(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.2,158.8,145.7,142.3,134.0,133.3,132.2,129.2,128.6,127.7,126.5,126.3,124.6,124.4,122.7,122.1,119.9,111.6,109.9,103.8,87.5,44.9；.

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-58.4；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₅N₂O₄F₃H⁺:465.1056,found:465.1053；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(AD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝85/15,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝32.8min,Rt(major)＝38.6min.

制备实施例21

取代基R¹为H,R²为5-CH₃，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5-甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₁)

1H),4.81(d,J＝15.4Hz,1H),2.24(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.2,159.4,141.3,134.6,134.3,133.7,133.2,132.2,129.0,128.3,127.7,126.7,125.8,124.8,124.3,122.4,120.5,110.5,110.3,103.0,88.3,44.7,20.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₃H⁺:395.1390,found:395.1393；

手性分析通过HPLC，具体条件为:95:5er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝32.5min,Rt(major)＝26.7min.

制备实施例22

取代基R¹为H,R²为6-F，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6-氟-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₂)

(d,J＝8.3Hz,1H),5.10(d,J＝15.5Hz,1H),4.79(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.6,165.9(d,J＝253.5Hz),159.1(s),145.8(d,J＝12.2Hz),134.0(s),133.25(s),132.2(s),129.2(s),128.6(s),128.0(d,J＝10.5Hz),127.6(s),126.1(s),124.7(s),124.5(s),122.5(s),116.0(d,J＝3.3Hz),110.9(d,J＝23.3Hz),110.1(s),103.4(s),99.9(d,J＝28.2Hz),87.6(s),44.9(s)；

¹⁹F NMR(376MHz,CDCl₃)δ-102.4；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃FH⁺:399.1139,found:399.1132；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(AD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝80/20,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝38.6min,Rt(major)＝45.1min.

制备实施例23

取代基R¹为H,R²为6-Cl，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6-氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₃)

J＝3.3Hz,1H),6.53(dd,J＝8.2,0.9Hz,1H),5.10(d,J＝15.5Hz,1H),4.79(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.3,159.0,144.9,139.6,134.0,133.2,132.2,129.2,128.6,127.6,127.1,126.1,124.6,124.5,124.4,122.6,118.9,111.5,110.1,103.5,87.5,44.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃ClH⁺:415.0844,found:415.0838；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(AD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝85/15,0.5mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝42.1min,Rt(major)＝49.4min.

制备实施例24

取代基R¹为H,R²为6-Br，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₄)

Hz,1H),4.72(d,J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ166.3,157.1,143.0,132.0,131.2,130.2,127.3,126.6,125.7,125.7,125.4,125.4,124.2,122.6,122.5,120.7,117.5,112.3,108.2,101.66,85.6,42.9；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃BrH⁺:459.0338,found:449.0332；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝22.3min,Rt(major)＝27.4min.

制备实施例25

取代基R¹为H,R²为6-OCH₃，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-6-甲氧基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₅)

1H),3.80(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.9,164.0,159.6,145.4,134.6,133.1,132.2,129.1,128.3,127.6,127.5,125.8,125.0,124.3,122.3,111.8,110.3,107.7,102.96,98.9,88.3,55.7,44.7；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₈N₂O₄H⁺:411.1339,found:411.1335；

手性分析通过HPLC，具体条件为:95:5er(U-IB柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝6.4min,Rt(major)＝9.9min.

制备实施例26

取代基R¹为H,R²为7-F，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7-氟-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₆)

6.46(dd,J＝8.3,0.8Hz,1H),5.21(d,J＝15.2Hz,1H),5.01(dd,J＝15.1,1.2Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.2(s),158.9(s),147.8(d,J＝248.4Hz),135.6(s),133.1(s),132.1(s),130.3(d,J＝10.1Hz),128.8(s),128.3(s),128.0(d,J＝2.0Hz),126.11(s),125.3(d,J＝6.0Hz),124.4(s),123.3(d,J＝2.8Hz),122.57(s),122.0(d,J＝3.5Hz),121.8(s),121.6(s),110.1(s),103.5(s),87.6(s),46.4(s).

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-130.4；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃FH⁺:399.1139,found:399.1129；

手性分析通过HPLC，具体条件为:96:4er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝24.6min,Rt(major)＝19.7min.

制备实施例27

取代基R¹为H,R²为7-Cl，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7-氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₇)

(m,1H),5.53–5.32(m,2H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ169.1,158.9,139.9,136.0,136.0,133.2,132.2,128.8,127.9,127.0,126.2,125.3,124.8,124.6,124.5,123.6,122.6,117.1,110.2,103.6,87.1,45.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃ClH⁺:415.0844,found:415.0836；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝10.7min,Rt(major)＝7.1min.

制备实施例28

取代基R¹为H,R²为7-Br，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7-溴-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₈)

–6.48(m,1H),5.49–5.34(m,2H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ169.1,158.9,139.9,136.0,136.0,133.2,132.2,128.8,127.9,127.0,126.2,125.1,124.8,124.6,124.5,123.6,122.6,117.1,110.1,103.6,87.1,45.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₂O₃BrH⁺:459.0338,found:459.0668；

手性分析通过HPLC，具体条件为:>99:1er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝18.8min,Rt(major)＝12.2min.

制备实施例29

取代基R¹为H,R²为7-CF₃，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7-三氟甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₂₉)

＝16.1Hz,2H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.5(s),157.1(s),139.7(s),137.6(s),134.1(s),131.4(s),130.4(s),127.0(s),126.0(s),125.1(s),124.4(s),123.8(s),123.6(s),122.8(s),122.7(s),122.1(s),120.8(s),108.4(s),102.2(s),101.8(s),85.3(s),43.6(s)；

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-54.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₅N₂O₃F₃H⁺:449.1107,found:449.1157；

手性分析通过HPLC，具体条件为:>99:1er(ID柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝59.4min,Rt(major)＝64.8min.

制备实施例30

取代基R¹为H,R²为7-NO₂，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-7-三氟甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₀)

7.20(dd,J＝8.3,7.4Hz,1H),7.16–7.07(m,2H),6.67–6.54(m,1H),5.29–5.18(m,2H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ169.4,158.4,137.0,136.9,133.3,132.1,132.1,130.0,129.2,129.1,128.6,127.9,126.5,124.7,124.4,124.3,124.3,122.9,110.0,104.2,85.9,46.6；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₅N₃O₅H⁺:426.1084,found:426.1077；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝13.7min,Rt(major)＝10.9min.

制备实施例31

取代基R¹为H,R²为4-Br-5-CH₃，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-4-溴-5-甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₁)

＝8.2,0.8Hz,1H),5.11(d,J＝15.4Hz,1H),4.84(d,J＝15.4Hz,1H),2.24(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.5,159.3,143.0,134.5,134.2,134.1,132.7,131.8,128.9,128.2,127.5,125.7,125.1,124.2,123.5,122.1,119.0,109.6,109.2,103.0,88.5,44.6,21.3；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₅H₁₇N₂O₃BrH⁺:473.0495,found:473.0489；

手性分析通过HPLC，具体条件为:>99:1er(OD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝80.6min,Rt(major)＝72.7min.

制备实施例32

取代基R¹为H,R²为4,6-二F，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-4,6-二氟-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₂)

J＝15.5Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.01(s),165.48(d,J＝12.6Hz),162.03(d,J＝14.7Hz),159.45(d,J＝15.0Hz),158.65(s),146.43(dd,J＝14.0,8.6Hz),133.79(s),133.20(s),132.13(s),129.35(s),128.78(s),127.69(s),126.19(s),124.67(s),124.28(s),122.61(s),109.74(s),103.87(s),100.74–99.58(m),96.32(d,J＝28.3Hz),86.44(s),45.33(s)；

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-97.9,-110.6；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₄N₂O₃F₂H⁺:417.1045,found:417.1040；

手性分析通过HPLC，具体条件为:92:8er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝10.7min,Rt(major)＝13.3min.

制备实施例33

取代基R¹为H,R²为4,7-二Cl，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-4,7-二氯-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₃)

(m,2H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.5,158.8,141.3,136.7,135.7,132.9,132.6,132.0,128.9,128.1,127.0,126.2,126.0,124.7,124.6,122.6,119.9,115.5,109.6,103.8,86.8,45.8；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₄N₂O₃Cl₂H⁺:449.0454,found:449.0454；

手性分析通过HPLC，具体条件为:>99:1er(U-IC柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝20.5min,Rt(major)＝12.3min.

制备实施例34

取代基R¹为H,R²为5,6-二F，R³为Bn，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-苄基-5,6-二氟-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₄)

白色固体,产率93％；熔点：158-160℃；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ166.42(s),156.95(s),151.89(dd,J＝256.0,13.9Hz),145.76(dd,J＝248.6,13.6Hz),138.77(d,J＝9.8Hz),131.95(s),131.50(s),130.40(s),127.56(s),126.96(s),125.87(s),124.52(s),122.86(s),122.64(s),120.97(s),114.40(d,J＝1.9Hz),114.19(q,J＝4.2Hz),108.20(s),102.08(s),99.76(d,J＝23.5Hz),85.59(s),43.25(s).

¹⁹F NMR(377MHz,CDCl₃)δ-126.8,-141.4.

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₂₄H₁₄N₂O₃F₂H⁺:417.1045,found:417.1044；

手性分析通过HPLC，具体条件为:97:3er(U-IA柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝90/10,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝12.5min,Rt(major)＝15.1min.

制备实施例35

取代基R¹为H,R²为H，R³为CH₃，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₅)

1H),3.33(s,3H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ168.0,159.3,144.7,133.6,133.1,132.2,126.1,126.0,124.8,124.4,124.3,122.4,120.5,110.0,109.7,103.1,88.1,27.0；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₁₈H₁₂N₂O₃H⁺:305.0920,found:305.0916；

手性分析通过HPLC，具体条件为:92:8er(U-IB柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝95/5,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝26.5min,Rt(major)＝21.7min.

制备实施例36

取代基R¹为H,R²为H，R³为Trt，制备实施方法和条件同总实施例I；

(R)-1-三苯基甲基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮(I₃₆)

(dd,J＝8.3,0.7Hz,1H)；

¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ167.2,157.2,142.7,138.9,130.9,130.1,129.9,126.9,125.8,125.2,123.5，123.4,123.1,122.0,121.6,120.0,118.7,115.2,108.3,100.7,86.1,73.6；

HRMS(ESI,m/z)calcd.for C₃₆H₂₄N₂O₃H⁺:533.1859,found:533.1857；

手性分析通过HPLC，具体条件为:99:1er(OD-H柱,25℃,hexans/ⁱPrOH＝98/2,0.3mL/min,λ＝254nm),Rt(minor)＝44.0min,Rt(major)＝36.9min.

以下提供本发明(R)-1-芳基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮衍生物共34个制备实施例抑菌活性测试：

(1)测试方法

采用浊度法，测试了目标化合物对烟草青枯病菌(R.solaNacearum)的抑制活性，具体操作步骤如下：

A.于2000mL烧杯中加入1000mL灭菌蒸馏水，在电磁搅拌下依次加入蛋白胨5.0g、酵母粉1.0g、葡萄糖10.0g、牛肉膏3.0g，待搅拌均匀后以氢氧化钠水溶液调节pH至中性(7.2±0.2)；

B.将试管洗净灭菌后置于试管架上，使用移液枪向每支试管内移取第一步(1)中溶液4.0mL后加橡胶塞，每6支试管包装一次，使用灭菌锅在121℃灭菌20min后待用；

C.称取0.008g待测化合物样品于离心管中，以150μL DMSO溶解后分别移取80μL与40μL到灭菌后已编号的离心管中，另补加40μL DMSO到装有40μL样品溶液的离心管，向上述离心管中各加入4mL Tween-20，同时设噻菌铜或叶枯唑作对照药剂，DMSO作空白对照；

D.每支离心管内溶液移取1mL到3支装第二步(2)中试管内(酒精灯前操作，防止其它细菌污染)；

E.取空白96孔板，测空白OD值排除OD值大于0.05的孔，后向每个可用孔中加入200μL(4)中试管内溶液测OD值并记录，最后向每支试管中接入40μL活化后的烟草青枯病菌菌种，用报纸包好在28℃、180rpm恒温摇床中振荡培养24h，期间测试试管内溶液OD值以跟踪细菌生长状态，培养结束后在试管中取200μL溶液测OD值并记录；

F.化合物对细菌抑制率计算公式如下，

校正OD值＝含菌培养基OD值-无菌培养基OD值

(2)抗植物病菌的生物活性测试结果

表1实施例I₁-I₃₆制备的化合物设定浓度下分别对烟草青枯病菌的抑制率a

采用浊度法，以商品药剂噻菌酮、叶枯唑为阳性对照，在供试浓度为100,50μg/mL时，测试了目标化合物对烟草青枯病菌抑制活性(见表1)。该测试结果表明：所有化合物对所供试的植物细菌都具有一定的抑制率。其中，当浓度为100μg/mL时，化合物I₁,I₃,I₄,I₈,I₉,I₁₀,I₁₃,I₁₄的抑制率均超过噻菌酮(46.82％)、叶枯唑(62.42％)；当浓度为50μg/mL时，化合物I₁,I₃,I₈,I₉,I₁₀,I₁₃,I₁₄的制率均超过噻菌酮(28.58％)、叶枯唑(53.25％)。如上实验活性数据表明(R)-1-芳基-1'H-螺[二氢吲哚-3,3'-恶唑并[3,4-α]吲哚]-1',2二酮衍生物对植物病菌烟草青枯病菌具有一定的抑制作用，其中部分目标化合物对植物病菌表现有优良抑制活性，可作为潜在的抑植物病菌药物，具有较好应用前景。

综合如上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，任何未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。