阅读说明：本技术 一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法 (Recombinant adenovirus expression vector based on adenovirus HAd49 and construction method thereof ) 是由 黎诚耀 罗升学 刘博超 张攀丽 于 2019-08-08 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种基于人稀有血清型腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法,其是以野生型腺病毒HAd49的基因组为基础,通过基因组直接克隆方法,删除E1编码区和E3编码区,在E1删除区插入I-CeuI和PI-SceI酶切位点,同时以人源腺病毒Ad5的E4orf6替换HAd49的E4orf6,提高了在人源肾胚细胞(HEK293)中包装重组病毒的成功率和包装出重组病毒的滴度,获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体Ad49。此表达载体可以用于表达多种不同种类的抗原,为疫苗和生物医药研发提供基础。(The invention discloses a recombinant adenovirus expression vector based on human rare serotype adenovirus HAd49 and a construction method thereof, which is based on the genome of wild type adenovirus HAd49, deletes the coding region of E1 and the coding region of E3 by a direct genome cloning method, inserts I-CeuI and PI-SceI enzyme cutting sites in the deletion region of E1, and replaces E4orf6 of HAd49 with E4orf6 of human adenovirus Ad5, thereby improving the success rate of packaging recombinant virus in human kidney embryo cells (HEK293) and the titer of the packaged recombinant virus, and obtaining the replication-defective recombinant adenovirus expression vector Ad 49. The expression vector can be used for expressing various antigens of different types, and provides a basis for research and development of vaccines and biological medicines.)

一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别是一种用于基因治疗和疫苗载体研发的重组腺病毒载体；具体是本发明涉及基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法。

背景技术

腺病毒 （adenovirus, Ad）作为基因表达载体的研制起始于20世纪60年代初，当科学家发现腺病毒基因组可与猴类病毒 40（SV40）基因组杂交，说明腺病毒基因组能接入异源性基因。此后腺病毒逐步发展为一种重要的载体系统。已有的研究证明，腺病毒载体疫苗可以在不同动物体内刺激诱导产生特异的T细胞和B细胞免疫应答，但是不同亚型的腺病毒感染和刺激能力是不相同。C亚群中的腺病毒诱导的针对外源基因的特异性T细胞免疫和B细胞免疫的反应最强。基于人腺病毒血清型5（Ad5）和2（Ad2）型的表达载体在疫苗研究以及治疗中被广泛应用，但是由于人体内预存的针对Ad5和Ad2腺病毒的免疫反应，从而抑制腺病毒感染机体细胞，导致其所携带的目的基因就得不到预期水平的表达甚至是完全不表达，此外具有交叉性的针对腺病毒载体的细胞免疫CTL反应会杀死已经感染了腺病毒载体的靶细胞从而阻断外源基因的持续表达。为了克服预存免疫反应对腺病毒载体的影响，需要从其它人体腺病毒血清型甚至其他动物种属中开发新的重组腺病毒载体。因此基于人稀有血清型腺病毒49（HAd49）的疫苗载体，其免疫效果显著且能够克服针对Ad5腺病毒的预存免疫反应。

现有技术中基于人稀有血清型腺病毒构建的疫苗载体，都需要在人源肾胚细胞中完成病毒的包装。但是，由于腺病毒亚型或者种属的差异性，包装出的重组病毒无论是滴度还是纯度都达不到临床使用的标准，而且跟包装出的Ad5病毒载体均有一定差距。

发明内容

为了弥补已有腺病毒表达载体的缺陷，本发明提供一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法，更加有利于包装出纯度和滴度更高的重组病毒。

本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：

一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体，其是以人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组为基础，通过直接克隆方法，删除E1编码区和E3编码区，在E1删除区***I-CeuI和PI-SceI酶切位点，同时以人血清型腺病毒Ad5的E4编码区的开放阅读框6替换HAd49的基因组的相应阅读框，获得复制缺陷性的重组腺病毒表达载体；其中，所述人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组的GenBank登录号为DQ393829.1，人血清型腺病毒Ad5的基因组的GenBank登录号为AY601635.1。

进一步地，所述的删除E1编码区是指删除人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组中第462-3362位的碱基序列。

进一步地，所述的删除E3编码区是指删除人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组中第26655-30736位的碱基序列。

进一步地，所述的HAd49的基因组的相应阅读框为人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组的E4编码区的开放阅读框6（E4orf6），具体为人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组中第32257-33389位的碱基序列。

进一步地，所述的人血清型腺病毒Ad5的E4编码区的开放阅读框6（E4orf6）是指人血清型腺病毒Ad5的基因组中第33193-34077位的碱基序列。

进一步地，上述基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体的构建方法包括：

（1）PCR扩增HAd49的基因组的LITR片段(1-462)（基于genbank登录号DQ393829.1的序列计算序列位点），以pUC57-linker质粒为模板，PCR扩增Linker序列；

（2）以LITR和Linker为模板，OverlappingPCR扩增获得序列LITR-Linker，用PmeI和SpeI分别双酶切目的基因和载体，将酶切之后的目的片段***到质粒pNEB193上，获得质粒pNEB193-LITR+linker；

（3）PCR扩增HAd49的基因组的位30736至32257片段为3；PCR扩增Ad5的基因组的E4orf6的片段为4；PCR扩增Ad49的基因组的位33389至35215片段为5；以DNA片段3,4和5为模板，OverlappingPCR扩增获得片段345，用SwaI和PacI分别双酶切目的基因和载体，将酶切之后的目的片段***到质粒pNEB193-LITR+linker上，获得质粒pNEB193-LITR+linker+345;

(4) PCR扩增HAd49基因组的3363至15439位的DNA片段为1，通过SpeI和SrfI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+linker+345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+1345；

(5) PCR扩增HAd49的基因组的位15439至26665片段为2，通过SrfI和SwaI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+linker+1345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+12345，即为重组腺病毒表达载体。

进一步地，所述重组腺病毒表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

在另外的一选例中，所述重组腺病毒表达载体的酶切位点I-CeuI和PI-SceI之间，还包括外源的抗原编码基因。

进一步地，所述外源的抗原是寨卡病毒病毒的包膜蛋白prM-E抗原。

在本发明的另外一方面，提供一种制备疫苗的方法，所述方法包括：

（1）提供所述的重组腺病毒表达载体；

（2）将外源的抗原编码基因***到（1）中重组腺病毒表达载体的酶切位点I-CeuI和PI-SceI之间；

（3）将步骤（2）的重组表达载体转染包装病毒细胞，病毒在细胞内包装完成，从而获得具有免疫原性的疫苗。

本发明具有如下有益效果：

（1）本发明人成功地基于人稀有血清型腺病毒49（HAd49）构建成一种新型表达载体Ad49，所述的疫苗载体可应用于制备高效表达且具有良好免疫原性的病毒疫苗。

（2）本发明中的重组腺病毒表达载体是以Ad5的E4orf6编码区替换HAd49的E4orf6，提高了在人源肾胚细胞中包装病毒的成功率和包装出病毒的滴度。

（3）本发明的重组腺病毒载体，能被广泛应用于疫苗和基因治疗领域。

附图说明

图1 为人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组的纯化和酶切鉴定结果，其中，

A：氯化铯纯化的人稀有血清型腺病毒HAd49结果图；

B：人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组酶切鉴定结果图。

图2为构建复制缺陷性的重组腺病毒表达载体Ad49的酶切鉴定结果。

图3为构建重组腺病毒Ad49-eGFP的鉴定结果，其中

A：重组腺病毒载体Ad49-eGFP的酶切鉴定结果；

B：重组腺病毒载体Ad49-eGFP的病毒噬斑形成结果。

图4为构建重组腺病毒Ad49-prM-E的鉴定结果，其中，

A: Ad49-prM-E的酶切鉴定结果；

B: Ad49-prM-E的病毒噬斑结果；

C: WB检测Ad49-prM-E病毒感染细胞之后，包膜E蛋白抗原的表达。

图5为构建复制缺陷性的重组腺病毒表达载体Ad49的流程图。

具体实施方式

本发明提供了一种重组腺病毒表达载体，所述重组腺病毒表达载体包括：以人稀有血清型腺病毒HAd49的基因组为基础，通过直接克隆方法，删除E1编码区和E3编码区，且在E1删除区***酶切位点I-CeuI和PI-SceI，同时以Ad5的E4orf6编码区替换人稀有血清型腺病毒HAd49的E4orf6 编码区，提高了在人源肾胚细胞(HEK293)中包装重组病毒的成功率和包装出重组病毒的滴度。其中，人稀有血清型腺病毒HAd49的E1编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO：2，人稀有血清型腺病毒HAd49的E3编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO：3，人血清型腺病毒Ad5的E4orf6编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO：4，人稀有血清型腺病毒HAd49的E4orf6 编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO：5。

对HAd49的基因组的深入研究，在E1编码区缺失位***酶切位点I-CeuI和PI-SceI作为外源基因的连接位点，此酶切位点不存在于腺病毒表达载体的其它位置。

人稀有血清型腺病毒HAd49，从人体内分离得到，人群流行率非常低。本发明以野生型HAd49基因组为基础，通过直接克隆方法，删除E1和E3编码区，在E1删除区***酶切位点I-CeuI和PI-SceI，同时以Ad5的E4orf6 编码区替换HAd49的E4orf6编码区，最终获得复制缺陷性的Ad49重组腺病毒表达载体。

作为本发明的优选方式，克隆步骤包括：PCR扩增HAd49的基因组的LITR片段 (1-462)，以pUC57-linker质粒为模板，PCR扩增Linker片段，以LITR和Linker的DNA片段为 模板，OverlappingPCR扩增获得序列LITR-Linker，用PmeI和SpeI分别双酶切目的基因和载 体，将酶切之后的目的片段***到质粒pNEB193上，获得质粒pNEB193-LITR+linker；PCR 扩增HAd49的基因组的位30736至32257片段为3；PCR扩增Ad5的基因组的E4orf6的片段为4； PCR扩增Ad49的基因组的位33389至35215片段为5；以DNA片段3、4和5为模板， OverlappingPCR扩增获得片段345，用SwaI和PacI分别双酶切目的基因和载体，将酶切之后 的目的片段***到质粒pNEB193-LITR+linker上，获得质粒pNEB193-LITR+linker+345; PCR扩增HAd49的基因组的位3363至15439片段为1，通过SpeI和SrfI酶切位点，连接于质粒 pNEB193-LITR+linker+345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+1345；PCR扩增HAd49的基因 组的位15439至26665片段为2，通过SrfI和SwaI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+ linker+1345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+12345，即为重组腺病毒表达载体Ad49。

获得重组腺病毒表达载体之后，线性化之后将其转染入包装病毒细胞，进行病毒的包装；转染一段时间后，可以收获病毒；收获的病毒反复感染HEK293，持续传代。

本发明的复制缺陷型的重组腺病毒表达载体作为一种表达载体平台，适用于表达多种抗原，从而制备病毒疫苗。

为了验证Ad49的有效性，本发明将绿色荧光蛋白和寨卡病毒的包膜蛋白基因克隆入Ad49载体，研究显示Ad49载体能高表达抗原基因，证明本发明获得了一种新型的腺病毒载体，可用于疫苗研发以及其它生物医学基础研究，为新型疫苗研发提供一种新型的载体平台。

下面结合具体实例，进一步阐述本发明。应理解，这些实例仅用于说明本发明而不是限制本发明的范围。下列实例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如J. 萨姆布鲁克等编著的分子克隆指南第三版，科学出版社，2002中所述的条件，或者按照试剂的说明书的条件。

材料

1.1病毒株和细胞

人稀有血清型腺病毒HAd49购于ATCC(VR-1047 )；HEK293细胞株本实验室保存，培养基为10%胎牛血清（FBS）的DMEM。

限制性内切酶、菌种和质粒

限制性内切酶购自New England Biolabs；DH5α感受态购自于天根生化科技有限公司。

pUC19-eGFP质粒由实验室保存。

pBHGlox(delta)E1,3Cre质粒由实验室保存。

pDC315-prM-E (ZIKV)质粒由实验室保存。

pNEB193 质粒由实验室保存。

pShuttle2-CMV-Flag载体购于Addgene。

pUC57-linker质粒：linker序列（SEQ ID NO：6）由北京华大基因合成并克隆至pUC57载体上，获得pUC57-linker。

方法

2.1 腺病毒的扩增与纯化

HEK293细胞在含有10%FBS的DMEM培养基中培养，HAd49腺病毒在HEK293细胞中培养增值，当细胞全部表现出病毒病变（CPE）后，收集感染的细胞，离心，用DMEM重悬，反复冻融细胞三次，使细胞裂解释放出病毒。病毒经过氯化铯密度梯度离心纯化，加入甘油保存于液氮罐。

构建复制缺陷性的的重组腺病毒载体

2.2.1构建质粒pNEB193-LITR+linker

以HAd49的基因组为模版，用引物LITR-F和LITR-R通过PCR扩增得到1到462约462bp。使用引物Linker-F和Linker-R，以pUC57-linker质粒为模板，PCR扩增Linker片段。以LITR和Linker的DNA片段为模板，使用引物LITR-F和Linker-R，OverlappingPCR扩增获得序列LITR-Linker，用PmeI和SpeI分别双酶切目的基因和载体pNEB193，连接获得质粒pNEB193-LITR+linker。

构建质粒pNEB193-LITR+linker+345

以HAd49的基因组为模版，用引物3-F和3-R，PCR扩增HAd49的基因组的位30736至32257片段为3。以pBHGlox(delta)E1,3Cre质粒为模板，用引物4-F和4-R，PCR扩增Ad5的基因组的E4orf6的片段为4。以HAd49的基因组为模版，用引物5-F和5-R，PCR扩增Ad49的基因组的位33389至35215片段为5。以DNA片段3,4和5为模板，使用引物3-F和5-R，OverlappingPCR扩增获得片段345，用SwaI和PacI分别双酶切目的基因和载体，将酶切之后的目的片段***到质粒pNEB193-LITR+linker上，获得质粒pNEB193-LITR+linker+345。

构架质粒pNEB193-LITR+linker+1345

以HAd49的基因组为模版，用引物1-F和1-R，PCR扩增HAd49的基因组的位3363至15439片段为1，通过SpeI和SrfI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+linker+345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+1345。

构建质粒pNEB193-LITR+linker+12345（Ad49）

以HAd49的基因组为模版，使用引物2-F和2-R， PCR扩增HAd49的基因组的位15439至26665片段为2，通过SrfI和SwaI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+linker+1345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+12345，即重组的腺病毒载体Ad49。

2.3 构建重组腺病毒Ad49-eGFP

2.3.1将eGFP基因克隆至Ad49载体

以EcoRI和BamHI分别双酶切pUC19-eGFP和pShuttle2-CMV-Flag质粒，琼脂糖凝胶回收目的片段，连接获得载体pShuttle2-CMV-eGFP；用I-CeuI和PI-SceI分别双酶切pShuttle2-CMV-eGFP和Ad49，琼脂糖凝胶电泳回收DNA片段，连接，转化，鉴定，获得Ad49-eGFP。

包装Ad49-eGFP重组腺病毒

用AsiSI酶切线性化Ad49-eGFP质粒（eGFP核苷酸序列SEQ ID NO：21）；用HEK293细胞铺六孔板，当细胞融合度到80%-90%时，用X-tremeGENE(Roche)转染约2.5ug已线性化的Ad49-eGFP质粒至HEK293细胞，包装重组腺病毒。每天观察荧光及细胞状态，直至约第五天左右出现细胞病变（CPE）。

构建重组腺病毒Ad49-prM-E

2.4.1将寨卡病毒（ZIKV）的prM-E基因克隆至Ad49

用KpnI和BamHI分别双酶切pShuttle2-CMV-Flag质粒和pDC315-prM-E (ZIKV)质粒，胶回收载体和目的基因片段，连接，转化，鉴定，获得pShuttle2-CMV-prM-E (ZIKV)（寨卡病毒prM-E抗原核苷酸序列SEQ ID NO：22）。用I-CeuI和PI-SceI分别双酶切pShuttle2-CMV-prM-E和Ad49质粒，琼脂糖凝胶电泳回收DNA片段，连接，转化，鉴定，获得载体Ad49-prM-E。

包装Ad49-prM-E重组腺病毒

用AsiSI酶切线性化Ad49-prM-E质粒；用HEK293细胞铺六孔板，当六孔板中的细胞融合度达到80%-90%时，用X-tremeGENE(Roche)转染约2.5ug已经线性化的Ad49-prM-E质粒至HEK293细胞，包装重组腺病毒。每天观察细胞状态，直至约第五天左右出现细胞病变（CPE）。

扩增与纯化重组腺病毒Ad49-prM-E

HEK293细胞在含有10%FBS的DMEM培养基中培养，Ad49-prM-E腺病毒在HEK293细胞中培养扩增。重组腺病毒感染HEK293细胞后，当细胞全部出现细胞病变（CPE），收集被感染的细胞，离心，用DMEM重悬细胞，反复冻融细胞三次，使细胞裂解，释放出病毒。含有病毒的上清液经过氯化铯密度梯度离心纯化，然后用病毒保存液冻存于-80℃冰箱。

检测寨卡病毒的E蛋白表达

用HEK293细胞铺六孔板；当细胞融合度达到80-90%时，用Ad49-prM-E病毒去感染细胞，同时用Ad49-eGFP病毒去感染细胞做为对照组，24小时之后收细胞，western blot 检测E蛋白的表达。

实施例

实施例1、腺病毒的扩增、纯化与腺病毒基因组的提取

人稀有血清型腺病毒HAd49在HEK293细胞中增值，经过氯化铯密度梯度离心得到纯化的病毒，之后提取病毒基因组DNA，用SrfI和KpnI双酶切鉴定，进行琼脂糖电泳，实验结果请参阅图1，其中图A是氯化铯纯化病毒的结果图，其下层清晰可见的白色条带为具有感染活性的野生型病毒HAd49，图B是提取HAd49病毒进行SrfI和KpnI双酶切鉴定的结果图，条带大小合适。

实施例2构建复制缺陷性的腺病毒载体

按照图5所示的流程图，PCR扩增HAd49的基因组的LITR片段(1-462)。以pUC57-linker质粒为模板，PCR扩增Linker片段。以LITR和Linker的DNA片段为模板，OverlappingPCR扩增获得序列LITR-Linker，使用酶切位点PmeI和SpeI将目的基因连接至载体pNEB193上，获得质粒pNEB193-LITR+linker；

PCR扩增HAd49的基因组的位30736至32257片段为3；PCR扩增Ad5的基因组的E4orf6的片段为4；PCR扩增HAd49的基因组的位33389至35215片段为5；以DNA片段3,4和5为模板，OverlappingPCR扩增获得片段345，用SwaI和PacI的酶切位点将目的基因***到质粒pNEB193-LITR+linker上，获得质粒pNEB193-LITR+linker+345;

PCR扩增HAd49的基因组的位3363至15439片段为1，通过SpeI和SrfI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+linker+345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+1345；

PCR扩增HAd49的基因组的位15439至26665片段为2，通过SrfI和SwaI酶切位点，连接于质粒pNEB193-LITR+linker+1345，获得质粒pNEB193-LITR+linker+12345，即重组的腺病毒载体Ad49。使用HindIII酶切重组的腺病毒载体Ad49，酶切的结果跑核酸凝胶电泳，结果如图2所示，条带大小正确，经过测序，确定是正确的载体。

实施例3、构建重组腺病毒Ad49-eGFP

将绿色荧光蛋白基因（eGFP）克隆至Ad49载体，使用HindIII酶切鉴定重组腺病毒载体Ad49-eGFP，使用酶切的Ad49空载体作为对照，酶切鉴定结果请参阅图3A，条带大小正确，经过测序分析正确的连接外源基因eGFP。

重组载体Ad49-eGFP经过酶切和测序鉴定正确之后，使用AsiSI酶切线性化之后转染HEK293细胞，包装病毒，在转染第五天出现细胞病变，随后病毒的噬斑逐渐扩大，如图3B所示，可以看到清晰的病毒噬斑的形成，而且在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光蛋白的大量表达。

实施例4、构建重组腺病毒Ad49-prM-E

将寨卡病毒的包膜蛋白（prM-E）基因克隆至Ad49重组载体之后，使用HindIII限制性内切酶酶切鉴定，使用酶切的载体Ad49空载体做为对照，跑核酸凝胶电泳，结果如图4A所示，条带大小正确，而且测序结果分析正确的连接prM-E基因至Ad49载体。

重组的腺病毒载体Ad49-prM-E经过酶切鉴定和测序正确之后，使用限制性内切酶AsiSI线性化，转染至HEK293细胞包装出病毒。在转染第五天出现细胞病变，随后病毒的噬斑逐渐扩大，如图4B所示，在包装病毒第十天时，可以看到清晰的病毒噬斑的形成。

收取包装病毒成功的HEK293细胞，在-80℃和37℃反复冻融之后，离心吸取上层含有重组Ad49-prM-E腺病毒上清，感染HEK293细胞，同时用重组腺病毒Ad49-eGFP感染的HEK293细胞做完对照。在重组的病毒感染24小时之后，收集细胞，使用蛋白印迹法（Weaternblot）鉴定寨卡病毒包膜（E）蛋白的表达，请参阅图4C，可以清晰的看到重组Ad49-prM-E腺病毒感染HEK293细胞之后，特异的目的条带，即包膜蛋白的表达，说明外源的蛋白可以通过此腺病毒载体成功的在真核细胞中表达。

结论

通过以上病毒基因组直接克隆的方法，本发明将人稀有血清型腺病毒HAd49构建成安全且能稳定表达外源基因的复制缺陷型载体，同时以人血清型腺病毒Ad5的E4orf6替换HAd49的E4orf6。对于这种人稀有血清型腺病毒并不能利用或者完全利用人源肾胚细胞(HEK293)中Ad5的E1结构蛋白，因此使用Ad5的E4orf6替换Ad49的E4orf6结构基因能够提高包装病毒过程中对人源肾胚细胞(HEK293)中Ad5的E1蛋白的利用效率，更加利于包装出重组腺病毒和提高了包装出重组病毒的病毒滴度。因此本发明为新型疫苗的研发以及生物医学的基础研究提供了一种基于HAd49-Ad5E4orf6的新型表达载体Ad49，此载体可以用于表达多种类的抗原，为疫苗和生物医药研发提供基础。

以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制，但凡采用等同替换或等效变换的形式所获得的技术方案，均应落在本发明的保护范围之内。

序列表

<110> 广州佰芮慷生物科技有限公司

<120> 一种基于腺病毒HAd49的重组腺病毒表达载体及其构建方法

<141> 2019-08-08

<160> 22

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 28423

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

catcatcaat aatatacccc acaaagtaaa caaaagttaa tatgcaaatg agcttttgaa 60

tttagggcgt ggccgtcgct gattggtcga gagaagacga tgcaaatgac gtcacgacgc 120

acggctaacg gtcgccgcgg aggcgtggcc tagcccggaa gcaagtcgcg ggactgatga 180

cgtataaaaa agcggacttt agacccggaa atggccgatt ttcccgcggc cacgcccgga 240

tatgaggtaa ttctgggcgg atgcaagtga aattaggtca ttttggcgcg aaaactgaat 300

gaggaagtga aaagtgaaaa ataccggtcc cgcccagggc ggaatattta ccgagggccg 360

agagactttg accgattacg tgggggtttc gattgcggtg tttttttcgc gaatttccgc 420

gtccgtgtca aagtccggtg tttatgtcac agatcagctg atccacaggg cgctacgtac 480

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cattaatgaa tcggtcagat atcgacatat gctgcgaggt aggttttgag tagtgggcgt 660

ggctaaggtg agtataaagg cggtgtctta cgagggtctt tttgcttttc tgcagacatc 720

atgaacggga ccggcggggc cttcgaaggg gggcttttta gcccttattt gacaacccgc 780

ctgccgggat gggccggagt tcgtcagaat gtgatgggat cgacggtgga tgggcgtcca 840

gtgcttccag caaattcctc gaccatgacc tacgcgaccg tggggagctc gtcgcttgac 900

agcaccgccg cagccgcggc agccgcagcc gccatgacag cgacgagact ggcctcgagc 960

tacatgccca gcagcggtag cagcccctct gtgcccagtt ccatcatcgc cgaggagaaa 1020

ctgctggccc tgctggccga gctggaagcc ctgagccgcc agctggccgc cctgacccag 1080

caggtgtccg agctccgcga gcagcagcag cagcaaaata aatgattcaa taaacacaga 1140

ttctgattca aacagcaaag catctttatt atttattttt tcgcgcgcgg taggccctgg 1200

tccacctctc ccgatcattg agagtgcggt ggattttttc caggacccgg tagaggtggg 1260

attggatgtt gaggtacatg ggcatgagcc cgtcccgggg gtggaggtag caccactgca 1320

tggcctcgtg ctctggggtc gtgttgtaga tgatccagtc atagcagggg cgctgggcgt 1380

ggtgctggat gatgtccttg aggaggagac tgatggccac ggggagcccc ttggtgtagg 1440

tgttggcaaa gcggttgagc tgggagggat gcatgcgggg ggagatgatg tgcagtttgg 1500

cctggatctt gaggttggcg atgttgccgc ccagatcccg cctggggttc atgttgtgca 1560

ggaccaccag gacggtgtag cccgtgcact tggggaactt atcatgcaac ttggaaggga 1620

atgcgtggaa gaatttggag acgcccttgt gcccgcccag gttttccatg cactcatcca 1680

tgatgatggc gatgggcccg tgagctgcgg ctttggcaaa gacgtttctg gggtcagaga 1740

catcataatt atgctcctgg gtgagatcat cataagacat tttaatgaat ttggggcgta 1800

gggtgccaga ttgggggacg atagttccct cgggccccgg ggcgaagttc ccctcacaga 1860

tctgcatctc ccaggctttc atctcggagg gggggatcat gtccacctgc ggggcgataa 1920

aaaaaacggt ttccggggcg ggggtgatga gctgcgagga gagcaggttt ctcaacagct 1980

gggacttgcc gcacccggtc gggccgtaga tgaccccgat gacgggttgc aggtggtagt 2040

tcaaggacat gcagctgccg tcgtcccgga ggaggggggc cacctcgttg agcatgtctc 2100

tgacttggag gttttcccgg acgagctcgc cgaggaggcg gtccccgccc agcgagagca 2160

gctcttgcag ggaagcaaag tttttcaggg gcttgagccc gtcggccatg ggcatcttgg 2220

cgagggtctg agagaggagt tccaggcggt cccagagctc ggtgacgtgc tctacggcat 2280

ctcgatccag cagacttcct cgtttcgggg gttgggacga ctgcgactgt agggcacgag 2340

acgatgggcg tccagcgcgg ccagcgtcat gtccttccag ggtctcaggg tccgagtgag 2400

ggtggtctcc gtcacggtga atgggtgggc cccgggctgg gcgcttgcaa gggtgcgctt 2460

gagactcatc ctgctggtgc tgaaacgggc acggtcttcg ccctgcgcgt cggcgagata 2520

gcagttgacc atgagctcgt agttgagggc ctcggcggcg tggcccttgg cgcggagctt 2580

gcccttggaa gagcgcccgc aggcgggaca taggagggat tgcagggcgt atagcttggg 2640

tgcgagaaag acggactcgg gagcgaaggc gtctgctccg cagtgggcgc agacggtctc 2700

gcactcgacg agccaggtga gctcgggctg ctcggggtca aaaaccagtt ttcccccgtt 2760

ctttttgatg cgcttcttac ctcgcgtctc catgagtctg tgtccgcgct cggtgacaaa 2820

caagctgtct gtgtccccgt agacggactt gatgggcctg tcctgcacgg gcgtcccgcg 2880

gtcctcctcg tagagaaact cggaccactc tgagacgaag gcgcgcgtcc acgccaagac 2940

aaaggaggcc acgtgcgagg ggtagcggtc gttgtccacc agggggtcca ccttttccac 3000

cgtgtgcaga cacatgtccc cctcctccgc atccaagaag gtgattggct tgtaggtgta 3060

ggccacgtga ccgggggtcc ccgacggggg ggtataaaag ggggcgggtc tgtgctcgtc 3120

ctcactctct tccgcgtcgc tgtccacgag cgccagctgt tggggtaggt attccctctc 3180

gagagcgggc atgacctcag cactcaggtt gtcagtttct agaaacgagg aggatttgat 3240

gttggcctgc cctgccgcga tgctttttag gagactttca tccatctggt cagaaaagac 3300

tattttttta ttgtcaagct tggtggcgaa ggagccatat agggcgttgg agagaagctt 3360

ggcgatggat ctcatggtct gatttttgtc acggtcggcg cgctccttgg ccgcgatgtt 3420

gagctggaca tactcgcgcg cgacgcactt ccattcgggg aagacggtgg tccgctcgtc 3480

gggcacgatc ctgacgcgcc agccgcggtt atgcagggtg accaggtcca cgctggtggc 3540

cacctcgccg cgcaggggct cgttggtcca gcagagtctg ccgcccttgc gcgagcagaa 3600

cggaggcagc acatcaagca gatgctcgtc aggggggtcc gcatcgatgg tgaagatgcc 3660

cggacagagt tccttgtcaa aataatctat ttttgaggat gcatcatcca aggccatctg 3720

ccactcgcgg gcggccagcg ctcgctcgta ggggttgagg ggcgggcccc agggcatggg 3780

atgcgtgagg gcggaggcgt acatgccgca gatgtcgtag acatagatgg gctccgagag 3840

gatgccgatg taggttggat aacagcgccc cccgcggatg ctggcgcgca cgtagtcata 3900

caactcgtgc gagggggcca agaaggcggg gccgagattg gtgcgctggg gctgctcggc 3960

gcggaagacg atctggcgaa agatggcgtg cgagttggag gagatggtgg gccgttggaa 4020

gatgttaaag tgggcgtggg gcaggcggac cgagtcgcgg atgaagtgcg cgtaggagtc 4080

ttgcagcttg gcgacgagct cggcggtgac gaggacgtcc atggcgcagt agtccagcgt 4140

ttcgcggatg atgtcataac ccgcctctcc tttcttctcc cacagctcgc ggttgagggc 4200

gtactcctcg tcatccttcc agtactcccg gagcgggaat cctcgatcgt ccgcacggta 4260

agagcccagc atgtagaaat ggttcacggc cttgtaggga cagcagccct tctccacggg 4320

gagggcgtaa gcttgagcgg ccttgcggag cgaggtgtgc gtcagggcga aggtgtccct 4380

gaccatgact ttcaagaact ggtacttgaa gtccgagtcg tcgcagccgc cgtgctccca 4440

gagctcaaaa tcggtgcgct tcttcgagag ggggttaggc agagcgaaag tgacgtcatt 4500

gaagagaatc ttgcctgccc gcggcatgaa attgcgggtg atgcggaaag gaccagggac 4560

ggaggctcgg ttgttgatga cctgggcggc gaggacgatc tcgtcgaagc cgttgatgtt 4620

gtgcccgacg atgtagagtt ccatgaatcg cgggcggcct ttgatgtgcg gcagcttttt 4680

gagctcctcg taggtgaggt cctcggggca ttgcaggccg tgctgctcga gcgcccactc 4740

ctggagatgt gggttggctt gcatgaagga agcccagagc tcgcgggcca tgagggtctg 4800

gagctcgtcg cgaaagaggc ggaactgctg gcccacggcc atcttttctg gggtgacgca 4860

gtagaaggtg agggggtccc gctcccagcg atcccagcgt aagcgcacgg cgagatcgcg 4920

agcgagggcg accagcttgg ggtcccccga gaatttcatg accagcatga aggggacgag 4980

ctgcttgccg aaggacccca tccaggtgta ggtttctaca tcgtaggtga caaagagccg 5040

ctccgtgcga ggatgagagc cgattgggaa gaactggatt tcctgccacc agttggacga 5100

gtggctgttg atgtgatgaa agtagaaatc ccgccggcga accgagcact cgtgctgatg 5160

cttgtaaaag cgtccgcagt actcgcagcg ctgcacgggc tgtacctcat ccacgagata 5220

cacagcgcgt cccttgagga ggaacttcag gagtggcggc cctggctggt ggttttcatg 5280

ttcgcctgcg tgggactcac cctggggctc ctcgaggacg gagaggctga cgagcccgcg 5340

cgggagccag gtccagatct cggcgcggcg ggggcggaga gcgaagacga gggcgcgcag 5400

ttgggagctg tccatggtgt cgcggagatc caggtccggg ggcagggttc tgaggttgac 5460

ctcgtagagg cgggtgaggg cgtgcttgag atgcagatgg tacttgattt ctacgggtga 5520

gttggtggcc gtgtccacgc attgcatgag cccgtagctg cgcggggcca cgaccgtgcc 5580

gcggtgcgct tttagaagcg gtgtcgcgga cgcgctcccg gcggcagcgg cggttccggc 5640

cccgcgggca ggggcggcag aggcacgtcg gcgtggcgct cgggcaggtc ccggtgctgc 5700

gccctgagag cgctggcgtg cgcgacgacg cggcggttga catcctggat ctgccgcctc 5760

tgcgtgaaga ccacgggccc cgtgactttg aacctgaaag acagttcaac agaatcaatc 5820

tcggcgtcat tgacggcggc ctgacgcagg atttcttgca cgtcgcccga gttgtcctgg 5880

taggcgatct cggacatgaa ctgctcgatc tcctcctcct ggagatcgcc gcggcccgcg 5940

cgctcgacgg tggcggcgag gtcattcgag atgcgaccca tgagctgcga gaaggcgccc 6000

aggccgctct cgttccagac gcggctgtag accacgtccc cgtcggcgtc gcgcgcgcgc 6060

atgaccacct gcgcgaggtt gagctccacg tgccgcgtga agacggcgta gttgcgcagg 6120

cgctggaaga ggtagttgag ggtggtggcg atgtgctcgg tgacgaagaa gtacatgatc 6180

cagcggcgca ggggcatttc gctgatgtcg ccgatggcct ccagcctttc catggcctcg 6240

tagaaatcca cggcgaagtt gaaaaactgg gcgttgcggg ccgagaccgt gagctcgtct 6300

tccaggagcc ggatgagttc ggcgatggtg gcgcgcacct cgcgctcgaa atccccgggg 6360

gcctcctcct cttcctcttc ttccatgacg acctcttctt ctatttcttc ctctgggggc 6420

ggtggtggtg gcggggcccg acgacgacgg cgacgcaccg ggagacggtc gacgaagcgc 6480

tcgatcatct ccccgcggcg gcgacgcatg gtttcggtga cggcgcgacc ccgttcgcga 6540

ggacgcagcg tgaagacgcc gccggtcatc tcccggtaat ggggcgggtc cccgttgggc 6600

agcgataggg cgctgacgat gcatcttatc aattgcggtg taggggacgt gagcgcgtcg 6660

agatcgaccg gatcggagaa tctttcgagg aaagcgtcta gccaatcgca gtcgcaaggt 6720

aagctcaaac acgtagcagc cctgtggacg ctgttagaat tgcggttgct gatgatgtaa 6780

ttgaagtagg cgtttttgag gcggcggatg gtggcgagga ggaccaggtc cttgggtccc 6840

gcttgctgga tgcggagccg ctcggccatg ccccaggcct ggccctgaca ccggctcagg 6900

ttcttgtagt agtcatgcat gagcctctca atgtcatcac tggcggaggc ggagtcttcc 6960

atgcgggtga ccccgacgcc cctgagcggc tgcacgagcg ccaggtcggc gacgacgcgc 7020

tcggcgagga tggcctgttg cacgcgggtg agggtgtcct gaaagtcgtc catgtcgacg 7080

aagcggtggt aggccccggt gttgatggtg taggtgcagt tggccatgag cgaccagttg 7140

acggtctgca ggccgggctg cacgacctcg gagtacctga tccgcgagaa ggcgcgcgag 7200

tcgaagacgt agtcgttgca ggtgcgcacg aggtactggt agccgactag gaagtgcggc 7260

gggggctggc ggtagagcgg ccagcgctgg gtggccggcg cgcccggggc caggtcctct 7320

agcatgaggc ggtggtagcc gtagaggtag cgggacatcc aggtgatgcc ggcggcggtg 7380

gtggaggcgc gcgggaactc gcggacgcgg ttccagatgt tgcgcagcgg caggaaatag 7440

tccatggtcg gcacggtctg gccggtgaga cgcgcgcagt cattgacgct ctagaggcaa 7500

aaacgaaagc ggttgagcgg gctcttcctc cgtagcctgg cggaacgcaa acgggttagg 7560

ccgcgcgtgt accccggttc gagtccctgc tcgaatcagg ctggagccgc gactaacgtg 7620

gtattggcac tcccgtctcg acccgagccc gatagccgcc aggatacggc ggagagtcct 7680

ttttgccggc cgagtggggt cgctagactt gaaagcggcc gaaaaccctg ccgggtagtg 7740

gctcgcgccc gtagtctgga gaagcatcgc cagggttgag tcgcggcaga acccggttcg 7800

cggacggccg cggcgagcgg gacttggtca ccccgccgat ttaaagaccc acagccagcc 7860

gacttctcca gttacgggag cgagccccct tttttctttt tgccagatgc atcccgtcct 7920

gcgccaaatg cgtcccaccc ccccggcgac caccgcgacc gcggccgtag caggcgccgg 7980

cgctagccag ccacagccac agacagagat ggacttggaa gagggcgaag ggctggcgag 8040

actgggggcg ccgtccccgg agcgacaccc ccgcgtgcag ctgcagaagg acgtgcgccc 8100

ggcgtacgtg cctgcgcaga acctgttcag ggaccgcagc ggggaggagc ccgaggagat 8160

gcgcgactgc cgttttcggg cgggcaggga gctgcgcgag ggcctggacc gccagcgagt 8220

gctgcgcgac gaggatttcg agccgaacga gcagacgggg atcagtcccg cgcgcgcgca 8280

cgtggcggcg gccaacctgg tgacggccta cgagcagacg gtgaagcagg agcgcaactt 8340

ccaaaagagt ttcaacaacc acgtgcgcac cctgatcgcg cgcgaggagg tggccctggg 8400

cctgatgcac ctgtgggacc tggcggaggc catcgtgcag aacccggaca gcaagcctct 8460

gacggcgcag ctgttcctgg tggtgcagca cagcagggac aacgaggcgt tcagggaggc 8520

gctgctgaac atcgccgagc ccgagggtcg ctggctgctg gagctgatca acatcttgca 8580

gagcatcgta gtgcaggagc gcagcctgag cctggccgag aaggtggcgg cgatcaacta 8640

ctcggtgctg agcctgggca agttttacgc gcgcaagatt tacaagacgc cgtacgtgcc 8700

catagacaag gaggtgaaga tagacagctt ttacatgcgc atggcgctca aggtgctgac 8760

gctgagcgac gacctgggcg tgtaccgcaa cgaccgcatc cacaaggccg tgagcgcgag 8820

ccggcggcgc gagctgagcg accgcgagct gatgctgagc ctgcgccggg cgctggtagg 8880

gggcgccgcc ggcggagagg agtcctactt cgacatgggg gcggacctgc attggcagcc 8940

gagccggcgc gccttggagg ccgcctacgg tccagaggac ttggatgagg aagaggaaga 9000

ggaggaggag gatgcacccg ttgcggggta ctgacgcctc cgtgatgtgt ttttagatgc 9060

agcaagcccc ggaccccgcc ataagggcgg cgctgcaaag ccagccgtcc ggtctagcat 9120

cggacgactg ggaggccgcg atgcaacgca tcatggccct gacgacccgc aaccccgagt 9180

cctttagaca acagccgcag gccaacagac tctcggccat tctggaggcg gtggtcccct 9240

ctcggaccaa ccccacgcac gagaaggtgc tggcgatcgt gaacgcgctg gcggagaaca 9300

aggccatccg tcccgacgag gccgggctgg tgtacaacgc cctgctggag cgcgtgggcc 9360

gctacaacag cacgaacgtg cagtccaacc tggaccggct ggtgacggac gtgcgcgagg 9420

ccgtggcgca gcgcgagcgg ttcaagaacg agggcctggg ctcgctggtg gcgctgaacg 9480

ccttcctggc gacgcagccg gcgaacgtgc cgcgcgggca ggacgattat accaacttta 9540

taagcgcgct gcggctgatg gtgaccgagg ttccccagag cgaggtgtac cagtcgggcc 9600

cggactactt tttccagact agccggcagg gcctgcagac ggtgaacctg agccaggctt 9660

tcaagaacct gcgcgggctg tggggcgtgc aggcgcccgt gggcgaccgg tcgacggtga 9720

gcagcttgct gacgcccaat tcgcggctgc tgctgctgct gatagcgccc ttcaccgaca 9780

gcggcagcgt gaaccgcaac tcgtacctgg gccacctgct gacgctgtac cgcgaggcca 9840

taggccaggc acaggtggac gagcagacct tccaggagat cacgagtgtg agccgcgcgc 9900

tggggcagaa cgataccgac agtctgaggg ccaccctgaa cttcttgctg accaatagac 9960

agcagaagat cccggcgcag tacgcgctgt cggccgagga ggaaaggatc ctgagatatg 10020

tgcagcagag cgtagggctg ttcctgatgc aggagggcgc cacccccagc gccgcgctgg 10080

acatgaccgc gcgcaacatg gaacctagca tgtacgccgc caaccggccg ttcatcaata 10140

agctgatgga ctacctgcac cgcgcggcgg ccatgaacac ggactacttc accaacgcca 10200

tattgaaccc gcactggctc ccgccaccgg ggttctacac gggcgagtac gacatgcccg 10260

accccaacga cgggttcctg tgggacgacg tggacagcgc ggtgttctcc ccgaccttgc 10320

aaaagcgcca ggaggcgccg ccgagcgagg gcgcggtggg gaggagcccc tttcctagct 10380

tagggagttt gcatagcttg ccgggctcgg tgaacagcgg cagggtgagc cggccgcgct 10440

tgctgggcga ggacgagtac ctgaacgact cgctgctgca gccgccgcgg gccaagaacg 10500

ccatggccaa taacgggata gagagtctgg tggacaaact gaaccgctgg aagacctacg 10560

ctcaggacca tagggacgcg cccgcgccgc ggcgacagcg ccacgaccgg cagcggggcc 10620

tggtgtggga cgacgaggac tcggccgacg atagcagcgt gttggacttg ggcgggagcg 10680

gtggggccaa cccgttcgcg catctgcagc ccagactggg gcggcggatg ttttgaaatg 10740

caaaataaaa ctcaccaagg ccatagcgtg cgttctcttc cttgttagag atgaggcgcg 10800

cggtggtgtc ttcctctcct cctccctcgt acgagagcgt gatggcgcag gcgaccctgg 10860

aggttccgtt tgtgcctccg cggtatatgg ctcctacgga gggcagaaac agcattcgtt 10920

actcggagct ggctccgcag tacgacacca ctcgcgtgta cttggtggac aacaagtcgg 10980

cggacatcgc ttccctgaac taccaaaacg accacagcaa cttcctgacc acggtggtgc 11040

agaacaacga tttcaccccc gccgaggcca gcacgcagac gataaatttt gacgagcggt 11100

cgcggtgggg cggtgatctg aagaccattc tgcacaccaa catgcccaat gtgaacgagt 11160

acatgttcac cagcaagttt aaggcgcggg tgatggtgtc taggaagcgg ccagaggggg 11220

cgacagatgc aagtcaggat atcttaaagt atgagtggtt tgagtttacc ctgcccgagg 11280

gcaacttttc cgagaccatg accatagacc tgatgaacaa cgccatcttg gaaaactact 11340

tgcaagtggg gcggcaaaat ggcgtgctgg agagcgatat cggagtcaag tttgacagca 11400

ggaatttcag acttggctgg gacccggaga ccaagctggt gatgccgggg gtctacacct 11460

acgaggcctt ccacccggac gtggtgctac tgccgggctg cggggtggac ttcaccgaga 11520

gccgcctgag caacctcctg ggcattcgca agaagcaacc tttccaagag ggcttcagga 11580

tcatgtatga ggatctagaa gggggcaaca tccctgctct gctggatgtg gaagcatacc 11640

tcaaaagcaa gaatgatctg gaggaggcta ccaagaatgc aaacagagct gctgctaatg 11700

gaggtggtga aactagggga gatacttttc tcaccaccga acagctgaga gccgctggca 11760

aggagctggt tattaagccc attaaggaag atgctagcaa aaggagctat aatgtcatag 11820

gggacaccca tgacaccctg taccgaagct ggtatctgtc ctatacctac ggggaccccg 11880

agaagggggt gcagtcgtgg acgctgctca ccacccctga cgtcacctgc ggcgcggagc 11940

aagtctactg gtcgctgccg gacctcatgc aagaccccgt caccttccgc tccacccagc 12000

aagtcagcaa ctaccccgtg gtcggcgccg agctcatgcc cttccgcgcc aagagctttt 12060

acaacgacct cgccgtctac tcccagctca tccgcagcta cacctccctc acccacgtct 12120

tcaaccgctt ccccgacaac cagatcctct gccgcccgcc cgcgcccacc atcaccaccg 12180

tcagtgaaaa cgtgcctgct ctcacagatc acgggacgct accgctgcgc agcagtatcc 12240

gcggagtcca gcgagtgacc gtcactgacg cccgtcgccg cacctgtccc tacgtctaca 12300

aggccctggg catagtcgcg ccgcgcgtgc tttccagtcg caccttctaa aaaatgtcta 12360

ttctcatctc gcccagcaat aacaccggct ggggtcttac taggcccagc accatgtacg 12420

gaggagccaa gaagcgctcc cagcagcacc ccgtccgcgt ccgcggccac ttccgcgctc 12480

cctggggcgc ttacaagcgc gggcggactt ccaccgccgc cgccgtgcgc accaccgtcg 12540

atgacgttat cgactcggtg gtcgccgacg cgcgcaacta tactcccgcc ccctccaccg 12600

tggacgcggt catcgacagc gtggtggccg acgcgcgcga ctatgccaga cgcaagagcc 12660

ggcggcgacg gatcgccagg cgccaccgga gcacgcccgc catgcgcgcc gcccgggctc 12720

tgctgcgccg cgccagacgc acgggccgcc gggccatgat gcgagccgcg cgccgcgccg 12780

ccactgcacc cacccccgca ggcaggactc gcagacgagc ggccgccgcc gccgccgcgg 12840

ccatctctag catgaccaga cccaggcgcg gaaacgtgta ctgggtgcgc gactccgtca 12900

cgggcgtgcg cgtgcccgtg cgcacccgtc ctcctcgtcc ctgatctaat gcttgtgtcc 12960

tcccccgcaa gcgacgatgt caaagcgcaa aatcaaggag gagatgctcc aggtcgtcgc 13020

cccggagatt tacggaccac cccaggcgga ccagaaaccc cgcaaaatca agcgggttaa 13080

aaaaaaggat gaggtggacg agggggcagt agagtttgtg cgcgagttcg ctccgcggcg 13140

gcgcgtaaat tggaaggggc gcagggtgca gcgcgtgttg cggcccggca cggcggtggt 13200

gttcacgccc ggcgagcggt cctcggtcag gagcaagcgt agctatgacg aggtgtacgg 13260

cgacgacgac atcctggacc aggcggcgga gcgggcgggc gagttcgcct acgggaagcg 13320

gtcgcgcgaa gaggagctga tatcgctgcc gctggacgag agcaacccca cgccgagcct 13380

gaagcccgtg accctgcagc aggtgctgcc ccaggcggtg ctgctgccga gccgcggggt 13440

caagcgcgag ggcgagagcg tgtatcccac catgcagatc atggtgccca agcgccggcg 13500

cgtggaggac gtgctggaca ccgtgaaaat ggatgtggag cccgaggtca aggtgcgccc 13560

catcaagcag gtggcgccgg gcctgggcgt gcagaccgtg gacattcaga tccccaccga 13620

catggatgtc gacaaaaaac cctcgaccag catcgaggtg cagaccgacc cctggctccc 13680

agcctccacc gctaccgcgt ccacttctac cgccgccacg gctaccgagc ctcccaggag 13740

gcgaagatgg ggcgccgcca gccggctgat gcccaactac gtgttgcatc cttccatcat 13800

cccgacgccg ggctaccgcg gcacccggta ctacgccagc cgccgacgcc cagccagcaa 13860

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cacgcgccgg ggccgctcgc tcgttctgcc caccgtgcgc taccacccca gcatccttta 13980

atccgtgtgc tgtgatactg ttgcagagag atggctctca cttgccgcct gcgcatcccc 14040

gtcccgaatt accgaggaag atcccgccgc aggagaggca tggcaggcag cggcctgaac 14100

cgccgccggc ggcgggccat gcgcaggcgc ctgagtggcg gctttctgcc cgcgctcatc 14160

cccataatcg ccgcggccat cggcacgatc ccgggcatag cttccgttgc gctgcaggcg 14220

tcgcagcgcc gttgatgtgc gaataaagcc tctttagact ctgacacacc tggtcctgta 14280

tatttttaga atggaagaca tcaattttgc gtccctggct ccgcggcacg gcacgcggcc 14340

gttcatgggc acctggaacg agatcggcac cagccagctg aacgggggcg ccttcaattg 14400

gagcagtgtc tggagcgggc ttaaaaattt cggctcgacg ctccggacct atgggaacaa 14460

ggcctggaat agtagcacgg ggcagttgtt aagggaaaag ctcaaagacc agaacttcca 14520

gcagaaggtg gtggacgggc tggcctcggg cattaacggg gtggtggaca tcgcgaacca 14580

ggccgtgcag cgcgagataa acagccgcct ggacccgcgg ccgcctacgg tggtggagat 14640

ggaagatgca actcttccgc cgcccaaagg cgagaagcgg ccgcggcccg acgcggagga 14700

gacgatcctg caggtggacg agccgccctc gtacgaggag gccgtcaagg ccggcatgcc 14760

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gcctccacca cccacgcccg ctccaccgaa ggcagctccg gttgtgcagg cccccccggt 14880

ggcgaccgcc gtgcgccgcg tccccgcccg ccgccaggcc cagaactggc agagcacgct 14940

gcacagtatc gttggcctgg gagtgaaaag tctgaagcgc cgccgatgct attgagagag 15000

aggaaagagg acactaaagg gagagcttaa cttgtatgtg ccttaccgcc agagaacgcg 15060

cgaagatggc caccccctcg atgatgccgc agtgggcgta catgcacatc gccgggcagg 15120

acgcctcgga gtacctgagc ccgggtctgg tgcagtttgc ccgcgccacc gacacgtact 15180

tcagcctggg caacaagttt aggaacccca cggtggctcc cacccacgat gtgaccacgg 15240

accggtccca gcgtctgacg ctgcgcttcg tgcccgtgga tcgcgaggac accacgtact 15300

cgtacaaggc gcgcttcact ctggccgtgg gcgacaaccg ggtgctagac atggccagca 15360

cttactttga catccgcggc gtcctggacc gcggtcccag cttcaaaccc tactcgggca 15420

cggcttataa cagcctggcc cccaagggcg cccccaactc cagtcagtgg gacgctaaag 15480

aaaataatgg tcagggagaa gctaagactc atacatatgg tgtggctgcc atgggcggtt 15540

ataatatcac aaaggatgga ctgcaaatag gaatagatga aaacaaggaa gaagatgaag 15600

aaggaagaga aattttcgca gttaaatcat accagccaga acctcaagtg ggagaggaaa 15660

actggcaaaa cacagaaaac ttctacggag gcagagctct taaaaaagaa accaaaatga 15720

aaccatgcta tggttctttt gccagaccca ccaatgataa gggaggtcag gctgttttta 15780

aaactggtga aaatggaaag cctaccgaag agctagatat cgatcttgct ttctttgatc 15840

tcagacaaaa tgacactggt ggaaataaca atcaaccaga tatgatcatg tatgctgaaa 15900

atgtaaacct ggaaacacca gacactcatg tggtgtacaa acctggaact tcagatgaca 15960

gttccgaaat taacttatgt cagcaatcca tgcccaacag acctaactac attggattta 16020

gagataactt tgttgggctg atgtactaca acagcactgg caacatgggt gtgctagcgg 16080

gtcaggcctc tcagttgaat gctgtggtcg acttgcaaga cagaaacacc gagctgtctt 16140

accagctctt gctagattct ctgggtgaca gaacaaggta ctttagcatg tggaactctg 16200

cggtggacag ctatgatccc gatgtcagga tcattgagaa tcacggtgtg gaagatgaac 16260

ttccaaacta ttgctttcca ttggatggct ctggcagcag tactgcttac caaggtgttg 16320

aacctgatac aactgttgct ggtacaaacg acaaatggaa agtaaatgct aaagtcgctc 16380

agcataatca gatcgccaag ggcaacctgt tcgccatgga gatcaacctc caggccaacc 16440

tgtggaagag ttttctgtac tcgaacgtgg ccctgtacct gcccgactca tacaagtaca 16500

cgccggccaa cgtcaagctg cccaccaaca ccaacaccta cgactacatg aacggccgcg 16560

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ccatggacaa tgtcaacccc ttcaaccacc accgcaacgc gggcctgcgc taccgctcca 16680

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ccatcaagaa cctgctcctg ctcccgggct cctacaccta cgagtggaac ttccgcaagg 16800

atgtcaacat gatcctgcag agttccctcg gcaacgacct gcgcgtcgac ggcgcctccg 16860

tccgcttcga cagcgtcaac ctctacgcca ccttcttccc catggcgcac aacaccgcct 16920

ccaccttgga agccatgctg cgcaacgaca ccaacgacca gtccttcaac gactacctct 16980

cggccgccaa catgctctac cccatcccgg ccaaggccac caacgtgccc atctccatcc 17040

cctcgcgcaa ctgggccgcc ttccgcggct ggagtttcac ccggctcaag accaaggaaa 17100

ctccttccct cggctcgggt ttcgacccct actttgtcta ctcgggctcc atcccctacc 17160

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cggtcagctg gcccggcaac gaccggctgc tcacgccgaa cgagtttgag atcaagcgca 17280

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tccagatgct ctcccactac aacatcggct accagggctt ccacgtgccc gagggctaca 17400

aggaccgcat gtactccttc ttccgcaact tccagcccat gagcaggcag gtggtcgatg 17460

agatcaacta caaggactac aaggccgtca ccctgccatt ccagcacaac aactcgggct 17520

tcaccggcta cctcgccccc accatgcgcc aggggcagcc ctaccccgcc aacttcccct 17580

acccgctcat cggctccacc gcagtcccct ccgtcaccca gaaaaagttc ctctgcgaca 17640

gggtcatgtg gcgcatcccc ttctccagca acttcatgtc catgggcgcc ctcaccgacc 17700

tgggtcagaa catgctatac gccaactcgg cccacgcgct tgacatgacc ttcgaggtgg 17760

accccatgga tgagcccacc ctcctctatc ttctcttcga agttttcgac gtggtcagag 17820

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gcaacgccac cacataagca tgagcggctc cagcgaacga gagctcgcgg ccatcgtgcg 17940

cgacctgggc tgcgggccct actttttggg cacccacgac aagcgcttcc cgggcttcct 18000

agccggcgac aagctggcct gcgccatcgt caacacggcc ggccgcgaga ccggaggtgt 18060

gcactggctc gccttcggct ggaacccgcg ctcgcgcacc tgctacatgt tcgacccatt 18120

tgggttctcg gaccgccggc tcaagcagat ttacagcttc gagtacgagg ccatgctgcg 18180

ccgcagcgcc ctggcctcct cgcccgaccg ctgtctcagc ctcgagcagt ccacccagac 18240

cgtgcagggg cccgactccg ccgcctgcgg acttttctgt tgcatgttct tgcatgcctt 18300

cgtgcactgg cccgaccgac ccatggacgg aaaccccacc atgaacttgc tgacgggggt 18360

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attttacatg cactggagta tatgcaagtt atttaaaagt cgaaggggtt ctcgcgctcg 18600

tcgttgtgcg ccgcgctggg gagggccacg ttgcggaact ggtacttggg ctgccacttg 18660

aactcgggga tcaccagttt gggcactggg gtctcgggga aggtctcgct ccacatgcgc 18720

cggctcatct gcagggctcc cagcatgtcc ggggcggaaa tcttgaaatc gcagttggga 18780

ccggtgctct gcgcgcgcga gttgcggtac acggggttgc agcactggaa caccatcaga 18840

ctggggtgct tcacgctggc cagcacgctc ttgtcgctga tctgatcctt gtccagatcc 18900

tcggcgttgc tcaggccgaa cggggtcatc ttgcacagct ggcggcccag gaagggcacg 18960

ctctgaggct tgtggttaca ctcgcagtgg acgggcatca gcatcatccc cgcgccgcgc 19020

tgcatattcg ggtagagggc cttgacgaag gccgcgatct gcttgaaagc ttgctgggcc 19080

ttggccccct cgctaaagaa cagaccgcag ctcttcccgc taaactggtt attcccgcag 19140

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cagcggttct gggtcacctt ggccttgctg ggttgctcct tcagcgcgcg ctgcccgttc 19260

tcgctggtca catccatctc caccacgtgg tccttgtgga tcatcaccgt tccatgcaga 19320

cacttgagct ggccttccac ctcggtgcag ccgtgatccc acagggcgca gccggtgcac 19380

tcccagttct tgtgcgcgat cccgctgtgg ctgaagatgt aaccttgcaa catgcggccc 19440

atgacggtgc taaatgcttt ctgggtggtg aaggtcagtt gcagaccgcg ggcctcctcg 19500

ttcatccagg tctggcacat cttttggaag atctcggtct gctcgggcat gagcttgtaa 19560

gcatcgcgca ggccgctgtc gacgcggtag cgttccatca gcacgttcat ggtatccatg 19620

cccttctccc aggacgagac cagaggcaga ctcagggggt tgcgcacgtt caggacaccg 19680

ggggtcgcgg gctcgacgat gcgttttccg tccttgcctt ccttcaacag aaccggcggc 19740

tggctgaatc ccactcccac gatcacggcg tcttcctggg gcatctcttc gtcggggtct 19800

acctttgtca catgcttggt ctttctggct tgcttctttt ttggagggct gtccacgggg 19860

accacgtcct cctcggaaga cccggagccc acccgctgat actttcggcg cttggtgggc 19920

agaggaggcg gcggcgaggg gctcctctcc tgctccggcg gatagcgcgc tgaaccgtgg 19980

ccccggggcg gagtggcctc tcgctccatg aaccggcgca cgtcctgact gccgccggcc 20040

attgtttcct aggggaagat ggaggagcag ccgcgtaagc aggagcagga ggaggactta 20100

accacccacg agcaacccaa aatcgagcag gacctgggct tcgaagagcc ggctcgtcta 20160

gaacccccac aggatgaaca ggagcacgag caagacgcag gccaggagga gaccgacgct 20220

gggctcgagc atggctacct gggaggagag gaggatgtgc tgctgaaaca cctgcagcgc 20280

cagtccctca tcctccggga cgccctggcc gaccggagcg aaacccccct gagcgtcgag 20340

gagctgtgtc gggcctacga gctcaacctc ttctcgccgc gcgtgccccc caaacgccag 20400

cccaacggca catgcgagcc caacccgcgt ctcaacttct atcccgtctt tgcggtcccc 20460

gaggccctcg ccacctatca catctttttc aagaaccaaa agatccccgt ctcctgccgc 20520

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atcgcttccc tagaagaggt gcccaagatc ttcgaagggc tcggtcggga cgagacgcgc 20640

gcggcgaacg ctctgaaaga aacagcagag gaagagggtc acactagcgc cctggtagag 20700

ttggaaggcg acaacgccag gctggccgtg ctcaagcgca gcgttgagct cacccacttc 20760

gcctaccccg ccgtcaacct cccgcccaag gtcatgcgtc gcatcatgga tcagctcatc 20820

atgccccaca tcgaggccct cgatgaaagt caggagcagc gccccgagga cgcccggccc 20880

gtggtcagcg acgagatgct cgcgcgctgg ctcggaaccc acgaccccca gaccctggag 20940

cagcggcgca agctcatgct ggccgtggtc ctggtcaccc tcgagctcga atgcatgcgc 21000

cgcttcttca gcgaccccga gaccctgcgc aaggtcgagg agaccctgca ctacactttc 21060

aggcacggtt tcgtcaggca ggcctgcaag atctccaacg tggagctgac caatctggtc 21120

tcctgcctgg ggatcctgca cgagaaccgc ctggggcaga ccgtgctcca ctcgaccctg 21180

aagggcgagg cgcggcggga ctatgtccgc gactgcgtct ttctctttct ctgccacaca 21240

tggcaagcgg ccatgggcgt gtggcagcag tgtctcgagg acgagaacct gaaggagctg 21300

gacaagcttc ttgctagaaa tcttaaaaag ctgtggacgg gtttcgacga gcgcaccgtc 21360

gcctcggacc tggccgagat cgtcttccca gagcgcctga ggcagacgct gaaaggcggg 21420

ctgcccgact tcatgagcca gagcatgtta caaaactacc gcactttcat tctcgagcga 21480

tctgggatgc tgcccgccac ctgcaacgcc ttcccctccg actttgtccc gctgagctac 21540

cgcgagtgtc ccccgccgct gtggagccac tgctacctct tgcagctggc caactacatc 21600

gcctaccact cggacgtgat cgaggacgtg agcggcgagg ggctgctcga gtgccactgc 21660

cgctgcaacc tgtgctcccc gcaccgctcc ctggtctgca acccccagct cctgagcgag 21720

acccaggtca tcggtacctt cgagctgcaa ggtccgcagg agtccaccgc tccgctgaaa 21780

ctcacgccgg ggttgtggac ttccgcgtac ctgcgcaaat ttgtacccga ggactaccac 21840

gcccatgaga taaagttctt cgaggaccaa tcgcggccgc agcacgcgga tctcacggcc 21900

tgcgtcatca cccagggcgc gatcctcgcc caattgcacg ccatccaaaa atcccgccaa 21960

gagtttcttc tgaaaaaggg tagaggggtc tacctggacc cccagacggg cgaggtgctc 22020

aacccgggtc tccctcagaa tgccgaggaa gaagcaggag ccgctagtgg aggagatgga 22080

agaagaatgg gacagccagg cagaggagga cgaatgggag gaggagacag aggaggaaga 22140

attggaagag gtggaagagg agcaggcaac agagcagccc gtcgccgcac catccgcgcc 22200

ggcagccccg gcggtcacgg atacaacctc cgcagctccg gccaagcctc ctcgtagatg 22260

ggatcgagtg aagggtgacg gtaagcacga gcggcagggc taccgatcat ggagggccca 22320

caaagccgcg atcatcgcct gcttgcaaga ctgcgggggg aacatcgctt tcgcccgccg 22380

ctacctgctc ttccaccgcg gggtgaacat cccccgcaac gtgttgcatt actaccgtca 22440

ccttcacagc taagaaaaag caagtaagag gagtcgccgg aggaggagga ggcctgagga 22500

tcgcggcgaa cgagccctcg accaccaggg agctgaggaa ccggatcttc cccactcttt 22560

atgccatttt tcagcagagt cgaggtcagc agcaagagct caaagtaaaa aatcggtctc 22620

tgcgctcgct cacccgcagt tgcttgtacc acaaaaacga agatcagctg cagcgcactc 22680

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ccccttacat gtggagctat cagccccaga tgggcctggc agcgggcgcc tcccaggact 22860

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tccgcagtca tcgaaaccag atattgttgg agcaggcggc ggtcacctcc acgcccaggg 22980

caaagctcaa cccgcgtaat tggccctcca ccctggtgta tcaggaaatc cccgggccga 23040

ctaccgtact acttccgcgt gacgcactgg ccgaagtccg catgactaac tcaggtgtcc 23100

agctggccgg cggcgcttcc cggtgcccgc tccgcccaca atcgggtata aaaaccctgg 23160

tgatccgagg cagaggcaca cagctcaacg acgagttggt gagctcttcg atcggtctgc 23220

gaccggacgg agtgttccaa ctagccggag ccgggagatc ctccttcact cccaaccagg 23280

cctacctgac cttgcagagc agctcttcgg agcctcgctc cggaggcatc ggaactctcc 23340

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tctacccgga cgagttcata ccgaacttcg acgcagtgag agaagcggtg gacggctacg 23460

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cctacaccgt ctactgcatc tgtcctaccc cgaagttgca tgagaatttt tgctgtactc 23760

tttgtggtga gtttaataaa agctgaacta agaacctact ttggaatccc ttgtcgtcat 23820

cctcggaaca agaccgtctt ctttaccaac cagaccaagg ttcgtctgaa ctgtacaacc 23880

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gacgacgacg gtgttcctcc ccatgaacta atgttgatta aaagcccaga aaccaatcag 24000

cccattccca tttccccaat tattcataag aataaatcat tggaattaat cattcaataa 24060

aatcacttac ttgaaatctg aaagtatgtc tctggtgtag ttgttcagca gcacctcggt 24120

accctcctcc cagctctggt actccagtcc ccggcgggcg gcgaacttcc tccacacctt 24180

gaaagggatg tcaaattcct ggtccacaat tttcattgtc ttccctctta gatgtcaaag 24240

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aatatcccct tcctcactcc cccctttgtc tcctccgatg gattccaaaa cttccctcct 24360

ggggtcctgt cactcaaact ggctgaccca atcgccatca ccaatgggaa tgtctcactc 24420

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gactataaaa aattttcagt taaattattg tttgatgcca atggtaaatt attgacagga 25020

tcaagcctag atggaaatta ttggaattat aaaaacaagg atagtgtgat tgggtctcct 25080

tatgaaaatg ccgttccttt tatgcctaat tccacagctt atcctaaaat catcaataat 25140

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aagctcatgg cggggaccac agaacccacg tggccatcat accacaagcg caggtagatt 26040

aagtggcgac ccctcataaa cacgctggac ataaacatta cctcttttgg catgttgtaa 26100

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ctaaaccagc tggccaaaac ctgcccgccg gctatacact gcagggaacc gggactggaa 26220

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ggaagacctc gcacgtaact cacgttgtgc attgtcaaag tgttacattc gggcagcagc 26460

ggatgatcct ccagtatggt agcgcgggtt tctgtctcaa aaggaggtag acgatcccta 26520

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acgccggacg tagtcatttc gctgctgccg ctcagtcatc caactgaagt acatccattc 26640

tcgaagattc tggagaagtt cctctgcatc tgatgaaaca aaaaacccgt ccatgcgaat 26700

tcccctcatc acatcagcca ggactctgta ggccatcccc atccagttaa tgctgccttg 26760

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cgaaggacga taaagtgcaa gtcacgcagg tgacagcgtt ccccgccgct gtgctggtgg 26880

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agtggctcta cgcgtacatc cagcataaga atcacattaa atgccggccc tccatcgatt 27000

tcatcaatca tcaggttaca ctcgttcacc atccccaggt aattctcatt tttccagcct 27060

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agcgccccct ccactttcat aagcaggcag accttcatat tagaaacaga tcctgctgct 27180

ccaccacctg cagcgtattc agaataaaaa gatttaattg tctgccctct gccctcagct 27240

cgcgcctcag cgtcagctgt aaaaagtcac tcaagtcctc agccaccaca gctgccaact 27300

ctgagcctgg gctaagcgtg ggactggcaa gcgtgaggga atatttcagt gctccataat 27360

tagcccccaa aaactgcatg ctggaataag ctctctttgt gtctccggtg atgccttcca 27420

ataggtgagt gacaaagcga ggtagctctt ttttaatcat tgcagtaatg gaaaagtcct 27480

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gcatggttag tagagatgag agtctgaaaa acagaaagca tgcactaaac cagagtggcc 27600

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cggacataca aaaatcggtc cgtgtggtta aagagcagta cagtgagctc ctgtcttcta 27720

ccggcaaaga tcacatcgga ctgggttagt atgccactgg tatggtagtc attcaaggcc 27780

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accccatgcg gaggaatgtg gaaagattcg gggcaaaaga aattatatct attgctagac 27900

ccttcctgga cgggagcaat ccctccaggg ctatctatga aagcatacag agattcagcc 27960

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atattaactt ttgtttactt tgtggggtat attattgatg atg 28423

<210> 2

<211> 2880

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

tatttaaacc agtcgagccc gtcaagaggc cactcttgag tgccagcgag tagagatttc 60

tctgagctcc gctcccagag tctgagaaaa tgagacatct gcgcctcctg tcttcaactg 120

tgcctattga catggccgca ttattgctgg aggactatgt gagtacaata ttggaggacg 180

atctgcatcc atctccgttc gagctgggac ccacacttca ggacctatat gatctggagg 240

tagatgccca ggaggacgac ccgaacgaag aggctgtgaa tttaatattt ccagaatcta 300

tgattcttca ggctgatata gccagcgaag ctgtacctac tccacttcat acaccgactc 360

tgtcacccat acctgaattg gaagaggagg acgaactaga cctccggtgt tatgaggaag 420

gttttcctcc cagcgattca gaggacgaac ggggtgagca gagtatggct ataatctcag 480

actatgcttg tgtggttgtg gaagagcatt ttgtgttgga caatcctgag gtgccagggc 540

aaggatgtag atcctgccaa tatcaccggg atcagaccgg aaacccaaat gcttcctgcg 600

ctctgtgtta catgaaaatg agcttcagct ttatttacag taagtggagt gaatgtgaga 660

gaggctgagt gcttaacaca taactgggtg atgcttgaac agctgtgcta agtgtggttt 720

atttttgttt ctaggtccgg tgtcagagga tgagtcatca ccctcagaag aagaccaccc 780

gtgtccccct gagctgtcag gcgaaacgcc cctgcaagtg cacagaccca ccccagtcag 840

acccagtggc gagaggcgag cagctgttga aaaaattgag gacttgttac atgacatggg 900

tggggatgaa cctttggacc tgagcttgaa acgccccagg aactaggcgc agctgcgctt 960

agtcatgtgt aaataaagtt gtacaataaa agtatatgtg acgcatgcaa ggtgtggttt 1020

atgactcatg ggcggggctt agtcctatat aagtggcaac acctgggcac ttgggcacag 1080

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cggcttgtag aggatagttc agacgggtgc tccgggttct ggagacactg gtttggaact 1200

cctctatctc gcctggtgta cacagttaag aaggattata aagaggaatt tgaaaatctt 1260

tttgctgact gctctggcct gctagattct ctgaatcttg gccaccagtc ccttttccag 1320

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tttgtggttt ttctggttga caaatggagc caggacaccc aactgagcag gggctacatc 1440

ctggacttcg cagccatgca cctgtggagg gcctggatca ggcagcgggg acagagaatc 1500

ttgaactact ggcttctaca gccagcagct ccgggtcttc ttcgtctaca cagacaaaca 1560

tccatgttgg aggaagaaat gaggcaggcc atggacgaga acccgaggag cggcctggac 1620

cctccgtcgg aagaggagct ggattgaatc aggtagccag cctgtaccca gagcttagca 1680

aggtgctgac aaccatggcc aggggagtga agagggagag gagcgatggg ggcaataccg 1740

ggatgatgac cgagctgact gccagcctga tgaatcgcaa gcgcccagag cgtattacct 1800

ggcacgagct gcagcaggag tgcagggatg agataggcct gatgcaggat aaatatggcc 1860

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tgatcttcat gaacatgaag ttcaatggag agaagtttaa tggggtgctg ttcatggcca 2160

acagccacat gaccctgcat ggttgcagct tcttcggttt caacaacatg tgcgccgagg 2220

tctggggcgc tgctaagatc aggggatgta agttttatgg ctgctggatg ggagtggtcg 2280

gaagacccaa gagcgagatg tctgtgaagc agtgtgtgtt tgagaaatgc tacctgggag 2340

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ccaagctgct gttggagaac gatgccttct ccagggtgaa cctgaacggc atctttgaca 2700

tggatgtctc ggtgtacaag atcctgagat acgatgagac caggtccagg gtgcgcgctt 2760

gcgagtgcgg gggcagacac accaggatgc agccagtggc cctggatgtg accgaggagc 2820

tgagaccaga ccacctggtg atggcctgta ccgggaccga gttcagctcc agtggggagg 2880

<210> 3

<211> 4060

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

cgacggtgtt ttaatcccca acaacctcac cagtggactt acttacagta ccagaaaaac 60

taagctcgtc ctccacaaac cttttgtaga gggaacctac cagtgccgac acggaccttg 120

tgttcacaca ttccacttgg tgaaccttac cagcagcagc acagttgctc ctgaaacaac 180

taacctttct tctgatacta acaaacctcg tgtcggaggt gagctttggg ttccatctct 240

aacagagggt gggagttcta ttgaagtggt tgggtatttg attttagggg tggtattggg 300

cgggtgcata gcggtgctgt atcaacttcc ttgctgggtc gaaatcaggg tatttatctg 360

ctgggtcaga cattgtgggg aggaaccatg aaggggctct tgctgattat cctttccctg 420

gtggggggtg tactgtcatg ccacgaacag ccacgatgta acatcaccac aggcaatgag 480

agaagcgaat gctctgtagt tatcaaatgt gagcacaaat gttctctcaa catcacattc 540

aagaataaga ccatgggaaa tgtatgggtg ggattctggc aaccaggaga tgagcagaac 600

tacacggtca ctgtccatgg tagcgatggc aatcacactt tcggtttcaa attcattttt 660

gaagtcatgt gtgatatcac actgcatgtg gctagacttc atggcttgtg gccccctacc 720

aaggagaaca tggttgggtt ttctttggct tttgtgatca tggcctgcct gatgtcaggt 780

ctgctggtag gggctttagt gtggtttctg aagcgcaagc ccaggtatgg aaatgaggag 840

aaggaaaaat tgctataaat tctttttctc ttcgcagcac catgaatact ttgaccagtg 900

tcgtgctgct ctctctttta gtcattaatg tggaatgtgc cgatcctatt atagttaatg 960

tagattgggg aaaaaatcta acattagagg gacctaaaga aacaccagtt gaatggtggg 1020

gtggaagaaa cattcagcaa ctgtgcatag ggaatcaaac caaacataaa gagctaagtc 1080

acagatgtaa tatccagaac ataactttac tgtttgtaaa tactagtttt aatggagact 1140

actttggctt taaaaatgat aacagcggta tgaaacatta taaagttaca gttatacccc 1200

ctaaaccagc cactcggaaa cctctctctc caccacacta tgtaaacgca actatggggc 1260

aaaacttaac attagtggga cctgcaaaca ttccagttac ttggcttagt gaatatggca 1320

cattgtgtga gggtaaaaaa attttgcata aagaattgaa tcacacctgt aacgaacaga 1380

acctcacgtt gctatttgtt aatatgacac acaacgggcc atattttggt tttgacaaat 1440

acaatgttga cagagagcag tatgaggttt ctataattag tttattcaaa gtaggggcgg 1500

gtcaaaaaaa aatagacaaa ggacaaagga cagaagagaa aacaaaattc aactcaggtg 1560

atttgggtag aaaacaatct agacctaaga aaaaagacat tgttgatgag gttcaagtta 1620

aatcaggcaa taatcaaact cttattggac cacctggaaa aaatgttgat tggattaagc 1680

tttccagcgg aagcgatgct gttgtaacac tgtgtaaagg tgacacttgg ataaaacact 1740

catgcaatgg accaaatgta actttgatta atgtcacaaa accatacgaa ggaagctatt 1800

atggctccag cgatgatggt tcaagtcatt acaaagttac tgtctatgat ttatataaag 1860

caagtaaaac caagtctaat gtcagacctt acaccacaaa gggcactaca gcaaatgcaa 1920

cagatggcaa tggtctcaaa aatgctttgc aacaggaaaa tgggcaaaca gaaaatgatc 1980

aaaaatcaaa aattccatca actactgtgg caatcgtggt gggagtgatt gcgggcttcg 2040

taactctgat cattgtcttt atctgctaca tctgctgccg caagcgtccc aggtcataca 2100

atcatatggt agacccacta ctcagcttct cttactgaaa ctcagtcact ctcatttcag 2160

aaccatgaag gctttcacag cttgcgttct gattagccta gtcacactta gtttagctgc 2220

ttacactcaa gttagtgttc ataggggagg taatattaca ttagatggac cattaaaaaa 2280

taccacatgg ttaaggtttc atttaaataa ttggcatcac atttgtactt ggtctggtat 2340

ttcatacaaa tgtcatgaaa atggaagtat ttcaattttt gcttataaca ttacatctgg 2400

aatctataaa gccgaaggat accaaagaga aactagaact tcatatttta aaaatgaaag 2460

aaatacattt gaagatagtg gaaactatga aacacataaa atacttttat tcaatctaac 2520

aataattgaa ccaccaacta ctaaagcacc cactaccact aaaccaacca cagttaggac 2580

aactagggaa acaaccacac agcctaccac agccagtaca actgttgaga ccactactca 2640

cactacacag ctagacacta cagtacataa tagtactgtg atgataaggt ttttgttaag 2700

ggaggaaagt actactgaac agacagaggc tacctcaagt gccttcagca gcactgcaaa 2760

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<210> 4

<211> 1115

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

tacacagtcc tttctccccg gctggcctta aaaagcatca tatcatgggt aacagacata 60

ttcttaggtg ttatattcca cacggtttcc tgtcgagcca aacgctcatc agtgatatta 120

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tcacttaaat cagcacagta actgcagcac agcaccacaa tattgttcaa aatcccacag 480

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cacaagcgca ggtagattaa gtggcgaccc ctcataaaca cgctggacat aaacattacc 600

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agggaaccgg gactggaaca atgacagtgg agagcccagg actcgtaacc atggatcatc 780

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attacaagct cctcccgcgt tagaaccata tcccagggaa caacccattc ctgaatcagc 900

gtaaatccca cactgcaggg aagacctcgc acgtaactca cgttgtgcat tgtcaaagtg 960

ttacattcgg gcagcagcgg atgatcctcc agtatggtag cgcgggtttc tgtctcaaaa 1020

ggaggtagac gatccctact gtacggagtg cgccgagaca accgagatcg tgttggtcgt 1080

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<210> 5

<211> 1133

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

aattctctca gcacgggtgg ccttaaatag gggaatgttc tgattagtgc gggaactgaa 60

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gaatgagaag aacgcacaga ttcatactcg gaaaacagga tgggtctgtg cctctccatc 240

agcgccctca acagtctctg ccgccggggc tcggtgcggc tgctgcagat gggatcggga 300

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atgttattca gcagcccata attcagggtg ctccagccaa agctcatgtt ggggatgatg 480

gaacccacgt gaccatcgta ccagatgcgg cagtatatca ggtgcctgcc cctcataaac 540

acactgccca tatacattat ctctttgggc atgtttctgt tcacaatctg ccggtaccag 600

gggaagcgct ggttgaacat gcacccgtaa atgactctcc tgaaccacac ggccagcagg 660

gtgcctcccg cccgacactg cagggagccc ggggatgaac agtggcaatg caggatccag 720

cgctcgtacc cgctcaccat ctgagctctc accaagtcca gggtagctgg gcacaggcac 780

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actggaaact cttggagcag ggtaaagcca gcagcacatg gtaatccacg gacagaactt 900

acattatgat aatctgcatg atcacaatcg ggcaacaggg gatgttgttc agtcagtgaa 960

gccctggtct cctcatcaga tcgtggtaaa cgggccctgc gatatggatg atggcggagc 1020

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<210> 6

<211> 165

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

cgctacgtac gatatcattt ccccgaaagt gccacctgac cgtaactata acggtcctaa 60

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tatgggtctg cattaatgaa tcggtcagat atcgacatat gctgc 165

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

gggtttaaac ccgcgatcgc gcatcatcaa taatataccc cac 43

<210> 8

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

ccctgtggat cagctgatct gt 22

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<212> DNA

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<400> 9

atcagctgat ccacagggcg ctacgtacga tatcattt 38

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 10

ggatttaaat cctctagagg actagtgcag catatgtcga tatctga 47

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 11

actagtcctc tagaggattt aaatcccctc cccatgaact aatgttgatt aaaa 54

<210> 12

<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 12

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<210> 13

<211> 28

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 13

tacacagtcc tttctccccg gctggcct 28

<210> 14

<211> 27

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 14

atgactacgt ccggcgttcc atttggc 27

<210> 15

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 15

atggaacgcc ggacgtagtc atttcgctgc tgccgctcag tcatccaa 48

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<211> 45

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 16

ggttaattaa ccgcgatcgc catcatcaat aatatacccc acaaa 45

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 17

aattgaattc actagtgagg taggttttga gtagtg 36

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<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 18

ctagatttaa atgcatcgcc cgggcggcgc gcatggc 37

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 19

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<211> 37

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 20

ctagatttaa ataacaccgt cgtcgtcacg ggtattg 37

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<211> 720

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 21

atggtgagca agggcgagga gctgttcacc ggggtggtgc ccatcctggt cgagctggac 60

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ggcatcaagg tgaacttcaa gatccgccac aacatcgagg acggcagcgt gcagctcgcc 540

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tacctgagca cccagtccgc cctgagcaaa gaccccaacg agaagcgcga tcacatggtc 660

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<210> 22

<211> 2001

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 22

cgtgggagtg catactatat gtacttggac agaaacgatg ctggggaggc catatctttt 60

ccaaccacat tggggatgaa taagtgttat atacagatca tggatcttgg acacatgtgt 120

gatgccacca tgagctatga atgccctatg ctggatgagg gggtggaacc agatgacgtc 180

gattgttggt gcaacacgac gtcaacttgg gttgtgtacg gaacctgcca tcacaaaaaa 240

ggtgaagcac ggagatctag aagagctgtg acgctcccct cccattccac taggaagctg 300

caaacgcggt cgcaaacttg gttggaatca agagaataca caaagcactt gattagagtc 360

gaaaattgga tattcaggaa ccctggcttc gcgttagcag cagctgccat cgcttggctt 420

ttgggaagct caacgagcca aaaagtcata tacttggtca tgatactgct gattgccccg 480

gcatacagca tcaggtgcat aggagtcagc aatagggact ttgtggaagg tatgtcaggt 540

gggacttggg ttgatgttgt cttggaacat ggaggttgtg tcaccgtaat ggcacaggac 600

aaaccgactg tcgacataga gctggttaca acaacagtca gcaacatggc ggaggtaaga 660

tcctactgct atgaggcatc aatatcggac atggcttcgg acagccgctg cccaacacaa 720

ggtgaagcct accttgacaa gcaatcagac actcaatatg tctgcaaaag aacgttagtg 780

gacagaggct ggggaaatgg atgtggactt tttggcaaag ggagcctggt gacatgcgct 840

aagtttgcat gctccaagaa aatgaccggg aagagcatcc agccagagaa tctggagtac 900

cggataatgc tgtcagttca tggctcccag cacagtggga tgatcgttaa tgacacagga 960

catgaaactg atgagaatag agcgaaggtt gagataacgc ccaattcacc aagagccgaa 1020

gccaccctgg ggggttttgg aagcctagga cttgattgtg aaccgaggac aggccttgac 1080

ttttcagatt tgtattactt gactatgaat aacaagcact ggttggttca caaggagtgg 1140

ttccacgaca ttccattacc ttggcacgct ggggcagaca ccggaactcc acactggaac 1200

aacaaagaag cactggtaga gttcaaggac gcacatgcca aaaggcaaac tgtcgtggtt 1260

ctagggagtc aagaaggagc agttcacacg gcccttgctg gagctctgga ggctgagatg 1320

gatggtgcaa agggaaggct gtcctctggc cacttgaaat gtcgcctgaa aatggataaa 1380

cttagattga agggcgtgtc atactccttg tgtaccgcag cgttcacatt caccaagatc 1440

ccggctgaaa cactgcacgg gacagtcaca gtggaggtac agtacgcagg gacagatgga 1500

ccttgcaagg ttccagctca gatggcggtg gacatgcaaa ctctgacccc agttgggagg 1560

ctgataaccg ctaaccccgt aatcactgaa agcactgaga actccaagat gatgctggaa 1620

cttgatccac catttgggga ctcttacatt gtcataggag tcggggagaa gaagatcacc 1680

caccactggc acaggagtgg cagcaccatt ggaaaagcat ttgaagccac tgtgagaggt 1740

gccaggagaa tggcagtctt gggagacaca gcctgggact ttggatcagt tggaggcgct 1800

ctcaactcat tgggcaaggg catccatcaa atttttggag cagctttcaa atcattgttt 1860

ggaggaatgt cctggttctc acaaattctc attggaacgt tgctgatgtg gttgggtctg 1920

aacacaaaga atggatctat ttcccttatg tgcttggcct tagggggagt gttgatcttc 1980

ttatccacag ccgtctctgc t 2001