一种罗汉果甜苷v的制备方法
阅读说明：本技术 一种罗汉果甜苷v的制备方法 (Preparation method of mogroside V ) 是由 何安乐 黄华学 熊瑶 刘庚贵 黄�俊 于 2021-08-06 设计创作，主要内容包括：本发明涉及植物提取技术领域,公开了一种罗汉果甜苷V的制备方法。本发明所述制备方法克服现有传统的工艺技术,从减少树脂层析次数、优化层析工艺及二次纯化解吸液等入手,创新性的采用亚临界溶剂清洗除杂、解吸粗品高温固杂及粗品亚临界溶剂二次纯化工艺进行提取分离和纯化,在只需要一次树脂层析的前提下,可同时制得两种规格的高含量罗汉果甜苷V产品,其含量分别≥72％和≥95％,总收率92％以上。且工艺对环境友好、工艺简单,适用于规模化生产。(The invention relates to the technical field of plant extraction, and discloses a preparation method of mogroside V. The preparation method provided by the invention overcomes the defects of the existing traditional process technology, starts with reduction of resin chromatography times, optimization of chromatography process, secondary purification of desorption solution and the like, innovatively adopts subcritical solvent cleaning and impurity removal, desorption of crude product high-temperature solid impurity and secondary purification process of crude product subcritical solvent for extraction, separation and purification, and can simultaneously prepare two specifications of high-content mogroside V products with the contents respectively more than or equal to 72% and more than or equal to 95% and the total yield more than 92% on the premise of only needing one resin chromatography. And the process is environment-friendly, simple and suitable for large-scale production.)
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，具体的说是涉及一种罗汉果甜苷V的制备方法。
背景技术
罗汉果，别名拉江果、假苦瓜，植物学名“光果木鳖”，是一年种多年收的葫芦科植物罗汉果的果实。罗汉果为中国特有的经济、药用植物，有300多年的应用历史，分布于广西、湖南、广东、海南、贵州等热点、亚热带山区，由于对树脂环境条件的特殊要求，其主产区分布在广西桂林永福县、临桂县和融安县。自1977年版《中国药典》起作为常用中药收载，具有清热润肺，滑肠通便的功效，主治肺热或肺燥咳嗽，百日咳，痰火咳嗽，血燥便秘等症；此外罗汉果还是一种极好的清凉饮料，既可提神生津，又可预防呼吸道感染，常年服用，能延年益寿，被誉为“东方神果”和“长寿之果”。
罗汉果甜苷是罗汉果独有的，研究最多的化学成分，其中又以罗汉果甜苷V含量最高，其甜度是蔗糖的300倍左右，且热量接近于0，是罗汉果的主要甜味物质，是一种优良的天然甜味剂，现在不同含量的罗汉果甜苷产品目前已经实现了规模化生产，且主要是以甜苷V的含量为衡量标准。
CN107602653公开了一种从鲜罗汉果中提取罗汉果甜苷的方法，具体为鲜果破壳浸提、大孔吸附树脂吸附、解吸、树脂脱色、浓缩干燥，即得。该方法设计到大孔吸附树脂吸附和大孔树脂脱色两次层析过程，操作较为麻烦，生产效率较低，且脱色工艺过程中对树脂的活化需要大量的酸和碱，环境不友好，制得产品含量最高为90.7％，含量较低。
CN111333691公开了一种罗汉果甜苷V的制备方法，具体为鲜果干燥、乙醇浸提、活性炭脱色、大孔吸附树脂层析、乙醇解吸、浓缩干燥、超滤除杂、聚酰胺柱洗脱、浓缩干燥即得98％以上的甜苷V产品。该工艺涉及到两次柱层析，且前后进行了3次的干燥处理，操作较繁琐，生产成本相对较高。
CN107629105公开了一种风味罗汉果甜苷V的提纯方法，具体为聚酰胺吸附、流出液调碱、超滤、阴阳离子交换树脂脱色、浓缩干燥后即得。该工艺涉及到阴阳离子交换树脂的活化过程，会使用到大量的酸和碱，环境极不友好。且制得产品含量不超过60％。
CN103923152A公开了一种罗汉果甙V的提取方法，该方法以罗汉果鲜果为原料，经清洗、破碎、糖化、水提取和浓缩、沉降离心、多柱大孔吸附树脂分段解析、离子交换、浓缩、硅胶精制、浓缩喷雾等步骤获得最终产品罗汉果甙V提取物。但是，该方法冗繁复杂、周期长、成本高，不适用于工业化生产。
CN108276465公开了一种以亚临界水解吸附技术分离纯化罗汉果甜苷V的方法，具体为罗汉果浸提、固液分离、膜过滤、大孔吸附树脂吸附、亚临界水解吸、浓缩干燥即得。该工艺制得产品含量最高不超过59.26％。
CN111978365公开了一种含罗汉果苷V的罗汉果甜苷制备方法，具体为原料粉碎、浸提、浓缩、稀释、树脂脱色、膜过滤、真空浓缩、干燥后即得罗汉果甜苷。该工艺涉及到阴阳离子交换树脂的活化过程，会使用到大量的酸和碱，环境极不友好，且制得产品含量不超过65％。
CN105218612公开了一种提高罗汉果甜苷职工罗汉果甜甙V纯度的方法，具体为罗汉果鲜果破碎、乙醇浸提、浓缩、酶解、膜过滤、树脂吸附、解吸、浓缩、膜过滤、树脂脱盐、树脂脱色、活性炭脱色、灭菌、干燥后即得。该工艺极为繁琐，不适合规模化生产。
CN104558088公开了一种从罗汉果中提取罗汉果苷V的方法，具体为微波逆流提取、多级过滤、大孔树脂分离、多级过滤、干燥后即得。该工艺涉及过多的过滤，操作极为繁琐，且膜过滤会导致收率降低。且制得产品罗汉果甜苷V的含量也在70％以下。
CN110669095公开了一种高纯度罗汉果苷V的提取方法，具体为冷冻、瞬时加热、浸提、澄清、C18制备柱纯化、浓缩、干燥即得。该工艺为制备型液相色谱，填柱料为C18，其价格极为昂贵，且生产量很小，不适宜规模化生产。
CN106432394公开了从罗汉果中提取罗汉果总苷的方法，具体为乙醇提取、大孔树脂吸附、乙醇解吸、再次大孔树脂吸附、浓缩、干燥后即得。该工艺未对罗汉果甜苷V的含量加以说明，未知其工艺优劣情况，
上述公开的专利中对罗汉果甜苷V的提取纯化方法基本上都采用将罗汉果进行水/醇进行浸提、然后固液分离、膜过滤、大孔树脂进行吸附、解吸、离子交换树脂或活性炭脱色、浓缩干燥后，即得高含量产品。其树脂层析是提高产品含量的关键性步骤，上述公开的专利为了获得高含量的罗汉果甜苷V产品，基本上都进行了两次、甚至三次的树脂层析，且有的层析为了脱盐和脱色使用了阴阳离子交换树脂，这就必然会由于阴阳离子交换树脂的活化过程使用到了酸和碱而导致对环境不友好，且这些污水处理难度大。如果只使用一次的树脂层析，则会出现制备的产品含量低，或者使用制备型色谱柱其生产量太小而不适用于规模化生产。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种罗汉果甜苷V的制备方法，使得所述制备工艺在一次树脂层析前提下获得较高罗汉果甜苷V含量的产品。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种罗汉果甜苷V的制备方法，包括：
步骤1、浸提罗汉果，浸提液过滤后，滤液作为上注液；
步骤2、上注液过层析柱进行层析吸附；
步骤3、对层析柱清洗除杂，然后以甲醇或乙醇为解吸溶剂进行线性连续解吸，以罗汉果甜苷V含量为70-80％为分界点，分段收集解吸液I和解吸液II；
步骤4、解吸液浓缩和干燥后进行高温烘烤，然后进行渗漏浸提，收集渗漏浸提液；
步骤5、渗漏浸提液膜过滤收集截留液，浓缩干燥后获得罗汉果甜苷V。
其中，步骤1中所述罗汉果优选为罗汉果鲜果或干果等，以其罗汉果干果为较佳，所述浸提为以水为浸提溶媒，通过罐式提取或者连续逆流提取方式提取。所述浸提罗汉果鲜果与水的料液质量比为1:3-6；罗汉果干果与水的料液质量比为1:15-30；浸提温度为80-100℃；浸提时间为2-4h。
作为优选，步骤1中，浸提后进行固液分离，以实现提取渣与提取液的分离为目的，包括卧螺离心、碟式离心中的任意一种或组合，更优先卧螺离心然后再碟式离心。
作为优选，步骤1中，所述过滤为超滤膜过滤，超滤膜截留分子量为5000-20000Da，更优选8000-15000Da。
步骤2中，所述层析柱为填充大孔吸附树脂的密闭耐高压层析柱。所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB-8、LX-T28、LX-T5、LXD-762、LX-94中的任意一种。层析柱的装柱方式为：将活化好的大孔吸附树脂装入柱内，并注入纯水至树脂以上，然后两端密闭，进行抽真空处理，保持真空度为(-0.06MPa)-(-0.09MPa)，保持20-30min后，恢复常压。
此外，步骤2中所述上柱液上柱前进行脱气处理。所述的脱气方法为抽真空处理或者超声波处理。所述的抽真空处理为保持真空度为(-0.06MPa)-(-0.09MPa)，保持20-30min；所述的超声波处理为30-50KHZ、100-300W，保持5-10min。
作为优选，所述的层析柱高径比为1:3-8，上柱流速为0.5-1.0BV/h；上柱流出液有甜感时即为泄漏点，上柱结束。
作为优选，步骤3中所述清洗除杂采用亚临界状态的酸性水溶液进行除杂洗柱，pH值为2-4。为了减少除杂后除酸步骤，进一步优选挥发性酸水溶液，如盐酸；如果使用硫酸、柠檬酸、醋酸、苹果酸等非挥发性酸，则除杂后需要额外进行中性水洗柱。其中的所述亚临界状态为压力为5-10MPa、温度为110-140℃。所述的洗柱流速为2-3BV/h，洗柱体积为4-5BV。
作为优选，步骤3中甲醇或乙醇的体积百分比浓度范围为0-65％，用从体积分数为0-65％的甲醇或乙醇水溶液进行线性解吸，即从0线性匀速逐步提高至65％。所述的解吸流速优选为0.5-1.5BV/h，解吸溶剂体积优选为10-20BV。
步骤3中分段收集，即解吸液中罗汉果甜苷V(干基)含量低于70％或低于80％的部分合并收集，得到解吸液Ⅰ；不低于70％或不低于-80％的部分合并收集，得到解吸液II。在收集过程中，采用小段收集检测确定分界点，例如流出液每1L单独收集1瓶，并逐一进行含量检测。
作为优选，步骤4中，所述的浓缩是以除去部分水和甲醇/乙醇为目的，浓缩至可溶性固形物45-65％。浓缩方式为旋转蒸发式浓缩、降膜式浓缩、单效蒸发式浓缩、多效蒸发式浓缩中的任意一种。干燥为除去余下水分为目的，具体方法为真空干燥、真空微波干燥中的任意一种。干燥后还优选包括粉碎过筛处理，过60-120目
作为优选，步骤4中，高温烘烤为将经过浓缩干燥后的粗品进行高温处理，所述的高温为将粗品恒温150-200℃，保持20-40min。在本发明
具体实施方式
中，所述高温可选择为150℃、160℃、170℃、180℃或200℃，所述保持时间为20min、30min或40min。
作为优选，步骤4中，所述渗漏浸提为将高温烘烤后的粗品装柱，柱的高径比为1:5-10，渗漏浸提溶剂进柱方式为柱底端进入，所述溶剂的使用量为粗品质量的20-40倍，渗漏流速为0.5-1.0BV/h；所述渗漏浸提以亚临界状态的水为溶剂浸提，所述亚临界状态为压力为10-15MPa、温度为140-200℃，在本发明具体实施方式中，所述压力可以是10MPa、11MPa、12MPa、13MPa、14MPa或15MPa，所述温度为140℃、150℃、160℃、170℃、180℃、190℃或200℃。
作为优选，步骤5中，膜过滤为纳滤膜过滤，纳滤膜的截留分子量优选为200-800Da，在本发明具体实施方式中所述截留分子量为500Da。
作为优选，步骤5中，所述的浓缩为以除去洗脱液中的水分为目的，包括但不限于真空浓缩和膜浓缩，浓缩至可溶性固形物为40-60％；所述的干燥为以除去水分为目的，包括但不限于真空干燥、微波干燥、带式干燥、鼓风干燥中的一种。所述的干燥后还优选包括粉碎过筛处理，过100-200目。
本发明克服现有传统的工艺技术，从减少树脂层析次数、优化层析工艺及二次纯化解吸液等入手，创新性的采用亚临界溶剂清洗除杂、解吸粗品高温固杂及粗品亚临界溶剂二次纯化工艺进行提取分离和纯化，在只需要一次树脂层析的前提下，可同时制得两种规格的高含量罗汉果甜苷V产品，其含量分别≥72％和≥95％，总收率92％以上。且工艺对环境友好、工艺简单，适用于规模化生产。
具体实施方式
本发明实施例公开了一种罗汉果甜苷V的制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明内。本发明所述制备方法已通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述制备方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明实施所使用的罗汉果原料可购自湖南华诚生物资源股份有限公司，本发明实施例所使用的原料或化学试剂，如无特殊说明，均通过常规商业途径获得。
对本发明采用的测试方法说明如下：
依据GB188677-2016《食品安全国家标准食品添加剂罗汉果甜苷》规定方法对罗汉果甜苷V进行测定。
涉及到对比实验，各组除去应有的区别外，其余实验环境各组保持一致，使结果具有可比性。
以下就本发明所提供的一种罗汉果甜苷V的制备方法做进一步说明。
实施例1：本发明示例性制备方法
(1)上柱液的制备：将50kg鲜罗汉果加入5倍、90℃的热水、分三次浸提，过滤并卧螺离心固液分离后，合并收集浸提液，然后过截留分子量为20000Da的超滤膜，收集透过液，得到267kg上柱液。
(2)层析吸附：将乙醇活化好的5L的D101型大孔吸附树脂装柱，层析柱高径比为1:4，抽真空至-0.06MPa并保持20min后，恢复常压。接着将真空脱气的上柱液以0.6BV/h的流速进行上柱，至流出液出现甜感即停止上柱；
(3)洗柱与解吸：先用处于亚临界状态的盐酸水溶液(即层析柱内的压力为5MPa、温度为140℃，pH值为4)，以流速为2BV/h，洗柱体积为5BV进行洗柱；然后用10BV、体积分数为0-65％乙醇水溶液进行连续性线性洗脱，分别收集含量低于70％的解吸液Ⅰ和不低于70％的解吸液Ⅱ。
(4)浓缩与干燥：将收集的解吸液分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为50.2％和53.8％，并进行微波干燥和粉碎后，分别得到43.2g粗品Ⅰ和131.4g粗品Ⅱ；
(5)柱浸提：分别单独将得到的粗品Ⅰ和粗品Ⅱ置于160℃条件下恒温烘烤30min后，将其装柱层析柱内，径高比为1:7，然后用温度为200℃，压力为10MPa的亚临界水溶液进行渗漏浸提，亚临界水的体积分别为1.5L和4L，渗漏流速为0.5BV/h，分别收集渗漏浸提液，得到渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ。
(6)膜过滤：将得到的渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ分别过500Da纳滤膜，分别收集截留液Ⅰ和截留液Ⅱ；
(7)浓缩干燥：将收集的截留液Ⅰ和截留液Ⅱ分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为48.2％和50.1％，并进行微波干燥和粉碎过筛后，即得不同含量的罗汉果甜苷V产品。
结称量与检测，分别得到两种不同规格的罗汉果甜苷V，其重量和含量分别为：产品Ⅰ：28.6g、78.3％；产品Ⅱ：96.4g、98.3％。合计总收率为93.21％。
实施例2：本发明示例性制备方法
(1)上柱液的制备：将50kg鲜罗汉果加入5倍、90℃的热水、分三次浸提，过滤并卧螺离心固液分离后，合并收集浸提液，然后过截留分子量为8000Da的超滤膜，收集透过液，得到267kg上柱液。
(2)层析吸附：将乙醇活化好的5L的AB-8型大孔吸附树脂装柱，层析柱高径比为1:4，抽真空至-0.06MPa并保持20min后，恢复常压。接着将真空脱气的上柱液以0.6BV/h的流速进行上柱，至流出液出现甜感即停止上柱；
(3)洗柱与解吸：先用处于亚临界状态的盐酸水溶液(即层析柱内的压力为5MPa、温度为140℃，pH值为2)，以流速为2BV/h，洗柱体积为5BV进行洗柱；然后用10BV、体积分数为0-65％乙醇水溶液进行连续性线性洗脱，分别收集含量低于70％的解吸液Ⅰ和不低于70％的解吸液Ⅱ。
(4)浓缩与干燥：将收集的解吸液分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为49.4％和51.3％，并进行微波干燥和粉碎后，分别得到40.2g粗品Ⅰ和130.2g粗品Ⅱ；
(5)柱浸提：分别单独将得到的粗品Ⅰ和粗品Ⅱ置于160℃条件下恒温烘烤30min后，将其装柱层析柱内，径高比为1:7，然后用温度为200℃，压力为10MPa的亚临界水溶液进行渗漏浸提，亚临界水的体积分别为1.5L和4L，渗漏流速为0.5BV/h，分别收集渗漏浸提液，得到渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ。
(6)膜过滤：将得到的渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ分别过500Da纳滤膜，分别收集截留液Ⅰ和截留液Ⅱ；
(7)浓缩干燥：将收集的截留液Ⅰ和截留液Ⅱ分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为50.1％和53.8％，并进行微波干燥和粉碎过筛后，即得不同含量的罗汉果甜苷V产品。
结称量与检测，分别得到两种不同规格的罗汉果甜苷V，其重量和含量分别为：产品Ⅰ：30.2g、72.1％；产品Ⅱ：98.8g、96.7％。合计总收率为93.33％。
实施例3：本发明示例性制备方法
(1)上柱液的制备：将50kg鲜罗汉果加入5倍、90℃的热水、分三次浸提，过滤并卧螺离心固液分离后，合并收集浸提液，然后过截留分子量为10000Da的超滤膜，收集透过液，得到267kg上柱液。
(2)层析吸附：将乙醇活化好的5L的D101型大孔吸附树脂装柱，层析柱高径比为1:4，抽真空至-0.06MPa并保持20min后，恢复常压。接着将真空脱气的上柱液以0.6BV/h的流速进行上柱，至流出液出现甜感即停止上柱；
(3)洗柱与解吸：先用处于亚临界状态的盐酸水溶液(即层析柱内的压力为5MPa、温度为110℃，pH值为2)，以流速为2BV/h，洗柱体积为5BV进行洗柱；然后用10BV、体积分数为0-65％乙醇水溶液进行连续性线性洗脱，分别收集含量低于70％的解吸液Ⅰ和不低于70％的解吸液Ⅱ。
(4)浓缩与干燥：将收集的解吸液分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为53.6％和56.1％，并进行微波干燥和粉碎后，分别得到42.1g粗品Ⅰ和133.1g粗品Ⅱ；
(5)柱浸提：分别单独将得到的粗品Ⅰ和粗品Ⅱ置于160℃条件下恒温烘烤30min后，将其装柱层析柱内，径高比为1:7，然后用温度为200℃，压力为10MPa的亚临界水溶液进行渗漏浸提，亚临界水的体积分别为1.5L和4L，渗漏流速为0.5BV/h，分别收集渗漏浸提液，得到渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ。
(6)膜过滤：将得到的渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ分别过500Da纳滤膜，分别收集截留液Ⅰ和截留液Ⅱ；
(7)浓缩干燥：将收集的截留液Ⅰ和截留液Ⅱ分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为50.2％和54.2％，并进行微波干燥和粉碎过筛后，即得不同含量的罗汉果甜苷V产品。
结称量与检测，分别得到两种不同规格的罗汉果甜苷V，其重量和含量分别为：产品Ⅰ：28.3g、79.1％；产品Ⅱ：98.8g、97.6％。合计总收率为94.5％。
实施例4：本发明示例性制备方法
(1)上柱液的制备：将50kg鲜罗汉果加入5倍、90℃的热水、分三次浸提，过滤并卧螺离心固液分离后，合并收集浸提液，然后过截留分子量为15000Da的超滤膜，收集透过液，得到267kg上柱液。
(2)层析吸附：将乙醇活化好的5L的D101型大孔吸附树脂装柱，层析柱高径比为1:4，抽真空至-0.06MPa并保持20min后，恢复常压。接着将真空脱气的上柱液以0.6BV/h的流速进行上柱，至流出液出现甜感即停止上柱；
(3)洗柱与解吸：先用处于亚临界状态的盐酸水溶液(即层析柱内的压力为5MPa、温度为140℃，pH值为4)，以流速为2BV/h，洗柱体积为5BV进行洗柱；然后用10BV、体积分数为0-65％乙醇水溶液进行连续性线性洗脱，分别收集含量低于70％的解吸液Ⅰ和不低于70％的解吸液Ⅱ。
(4)浓缩与干燥：将收集的解吸液分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为54.2％和53.2％，并进行微波干燥和粉碎后，分别得到42.8g粗品Ⅰ和133.2g粗品Ⅱ；
(5)柱浸提：分别单独将得到的粗品Ⅰ和粗品Ⅱ置于200℃条件下恒温烘烤30min后，将其装柱层析柱内，径高比为1:7，然后用温度为140℃，压力为15MPa的亚临界水溶液进行渗漏浸提，亚临界水的体积分别为1.5L和4L，渗漏流速为0.5BV/h，分别收集渗漏浸提液，得到渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ。
(6)膜过滤：将得到的渗漏浸提液Ⅰ和渗漏浸提液Ⅱ分别过500Da纳滤膜，分别收集截留液I和截留液II；
(7)浓缩干燥：将收集的截留液Ⅰ和截留液Ⅱ分别进行单效真空浓缩器浓缩至可溶性固形物含量为52.9％和53.6％，并进行微波干燥和粉碎过筛后，即得不同含量的罗汉果甜苷V产品。
结称量与检测，分别得到两种不同规格的罗汉果甜苷V，其重量和含量分别为：产品Ⅰ：27.6g、80.2％；产品Ⅱ：95.9g、97.7％。合计总收率为92.16％。
实施例5：不同工艺之间的对比
针对本发明工艺中较为关键的影响因素进行针对性的设置对比工艺组：
(1)对照工艺1：实施例1基础上，步骤(3)中的清洗除杂，采用常规的水(非亚临界状态)；
(2)对照工艺2：实施例1基础上，步骤(2)上注液不进行脱气处理；
(3)对照工艺3：实施例1基础上，步骤(3)变更洗脱方式为梯度洗脱，梯度洗脱方式如下：依次用体积分数为30％和65％的乙醇溶解洗脱(流速为2BV/h，每个梯度的洗柱体积为5BV)。
(4)对照工艺4：实施例1基础上，步骤(4)粗品干燥后不进行高温烘烤，直接装柱并进行渗漏浸提；
(5)对照工艺5：实施例1基础上，步骤(5)在高温烘烤后装柱渗漏浸提时，改为常规的水(非亚临界状态)进行渗漏提取；
与实施例1按照相同方法检测并统计结果，见表1；
表1统计结果
由表1可以看出，对照工艺1在没有使用亚临界状态的酸性水溶液除杂的情形下，产品I和产品II的重量和含量都明显低于本发明实施例1工艺，对照工艺2上注液不脱气也会出现与对照工艺1相同的问题，且同时总收率会明显降低；对照工艺3在含量和总收率上与本发明是基本相当的，但是在重量上，其产品II的占比明显较低，而产品II代表的是高质量产品，在工业化生产中占比越高则越好，这一点是明显不如本发明工艺的；对照工艺4粗品不高温烘烤，其问题与对照工艺1相同；对照工艺5采用非亚临界状态的水渗漏提取，会使总收率下降5％左右。
以上所述只是用于理解本发明的方法及其核心思想，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利的保护范围。