全自动rh系统血型检测仪检测方法
阅读说明：本技术 全自动rh系统血型检测仪检测方法 (Detection method of full-automatic RH system blood type detector ) 是由 张志飞 常宗瑜 向川 沙俊宏 于 2021-06-28 设计创作，主要内容包括：本发明适用于血型检测技术领域,提供了一种全自动RH系统血型检测仪检测方法,包括如下步骤：将血液样本(EDTA抗凝全血)上机；上机后对红细胞悬液进行稀释,得到稀释液；再将稀释液加入微孔板中,微孔板中已经事先加入抗体,抗原抗体震荡混匀后离心,使抗原抗体充分凝集,再次震荡,最后拍照判读。借此,本发明能够实现血液的全自动检测,无需人工操作,检测时间短,效率高,且能够对阳性和弱阳性的血型进行精确的判读,避免由于检测不出弱阳性血型而耽误患者输血,造成患者无法救治的现象。(The invention is suitable for the technical field of blood type detection, and provides a detection method of a full-automatic RH system blood type detector, which comprises the following steps: processing a blood sample (EDTA anticoagulated whole blood) on a machine; diluting the erythrocyte suspension after the machine is operated to obtain a diluent; and adding the diluent into a microporous plate, adding the antibody into the microporous plate in advance, shaking and uniformly mixing the antigen and the antibody, centrifuging to ensure that the antigen and the antibody are fully agglutinated, shaking again, and finally photographing and interpreting. Therefore, the blood detection device can realize full-automatic detection of blood, does not need manual operation, has short detection time and high efficiency, can accurately judge the blood types of positive and weak positive, and avoids the phenomenon that the blood transfusion of a patient is delayed due to the fact that the blood type of the weak positive cannot be detected, so that the patient cannot be cured.)
技术领域
本发明涉及血型检测方法技术领域，尤其涉及一种全自动RH系统血型检测仪检测方法。
背景技术
血型是对血液的分类，通常是指红细胞的分型，其分型依据是红细胞膜上存在的一些可遗传的抗原物质。在人类的血型系统中，目前已经发现并为国际输血协会承认的血型系统有36种，包括ABO血型系统、Rh血型系统、MNS血型系统、P血型系统等，其中，以ABO血型系统和Rh血型系统最为常用。
现阶段，对于血型检测主要依靠工作人员人工检测，检测效率低，时间长，人工成本较高；ABO血型正定型及Rh血型检测都是基于红细胞抗原抗体的凝集反应原理，通过阴、阳性反应格局判读检测结果，阳性反应为出现红细胞凝集，反之，阴性反应为未出现红细胞凝集，检测方法主要步骤是：先将血液进行离心，分离出红细胞，再向红细胞中加入抗体，震荡使红细胞和抗体充分混合，等待红细胞和抗体凝集，根据凝集情况判断血型；此方法虽然较为常规，应用比较普遍，但是其只能检测出阳性血型，对于弱阳性血型却完全检测不出，如果病人处于危急状态，血型判断偏差将会直接影响病人的生命；另外，现有方法在检测血型过程中，一般耗时20min以上，时间较长，工作效率较低。
公开号为CN110146711A的专利中公开了一种全自动血型检验装置及其血型检验方法，该方法也是应用上述常规方法，检测结果的精度不高，检测时间较长。
综上可知，现有技术在实际使用上显然存在不便与缺陷，所以有必要加以改进。
发明内容
针对上述的缺陷，本发明的目的在于提供一种全自动RH系统血型检测仪检测方法，其能够实现血液的全自动检测，无需人工操作，检测时间短，效率高，且能够对阳性和弱阳性的血型进行精确的判读，避免由于检测不出弱阳性血型而耽误患者输血，造成患者无法救治的现象。
为了实现上述目的，本发明提供一种全自动RH系统血型检测仪检测方法，包括如下步骤：
步骤一血液样本上机
将步骤一中离心后的血液试管放置到血型检测仪的样本板上，通过血型检测仪的控制系统对血液试管上的二维码进行扫描，使每个血液试管上的患者信息录入系统。
步骤二微孔板中加入抗体
现将微孔板放置到震荡器上，再将RH分型抗体分别加入微孔板中。
步骤三血液样本稀释
通过血型检测仪的控制系统，向深孔板中滴加生理盐水；再移取所述血液试管中的红细胞悬液，将红细胞悬液加入到已经滴加生理盐水的所述深孔板中；通过生理盐水对红细胞悬液进行稀释，得到稀释液。
步骤四抗原抗体混合
将所述稀释液加入到已经滴加抗体的微孔板中，使所述稀释液与五种抗体分别混合；通过血型检测仪的控制系统控制震荡器工作，使所述稀释液和所述抗体混合均匀。
步骤五离心
将步骤四中经过震荡的微孔板，放入到血型检测仪的离心机中，对充分混合的抗原抗体进行离心。
步骤六震荡分散
将步骤五中经过离心的微孔板再次进行震荡，使弱阳性凝集块散开。
步骤七拍照判读
将步骤六中经过震荡的微孔板取出，然后进行拍照，通过照片中血液的凝集情况判断血液的血型。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，所述微孔板选用96孔板。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，所述微孔板中，每个孔的底部的形状均为平底、U型底或UV型底。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，所述微孔板中每个孔的容积为100-400ul。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，五种抗体在微孔板中的加入量分别为10-50ul。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，所述稀释液中，红细胞悬液的体积占比为2-4％。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，所述稀释液在所述微孔板中的加入量为10-50ul。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，震荡器的震荡时间为25-35s，振幅1-3mm，频率500-3000RPM。
根据本发明的全自动RH系统血型检测仪检测方法，离心过程中，所述离心机的相对离心力为250-500g，离心时间为0.8-1.5min。
本发明的目的在于提供一种全自动RH系统血型检测仪检测方法，在全自动血型检测仪上，先对抗原抗体的混合物进行震荡混合，能够提高抗原抗体的混合均匀度，抗原抗体混合均匀后，进行离心操作，通过离心力的作用，使阳性和弱阳性样本都发生凝集，再进行震荡，使弱阳性的凝集震散，而阳性凝集仍然聚集在一起，从而区分阳性与弱阳性的血液。综上所述，本发明能够实现血液的全自动检测，无需人工操作，检测时间短，效率高，且能够对阳性和弱阳性的血型进行精确的判读，避免由于检测不出弱阳性血型而耽误患者输血，造成患者无法救治的现象。
附图说明
图1是本发明检测流程示意图；
图2是本发明的拍照判读图片；
图3是本发明的血型检测仪结构示意图；
在图中，1-样本板，2-震荡器，3-微孔板，4-抗体，5-深孔板，6-离心机，7-离心机。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供了一种全自动RH系统血型检测仪检测方法，包括如下步骤：
步骤一 血液样本上机
将上述离心后的血液试管人工放置到血型检测仪的样本板1上，将样本板1人工推入血型检测仪中，通过血型检测仪的控制系统对血液试管上的二维码进行扫描，使每个血液试管上的患者信息录入系统。
步骤二 微孔板中加入抗体
通过血型检测仪的控制系统，现将微孔板3放置到震荡器2上，再将RH分型抗体4分别加入微孔板3中。微孔板3选用96孔板，微孔板3中每个孔的容积为100-400ul，微孔板中，每个孔的底部的形状均为平底、U型底或UV型底。五种抗体4在微孔板3中的加入量分别为10-50ul；每种抗体4添加18个孔，即五种抗体4总共占据90个孔。RH分型抗体4包括D，C，c，E，e五种类型。
步骤三 血液样本稀释
通过血型检测仪的控制系统，向深孔板5中滴加生理盐水；再通过血型检测仪的控制系统，移取血液试管中的红细胞悬液，将红细胞悬液加入到已经滴加生理盐水的深孔板5中；通过生理盐水对红细胞悬液进行稀释，得到稀释液。
稀释液中，红细胞悬液的体积占比为2-4％，如先向深孔板5中加入500ul生理盐水，再加入20ul红细胞悬液，吹打混匀。
步骤四 抗原抗体混合
通过血型检测仪的控制系统，将上述稀释液加入到已经滴加抗体4的微孔板3中，使稀释液与五种抗体4分别混合；通过血型检测仪的控制系统控制震荡器2工作，使稀释液和抗体4混合均匀，促进红细胞抗原与抗体4的凝集。稀释液在微孔板3中的加入量为10-50ul。震荡器的震荡时间为25-35s，振幅1-3mm，频率500-3000RPM。
步骤五 离心
通过血型检测仪的控制系统，将步骤四中经过震荡的微孔板3，放入到血型检测仪的离心机6中，对充分混合的抗原抗体4进行离心。通过离心作用，使发生凝集的抗原抗体4能够充分聚集，便于判断凝集效果，判断血型。离心过程中，离心机6的相对离心力为250-500g，离心时间为0.8-1.5min。
步骤六 震荡分散
将步骤五中经过离心的微孔板再次进行震荡，使弱阳性凝集块散开。由于阳性和弱阳性的凝集块在离心过程中均发生聚集，因此，只经过离心，并不能区分阳性和弱阳性；本发明在离心之后经过再次震荡，能够将弱阳性的凝集块震散，而阳性的凝集块则始终聚集，因此，通过再次震荡作用，能够区分阳性和弱阳性。
步骤七 判读
将步骤六中经过震荡的微孔板3取出，然后放置到离心机7处进行拍照，通过照片中血液的凝集情况判断血液的血型。本发明中根据微孔中的红细胞凝块大小判断凝集强度，对于呈现弱阳性的凝集现象，通过再震荡作用，能够使聚集到一起的凝集块散开。因此，本发明离心后再震荡的操作，能够使本发明的方法检测出阳性以及弱阳性的血型，检测结果精准。当RH血型的患者在遇到紧急状况时，如果阴性血型紧缺，也可以为患者输入少量的弱阳性血型，暂时保住患者的性命，为患者争取一定的时间，等待阴性血型。
参见图3，针对上述检测方法，本发明还提供一种全自动RH系统血型检测仪，包括样本板1，震荡器2，微孔板3，抗体4，深孔板5，离心机6和离心机7。
本发明以上述血型检测仪，采用上述方法进行检测，一般耗时为3-8min；检测时间较短，效率较高。
为了验证本发明的检测方法，本发明设置如下若干实施例，并对每个实施例中检测的血型图片进行统计，以验证本发明方法的检测精度。由于每个实施例的拍照判读过程均得到若干图片，因此，本发明只列出实施例1中的其中一组图片作为参考，参见图2。
实施例1
步骤一 血液样本预处理
步骤一 血液样本上机
步骤二 微孔板中加入抗体
现将微孔板3放置到震荡器2上，再将五种抗体4分别加入微孔板3中。微孔板3选用96孔板，微孔板3中每个孔的容积为120ul。五种抗体4在微孔板3中的加入量分别为13ul。
步骤三 血液样本稀释
向深孔板5中滴加生理盐水，再通过血型检测仪的控制系统，移取血液试管中的红细胞悬液，将红细胞悬液加入到已经滴加生理盐水的深孔板5中；通过生理盐水对红细胞悬液进行稀释，得到稀释液。
稀释液中，红细胞悬液的体积占比为2.4％。
步骤四 抗原抗体混合
将上述稀释液加入到已经滴加抗体4的微孔板3中，使稀释液与五种抗体4分别混合，稀释液在微孔板3中的加入量为25ul。通过血型检测仪的控制系统控制震荡器2工作，使稀释液和抗体4混合均匀，震荡器的震荡时间为26s，振幅1.5mm，频率679RPM。
步骤五 离心
将步骤四中经过震荡的微孔板3，放入到血型检测仪的离心机6中，对充分混合的抗原抗体4进行离心。离心过程中，离心机6的相对离心力为271g，离心时间为0.9min。
步骤六 震荡分散
步骤七 拍照判读
在弱阳性的血型中，能够看到不完整的血凝块。
实施例2
步骤一 血液样本上机
步骤二 微孔板中加入抗体
现将微孔板3放置到震荡器2上，再将五种抗体4分别加入微孔板3中。微孔板3选用96孔板，微孔板3中每个孔的容积为120ul。五种抗体4在微孔板3中的加入量分别为32ul。
步骤三 血液样本稀释
向深孔板5中滴加生理盐水，再通过血型检测仪的控制系统，移取血液试管中的红细胞悬液，将红细胞悬液加入到已经滴加生理盐水的深孔板5中；通过生理盐水对红细胞悬液进行稀释，得到稀释液。
稀释液中，红细胞悬液的体积占比为3.4％。
步骤四 抗原抗体混合
将上述稀释液加入到已经滴加抗体4的微孔板3中，使稀释液与五种抗体4分别混合，稀释液在微孔板3中的加入量为32ul。通过血型检测仪的控制系统控制震荡器2工作，使稀释液和抗体4混合均匀，震荡器的震荡时间为29s，振幅2mm，频率2100RPM。
步骤五 离心
将步骤四中经过震荡的微孔板3，放入到血型检测仪的离心机6中，对充分混合的抗原抗体4进行离心。离心过程中，离心机6的相对离心力为410g，离心时间为1min。
步骤六 震荡分散
步骤七 拍照判读
在弱阳性的血型中，能够看到不完整的血凝块。
实施例3
步骤一 血液样本上机
步骤二 微孔板中加入抗体
现将微孔板3放置到震荡器2上，再将五种抗体4分别加入微孔板3中。微孔板3选用96孔板，微孔板3中每个孔的容积为120ul。五种抗体4在微孔板3中的加入量分别为48ul。
步骤三 血液样本稀释
向深孔板5中滴加生理盐水，再通过血型检测仪的控制系统，移取血液试管中的红细胞悬液，将红细胞悬液加入到已经滴加生理盐水的深孔板5中；通过生理盐水对红细胞悬液进行稀释，得到稀释液。
稀释液中，红细胞悬液的体积占比为3.7％。
步骤四 抗原抗体混合
将上述稀释液加入到已经滴加抗体4的微孔板3中，使稀释液与五种抗体4分别混合，稀释液在微孔板3中的加入量为47ul。通过血型检测仪的控制系统控制震荡器2工作，使稀释液和抗体4混合均匀，震荡器的震荡时间为35s，振幅3mm，频率2640RPM。
步骤五 离心
将步骤四中经过震荡的微孔板3，放入到血型检测仪的离心机6中，对充分混合的抗原抗体4进行离心。离心过程中，离心机6的相对离心力为473g，离心时间为1.3min。
步骤六 震荡分散
步骤七 拍照判读
在弱阳性的血型中，能够看到不完整的血凝块。
综上所述，本发明在全自动血型检测仪上，先对抗原抗体的混合物进行震荡混合，能够提高抗原抗体的混合均匀度，抗原抗体混合均匀后，进行离心操作，通过离心力的作用，使阳性和弱阳性样本都发生凝集，再进行震荡，使弱阳性的凝集震散，而阳性凝集仍然聚集在一起，从而区分阳性与弱阳性的血液。综上所述，本发明能够实现血液的全自动检测，无需人工操作，检测时间短，效率高，且能够对阳性和弱阳性的血型进行精确的判读，避免由于检测不出弱阳性血型而耽误患者输血，造成患者无法救治的现象。
当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员当可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明所附的权利要求的保护范围。
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