用于预防和治疗癌症的有机硒化合物
阅读说明：本技术 用于预防和治疗癌症的有机硒化合物 (Organic selenium compound for preventing and treating cancer ) 是由 贺贤然 李少磊 李晓龙 聂友松 于 2020-05-16 设计创作，主要内容包括：本发明提供了用于预防和治疗癌症的化合物,其具有式(I)的结构式：R-(a)-R-(b)-C(W)-O-L-SeCN(I)其中各变量如说明书中所定义。本发明还提供了所述式(I)化合物的制备方法、包含所述式(I)化合物的药物组合物以及所述式(I)化合物在制备用于预防和治疗癌症的药物中的用途。(The present invention provides compounds for the prevention and treatment of cancer, having the structural formula of formula (I): r a ‑R b -c (w) -O-L-secn (i) wherein the variables are as defined in the specification. The invention also provides a preparation method of the compound of the formula (I), a pharmaceutical composition containing the compound of the formula (I) and application of the compound of the formula (I) in preparation of medicines for preventing and treatingThe use in medicaments for treating cancer.)
技术领域
本申请涉及药物化学领域，具体来说涉及一种用于预防和治疗癌症的含硒有机化合物，本发明还涉及所述化合物的制备方法、含有所述化合物的药物组合物以及所述化合物的制药用途。
背景技术
癌症是影响全世界人口的重要致死性疾病。在细胞的生命期中，偶尔会发生被称为“突变”的DNA微小变化。在这些突变中，某些突变(称为“沉默突变”)不会导致细胞功能的任何本质变化，而另一些突变则可改变细胞的作用方式。多种机制均可以阻止已发生突变的细胞继续进行细胞周期，并且如果遗传错误得不到纠正，这些细胞将通过被称为“细胞凋亡”的过程而“自杀”。然而，如果突变发生在参与细胞周期调控的蛋白质中，这可导致失控的细胞增殖(称为肿瘤形成)，其可进一步发展成癌症。
癌细胞通常对机体具有不利影响。癌症可通过恶性肿瘤细胞侵入邻近组织来扩散，也可通过已知为“转移”的过程来扩散，在“转移”过程中恶性细胞从肿瘤块脱离并扩散至较远的部位。在许多不同类型的组织中，癌症表现为多种形式，并可以其侵入和侵袭程度来表征。
癌症作为活宿主生物中的异常组织块而发生，它从宿主中接收营养而不依赖于宿主地过度增殖，并且破坏宿主机体。人体器官由大量细胞构成。当人体的正常细胞变成异常细胞并且该异常细胞不加检查地分裂和增殖时，就发生癌症。尽管遗传因素与癌症的发病密切相关，但环境因素也对个体是否发生癌症产生重要影响。癌症在发达国家尤其普遍。有报道称，导致癌症的原因是对农药、杀虫剂等的使用增加(因此这类物质在食品中的残留量增加)，对包含添加剂(如食品防腐剂和着色剂)的加工食品的消费增加，对水、土壤和空气的污染的增加，现代生活的压力，活动的减少，油腻的饮食习惯所引起的肥胖，等等。近年来，还有人指出，当正常细胞的细胞信号系统发生故障，当癌症基因被激活，或当抑癌基因发生故障时，就引发癌症。
目前存在多种癌症治疗方法，如手术治疗，化学疗法和放射疗法。手术治疗方法在早期阶段有效地去除癌症，但是，缺点是有时不得不摘除器官，这会导致副作用，并且具有癌症扩散至其他器官的不确定性。放射治疗有利于有效地治疗在一个特定器官发生的癌症，但是有以下缺点：因为辐射而使患者暴露于其他癌症风险，无法防止癌细胞扩散到其他器官，并且在治疗过程中患者要承受很大的痛苦。化学疗法通常使用抗癌药物进行，但是已知抗癌药物的毒性不仅作用于癌细胞，也作用于患者的正常细胞，造成副作用。因此，要开发有更高的癌细胞选择性和尽可能小的毒性的新抗癌药物。
硒是机体生命活动不可缺少的一种微量元素。近年来，人们对硒化合物特别是有机硒化合物进行了研究，试图从中发现有抗癌或抗肿瘤活性的化合物。例如，EI-Bayoumy等(K El-Bayoumy，Drugs Future,1997，22(5):539～545)研究发现，苄基硒氰化物在DMBA诱导的乳腺癌小鼠模型中表现出抗肿瘤作用。与亚硒酸钠相比，苄基硒氰化物的抗癌活性更高，但其本身具有强烈的异味，且存在导致患者体重显著下降的副作用。
依布硒啉(ebselen，2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮)和乙烷硒啉(1,2-[二(1,2-苯并异硒唑-3(2H)-酮)]乙烷是两个已经进入临床试验阶段的有机硒化合物。研究表明，依布硒啉的作用机制主要是通过抑制靶酶-硫氧环蛋白还原酶的活性，调节其下游信号传导通路及其抗肿瘤凋亡通路，实现药物的抗肿瘤作用，生物活性和低毒性则可能与其环状硒酰胺结构或苯并异硒唑酮含硒杂环有关(H JReich，等J.Am.Chem.Soc.，1987，109(18):5549-5551)；乙烷硒啉是硫氧还蛋白还原酶抑制剂，乙烷硒啉分子中含有2个苯并异硒唑酮结构，收到了协同增效的效果，活性优于依布硒啉。
尽管发现了上述有机硒化合物，但现有的有机硒化合物仍存在抗癌效力有待进一步提高、抗癌谱有限，以及化合物结构类型有限等问题，远远不能满足人类对于癌症预防和治疗的日益增长的需求。因此，开发出更好效果的抗癌药物，特别是有机硒化合物已成为迫切的需要。
因此，现有技术仍迫切需要新的有良好效果的癌症预防剂或治疗剂，特别是具有抗癌效力好、抗癌谱广的新型有机硒化合物。
发明内容
本发明人经过大量实验研究，意外发现了一类含硒氰的有机化合物，具有出乎意料的预防和治疗癌症的生物活性。所述化合物可有效用于多种癌症的治疗和/或预防。
基于上述发现，在第一方面，本发明提供了具有下式(I)结构的化合物：
Ra-Rb-C(W)-O-L-SeCN
(I)
或其可药用盐，
其中
Ra代表芳基、芳基C1-4烷基-或杂芳基，所述芳基、芳基C1-4烷基或杂芳基任选地被一个、两个或三个选自以下的取代基取代：苯基、甲磺酰基苯基C1-4烷基-、卤代苯基甲酰基-、苯基甲酰基-、C1-4烷基苯基氨基-、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基-、卤代C1-4烷氧基-、氨基、酰基、C1-4烷基酰基-、酰氧基、C1-2烷基酰氧基-、C1-2烷基氨基-、卤代C1-4烷基；
W选自O、S和Se；
Rb为1至4个碳原子的直链或支链化的亚烷基链或亚烯基链，或者为直接的共价键；
L为1至4个碳原子的直链或支链化的亚烷基链。
在本发明的式(I)化合物中，优选地，Ra选自未取代或取代的苯基、萘基、苯并吡咯基、苯并吡咯烷基和苯并环戊烯基。
在本发明的式(I)化合物中，所述取代基选自苯基、甲磺酰基苯基C1-4烷基-、卤代苯基甲酰基-、苯基甲酰基-、C1-4烷基苯基氨基-、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基-、卤代C1-4烷基-、卤代C1-4烷氧基-、酰基、C1-4烷基酰基-、酰氧基、C1-2烷基酰氧基-、C1-2烷基氨基-。
优选地，所述杂芳基选自苯并吡咯基、苯并吡咯烷基、苯并环戊烯基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基；特别优选地，所述杂芳基选自苯并吡咯基、苯并吡咯烷基和苯并环戊烯基。
在本发明的一些优选方案中，Ra选自苯基、萘基、苯并环戊烯基、苯并吡咯基和苯并吡咯烷基，并且Ra任选地被选自以下的一个或两个取代基取代：选自氟、氯、溴和碘的卤素，苯基，甲磺酰基苯基次甲基-，苯基氨基，苯甲酰基，甲氧基，1至4个碳原子的直链或支链化的亚烷基，三氟甲基。
在本发明的式(I)化合物中，W优选为O或S；更优选为O。
在本发明的式(I)化合物中，L优选为(CH2)2或(CH2)3，即L为C2或C3链，并且所述链不限于直链，可以包含支链部分。
在本发明的一些特别优选的实施方案中，所述式(I)化合物为选自以下的具体化合物：
或其可药用盐。
在本发明的另一个方面，还提供了包含本发明化合物和任选的载体的药物组合物。
在本发明的又一个方面，上述药物组合物还可包含另外的活性药物成分，即第二药物，所述第二药物适于治疗医学上表明施用本发明化合物可治疗或预防的相同病症或相关病症。
在本发明的又一个方面，提供了一种制备本发明化合物的方法，所述方法包括使DCC(N,N’-二环己基碳二亚胺)与化合物Ra-Rb-C(W)-OH在有机溶剂中反应的步骤，其中各变量如前面所定义。优选地，所述化合物Ra-Rb-C(W)-OH与DCC的摩尔比为1:1至1:3。优选地，所述反应在4-二甲氨基吡啶(DMAP)催化下进行；优选地，DMAP与Ra-Rb-C(W)-OH的摩尔比为1:1至1:2。所述反应优选在低于0℃的温度下进行，例如，在-5℃的温度下进行。
本发明的多个实施方案提供了使用本发明的化合物、组合物或组合的方法，包括向需要治疗其不良状况的患者以足以向所述患者提供有益效果的剂量、频率和持续时间来施用所述化合物、组合物或组合。
在本发明的另一方面，提供了本发明的化合物或药物组合物在制备用于预防或治疗癌症或用于预防、治疗和/或缓解与癌症相关的并发症和/或症状的药物中的用途。
具体实施方式
术语“治疗”定义为为了对抵抗疾病、病症或障碍(例如统称为“癌症”的多种类型病症中的一种)而对患者进行的处理和护理，其包括施用本发明化合物以预防症状或并发症的发作、或者减轻症状或并发症、或者治愈或消除疾病、病症或障碍。
在本发明上下文中的“治疗”意指减轻与病症或疾病相关的症状，或者抑制这些症状的进一步发展或恶化，或者防止或预防所述疾病或病症。类似地，本文中使用的本发明化合物的“有效量”或“治疗有效量”指完全或部分减轻与所述病症或状况相关的症状、或者停止或减缓这些症状的进一步发展或恶化，或者预防或提供对所述病症或状况之预防的化合物的量。
本文中使用的术语“癌症”指任何恶性实体肿瘤、转移性瘤或其中细胞分裂不受控制和细胞丧失分化的其它病症。
当将基团定义为“共价键”时，意指直接邻接该指定基团的基团通过共价键彼此连接。
除非具体指出特定的立体化学或异构体形式，否则本发明化合物旨在包括结构的所有手性、非对映体、外消旋形式。在本发明中使用的化合物可以包括根据描述显而易见的任何或所有不对称原子的经富集或拆分的任何富集程度的光学异构体。可以分离或合成外消旋和非对映体混合物以及单独的光学异构体，以便基本上不含其对映体或非对映体，这些都在本发明的范围内。
通常，“取代的”指本文中所定义的有机基团(其中包含有与氢原子键合的一个或多个键)被一个或多个与非氢原子键合的键取代，所述非氢原子即为取代基。
本发明化合物的取代基(包括Ra定义中的取代基)包括卤素、烷基(优选C1-4烷基，更优选C1-2烷基)、烷氧基(优选C1-4烷氧基，更优选C1-2烷氧基)、卤代C1-4烷氧基-(优选卤代C1-2烷氧基-)、氨基、酰基、C1-4烷基酰基-(优选C1-2烷基烷基酰基-)、酰氧基、C1-4烷基酰氧基-(优选C1-2烷基酰氧基-)、羧基、硝基、氰基、C1-4烷基氨基-(优选C1-2烷基氨基-)、卤代C1-4烷基(优选卤代C1-2烷基)、C1-4烷基氨基C1-4烷基-(优选C1-2烷基氨基C1-2烷基-)、羟基、羟基C1-4烷基-(优选羟基C1-2烷基-)、羟基C1-4烷基氨基-(优选羟基C1-2烷基氨基-)、C3-6环烷基、C2-4链烯基。
在本发明的取代基定义中，短线“-”表示某基团或取代基与结构式中其他部分相连接的成键位置。本领域技术人员都能够理解，对于式(I)结构来说，Ra有一个成键位置，而Rb在两端有两个成键位置。
烷基包括具有1至约8个碳原子或在某些实施方案中为1至4个甚至更优选为1至2个碳原子的直链和支链烷基。直链烷基的实例包括具有1至8个、优选1至4个、更优选1-2个碳原子的那些，比如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基。支链烷基的实例包括但不限于异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、异戊基和2,2-二甲基丙基。代表性的取代烷基可以被任何上述基团取代一次或多次，所述上述基团例如氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫基、烷氧基和卤素基团。
环烷基为环状烷基，例如但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。在优选的实施方案中，所述环烷基具有3至8个环成员，而在其它一些实施方案中，环碳原子的数目为3至5、6或7个。环烷基进一步包括多环环烷基，例如但不限于降冰片基、金刚烷基、冰片基、莰烯基、异莰烯基和蒈烯基，以及稠环例如但不限于十氢萘基等。环烷基还包括被如上定义的直链或支链烷基取代的环。代表性的取代环烷基可以是单取代的或多于一次取代的，例如但不限于2,2-、2,3-、2,4-、2,5-或2,6-二取代的环己基或单-、二-或三-取代的降冰片基或环庚基，其可以被例如氨基、羟基、氰基、羧基、硝基、硫基、烷氧基和卤素基团取代。术语“环烯基”单独或组合时表示环状烯基。
芳基为不包含杂原子的环状芳族烃。因此，芳基包括但不限于苯基、薁基、庚搭烯基(heptalenyl)、联苯基、二环戊二烯并苯基(indacenyl)、芴基、菲基、三亚苯基(triphenylenyl)、芘基、萘并萘基(naphthacenyl)、亚联苯基、蒽基和萘基。在某些实施方案中，芳基在该基团的环部分中包含6-14个碳。芳基可以是未取代或取代的，如上所定义。代表性的取代芳基可以是单取代的或多于一次取代的，例如但不限于2-、3-、4-、5-或6-取代的苯基或2-8取代的萘基，其可以被碳或非碳基团(如上述那些)取代。
杂芳基是含有5个或更多个环成员的芳环化合物，其中一个或更多个环成员是杂原子，例如但不限于N、O和S。命名为C2-杂芳基的杂芳基可以是具有两个碳原子和三个杂原子的5元环、具有两个碳原子和四个杂原子的6元环等。同样地，C4-杂芳基可以是具有一个杂原子的5元环、具有2个杂原子的6元环等。碳原子数目加杂原子数目的总和等于环原子的总数。杂芳基包括但不限于例如以下的基团：吡咯基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、氮杂吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、硫杂萘基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基。杂芳基可以是未取代的，或者可以是被如上所述基团取代的。代表性的取代杂芳基可以被如上所述的那些基团取代一次或多次。
芳基和杂芳基的其它实例包括但不限于苯基、联苯基、茚基、萘基(1-萘基、2-萘基)、N-羟基四唑基、N-羟基三唑基、N-羟基咪唑基、蒽基(1-蒽基、2-蒽基、3-蒽基)、噻吩基(2-噻吩基、3-噻吩基)、呋喃基(2-呋喃基、3-呋喃基)、吲哚基、噁二唑基、异噁唑基、喹唑啉基、芴基、呫吨基、异茚满基、二苯甲基、吖啶基、噻唑基、吡咯基(2-吡咯基)、吡唑基(3-吡唑基)、咪唑基(1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基)、三唑基(1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-2-基、1,2,3-三唑-4-基、1,2,4-三唑-3-基)、噁唑基(2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基)、噻唑基(2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、吡啶基(2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、嘧啶基(2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基)、吡嗪基、哒嗪基(3-哒嗪基、4-哒嗪基、5-哒嗪基)、喹啉基(2-喹啉基、3--喹啉基、4-喹啉基、5-喹啉基、6-喹啉基、7-喹啉基、8-喹啉基)、异喹啉基(1-异喹啉基、3-异喹啉基、4-异喹啉基、5-异喹啉基、6-异喹啉基、7-异喹啉基、8-异喹啉基)、苯并[b]呋喃基(2-苯并[b]呋喃基、3-苯并[b]呋喃基、4-苯并[b]呋喃基、5-苯并[b]呋喃基、6-苯并[b]呋喃基、7-苯并[b]呋喃基)、2,3-二氢-苯并[b]呋喃基(2-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、3-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、4-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、5-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、6-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、7-(2,3-二氢-苯并[b]呋喃基)、苯并[b]噻吩基(2-苯并[b]噻吩基、3-苯并[b]噻吩基、4-苯并[b]噻吩基、5-苯并[b]噻吩基、6-苯并[b]噻吩基、7-苯并[b]噻吩基)、2,3-二氢-苯并[b]噻吩基、(2-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、3-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、4-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、5-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、6-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、7-(2,3-二氢-苯并[b]噻吩基)、吲哚基(1-吲哚基、2-吲哚基、3-吲哚基、4-吲哚基、5-吲哚基、6-吲哚基、7-吲哚基)、吲唑(1-吲唑基、3-吲唑基、4-吲唑基、5-吲唑基、6-吲唑基、7-吲唑基)、苯并咪唑基(1-苯并咪唑基、2-苯并咪唑基、4-苯并咪唑基、5-苯并咪唑基、6-苯并咪唑基、7-苯并咪唑基、8-苯并咪唑基)、苯并噁唑基(1-苯并噁唑基、2-苯并噁唑基)、苯并噻唑基(1-苯并噻唑基、2-苯并噻唑基、4-苯并噻唑基、5-苯并噻唑基、6-苯并噻唑基、7-苯并噻唑基)、咔唑基(1-咔唑基、2-咔唑基、3-咔唑基、4-咔唑基)等。
更特别地，芳基和杂芳基可以包括苯基、异吲哚烷基(isoindolidinyl)、咪唑基、噁唑基、苯并咪唑基和苯并噁唑基；其中任何芳基或杂芳基可以是未取代的、单取代的或者独立地多取代的，例如用如本文定义的J基团取代。
术语“烷氧基”指氧原子连接到如上述定义的包括环烷基在内的烷基上。直链烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。支链烷氧基的实例包括但不限于异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基、异己氧基等。环烷氧基的实例包括但不限于环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
本文使用的术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。“卤代烷基”包括单卤代烷基和多卤代烷基(其中所有卤原子可以相同或不同)。部分卤代的烷基是本文含义内的“卤代烷基”。卤代烷基的实例包括三氟甲基、1,1-二氯乙基、1,2-二氯乙基、1,3-二溴-3,3-二氟丙基等。
本文中使用的术语“酰基”指包含羰基部分的基团，其中该基团经由该羰基碳原子键合。该羰基碳原子还键合至其它碳原子，其可以是烷基、芳基、芳烷基环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基、杂芳基烷基等的一部分。在其中羰基碳原子键合至氢的特定情况下，该基团是“甲酰基”，其为一种酰基(该术语如本文所定义)。其它的实例包括乙酰基、苯甲酰基、苯乙酰基、吡啶基乙酰基、肉桂酰基和丙烯酰基等。当包含键合至羰基碳原子的碳原子的基团包含卤素时，该基团称为“卤代酰基”。一个实例为三氟乙酰基。
本领域众所周知的“盐”包括有机化合物，例如离子形式的羧酸、磺酸或胺与反离子的组合。例如，阴离子形式的酸可以与下述物质形成盐：阳离子如金属阳离子，例如钠、钾等；铵盐如NH4 +或多种胺的阳离子，包括四烷基铵盐如四甲铵，或其它阳离子如三甲基硫鎓等。“可药用”盐是由已批准用于人使用且通常无毒的离子形成的盐，比如盐酸盐或钠盐。“两性离子”是内盐，例如其可以在具有至少两个可电离基团的分子中形成，一个形成阴离子，另一个形成阳离子，其彼此达到平衡。例如，氨基酸(如甘氨酸)可以以两性离子形式存在。“两性离子”是本文含义内的盐。
“水合物”是以与水分子组合存在的化合物。所述组合物可以包含化学计量量的水，例如一水合物或二水合物，或者可以包含任意量的水。
“溶剂化物”是类似的组合物，不同点在于用不同于水的溶剂代替水。例如，甲醇或乙醇可以形成“醇化物”，其也可以是化学计量的或非化学计量的。
“互变异构体”是物质的两种形式，其仅仅在分子结构中的氢原子位置不同。
本发明的另一个方面提供了包含本发明化合物和任选的载体的药物组合物或者包含除本发明化合物外还另外包含其他药物活性成分以及任选的载体的药物组合物。本发明的药物组合物可以通过常规技术制备，例如在Remington：The Science and Practiceof Pharmacy,第19版，1995中所描述的方法，其通过引用并入本文。所述组合物可以以常规形式出现，例如胶囊、片剂、气雾剂、溶液剂、混悬剂或局部施用形式。
典型的组合物包含本发明化合物和载体。例如，活性化合物通常与载体混合，或者被载体稀释，或者被密封在可以为安瓿、胶囊、小药囊(sachet)、纸或其它容器形式的载体内。当将活性化合物与载体混合时，或者当载体充当稀释剂时，所述载体可以为充当活性化合物的载体、赋形剂或介质的固体、半固体或液体材料。所述活性化合物可以吸附在颗粒状固体载体上(例如容纳在小药囊中)。合适的载体的一些实例为水、盐溶液、醇、聚乙二醇、聚羟基乙氧基化蓖麻油、花生油、橄榄油、明胶、乳糖、白土、蔗糖、糊精、碳酸镁、糖、环糊精、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸或纤维素的低级烷基醚、硅酸、脂肪酸、脂肪酸胺、脂肪酸甘油单酯和甘油二酯、季戊四醇脂肪酸酯、聚氧乙烯、羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。类似地，所述载体或稀释剂可以包括任何本领域已知的持续释放材料，例如单独的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯或者其与蜡的混合物。
所述制剂可以与不与所述活性化合物发生有害反应的辅助剂混合。这些添加剂可以包括润湿剂、乳化剂和助悬剂、影响渗透压的盐、缓冲剂和/或着色物质、防腐剂、甜味剂或调味剂。如果需要，还可以对所述组合物进行灭菌。
施用途径可以是将本发明活性化合物有效地转运到适当的或期望的作用部位的任何途径，例如口服、经鼻、肺部、口含、皮下、皮内、透皮或肠胃外途径，例如直肠、贮库(depot)、皮下、静脉内、尿道内、肌内、鼻内、眼用溶液或软膏剂的途径，口服途径是优选的。
如果使用固体载体用于口服施用，则该制剂可以是压片的，以粉剂或小丸形式置于硬明胶胶囊中，或者其可以是糖锭或锭剂的形式。如果使用液体载体，则所述制剂可以是糖浆剂、乳剂、软明胶胶囊或无菌可注射液体的形式，例如水性或非水性液体混悬剂或溶液剂。
可注射的剂型通常包括水性混悬剂或油性混悬剂，其可以使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂来制备。可注射的形式可以是在溶液相中或者是用溶剂或稀释剂制备的混悬剂的形式。可接受的溶剂或载体包括无菌水、林格溶液或等渗盐水溶液。或者，可以应用无菌油作为溶剂或助悬剂。优选地，所述油或脂肪酸是不挥发性的，包括天然油或合成油、脂肪酸、甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯。
对于注射而言，所述制剂还可以是适于用上述的合适溶液重构的粉末。这些的实例包括但不限于冷冻干燥的、旋转干燥的或喷雾干燥的粉末，无定形粉末、颗粒、沉淀物或微粒。对于注射剂而言，所述制剂可以任选地包含稳定剂、pH调节剂、表面活性剂、生物利用度调节剂和这些试剂的组合。可以将所述化合物配制为用于通过注射进行胃肠外施用，例如通过推注或连续输注。用于注射的单位剂型可以在安瓿中或多剂量容器中。
可以将本发明的制剂设计成在通过本领域熟知的方法施用至患者后能提供活性成分的快速、持续或延迟释放。因此，还可以将所述制剂配制成用于控释释放或缓慢释放。
本发明的化合物在宽的剂量范围都是有效的。例如，在成年人的治疗中，可以使用每天约0.05至约5000mg、优选约1至约2000mg、更优选约2至约2000mg的剂量。典型的剂量为每天约10mg至约1000mg。在选择患者治疗方案时，其可常常须从较高的剂量开始，并且当病症得到控制时减少剂量。精确的剂量将取决于化合物的活性、施用方式、期望的治疗、施用的形式、待治疗的对象和待治疗对象的体重、及主管医师或兽医的偏好和经验。
通常，将本发明化合物分配在单位剂型中，其每单位剂量包含约0.05mg至约1000mg活性成分和可药用载体。
通常，适于口服、经鼻、肺部或透皮施用的剂型包括约125μg至约1250mg、优选约250μg至约500mg、更优选约2.5mg到约250mg的与可药用载体或稀释剂混合的所述化合物。
剂型可以是每日一次、或每日一次以上例如每日两次或每日三次施用。或者，剂型可以少于每日一次的频率施用，例如每隔一天或每周，如果开处方的医师认为合适的话。
药物组合物可以片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂、锭剂、液体或胶状物形式。供口服的片剂和胶囊可以适于单位剂量用药的形式，并且可以含常规的赋形剂，这些例子有：结合剂如糖浆、阿拉伯树胶、凝胶、山梨醇、黄著胶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；填料如乳糖、糖类、玉米粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸；片剂润滑剂如硬脂酸镁、二氧化硅、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂如马铃薯淀粉；可接受的润滑剂如月桂基硫酸钠。片剂可按照已知的常规制药实践中的方法进行包衣。口服液体制剂可以使水状或油状悬浮液、溶液、乳剂、糖浆或酊剂，也可制成一种干物质，在使用之前再用水或其它合适的载体重新调制。这些液体制剂可含有常规的添加剂，例如悬浮剂(如：山梨醇、糖浆、甲基纤维素、葡萄糖浆、明胶、经氢化的食用油脂)。乳化剂(如孵磷脂，山梨醇单油酸盐或阿拉伯树胶)，非水相载体(包括食用油如杏仁油、精馏的椰子油、油脂如甘油、丙二醇或乙醇),防腐剂(如甲基或丙基对羟基苯甲酸或山梨酸)，如果需要也可含有常规的风味剂或着色剂。
本发明药物组合物中活性物质的百分比是可变的，因为必须使药物调剂制成一定合适比例的剂量，以获得理想的疗效。总之，本发明的药物制剂经口服或注射给药应按每70kg体重每天1至15毫克活性物质。以下说明性的而不是限制性的给出一些实施实施例。
本发明在多个实施方案中提供了合成本文中本发明化合物的方法。通用方法包括使Ra-Rb-C(W)-OH所代表的化合物与2-硒氰乙醇或3-硒氰丙醇(NCSe(CH2)nOH)(n为2或3)在有机溶剂中反应的步骤。所述反应可以在低温下反应，在催化剂(DCC和DMAP)下进行。在一些优选的实施方案中，可将通式为Ra-Rb-C(W)-OH化合物溶于四氢呋喃或二氯甲烷中，加入4-二甲氨基吡啶，搅拌下加入N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)，冰浴条件下搅拌反应，生成目标化合物Ra-Rb-C(W)-O-L-SeCN。
实施例
以下结合具体的实施例对本发明的技术方案和应用作进一步说明：
合成制备例
实施例1：化合物I-a的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-a(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(54mg，1.2eq)、DCC(62mg，1.0eq)和DMAP(44mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-a 120mg，产率86％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.24(s,3H,-CH3),2.88(s,3H,CH3),3.16(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.64(s,2H,CH2),3.85(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),6.55(t,1H,J＝8.00Hz,ArH),6.80(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.11(d,1H,J＝4.00Hz,ArH),7.17(s,1H,CH),7.58(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.73(d,2H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ11.3,26.2,34.9,43.3,51.2,107.1(d,J＝24Hz),113.9(d,J＝22Hz),122.9,129.4,129.8,130.9,132.4,138.3,140.2,141.4,145.6,147.8(d,J＝9.5Hz),163.2,163.9,165.5,174.8.19FNMR(CDCl3,376MHz):δ＝-112.1(s,F).
ESI-MS:471.4([M+1]+).
实施例2：化合物I-b的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-b(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(59mg，1.2eq)、DCC(62mg，1.0eq)和DMAP(44mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-b 110mg，产率75％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.04(t,2H,J＝4.00Hz,CH2),2.20(s,3H,CH3),2.84(s,3H,–CH3),3.00(t,2H,J＝4.00Hz,CH2),3.33–3.40(m,2H,CH2),3.48(s,2H,CH2),6.50-6.58(m,1H,ArH),6.88(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.17–7.20(m,2H,ArH),7.70(d,2H,J＝13Hz,8.00Hz,ArH),7.77(d,2H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ10.4,26.6,31.1,34.3,37.9,44.2,101.3,104.9(d,J＝24Hz),112.5(d,J＝22Hz),125.0(d,J＝12Hz),129.3,129.8(d,J＝3.0Hz),131.5,133.4(d,J＝2.0Hz),139.2,139.8,142.6,146.8,147.9(d,J＝9.0Hz),164.1,165.6,170.3.19F NMR(CDCl3,376MHz):δ＝-112.3(s,F).
ESI-MS:486.4([M+1]+).
实施例3：化合物I-c的制备反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-c(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(72mg，1.2eq)、DCC(82mg，1.0eq)和DMAP(59mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-c 100mg，产率66％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ1.50(d,3H,J＝7.20Hz,CH3),3.13(t,2H,J＝4.00Hz,CH2),3.70(q,1H,J＝7.20Hz,CH),3.81(t,2H,J＝4.00Hz,CH2),7.04-7.11(m,2H,ArH),7.31-7.42(m,4H,ArH),7.46-7.50(m,2H,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ18.3,24.2,48.4,53.8,114.7(d,J＝24Hz),124.2,129.1,129.3,129.5,130.4,131.8,136.4,144.5(d,J＝8Hz),159.8,162.5,165.3,178.6.19F NMR(CDCl3,376MHz):δ＝-112.2(s,F).
ESI-MS:377.3([M+1]+).
实施例4：化合物I-d的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-d(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(79mg，1.2eq)、DCC(82mg，1.0eq)和DMAP
(59mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-d 110mg，产率70％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ1.52(d,3H,J＝8.00Hz,CH3),1.83-1.88(m,2H,CH2),2.85(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.34(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.61(q,1H,J＝8.00Hz,CH),7.08-7.13(m,2H,ArH),7.33-7.42(m,4H,ArH),7.47(d,2H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ18.0,27.5,32.1,39.4,45.6,101.3,117.2(d,J＝24Hz),124.7,128.9,128.3(d,J＝13Hz),128.7,129.1,132.0,136.2,144.7,159.2,162.1,175.8.19F NMR(CDCl3,376MHz):δ＝-114.9(s,F).
ESI-MS:391.0([M+1]+).
实施例5.化合物I-e的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-e(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(54mg，1.2eq)、DCC(62mg，1.0eq)和DMAP(44mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-e 120mg，产率84％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.12(s,3H,CH3),3.03(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.60(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.64(s,3H,CH3),6.68(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),6.86(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.11(m,1H,ArH),7.60(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.65(d,2H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ14.2,26.3,33.5,56.7,101.1,103.7,112.9,114.6,116.4,129.4,130.4,131.3,131.8,133.4,134.2,139.4,157.3,166.7.
ESI-MS:476.8([M+1]+).
实施例6.化合物I-f的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-f(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(49mg，1.2eq)、DCC(62mg，1.0eq)和DMAP(44mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-f 105mg，产率71％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.08(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),2.41(s,3H,CH3),3.05(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.30-3.34(m,2H,CH2),3.67(s,2H,CH2),3.88(s,3H,OCH3),6.64-6.68(m,1H,ArH),6.80-6.82(m,2H,ArH),7.53(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.69(d,2H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ12.6,26.4,29.4,31.5,37.7,56.3,101.2,104.3,111.4,111.6,116.4,128.3,130.8,131.1,131.4,134.3,137.7,140.5,157.6,166.5,169.8.
ESI-MS:490.0([M+1]+).
实施例7.化合物I-g的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-g(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(72mg，1.2eq)、DCC(82mg，1.0eq)和DMAP(59mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-g 100mg，产率65％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ1.48(d,3H,J＝8.00Hz,CH3),2.12-2.16(m,2H,CH2),3.03(m,2H,CH2),3.68(q,1H,J＝8.00Hz,CH),7.40-7.46(m,3H,ArH),7.61-7.67(m,3H,ArH),7.76-7.82(m,3H,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ17.5,31.2,38.5,47.6,102.6,128.0,128.6,129.2,129.7,130.4,131.0,131.5,137.6,138.8,142.2,172.6,193.9.
ESI-MS:387.3([M+1]+).
实施例8.化合物I-h的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-h(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(79mg，1.2eq)、DCC(82mg，1.0eq)和DMAP(59mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-h 105mg，产率65％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ1.53(d,3H,J＝8.00Hz,CH3),2.02-2.06(m,2H,CH2),2.96(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.35-3.38(m,2H,CH2),3.63(q,1H,J＝8.00Hz,CH),7.44-7.51(m,3H,ArH),7.56-7.61(m,3H,ArH),7.74-7.79(m,3H,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ18.6,27.2,31.1,38.4,46.9,102.3,128.4,128.9,129.0,129.3,130.1,131.4,132.7,137.3,138.1,141.7,174.5,196.6.
ESI-MS:402.3([M+1]+).
实施例9.化合物I-i的制备
反应式如下：
在50ml烧瓶中加入化合物II-i(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(76mg，1.2eq)、DCC(86mg，1.0eq)和DMAP(62mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-i 115mg，产率73％。
核磁共振1H NMR(400MHz,DMSO):δ2.08(s,3H,CH3),2.32(s,3H,CH3),3.15(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.67(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),6.60–6.64(m,2H,ArH),6.96-6.99(m,1H,ArH),7.06-7.08(m,2H,ArH),7.15-7.17(m,1H,ArH),8.10(d,1H,J＝4.00Hz,ArH),9.67(s,1H,NH).13C NMR(100MHz,DMSO):δ13.8,21.2,23.8,48.4,114.8,117.7,119.2,124.4,126.2,126.8,131.1,131.4,134.8,137.3,138.6,147.2,172.5,174.6.
ESI-MS:374.1([M+1]+).
实施例10.化合物I-j的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-j(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(76mg，1.2eq)、DCC(86mg，1.0eq)和DMAP
(62mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-j 120mg，产率75％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.11(s,3H,CH3),2.10-2.22(m,2H,CH2),2.28(s,3H,CH3),3.15(t,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.48(q,2H,J＝8.00Hz,CH2),6.48–6.50(m,1H,ArH),6.55(t,1H,J＝8.00Hz,ArH),6.82(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),6.90(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.00(t,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.08(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.12-7.18(m,1H,ArH),7.37(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),13CNMR(100MHz,CDCl3):δ13.9,21.4,26.4,32.5,37.8,105.7,114.2,115.4,116.3,122.3,124.8,126.3,127.2,131.2,132.3,137.9,138.3,146.5,171.4.
ESI-MS:388.0([M+1]+).
实施例11.化合物I-k的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-k(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(61mg，1.2eq)、DCC(70mg，1.0eq)和DMAP(50mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-k 100mg，产率69％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.06-3.09(m,2H,CH2),3.68-3.72(m,2H,CH2),3.76(s,2H,CH2),6.48–6.50(m,1H,ArH),6.25(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),6.83-6.86(m,1H,ArH),7.03-7.06(m,1H,ArH),7.20-7.24(m,2H,ArH),7.53(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.67(s,1H,NH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ24.9,41.5,51.7,115.6,120.7,124.3,125.8,127.5,129.3,130.4,137.1,143.0,175.8.
ESI-MS:428.0([M+1]+).
实施例12.化合物I-l的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-l(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(67mg，1.2eq)、DCC(70mg，1.0eq)和DMAP(50mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-l 100mg，产率66％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.24-2.28(m,2H,CH2),3.11-3.14(m,2H,CH2),3.64-3.68(m,2H,CH2),3.78(s,2H,CH2),6.44–6.47(m,1H,ArH),6.20(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),6.80-6.84(m,1H,ArH),7.13-7.16(m,1H,ArH),7.21-7.25(m,2H,ArH),7.68(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.88(s,1H,NH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ18.7,25.3,42.3,52.6,117.6,122.4,128.4,126.2,128.3,129.7,132.3,138.3,144.1,176.4.
ESI-MS:442.0([M+1]+).
实施例13.化合物I-m的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-m(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(52mg，1.2eq)、DCC(72mg，1.0eq)和DMAP(51mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-m 120mg，产率81％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ0.88(t,3H,J＝8.00Hz,CH3),1.30(t,3H,J＝8.00Hz,CH3),1.92-2.14(m,2H,CH2),2.75-2.83(m,4H,2×CH2),3.12(q,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.16(q,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.65-3.71(m,2H,CH2),3.92-4.00(m,2H,CH2),6.94(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.02(t,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.36(d,1H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ8.6,14.1,23.3,25.7,26.4,32.3,46.7,57.8,62.1,77.5,110.4,117.3,120.5,121.2,127.3,127.4,135.2,135.9,162.1,170.3.
ESI-MS:422.0([M+1]+).
实施例14.化合物I-n的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-n(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(57mg，1.2eq)、DCC(72mg，1.0eq)和DMAP(51mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-n 105mg，产率77％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3:δ0.98(t,3H,J＝8.00Hz,CH3),1.35(t,3H,J＝8.00Hz,CH3),1.80-1.92(m,2H,CH2),2.08–2.13(m,2H,CH2),2.38-2.41(m,1H,CH),2.77-2.82(m,5H,CH2,CH2,CH),2.30–2.38(m,1H,CH),3.09-3.16(m,1H,CH),3.50-3.57(m,1H,CH),4.00–4.12(m,2H,CH2),6.72(brs,1H,NH),6.88-6.92(m,1H,ArH),7.00-7.05(m,1H,ArH),7.54(d,1H,J＝8.00Hz,ArH).13CNMR(100MHz,CDCl3):δ8.3,15.4,23.2,24.3,27.3,31.2,31.9,38.4,44.2,61.4,75.4,101.8,108.2,116.9,120.2,120.8,126.6,127.4,132.8,134.2,170.1.
ESI-MS:436.1([M+1]+).
实施例15.化合物I-o的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-o(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(77mg，1.2eq)、DCC(88mg，1.0eq)和DMAP(63mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-o 115mg，产率74％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ1.50(d,3H,CH3),2.82-2.88(m,2H,CH2),3.29–3.31(m,2H,CH2),3.58-3.60(m,1H,CH),3.87(s,3H,OCH3),7.11-7.14(m,2H,ArH),7.28(d,1H,J＝8.00Hz),7.60(s,1H,ArH),7.65–7.12(m,2H,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ17.4,26.5,32.8,39.5,48.2,57.2,101.2,104.5,120.4,126.3,126.7,128.2,130.3,130.7,134.2,137.5,159.3,174.2.
ESI-MS:363.1([M+1]+).
实施例16.化合物I-p的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-p(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(85mg，1.2eq)、DCC(88mg，1.0eq)和DMAP(63mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-p 110mg，产率68％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ1.46(d,3H,CH3),2.80-2.88(m,2H,CH2),3.27-3.30(m,2H,CH2),3.62-3.65(m,1H,CH),4.02(s,3H,OCH3),7.06-7.12(m,2H,ArH),7.41(d,1H,J＝8.00Hz),7.58(s,1H,ArH),7.66-7.02(m,2H,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ17.2,26.3,32.4,40.3,46.5,55.7,103.2,106.9,120.5,126.3,126.6,128.5,129.3,129.8,134.7,137.6,158.4,174.7.
ESI-MS:377.1([M+1]+).
实施例17.化合物I-q的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-q(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(88mg，1.2eq)、DCC(101mg，1.0eq)和DMAP
(72mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-q 100mg，产率68％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ0.88(d,6H,J＝8.00Hz,2×CH3),1.43(d,3H,J＝4.00Hz,CH3),1.67-1.72(m,1H,CH),2.34(d,1H,J＝8.00Hz,CH2),3.10(td,2H,J＝8.00and 1.00Hz,CH2),3.58–3.63(m,1H,CH),3.66-3.78(m,1H,CH),7.15(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.24(d,2H,J＝8.00Hz).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ17.8,23.7,27.4,32.3,45.6,48.9,56.8,128.4,130.2,138.5,143.2,159.7,177.4.
ESI-MS:339.2([M+1]+).
实施例18.化合物I-r的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-r(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(96mg，1.2eq)、DCC(101mg，1.0eq)和DMAP
(72mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得淡黄色固体，即化合物I-r 130mg，产率75％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ0.84(d,6H,J＝8.00Hz,2×CH3),1.43(d,3H,J＝8.00Hz,CH3),1.78-1.81(m,1H,CH),2.01–2.04(m,2H,CH2),2.52(d,1H,J＝4.00Hz,CH2),2.98(td,2H,J＝8.00and 1.00Hz,CH2),3.31–3.36(m,2H,CH2),3.51–3.56(m,1H,CH),7.16(d,2H,J＝8.00Hz,ArH),7.23(d,2H,J＝8.00Hz).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ19.4,24.2,28.2,30.7,31.4,39.1,45.5,46.3,103.6,128.4,130.4,138.6,142.4,176.6.
ESI-MS:353.1([M+1]+).
实施例19.化合物I-s的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-s(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(101mg，1.2eq)、DCC(115mg，1.0eq)和DMAP(82mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-s 110mg，产率62％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.11(s,3H,CH3),3.27-3.30(m,2H,CH2),3.81-3.86(m,1H,CH2),7.06-7.12(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.27-7.29(m,1H,ArH),7.48-7.51(m,1H,ArH),7.73-7.75(d,1H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ21.3,28.9,40.3,101.4,123.3,126.4,128.9,129.5,132.4,148.1,166.5,169.1.
ESI-MS:313.0([M+1]+).
实施例20.化合物I-t的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-t(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(110mg，1.2eq)、DCC(115mg，1.0eq)和DMAP(82mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-t 115mg，产率63％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.10-2.15(m,2H,CH2),2.36(s,3H,CH3),3.05(d,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.48-3.52(m,1H,CH2),7.06(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.22-7.25(m,1H,ArH),7.45-7.54(m,1H,ArH),7.60(d,1H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ22.4,28.3,32.5,39.4,104.7,124.2,127.3,129.1,130.4,132.5,150.5,168.3,170.2.
ESI-MS:327.0([M+1]+)
实施例21.化合物I-u的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-u(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入2-硒氰乙醇(63mg，1.2eq)、DCC(115mg，1.0eq)和DMAP(82mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-u 105mg，产率72％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.41(s,3H,CH3),3.16(d,2H,J＝8.00Hz,CH2),3.47-3.52(m,1H,CH2),6.58(brs,1H,NH),7.10(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.21-7.23(m,1H,ArH),7.51-7.55(m,1H,ArH),7.76(d,1H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ25.8,33.4,103.1,116.5,117.8(q,JC-F＝4.0Hz),118.6(m,JC-F＝4.0Hz),121.2,122.3,123.6,127.3,130.8,131.9,132.2,135.4,144.4,146.2,170.5.
ESI-MS:414.0([M+1]+).
实施例22.化合物I-v的制备
反应式如下
在50ml烧瓶中加入化合物II-v(100mg，1.0eq)和无水四氢呋喃10ml，冰浴下依次加入3-硒氰丙醇(69mg，1.2eq)、DCC(72mg，1.0eq)和DMAP(51mg，1.2eq)搅拌反应12小时，TLC监测反应完全。减压蒸馏除去溶剂，硅胶柱层析分离，用乙酸乙酯(V)：石油醚(V)＝1:3作为流动相，得白色固体，即化合物I-v 120mg，产率80％。
核磁共振1H NMR(400MHz,CDCl3):δ2.10-2.15(m,2H,-CH2),2.36(s,3H,-CH3),3.13(d,2H,J＝8.00Hz,-CH2),3.50-3.54(m,1H,CH2),6.55(brs,1H,NH),7.15(d,1H,J＝8.00Hz,ArH),7.20-7.24(m,1H,ArH),7.45-7.53(m,1H,ArH),7.70(d,1H,J＝8.00Hz,ArH).13C NMR(100MHz,CDCl3):δ26.7,32.7,38.8,102.1,117.4,118.4(q,JC-F＝4.0Hz),119.60(m,JC-F＝4.0Hz),120.2,122.6,123.4,128.4,130.4,131.4,131.7,134.8,143.2,145.5,171.0.
ESI-MS:428.0([M+1]+).
生物活性实施例
评价了本发明化合物抗培养基中几种人肿瘤细胞系生长的抑制活性，所述肿瘤细胞系包括HeLa(宫颈癌细胞)、PC-3(前列腺癌细胞)、HCT-116(结肠癌细胞)、SGC-7091(胃癌细胞)。
体外细胞实验
实施例1.化合物I-a至I-v的体外抗肿瘤作用实验
取对数期的各细胞按每孔3×104接种于96孔板上，12小时后弃去上清，按以下分组给药：正常对照组和加药组(浓度0-100μM)，每组设6个复孔，培养24小时，弃上清，加入含有MTT的培养液50μL培养4小时(0.5mg/mL),加入100μL DMSO，振荡1小时，在酶标仪上570nm处测吸光度。另外采用紫杉醇作为阳性对照药。
结果显示，加药后肿瘤细胞活性明显下降，而且肿瘤细胞活性随着药物浓度的增加而降低。结果见表1。
表1化合物I-a至I-v对肿瘤细胞系的体外生长抑制作用(采用人胚肾细胞293T作为对照)
aIC50值为三次独立实验的平均值
b紫杉醇为阳性对照
结果表明：本发明的化合物I-a至I-v均能够有效地抑制多种肿瘤细胞生长，显示出本发明式(I)化合物具有显著的抗肿瘤活性。
实施例2.化合物I-a至I-v的醌还原酶诱导活性实验
取对数期的鼠肝癌细胞株Hepa 1c1c7细胞(购自ATCC)，按每孔2×104接种于96孔板上，培养液含有10％(v/v)胎牛血清、0.01％青霉素G、0.15％碳酸氢钠、0.01％链霉素，于环境条件为37℃、5％二氧化碳培养箱中培养24小时，然后将已知浓度的待测化合物溶解在DMSO中，加入各孔并保持24小时。每孔加入DMSO后应保证DMSO的终浓度＜0.5％(V/V)。之后弃去上清液，加入洋地黄毒苷以消化细胞，最后加入含有MTT的培养液轻轻振荡5分钟，在550nm处测吸光度。结果见表2。
表2化合物I-a至I-v的醌还原酶诱导活性测试结果
a 4′-溴黄酮为阳性对照
结果显示，本发明的化合物均表现出明显的醌还原酶诱导活性，且均优于阳性对照，证明本发明的化合物具有癌症化学预防作用。
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