发明内容

本发明要解决的技术问题是为了克服现有技术的缺陷，提供一种重组人透明质酸酶液体制剂及其应用，该制剂临床使用方便，用途广泛，制剂配方简单，产品稳定性良好，在2～8℃的温度条件下放置12个月后稳定性保持在95％以上。

本发明通过以下技术方案实现：

本发明的第一方面涉及一种重组人透明质酸酶液体制剂，包含：重组人透明质酸酶、缓冲剂、稳定剂和非离子型表面活性剂，其中：

所述的重组人透明质酸酶的酶活性为50单位/ml～4500000单位/ml；

所述的缓冲剂的浓度为1～100mM；

所述的稳定剂的浓度为1～200mM，所述的稳定剂选自海藻糖、蔗糖、甘露醇、氯化钠、甲硫氨酸中的一种或多种；

所述的非离子型表面活性剂的浓度为0.01％～0.1％(w/v)；

所述的液体制剂的pH为5.5～8.0。

所述的重组人透明质酸酶的酶活性优选为45单位/ml～3000000单位/ml；更优选为45单位/ml～1500000单位/ml；再优选为45单位/ml～300000单位/ml，例如45单位/ml、100单位/ml、150单位/ml、500单位/ml、1000单位/ml、5000单位/ml、50000单位/ml、300000单位/ml、1500000单位/ml、3000000单位/ml或4500000单位/ml。

所述的重组人透明质酸酶的浓度优选为0.15～0.75μg/ml、0.75～2.5μg/ml、2.5～5μg/ml、5.5～25μg/ml、25μg/ml～0.3mg/ml、0.3～1.5mg/ml、1.5～7.5mg/ml、7.5～15mg/ml或15～22.5mg/ml，例如0.15μg/ml、0.33μg/ml、0.5μg/ml、1.7μg/ml、3.3μg/ml、17μg/ml、0.2mg/ml、1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml或15mg/ml。

所述的重组人透明质酸酶的酶活性还可为300000单位/ml～1500000单位/ml、1500000单位/ml～3000000单位/ml或300000单位/ml～450000单位/ml。

优选地，所述的缓冲剂提供的pH为5.5～7.5，例如5.5、6.0、6.5、7.0、7.5或8.0。

所述的缓冲剂可为本领域常规，优选为组氨酸缓冲液、醋酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲液、Tris缓冲液中的一种或多种，例如组氨酸缓冲液、醋酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、柠檬酸缓冲液或Tris缓冲液。

其中，所述的组氨酸缓冲液的pH为5.5～7.5，醋酸缓冲液的pH为5.0～6.0，磷酸盐缓冲液的pH为6.0～8.0，柠檬酸缓冲液的pH为5.0～7.0，Tris缓冲液的pH为7.0～8.0。

优选地，所述的组氨酸缓冲液的pH为6.0。

优选地，所述的醋酸缓冲液的pH为5.0。

优选地，所述的磷酸盐缓冲液的pH为7.0。

优选地，所述的柠檬酸缓冲液的pH为6.5。

优选地，所述的Tris缓冲液的pH为8.0。

优选地，所述的组氨酸缓冲液浓度为5～50mM，例如5mM、10mM或50mM。

优选地，所述的醋酸缓冲液浓度为5～50mM，例如5mM、10mM或50mM。

优选地，所述的磷酸盐缓冲液浓度为5～50mM，例如5mM、10mM或50mM。

优选地，所述的柠檬酸缓冲液浓度为5～50mM，例如5mM、10mM或50mM。

优选地，所述的Tris缓冲液浓度为5～50mM，例如5mM、10mM或50mM。

优选地，所述的稳定剂选自海藻糖、氯化钠和甲硫氨酸中的一种或多种；更优选地，所述的稳定剂为甲硫氨酸和/或氯化钠。

优选地，所述的海藻糖浓度为25～200mM，例如25mM、53mM或200mM。

优选地，所述的氯化钠浓度为30～200mM，例如30mM、130mM、145mM或180mM。

优选地，所述的甲硫氨酸浓度为5～50mM，例如5mM、10mM或50mM。

所述的稳定剂为甲硫氨酸和氯化钠时，所述的甲硫氨酸浓度为5～15mM，氯化钠浓度为50～180mM。

所述的非离子型表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80、泊洛沙姆188中的一种。

优选地，所述的非离子型表面活性剂的浓度为0.02％(w/v)。

在本发明一较佳实施例中，所述的重组人透明质酸酶液体制剂为以下组成之一：

(1)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，145mM氯化钠，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(2)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(3)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，130mM氯化钠，53mM蔗糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(4)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，50mM组氨酸缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为5.5～6.5。

(5)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，50mM醋酸缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为5.0～6.0。

(6)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，50mM柠檬酸缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.0～7.0。

(7)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，50mM Tris缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为7.0～8.0。

(8)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，30mM氯化钠，200mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(9)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，180mM氯化钠，25mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(10)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，30mM氯化钠，200mM蔗糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(11)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，180mM氯化钠，25mM蔗糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(12)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，5mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(13)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，50mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯20，pH为6.5～7.5。

(14)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％聚山梨酯80，pH为6.5～7.5。

(15)45单位/ml～4500000单位/ml(约0.15μg/ml～15mg/ml)重组人透明质酸酶，10mM磷酸盐缓冲剂，130mM氯化钠，53mM海藻糖，10mM甲硫氨酸，0.02％泊洛沙姆188，pH为6.5～7.5。

所述的重组人透明质酸酶为人类睾丸透明质酸酶，优选地，为人类睾丸透明质酸酶膜外结构域。

所述的重组人透明质酸酶，包含如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，例如PH20，具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。

SEQ ID NO.1

LNFRAPPVIPNVPFLWAWNAPSEFCLGKFDEPLDMSLFSFIGSPRINATGQGVTIFYVDRLGYYPYIDSITGVTVNGGIPQKISLQDHLDKAKKDITFYMPVDNLGMAVIDWEEWRPTWARNWKPKDVYKNRSIELVQQQNVQLSLTEATEKAKQEFEKAGKDFLVETIKLGKLLRPNHLWGYYLFPDCYNHHYKKPGYNGSCFNVEIKRNDDLSWLWNESTALYPSIYLNTQQSPVAATLYVRNRVREAIRVSKIPDAKSPLPVFAYTRIVFTDQVLKFLSQDELVYTFGETVALGASGIVIWGTLSIMRSMKSCLLLDNYMETILNPYIINVTLAAKMCSQVLCQEQGVCIRKNWNSSDYLHLNPDNFAIQLEKGGKFTVRGKPTLEDLEQFSEKFYCSCYSTLSCKEKADVKDTDAVDVCIADGVCIDAFLKPPMETEE

SEQ ID NO.2

LNFRAPPVIPNVPFLWAWNAPSEFCLGKFDEPLDMSLFSFIGSPRINATGQGVTIFYVDRLGYYPYIDSITGVTVNGGIPQKISLQDHLDKAKKDITFYMPVDNLGMAVIDWEEWRPTWARNWKPKDVYKNRSIELVQQQNVQLSLTEATEKAKQEFEKAGKDFLVETIKLGKLLRPNHLWGYYLFPDCYNHHYKKPGYNGSCFNVEIKRNDDLSWLWNESTALYPSIYLNTQQSPVAATLYVRNRVREAIRVSKIPDAKSPLPVFAYTRIVFTDQVLKFLSQDELVYTFGETVALGASGIVIWGTLSIMRSMKSCLLLDNYMETILNPYIINVTLAAKMCSQVLCQEQGVCIRKNWNSSDYLHLNPDNFAIQLEKGGKFTVRGKPTLEDLEQFSEKFYCSCYSTLSCKEKADVKDTDAVDVCIADGVCIDAFLKPPMETEEPQIFY

本发明的第二方面提供了一种成套药盒，包括如上所述的重组人透明质酸酶液体制剂和治疗剂。

所述的治疗剂可为重组蛋白、融合蛋白、人血白蛋白、免疫球蛋白、靶向抗体药物、多肽、纳米颗粒、病毒、细胞或化学药品。

优选地，所述的多肽可为胰岛素、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物、亮丙瑞林、加压素、杆菌肽等。

或者，所述的治疗剂优选为具有抗肿瘤作用的药物。

所述的具有抗肿瘤作用的药物可为本领域常规，例如溶瘤病毒、免疫细胞、CAR-T细胞、TCR-T细胞、抗肿瘤化药、靶向肿瘤的抗体药物、ADC抗体药物、免疫检查点抑制剂、纳米颗粒药物和皮质类固醇中的一种或多种。

所述的靶向肿瘤的抗体药物的靶点可为细胞表面蛋白，例如：AFP、αv整联蛋白(integrin)、α4β7整联蛋白、BCMA、CD2、CD3、CD19、CD20、CD22、CD25、CD30、CD32、CD33、CD36、CD40、CD46、CD52、CD56、CD64、CD70、CD74、CD79、CD80、CD86、CD105、CD121、CD123、CD133、CD138、CD174、CD205、CD227、CD326、CD340、CEA、c-Met、Cripto、CA1X、Claudin18.2、ED-B、EGFR、EpCAM、EphA2、EphB2、FAP、FOLR1、GD2、Globo H、GPC3、GPNMB、HER-1、HER-2、HER-3、MAGE-A3、Mesothelin、MUC16、GPNMB、PSMA、TMEFF2、TAG-72、5T4、ROR-1、Sca-1、SP、VEGF或WT1。

所述的抗肿瘤药物的靶点可为细胞因子，例如：白介素IL-1至IL-13、肿瘤坏死因子α和β、干扰素α、β和γ、肿瘤生长因子β(TGF-β)、集落刺激因子(CSF)或粒细胞单核细胞集落刺激因子(GMCSF)。见HumanCytokines:Handbook for Basic&Clinical Research(Aggrawal等编,Blackwell Scientific,Boston,MA 1991)。

所述的抗肿瘤药物的靶点可为激素、酶、胞内和胞间信使，例如：腺苷环化酶、鸟苷环化酶或磷脂酶C。

优选地，所述的靶向抗体药物为靶向人类表皮生长因子受体2(Her-2)的抗体药物，例如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、ZW25或ZW49。

优选地，所述的靶向抗体药物为靶向CD20的抗体药物，例如利妥昔单抗。

优选地，所述的靶向抗体药物为靶向CD38的抗体药物，例如达雷木单抗、Isatuximab。

优选地，所述抗肿瘤化药的有效成分为吉西他滨、紫杉醇等。

优选地，所述免疫检查点抑制剂包括免疫检查点抗体，所述的免疫检查点包括：CTLA-4、PD-1、PD-L1、TIM-3、LAG3、Siglec15、4-1BB、GITR、OX40、CD40L、CD28、TIGIT、VISTA；

所述的免疫检查点抗体可为抗PD-1单抗、抗PD-L1单抗、抗OX-40单抗、抗CD47单抗、抗CTLA-4单抗、抗TIM-3抗体、抗LAG3抗体、抗Siglec15抗体、抗4-1BB抗体、抗GITR抗体、抗OX40抗体、抗CD40L抗体、抗CD28抗体、抗TIGIT抗体、抗VISTA抗体等。

优选地，所述的抗体为利妥昔单抗、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、ZW25、ZW49、达雷木单抗和/或Isatuximab。

所述的靶向抗体药物还可为非靶向肿瘤抗体药物。

所述的非靶向肿瘤抗体药物可为本领域常规，例如基因治疗病毒载体药物、单克隆抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、化学药品、重组蛋白、融合蛋白。

在第一个实施方案中，所述药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～4500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，且第二容器装有单个固定剂量的所述的治疗剂。

所述的包含重组人透明质酸酶液体制剂的容器，选自管形瓶、预充针；优选地为预充针。

优选地，所述的重组人透明质酸酶液体制剂中包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶。

所述的重组人透明质酸酶液体制剂的体积优选为0.1～50ml，例如0.2ml、0.5ml、1ml、1.5ml、2ml、2.50ml、5.00ml、10.00ml、15.00ml、20ml、30ml、40ml或50ml。

在一些实施方案中，每1ml所述的重组人透明质酸酶液体制剂包含45单位～75000单位重组人透明质酸酶，例如45单位、100单位、150单位、200单位、500单位、1000单位、1500单位、2000单位、2500单位、3000单位、4000单位、4500单位、5000单位、6000单位、6500单位、7000单位、7500单位、8000单位、8500单位、9000单位、10000单位、15000单位、20000单位、21000单位、22000单位、23000单位、24000单位、25000单位、26000单位、27000单位、28000单位、29000单位、30000单位、31000单位、32000单位、33000单位、34000单位、35000单位、36000单位、37000单位、38000单位、39000单位、40000单位、41000单位、42000单位、43000单位、44000单位、45000单位、46000单位、47000单位、48000单位、49000单位、50000单位、55000单位、60000单位、65000单位、70000单位或75000单位的重组人透明质酸酶。

在第二个实施方案中，所述药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个固定剂量的抗体，第二容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～4500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂。

其中，所述的第一容器为管形瓶，第二容器为管形瓶或预充针。

其中，所述重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

所述的抗体为如前所述的靶向抗体药物，可为：Abagovomab、Abciximab、Actoxumab、Adalimumab、Adecatumumab、Afelimomab、Afutuzumab、Alacizumab pegol、ALD518、Alemtuzumab、Alirocumab、Altumomab pentetate、Amatuximab、Anatumomabmafenatox、Anrukinzumab、Apolizumab、Arcitumomab、Aselizumab、Atinumab、Atlizumab(＝tocilizumab)、Atorolimumab、Bapineuzumab、Basiliximab、Bavituximab、Bectumomab、Belimumab、Benralizumab、Bertilimumab、Besilesomab、Bevacizumab、Bezlotoxumab、Biciromab、Bimagrumab、Bivatuzumabmertansine、Blinatumomab、Blosozumab、Brentuximabvedotin、Briakinumab、Brodalumab、Canakinumab、Cantuzumab mertansine、Cantuzumabravtansine、Caplacizumab、Capromab pendetide、Carlumab、Catumaxomab、CC49、Cedelizumab、Certolizumab pegol、Cetuximab、Ch.14.18、Citatuzumab bogatox、Cixutumumab、Clazakizumab、Clenoliximab、Clivatuzumab tetraxetan、Conatumumab、Concizumab、Crenezumab、CR6261、Dacetuzumab、Daclizumab、Dalotuzumab、Daratumumab、Demcizumab、Denosumab、Detumomab、Dorlimomab aritox、Drozitumab、Duligotumab、Dupilumab、Dusigitumab、Ecromeximab、Eculizumab、Edobacomab、Edrecolomab、Efalizumab、Efungumab、Elotuzumab、Elsilimomab、Enavatuzumab、Enlimomab pegol、Enokizumab、Enoticumab、Ensituximab、Epitumomab cituxetan、Epratuzumab、Erlizumab、Ertumaxomab、Etaracizumab、Etrolizumab、Evolocumab、Exbivirumab、Fanolesomab、FaralimomabFarletuzumab、Fasinumab、FBTA05、Felvizumab、Fezakinumab、Ficlatuzumab、Figitumumab、Flanvotumab、Fontolizumab、Foralumab、Foravirumab、Fresolimumab、Fulranumab、Futuximab、Galiximab、Ganitumab、Gantenerumab、Gavilimomab、Gemtuzumabozogamicin、Gevokizumab、Girentuximab、Glembatumumabvedotin、Golimumab、Gomiliximab、Ibalizumab、Ibritumomab tiuxetan、Icrucumab、Igovomab、Imciromab、Imgatuzumab、Inclacumab、Indatuximab ravtansine、Infliximab、Intetumumab、Inolimomab、Inotuzumab ozogamicin、Ipilimumab、Iratumumab、Itolizumab、Ixekizumab、Keliximab、Labetuzumab、Lampalizumab、Lebrikizumab、Lemalesomab、Lerdelimumab、Lexatumumab、Libivirumab、Ligelizumab、Lintuzumab、Lirilumab、Lodelcizumab、Lorvotuzumab mertansine、Lucatumumab、Lumiliximab、Mapatumumab、Maslimomab、Mavrilimumab、Matuzumab、Mepolizumab、Metelimumab、Milatuzumab、Minretumomab、Mitumomab、Mogamulizumab、Morolimumab、Motavizumab、Moxetumomab pasudotox、Muromonab-CD3、Nacolomab tafenatox、Namilumab、Naptumomab estafenatox、Narnatumab、Natalizumab、Nebacumab、Necitumumab、Nerelimomab、Nesvacumab、Nimotuzumab、Nivolumab、Nofetumomabmerpentan、Ocaratuzumab、Ocrelizumab、Odulimomab、Ofatumumab、Olaratumab、Olokizumab、Omalizumab、Onartuzumab、Oportuzumab monatox、Oregovomab、Orticumab、Otelixizumab、Oxelumab、Ozanezumab、Ozoralizumab、Pagibaximab、Palivizumab、Panitumumab、Panobacumab、Parsatuzumab、Pascolizumab、Pateclizumab、Patritumab、Pemtumomab、Perakizumab、Pertuzumab、Pexelizumab、Pidilizumab、Pinatuzumabvedotin、Pintumomab、Placulumab、Polatuzumabvedotin、Ponezumab、Priliximab、Pritoxaximab、Pritumumab、PRO 140、Quilizumab、Racotumomab、Radretumab、Rafivirumab、Ramucirumab、Ranibizumab,Raxibacumab、Regavirumab、Reslizumab、Rilotumumab、Rituximab、Robatumumab、Roledumab、Romosozumab、Rontalizumab、Rovelizumab、Ruplizumab、Samalizumab、Sarilumab、Satumomab pendetide、Secukinumab、Seribantumab、Setoxaximab、Sevirumab、Sibrotuzumab、Sifalimumab、Siltuximab、Simtuzumab、Siplizumab、Sirukumab、Solanezumab、Solitomab、Sonepcizumab、Sontuzumab、Stamulumab、Sulesomab、Suvizumab、Tabalumab、Tacatuzumab tetraxetan、Tadocizumab、Talizumab、Tanezumab、Taplitumomabpaptox、Tefibazumab、Telimomabaritox、Tenatumomab、Teneliximab、Teplizumab、Teprotumumab、Ticilimumab(＝tremelimumab)、Tildrakizumab、Tigatuzumab、Tocilizumab(＝atlizumab)、Toralizumab、Tositumomab、Tralokinumab、Trastuzumab、TRBS07、Tregalizumab、Tucotuzumab celmoleukin、Tuvirumab、Ublituximab、Urelumab、Urtoxazumab、Ustekinumab、Vapaliximab、Vatelizumab、Vedolizumab、Veltuzumab、Vepalimomab、Vesencumab、Visilizumab、Volociximab、Vorsetuzumab mafodotin、Votumumab、Zalutumumab、Zanolimumab、Zatuximab、Ziralimumab或Zolimomab aritox中的一种。

在第三个实施方案中，该制品包含三个单剂容器，其中第一容器装有单个固定剂量的帕妥珠单抗，第二容器装有单个固定剂量的曲妥珠单抗，第三容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～4500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂。

其中，所述的帕妥珠单抗的浓度可为30～150mg/ml，优选为0～120mg/ml；

所述的曲妥珠单抗为液体制剂或者冻干制剂；所述的液体制剂和冻干制剂复溶后曲妥珠单抗的浓度可为20～150mg/ml，优选为20～120mg/ml；

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，所述的帕妥珠单抗的剂量优选为600mg或1200mg，曲妥珠单抗的剂量优选为600mg。

其中，所述的第一容器为管形瓶，第二容器为管形瓶，第三容器为管形瓶或预充针。

在第四个实施方案中，该药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，第二容器装有单个固定剂量的利妥昔单抗。

其中，所述的利妥昔单抗浓度可为10～150mg/ml；优选地，为10～120mg/ml；

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，所述的利妥昔单抗的剂量优选为1400mg或1600mg。

其中，第一容器为管形瓶或预充针，优选地为预充针；第二容器为管形瓶。

在第五个实施方案中，该药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，第二容器装有单个固定剂量的曲妥珠单抗。

其中，所述的曲妥珠单抗的浓度可为20～150mg/ml；优选为20～120mg/ml；

所述的曲妥珠单抗的剂量优选为600mg。

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～100000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，第一容器为管形瓶或预充针，优选地为预充针；第二容器为管形瓶。

在第六个实施方案中，该药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，第二容器装有单个固定剂量的免疫球蛋白。

其中，所述的免疫球蛋白的浓度为5％～20％(w/v)。

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～100000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，第一容器为管形瓶或预充针，优选地为预充针；第二容器为管形瓶。

在第七个实施方案中，该药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，第二容器装有单个固定剂量的达雷木单抗。

其中，所述的达雷木单抗的浓度可为20-120mg/ml。

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～100000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，所述的达雷木单抗的剂量优选为1800mg。

其中，第一容器为管形瓶或预充针，优选地为预充针；第二容器为管形瓶。

在第八个实施方案中，该药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，第二容器装有单个固定剂量的人血白蛋白。

其中人血白蛋白的浓度为15％～25％(w/v)。

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～100000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，第一容器为管形瓶或预充针，优选地为预充针；第二容器为管形瓶。

在第九个实施方案中，该药盒包含两个单剂容器，其中第一容器装有单个特定剂量的包含45单位/ml～500000单位/ml重组人透明质酸酶的所述液体制剂，第二容器装有单个固定剂量的Isatuximab。

其中，Isatuximab的浓度可为20～120mg/ml。

所述的重组人透明质酸酶液体制剂优选包含45单位/ml～100000单位/ml重组人透明质酸酶；更优选地，包含45单位/ml～50000单位/ml重组人透明质酸酶。

其中，第一容器为管形瓶或预充针，优选地为预充针；第二容器为管形瓶。

本发明的第三方面涉及施用第二方面所述药盒治疗疾病的方法，通过分别给药或者混合给药进行施用。

所述的分别给药包括以下步骤：

(a)向施用对象皮内或皮下施用所述的药盒中的重组人透明质酸酶液体制剂；

(b)向所述对象随后施用所述的药盒中的治疗剂。

其中，步骤(a)和(b)可单独、同时或者交替进行；

当步骤(a)和(b)单独进行时，步骤(a)和(b)之间的时间间隔为0～24小时；

优选无时间间隔、至多1分钟、至多2分钟、至多3分钟、至多4分钟、至多5分钟、至多6分钟、至多7分钟、至多8分钟、至多9分钟、至多10分钟、至多15分钟、至多20分钟、至多25分钟、至多30分钟、至多1h、至多2h、至多3h、至多6h、至多12h或者至多24h。

在进行皮下先后给药时，步骤(a)和(b)之间的时间间隔可为0分钟、1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟、6分钟、7分钟、8分钟、9分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟或60分钟。

所述的分别给药可通过三通的方式实现同时给药或者先后给药。

所述的分别给药可通过输液泵或者重力的方式进行给药速度的控制；

其中，所述重组人透明质酸酶的液体制剂可以0.1～2ml/分钟的速度进行给药；

所述治疗剂可以5ml/小时、10ml/小时、30ml/小时、60ml/小时、120ml/小时、240ml/小时或者300ml/小时的速度输注。

所述的混合给药包括：将所述的药盒中的重组人透明质酸酶液体制剂与治疗剂混合后向所述对象皮下施用；每1ml所述液体制剂包含45单位～500000单位重组人透明质酸酶，例如45单位、100单位、150单位、500单位、750单位、1000单位、2000单位、3000单位、4000单位、5000单位、6000单位、7000单位、8000单位、9000单位、10000单位、15000单位、20000单位、25000单位、30000单位、35000单位、40000单位、45000单位、50000单位、55000单位、60000单位、65000单位、70000单位、75000单位、80000单位、85000单位、90000单位、95000单位、100000单位、105000单位、110000单位、115000单位、120000单位、125000单位、130000单位、135000单位、140000单位、145000单位、150000单位、155000单位、160000单位、165000单位、170000单位、175000单位、180000单位、185000单位、190000单位、195000单位、200000单位、250000单位、300000单位、350000单位、400000单位、450000单位或500000单位的重组人透明质酸酶。

所述的混合给药可通过输液泵或者重力的方式进行给药速度的控制；

其中，所述重组人透明质酸酶的液体制剂和所述治疗剂混合后可以5～300ml/小时的速度输注，例如5ml/小时、10ml/小时、30ml/小时、60ml/小时、120ml/小时、240ml/小时或者300ml/小时。

所述的用于混合的治疗剂为液体或干粉形式。

优选地，所述重组人透明质酸酶液体制剂的酶活性为50000单位/ml，体积0.5～2ml；施用时加入至10～15ml 1400mg或1600mg利妥昔单抗注射液中，混合均匀后，进行皮下注射。

优选地，所述重组人透明质酸酶液体制剂的酶活性为50000单位/ml，体积0.25～1ml；施用时加入至4～6ml 600mg曲妥珠单抗注射液中，混合均匀后，进行皮下注射。

所述重组人透明质酸酶液体制剂，可直接施用、和/或稀释后施用。

其中，所述稀释用制剂可为本领域常规，例如生理盐水；

所述稀释比例可为本领域常规，例如1:10。

如以上任一项所述的包含曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、重组人透明质酸酶液体制剂药物组合物在制备治疗HER2阳性肿瘤药物中的应用。在一具体实施例中，所述阳性肿瘤包括早期乳腺癌(EBC)或转移性乳腺癌(MBC)、胃癌、胃食管交界处癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、卵巢癌、结肠癌、食管癌、和头和颈的鳞状细胞癌。在一优选实施例中，所述阳性肿瘤为乳腺癌和胃癌。

其中，所述的药物组合物还包含化学制剂。所述化学制剂选自由紫杉烷和蒽环类抗生素组成的组。所述的紫杉烷是帕利他赛(paclitaxel)或多西他赛(docetaxel)。所述的蒽环类抗生素可为柔红霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)或表柔比星(epirubicin)。

如以上任一项所述的包含利妥昔单抗、重组人透明质酸酶液体制剂的药物组合物在制备治疗CD20相关肿瘤药物中的应用。在一具体实施例中，所述肿瘤包括复发性或顽固性低级或滤泡性、CD20阳性、B细胞非霍奇金淋巴瘤。

其中，所述的药物组合物还包含化学制剂。所述化学制剂优选为环磷酰胺、阿霉素、长春新碱或强的松。

如以上任一项所述的包含曲妥珠单抗、重组人透明质酸酶液体制剂的药物组合物在制备治疗HER2阳性肿瘤药物中的应用。在一具体实施例中，所述阳性肿瘤包括早期乳腺癌(EBC)或转移性乳腺癌(MBC)、胃癌、胃食管交界处癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、卵巢癌、结肠癌、食管癌、和头和颈的鳞状细胞癌。在一优选实施例中，所述阳性肿瘤为乳腺癌和胃癌。

其中，所述的药物组合物还包含化学制剂。所述化学制剂选自由紫杉烷和蒽环类抗生素组成的组。所述的紫杉烷是帕利他赛(paclitaxel)或多西他赛(docetaxel)。所述的蒽环类抗生素可为柔红霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)或表柔比星(epirubicin)。

如以上任一项所述的包含免疫球蛋白、重组人透明质酸酶液体制剂的药物组合物在制备疾病药物中的应用。在一具体实施例中，所述疾病选自免疫缺陷病、ANCA-阳性系统性坏死性血管炎、常见变异型免疫缺陷病(CVID)、抗体缺陷的原发性免疫缺陷病、先天性免疫球蛋白缺乏症、Wiskott-Aldrich综合征、X连锁无丙种球蛋白血症(XLA)、重症联合免疫缺陷病(SCID)、原发性低丙种球蛋白血症、婴儿期低丙球蛋白血症以及无抗体副肿瘤性小脑变性阿尔茨海默病、败血症、疤痕性类天疱疮、B细胞肿瘤、继发于恶性血液病的获得性低丙种球蛋白血症、Evans综合征、继发于恶性血液病的获得性低丙种球蛋白血症、急性播散性脑脊髓炎、川崎病、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病症(CIDP)、多发性硬化症、格林巴利综合症、特发性血小板减少性紫癜、炎性肌病、高危同种异基因造血干细胞移植、IgM副蛋白血症神经病、Lambert-Eaton肌无力综合征、中毒性休克综合征、多发性骨髓瘤、多灶性运动神经病、重症肌无力、落叶型天疱疮、Moersch-Woltmann综合征、继发低丙种球蛋白血症、特异性抗体缺陷、自身免疫性溶血性贫血、大疱性类天疱疮、胎母/新生儿同种异体免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT)、噬血细胞综合征、肾移植、眼阵挛-肌阵挛运动失调症、寻常型天疱疮、输血后紫癜、中毒性表皮坏死/StevenJohnson综合征(TEN/SJS)、系统性红斑狼疮、炎症性肌病、外伤以及细菌、病毒或者真菌感染。

优选地，所述疾病是细菌、病毒或者真菌感染引起的疾病，所述细菌、病毒或者真菌可为B型流感嗜血杆菌、A和B型铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、B族链球菌、(1、3、4、6、7、8、9、12、14、18、19和23)型肺炎链球菌、2和5型腺病毒、单纯疱疹病毒-1、单纯疱疹病毒-2、巨细胞病毒、EB病毒VCA、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、甲型流感病毒、麻疹病毒、(1、2和3)型副流感病毒、小儿脊髓灰质炎病毒、水痘-带状疱疹病毒、曲霉或白色念珠菌。

如以上任一项所述的包含达雷木单抗、重组人透明质酸酶液体制剂的药物组合物在制备疾病药物中的应用。在一具体实施例中，所述疾病选自多发性骨髓瘤、轻链淀粉样变性、白血病和淋巴瘤、实体瘤。

其中，所述的药物组合物还包含化学制剂。所述化学制剂选自糖皮质激素、蛋白酶体抑制剂(PIs)、细胞周期非特异性药物、免疫调节药物(IMiDs)，例如生存素抑制剂、全反式视黄酸(ATRA)、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松(CHOP)、地塞米松、醋酸去氢可的松、硼替佐米、米尔法兰、来那度胺、沙利度胺或泊马度胺。

如以上任一项所述的包含人血白蛋白、重组人透明质酸酶液体制剂的药物组合物在制备疾病药物中的应用。在一具体实施例中，所述疾病选自失血创伤和烧伤等引起的休克、脑水肿，以及肝硬化、肾病引起的水肿或腹水等危重病症的治疗，以及低蛋白血症患者。

如以上任一项所述的包含Isatuximab、重组人透明质酸酶液体制剂的药物组合物在制备疾病药物中的应用。在一具体实施例中，所述疾病选自多发性骨髓瘤、轻链淀粉样变性、白血病、淋巴瘤或实体瘤。

其中，所述的药物组合物还包含化学制剂。所述化学制剂选自糖皮质激素、蛋白酶体抑制剂(PIs)、细胞周期非特异性药物、免疫调节药物(IMiDs)，例如生存素抑制剂、全反式视黄酸(ATRA)、环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松(CHOP)、地塞米松、醋酸去氢可的松、硼替佐米、米尔法兰、来那度胺、沙利度胺或泊马度胺。

优选地，所述重组人透明质酸酶液体制剂的酶活性为500单位/ml，体积0.5～15ml；施用时先施用透明质酸酶液体制剂皮下注射，再施用固定剂量的利妥昔单抗注射液1400mg或1600mg皮下注射。针对各种CD20阳性B细胞恶性肿瘤的患者，所述皮下施用可以显著简化处理，将原本数小时的静脉输液时间改为10分钟内完成注射，改善患者治疗体验。

优选地，所述重组人透明质酸酶液体制剂的酶活性为500单位/ml，体积0.5～15ml；施用时先施用透明质酸酶液体制剂皮下注射，再施用固定剂量的曲妥珠单抗注射液600mg皮下注射。针对各种HER2阳性肿瘤患者，所述皮下施用可以显著简化处理，将原本数小时的静脉输液时间改为10分钟内完成注射，改善患者治疗体验。

直接施用本发明的重组人透明质酸酶的液体制剂，可促进手术及创伤后局部水肿或血肿消散，促进局麻药的浸润，减轻注射部位的疼痛或者加速皮下注射或肌肉注射药液的吸收，缓解透明质酸注射副反应，促使眼局部积贮的药液、渗出液或血液的扩散，促使玻璃体浑浊的吸收、预防结膜化学烧伤后的睑球粘连并消除有关的炎症反应，改善造影剂硫酸钡的再吸收(皮下尿道造影术)，治疗外伤性眼眶出血、外伤性视网膜水肿。

其中，所述改善造影剂硫酸钡的再吸收的施用方式为先在肩胛处皮下注射重组人透明质酸酶液体制剂，所述液体制剂的剂量为50～5000单位，然后在同一部位注射造影剂。

本发明的第四方面涉及上述第三方面稳定施用的包装材料和注射系统，包装材料包括但不限于管形瓶、注射器或者试管；注射系统包括但不限于：注射器、输注泵、注射笔、无针装置或者皮下贴片投递装置。

所述的注射装置的组成可为本领域常规，包括：容器、密封件、注射针头。

其中，所述的容器包括但不限于：管形瓶、注射器或试管。

所述的容器的材质可为本领域常规，例如玻璃或塑料。

其中，所述的密封件包括但不限于：密封塞或密封圈。

所述的密封件的材质可为本领域常规，例如橡胶、塑料或高分子材料。

其中，所述的注射针头包括但不限于水针、单针、微针组。

所述的注射针头的材质可为本领域常规，例如金属、硅、二氧化硅、玻璃、镍、钛或可生物降解的聚合物。

所述的水针包括但不限于：西林瓶水针、安瓿瓶水针或预充注射系统。

所述的安瓿瓶水针可为玻璃安瓿或塑料安瓿。

所述的预充注射系统可为本领域常规，例如预充注射器。

优选地，所述容器为西林瓶，材质为中性硼硅玻璃，规格为0.1～20ml；

所述密封件为密封塞，材质为卤化丁基橡胶；

所述注射针头为单针、微针组。

优选地，所述单针的材质可为304或316不锈钢，规格(如表1所示)可为30G、24G、27G、29G；所述微针组材质可为304或316不锈钢、可生物降解的聚合物，规格为高10～2000μm、宽10～50μm纳米级尺寸针。

表1单针规格

在本发明的一个实施方案中，提供了制品，其含有如本发明第二方面所述的药物配制剂且提供其使用指令。此制品包含所述容器。制品可以进一步包括从商业和用户观点看期望的其它材料，包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针头、注射器、输液泵和印有使用指令的包装插页。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：无需人血白蛋白等存在感染风险的特殊添加剂，即能维持重组人透明质酸酶在2～8℃条件下的稳定性，放置12个月后稳定性保持在95％以上。该制剂即可单独施用，又可和其他制剂同时或者先后施用，又或者和其他制剂混合后施用。临床使用较冻干制剂更加方便；能够改善患者治疗体验，降低输液相关副反应。