一种柴胡提取物及小柴胡颗粒的制备方法
阅读说明：本技术 一种柴胡提取物及小柴胡颗粒的制备方法 (Preparation method of bupleurum extract and bupleurum tenue granules ) 是由 袁崇均 张磊 陈帅 杨薇 罗森 吴瑕 汤依娜 周静 王笳 于 2021-09-23 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种柴胡提取物,它是柴胡经Na-(2)CO-(3)水溶液提取得到的提取物；所述提取物每1g相当于原药材5～6g。本发明还公开了一种柴胡颗粒的制备方法。由本发明小柴胡颗粒制备方法制得的成品中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d几乎无分解,这也使其药物疗效得到了提高。(The invention discloses a bupleurum extract, which is prepared by Na-meridian of bupleurum 2 CO 3 Extracting the resulting extract with an aqueous solution; each 1g of the extract is equivalent to 5-6 g of the raw medicinal material. The invention also discloses a preparation method of the radix bupleuri granules. The saikosaponin a and the saikosaponin d in the finished product prepared by the preparation method of the small bupleurum particles are almost not decomposed, so that the curative effect of the medicine is improved.)
技术领域
本发明具体涉及一种柴胡提取物及小柴胡颗粒的制备方法。
背景技术
小柴胡颗粒由柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草、大枣组成，有解表散热，疏肝和胃的功效，用于外感病，邪犯少阳证，症见寒热往来、胸胁苦满、食欲不振、心烦喜吐、口苦咽干，收载于中国药典2020版一部，为中成药感冒药的常用药。目前，小柴胡颗粒有近100家生产厂家获得批准文号。
小柴胡颗粒中柴胡为君药，方中用量(150g)为其它中药的近3倍(56g)，故柴胡的提取和质量检测很重要。《中国药典》2020年版一部中小柴胡颗粒质量检测柴胡项下为薄层色谱法，对照溶液为柴胡对照药材，二者薄层色谱应一致。但在质检过程中发现，很多小柴胡颗粒检品，二者的薄层色谱很难一致，药典中柴胡对照药材(取样量1g)薄层点样量为2μl，而小柴胡颗粒(折算柴胡药材量为0.9g)检品溶液点样量为2～10μl，二者最大相差近5倍。检测不符合标准的原因在于，小柴胡颗粒制备过程中柴胡皂苷成分发生了分解，而此时的柴胡对照药材对照溶液制备条件下柴胡皂苷很少发生分解，故二者薄层色谱很难一致。
柴胡为伞形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)和狭叶柴胡(B.scorzonerifoliunz Willd.)干燥根，具有疏散退热，疏肝解郁，升阳举陷之功效。柴胡皂苷a、d及柴胡总皂苷被认为是柴胡的主要药效成分，对整个药物的疗效起着举足轻重的作用。研究报道，柴胡皂苷a、d具有13,28-氧环结构，氧环不稳定，在提取柴胡过程中柴胡皂苷a、d，受中药固有成分的影响，转变为不具有原皂苷的一些药理活性或药理活性相对减弱的柴胡皂苷b1、b2。目前还没有任何可供实际参考用于解决柴胡在作为中药复方制剂，特别是小柴胡颗粒的原料时，药效成分被破坏的问题。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种柴胡提取物，它是柴胡的Na2CO3水溶液提取物；所述提取物每1g相当于原药材5～6g。
进一步地，所述Na2CO3水溶液的浓度为0.01～0.03％w/v，g/ml，优选0.025％w/v，g/ml；所述柴胡为柴胡粗粉。
进一步地，所述提取物每1g相当于原药材5.4g。
本发明还提供了一种前述柴胡提取物的制备方法，它包括如下步骤：
取柴胡粗粉，加Na2CO3水溶液提取，过滤，滤液浓缩，即得。
进一步地，所述提取为煎煮提取，次数2次，每次加5～15倍量v/w，ml/gNa2CO3水溶液煎煮提取0.5～2小时，优选1小时。
更进一步地，所述Na2CO3水溶液的浓度为0.01～0.03％w/v，g/ml，优选0.025％w/v，g/ml。
进一步地，它还包括取浓缩后的浸膏，减压干燥，粉碎成细粉；所述减压干燥温度为60℃。
本发明最后提供了一种小柴胡颗粒的制备方法，进一步地，它包括如下步骤：
1)取黄芩、党参、甘草和大枣，加水煎煮，过滤，滤液浓缩，得浓缩液；
2)取姜半夏、生姜，加70％乙醇浸渍，渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，加步骤1)浓缩液，混匀，浓缩，再加前述柴胡提取物和蔗糖，制粒，干燥即得。
进一步地，所述柴胡提取物、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草和大枣的质量体积比为27～28g：56g：56g：56g、56g、56g、56g，优选27.8g：56g：56g：56g、56g、56g、56g。
进一步地，步骤1)所述煎煮2次，每次1.5小时；和/或，步骤2)所述浸渍24小时，所述收集渗漉液的量为姜半夏和生姜重量和的5～6v/w，ml/g。
本发明柴胡提取物的制备方法，通过特定浓度的Na2CO3水溶液提取，得到的柴胡提取物中柴胡皂苷损失少，由本发明柴胡提取物制成的小柴胡颗粒，按《中国药典》2020年版一部中小柴胡颗粒质量检测柴胡项下的薄层色谱法检测，薄层色谱与柴胡对照药材一致，经试验证明，本发明小柴胡颗粒制备方法制得的成品中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d几乎无分解，这也使其药物疗效得到了提高。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的
具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1小柴胡颗粒柴胡鉴别薄层色谱图(从左到右分别为柴胡对照药材、对比组1～5样品)
图2试验例2薄层鉴别色谱图(从左到右分别为：柴胡提取物1μl、小柴胡颗粒1μl、柴胡提取物2μl、小柴胡颗粒2μl、柴胡对照药材2μl)
图3试验例3薄层鉴别色谱图(从左到右分别为：样品①、样品②、柴胡对照药材、样品③、样品④均2μl，柴胡对照药材1μl)
图4试验例4薄层鉴别色谱图(从左到右分别为：样品①、样品②、柴胡对照药材)
图5市售小柴胡颗粒柴胡薄层鉴别(从左到右分别为：柴胡皂苷a对照品、品牌1小柴胡颗粒、实施例1小柴胡颗粒、柴胡对照药材、品牌2小柴胡颗粒)
具体实施方式
实施例1本发明柴胡提取物的制备
取柴胡药材，粉碎成粗粉，加0.025％Na2CO3水溶液煎煮2次，每次1小时，每次Na2CO3水溶液用量为药材量的10倍(V/W)，过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，60℃减压干燥，粉碎成细粉，得柴胡提取物(棕褐色干燥疏松粉末，1g相当于原药材5.4g)。
实施例2本发明小柴胡颗粒制备
配方：实施例1制备的柴胡提取物27.8g、黄芩56g、姜半夏56g、党参56g、生姜56g、甘草56g、大枣56g
制备方法
1)取黄芩、党参、甘草及大枣加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩，得浓缩液；
2)取姜半夏、生姜，用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液600ml，回收乙醇，与步骤1)浓缩液合并，浓缩，加入柴胡提取物及蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得
以下通过试验例来说明本发明的有益效果。
仪器与试药
仪器：Agilent HP 1100高效液相色谱仪(Agilent色谱工作站)，Sartonus电子天平(BP211D型，美国)，CQX-25-06超声波清洗器(上海必能信超声有限公司)，RE 5205旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)，真空干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司),DJ灵巧型粉碎机(上海淀久中药机械制造有限公司)。
材料：柴胡皂苷a、d对照品(成都曼斯特)，柴胡、黄芩、姜半夏、党参、生姜、甘草、大枣(购于四川省中药饮片有限责任公司)，柴胡对照药材(中国食品药品检定研究院)。
试剂：乙腈(色谱纯)，水为高纯水，其他试剂均为分析纯
试验例1小柴胡颗粒制备方法对比
1、小柴胡颗粒制备
对比组1
配方：柴胡150g、黄芩56、姜半夏56g、党参56g、生姜56g、甘草56g、大枣56g
制法：以上七味，柴胡(粗粉)、黄芩、党参、甘草及大枣加0.05％的Na2CO3水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。姜半夏、生姜用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约600ml，回收乙醇，与上述浓缩液合并，浓缩至适量，加入适量的蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
对比组2
配方：同对比组1
制法：柴胡(粗粉)，加0.025％的Na2CO3水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。黄芩、党参、甘草及大枣加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。姜半夏、生姜用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约600ml，回收乙醇，与上述浓缩液合并，浓缩至适量，加入适量的蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
对比组3
配方：同对比组1
制法：柴胡(粗粉)，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。黄芩、党参、甘草及大枣加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。姜半夏、生姜用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约600ml，回收乙醇，与上述浓缩液合并，浓缩至适量，加入适量的蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
对比组4
配方：同对比组1
制法：柴胡(粗粉)，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥，粉粹成细粉，得柴胡干膏。黄芩、党参、甘草及大枣加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。姜半夏、生姜用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约600ml，回收乙醇，与上述浓缩液合并，浓缩至适量，加入上述柴胡干膏及适量的蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
对比组5
配方：同对比组1
制法：柴胡(粗粉)，加0.025％的Na2CO3水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥，粉粹成细粉，得柴胡提取物。黄芩、党参、甘草及大枣加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。姜半夏、生姜用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约600ml，回收乙醇，与上述浓缩液合并，浓缩至适量，加入上述柴胡提取物及适量的蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
2、检测
取对比组1～5制备的小柴胡颗粒，参照中国药典2020版一部第605页中鉴别项下柴胡薄层色谱(TLC)检测。
取对比组1样品6g，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加在聚酰胺柱(100～200目，8g，内径为2.5～3cm，湿法装柱)上，分别用水、20％乙醇和50％乙醇各100ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对比组1供试品溶液。同法分别制成对比组2～5供试品溶液。另取柴胡对照药材1g，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加在聚酰胺柱(100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱)上，分别用水100ml和50％乙醇150ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，分别吸取上述实施例1～5供试品溶液和对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(12：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。
3、结果
具体结果见图1，从图中可以看出，柴胡对照药材TLC此时只有两个明显的荧光斑点，对比组1、3、4则有其它荧光斑点存在，即此制备条件下，柴胡皂苷发生部分分解，而对比组2、5的TLC与柴胡对照药材完全一致。
从上述结果可知，柴胡用弱碱水(0.025％Na2CO3水溶液)煎煮而制备的柴胡浸膏或柴胡提取物，以此制成的小柴胡颗粒质量检测中的柴胡鉴别项下的TLC合格，此时的小柴胡颗粒制备工艺最佳，故对比组2、5为最佳生产工艺。用弱碱水(0.025％Na2CO3水溶液)煎煮柴胡而制成的柴胡提取物可以长期保存，用时可按原生药量计算，加入柴胡提取物制成小柴胡颗粒。故对比组5为最佳工艺。
试验例2柴胡提取物和小柴胡颗粒质量检测
1、柴胡提取物的制备
中药材为伞形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)的干燥根，经提取制成的提取物。
取柴胡药材，粉碎成粗粉，用0.025％Na2CO3水溶液煎煮2次，每次1小时，每次碱水用量为药材量的10倍(V/W)，过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，60℃减压干燥，粉碎成细粉，得柴胡提取物(棕褐色干燥疏松粉末，收率18.5％，1g相当于原药材5.4g)。
2、小柴胡颗粒的制备
配方：柴胡提取物27.8g、黄芩56g、姜半夏56g、党参56g、生姜56g甘草56g、大枣56g
制法：黄芩、党参、甘草及大枣加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量。姜半夏、生姜用70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液约600ml，回收乙醇，与上述浓缩液合并，浓缩至适量，加入柴胡提取物27.8g及适量的蔗糖，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
备注：柴胡提取物1g相当于原药材5.4g，故此小柴胡颗粒中柴胡提取物应加150/5.4＝27.8g
3、柴胡提取物、小柴胡颗粒TLC鉴别
取柴胡提取物约20mg(相当于柴胡药材1g，计算：1g/5.4g＝0.02g，即20mg)，加水20ml，搅拌使溶解，离心，取上清液，加在聚酰胺柱(100～200目，8g，内径为2.5～3cm，湿法装柱)上，分别用水、20％乙醇和50％乙醇各100ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，制成柴胡提取物供试品溶液。再取小柴胡颗粒6g，同法制成小柴胡颗粒供试品溶液。另取柴胡对照药材1g，加水适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加在聚酰胺柱(100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱)上，分别用水100ml和50％乙醇150ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述3种溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(12：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。
4、检测结果
具体结果见图2。从图中可以看出，柴胡提取物、小柴胡颗粒的薄层色谱与柴胡对照药材完全一致。
试验例3小柴胡颗粒中提取物制备工艺理论研究①
样品①：柴胡(粗粉)15g，加水煎煮二次，每次1.5小时，水用量为药材量的10倍(V/W)，合并煎液，滤过，滤液加水至约300ml，溶液用PHS-3CPH计(上海精科)测定PH值。
样品②：柴胡(粗粉)15g，黄芩、党参、甘草、大枣各5.6g，共37.4g，加水煎煮二次，每次1.5小时，水用量为药材量的10倍(V/W)，合并煎液，滤过，滤液加水至约750ml，溶液用PHS-3C PH计(上海精科)测定PH值。
样品③：柴胡(粗粉)15g，加0.025％的Na2CO3水溶液煎煮二次，每次1.5小时，水用量为药材量的10倍(V/W)，合并煎液，滤过，滤液加0.025％的Na2CO3水溶液至约300ml，溶液用PHS-3C PH计(上海精科)测定PH值。
样品④：柴胡(粗粉)15g，黄芩、党参、甘草、大枣各5.6g，共37.4g，加0.05％的Na2CO3水溶液煎煮二次，每次1.5小时，水用量为药材量的10倍(V/W)，合并煎液，滤过，滤液加0.05％的Na2CO3水溶液至约750ml，溶液用PHS-3C PH计(上海精科)测定PH值。
测定结果，PH值分别为6.0、6.4、7.3、7.2。
分别取样品①20ml、样品②50ml、样品③20ml、样品④50ml(均相当于柴胡原生药1g)，照试验例1方法制备出样品供试品溶液1、2、3、4，另制备柴胡对照药材溶液，照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述5种溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(12：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。
结果见图3，从图中可以看出，样品③即柴胡用0.025％的Na2CO3水溶液煎煮，其TLC与柴胡对照药材基本一致。
对结果进一步分析得出：由于中药本身固有的酸碱性，原生药水煎液大多偏于酸性，如柴胡水煎液PH为6.0，而柴胡、党参、黄芩、甘草、大枣水共煎液PH为6.4。由于柴胡皂苷在酸性条件下易发生化学变化，即柴胡皂苷a、d转变为柴胡皂苷b1、b2，在提取过程中，用弱碱水溶液中和柴胡中的一些酸性成分，可增加柴胡皂苷的稳定性。
试验例4小柴胡颗粒中提取物制备工艺理论研究②
样品①的制备：取柴胡(粗粉)1g，加0.05％的Na2CO3水溶液适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加在聚酰胺柱(100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱)上，分别用水100ml和50％乙醇150ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为样品①溶液。
样品②的制备：取柴胡(粗粉)1g，加0.1％的Na2CO3水溶液适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加在聚酰胺柱(100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱)上，分别用水100ml和50％乙醇150ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为样品②溶液。
柴胡对照药材样品溶液的制备：取柴胡对照药材1g，加水溶液适量，煎煮1.5小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加在聚酰胺柱(100～200目，4g，内径为2cm，湿法装柱)上，分别用水100ml和50％乙醇150ml洗脱，收集50％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为柴胡对照药材样品溶液。
照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述3种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(12：2：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。
结果见图4，从图中可以看出，柴胡药材用0.05％的Na2CO3水溶液、0.1％的Na2CO3水溶液煎煮，柴胡皂苷发生分解，其TLC与柴胡对照药材不一致，柴胡皂苷已分解，故较强的碱水溶液(0.05％或0.1％Na2CO3水溶液)长时间煎煮，亦可使柴胡皂苷分解。
试验例5小柴胡颗粒中提取物制备工艺理论研究③
柴胡药材中柴胡皂苷a、d的含量测定
照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按柴胡皂苷a峰计算应不低于10000。
对照品溶液的制备取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷d对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a 0.4mg、柴胡皂苷d 0.5mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液①的制备取柴胡粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入含5％浓氨试液的甲醇溶液25ml，密塞，30℃水温超声处理(功率200W，频率40kHz)30分钟，滤过，用甲醇20ml分2次洗涤容器及药渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至干。残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
供试品溶液②的制备取柴胡粉末(过四号筛)约1g，精密称定，加水适量，煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
供试品溶液③的制备取柴胡粉末(过四号筛)约1g，精密称定，加0.025％的Na2CO3水溶液适量，煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
供试品溶液④的制备取柴胡粉末(过四号筛)约1g，精密称定，加0.1％的Na2CO3水溶液适量，煎煮2次，每次1.5小时，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液20μl与供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
含量测定结果见表1：
表1柴胡药材含量测定结果
样品
柴胡皂苷a
柴胡皂苷d
柴胡皂苷a、d总量
为样品①含量
①
0.34％
0.54％
0.88％
100％
②
0.30％
0.42％
0.72％
84％
③
0.33％
0.48％
0.81％
92％
④
0.29％
0.33％
0.63％
72％
从表1可以看出，在碱性醇溶液中超声提取，得到的柴胡皂苷没有损失，但在工业化大生产中，超声提取比较困难，且经甲醇提取的提取物存在安全隐患，故通常采用水提，节约成本同时保证药物提取物安全。但柴胡水煎煮样品，已有16％分解(相对于柴胡超声提取比较)，0.025％Na2CO3水煎液只有8％分解，而0.1％Na2CO3水煎液有近30％分解。故弱碱水溶液(0.025％Na2CO3水溶液)煎煮柴胡的生产工艺较优。
试验例6市售小柴胡颗粒鉴别项下柴胡的薄层色谱
分别取两种市售小柴胡颗粒(规格10g/包)各6g，按小柴胡颗粒鉴别项下柴胡薄层色谱(TLC)(参照中国药典2020版一部第605页)进行鉴别，薄层色谱见图5(同时用柴胡皂苷a作对照)。
从图中可以看出，市售的小柴胡颗粒柴胡薄层鉴别柴胡皂苷d已部分或完全分解，其色谱行为与柴胡对照药材不一致。
综上，本发明小柴胡颗粒制备方法，在药典制法的基础上，做了三点改进：①柴胡粉粹成粗粉，有利于有效成分的提取。②柴胡粗粉用0.025％Na2CO3水溶液煎煮，用弱碱中和柴胡药材中本身固有的酸性成分，而有利于柴胡皂苷的稳定。③柴胡粗粉用0.025％Na2CO3水溶液煎煮，煎液过滤、浓缩、减压干燥，粉粹而制成的柴胡提取物，有利于保存，应用时可按原生药量计算加入柴胡提取物，以此制成小柴胡颗粒。本发明的小柴胡颗粒制备方法，完全保留了柴胡的有效成分(柴胡皂苷a、d)，使柴胡鉴别完全合格，另外还提高了临床疗效。