一种降低atp杂质的方法
阅读说明：本技术 一种降低atp杂质的方法 (Method for reducing ATP impurities ) 是由 吕祖平 吴志卿 刘存虎 童满 潘亚金 求赵明 于 2021-06-06 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种降低ATP杂质的方法,所述方法包括：以ATP粗品或ATP生产过程中的中间母液为原料,通过生物细胞转化和结晶除去ATP中的杂质ADP和AMP。本发明工艺操作简单,设备简易,成本低,对环境友好,便于工业化生产。(The invention provides a method for reducing ATP impurities, which comprises the following steps: taking ATP crude product or intermediate mother liquor in the ATP production process as raw materials, and removing impurities ADP and AMP in ATP through biological cell transformation and crystallization. The method has the advantages of simple process operation, simple equipment, low cost, environmental friendliness and convenience for industrial production.)
技术领域
本发明涉及一种降低ATP杂质的方法，以ATP粗品或ATP生产过程中的中间母液为原料，通过生物细胞转化和结晶除去ATP中的杂质ADP和AMP，属于生物工程技术领域。
背景技术
ATP，全称三磷酸腺嘌呤核苷，是重要的食品添加剂和辅助用药。由于ATP结构稳定性不高，生产过程中容易产生ADP(二磷酸腺嘌呤核苷)和AMP(单磷酸腺嘌呤核苷)杂质。
目前已知的关于ATP的专利方法主要为：
1.中国专利CN106191170A中提出一种ATP制备方法，用离子交换层析的方法去除杂质，该方法废水量大，操作比较复杂。
2.中国专利CN105647996A中提出一种固定化酶制备ATP的方法，
最后也是通过层析除杂后得到合格的ATP成品。
目前ATP的专利主要集中在酶法制备ATP方面，如果有效分离提纯ATP的研究不多，为了开发更有利于工业化放大的工艺，我们以ATP转化液中含有较高ADP和AMP杂质的特点，开发了一种能有效降低杂质的方法，该方法工艺简单，生产成本低，对环境友好，适合工业化生产。
发明内容
本发明提供了一种降低ATP杂质的方法。本发明具有的优点是：工艺简单，成本低，对环境友好。
本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：
一种降低ATP杂质的方法，其步骤如下：
(1)将一定量的ATP粗品溶入水中，或去一定量的ATP生产过程中的中间母液，加入焦磷酸钠、镁盐和生物细胞均质清液，在一定的pH和温度下反应0.5～2h，获得的ATP溶液中的杂质ADP和杂质AMP会大量减少；
(2)将上述溶液调pH至酸性，通过纳滤浓缩后，再用饮用水顶洗至透出液电导率小于200μs/cm；
(3)将纳滤浓缩液经过0.22μm微孔膜过滤后，搅拌条件下滴加甲醇(或乙醇、丙酮)，滴加完毕后，继续搅拌0.5～2h，过滤得ATP成品；
优选地，上述步骤(1)所用的镁盐指的是硫酸镁、氯化镁、醋酸酶、硝酸镁等镁盐，优选硫酸镁。
优选地，步骤(1)所述转化温度为25～40℃，优选36～38℃。
优选地，上述步骤(1)所述的转化pH为6.0～9.0，通过液碱、片碱或氨水控制pH，优选7.0～8.0。
优选地，上述步骤(1)所述ATP溶液没有具体的浓度要求，ATP的浓度在1～100g/L范围内均适用本方法，优选5～20g/L。镁盐的浓度为1～3g/L，优选2g/L，焦磷酸钠的浓度根据ADP和AMP的摩尔数计算，为它们总和的2～4倍。生物细胞均质清液的浓度为0.2～5g/L，优选0.5g/L。
优选地，上述步骤(2)所述pH为2～6，优选3～4。
优选地，上述骤(3)所滴加的有机溶剂的数量为浓缩液体积的2～4倍。
本发明去除ATP生产过程中的ADP和AMP杂质的有益效果在于：
(1)本发明工艺简单，易于控制，有利于工业化大生产；
(2)原料和所使用的原料价廉易得，降低了生产成本。
具体实施方式
下面通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或者改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
本发明所使用的试剂均为工业级合格品或者工业级合格品以上纯度。
实施例1
取1000gATP粗品，粗品中含有4.01％的ADP杂质和1.12％的AMP杂质，将1000gATP粗品溶于10L水中，加入90g焦磷酸钠，20g硫酸镁，控制搅拌转速为200rpm，将pH调至7.0，控制温度为37℃，加入50g生物细胞均质清液，反应期间用液碱控制pH为7.0，反应1h。将反应液pH调至3.0，用纳滤机进行纳滤浓缩，再用饮用水顶洗至电导率为120μs/cm，收集纳滤浓缩液共700ml，经过0.22μm微孔膜过滤后，往浓缩液中边搅拌边加入2400ml乙醇，滴加完毕后，继续搅拌0.5h，过滤得ATP湿品，真空干燥后得910gATP成品，ADP含量为0.68％，AMP含量为0.05％。
实施例2
取5000gATP粗品，粗品中含有3.72％的ADP杂质和0.81％的AMP杂质，将5000gATP粗品溶于30L水中，加入500g焦磷酸钠，60g硫酸镁，控制搅拌转速为200rpm，将pH调至7.0，控制温度为37℃，加入100g生物细胞均质清液，反应期间用液碱控制pH为7.0，反应2h。将反应液pH调至3.0，用纳滤机进行纳滤浓缩，再用饮用水顶洗至电导率为115μs/cm，收集纳滤浓缩液共2000ml，经过0.22μm微孔膜过滤后，往浓缩液中边搅拌边加入7000ml乙醇，滴加完毕后，继续搅拌0.5h，过滤得ATP湿品，真空干燥后得4750gATP成品，ADP含量为0.53％，AMP含量为0.04％。
实施例3
取50LATP生产过程中的中间母液，含有800gATP，ADP杂质含量为6.91％，AMP杂质含量为1.22％，往50L母液中加入100g焦磷酸钠，50g硫酸镁，控制搅拌转速为200rpm，将pH调至7.0，控制温度为37℃，加入50g生物细胞均质清液，反应期间用液碱控制pH为7.0，反应2.5h。将反应液pH调至3.0，用纳滤机进行纳滤浓缩，再用饮用水顶洗至电导率为118μs/cm，收集纳滤浓缩液共600ml，经过0.22μm微孔膜过滤后，往浓缩液中边搅拌边加入2000ml乙醇，滴加完毕后，继续搅拌0.5h，过滤得ATP湿品，真空干燥后得660gATP成品，ADP含量为0.93％，AMP含量为0.08％。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种倍他米松磷酸钠的制备分离方法